青霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝演示文稿

青霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝演示文稿當(dāng)前第1頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素簡(jiǎn)介

發(fā)現(xiàn)

化學(xué)結(jié)構(gòu)理化性質(zhì)抗菌作用和臨床應(yīng)用青霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝

菌種發(fā)酵工藝流程培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)控制提取精制2當(dāng)前第2頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素的發(fā)現(xiàn)1928年，英國(guó)細(xì)菌學(xué)家Fleming發(fā)現(xiàn)污染在培養(yǎng)葡萄球菌的雙蝶上的一株霉菌能殺死周?chē)钠咸亚蚓?。他將此霉菌分離純化后得到的菌株鑒定為青霉，并將這菌產(chǎn)生的抗生物質(zhì)命名為青霉素。3當(dāng)前第3頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)1940年，英國(guó)Florey和Chain進(jìn)一步研究此菌，并從培養(yǎng)液中制出了干燥的青霉素制品。經(jīng)實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)證明，它毒性很小，并對(duì)一些革蘭氏陽(yáng)性菌所引起的許多疾病有卓越療效。4當(dāng)前第4頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素類(lèi)抗生素青霉素(Penicillin)又稱(chēng)盤(pán)尼西林，是人類(lèi)發(fā)現(xiàn)的第一種抗生素，也是目前全球銷(xiāo)量最大的抗生素。青霉素是β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素中的一類(lèi)，是分子中含有青霉烷、能破壞細(xì)菌細(xì)胞壁并在細(xì)菌細(xì)胞的系列生長(zhǎng)期起殺菌作用的一類(lèi)抗生素。一種高效、低毒、臨床應(yīng)用廣泛的重要抗生素。它的研制成功大大增強(qiáng)了人類(lèi)抵抗細(xì)菌性感染的能力，帶動(dòng)了抗生素家族的誕生。5當(dāng)前第5頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)青霉素是β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素中的一類(lèi)，具有β-內(nèi)酰胺環(huán)結(jié)構(gòu)；是分子中含有青霉素母核（青霉烷）的多種化合物的總稱(chēng)。分子結(jié)構(gòu)球棍模型β-內(nèi)酰胺環(huán)6-氨基青霉烷酸6當(dāng)前第6頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)

青霉素類(lèi)抗生素

青霉素G青霉素X青霉素V霉菌屬的青霉菌發(fā)酵液中提取，天然青霉素有多種G、V、N、K、X、其中PG的活性最高、產(chǎn)量最高。

青霉素N青霉素K7當(dāng)前第7頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素理化性質(zhì)一元有機(jī)酸一般的羧酸Pka4-6PGPka2.7（解離常數(shù)）8當(dāng)前第8頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)不穩(wěn)定性β–內(nèi)酰胺環(huán)是青霉素中最不穩(wěn)定的部分，原因：1、四元環(huán)和五元環(huán)稠合，環(huán)的張力大2、兩個(gè)環(huán)不在同一平面，青霉素結(jié)構(gòu)中β-內(nèi)酰胺環(huán)中羰基和氮原子的孤對(duì)電子不能共軛，易受到親核性或親電性試劑的進(jìn)攻，使β-內(nèi)酰胺環(huán)破裂。β-內(nèi)酰胺環(huán)對(duì)水、光、熱、酸、堿、酶、醇、胺不穩(wěn)定，β-環(huán)開(kāi)裂、活性降低或消失9當(dāng)前第9頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)對(duì)堿或酶(β-內(nèi)酰胺酶)不穩(wěn)定，水解10當(dāng)前第10頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)對(duì)稀酸不穩(wěn)定，發(fā)生重排；PH=4青霉二酸青霉醛青霉胺-CO2對(duì)羰基親核反應(yīng)分解重排11當(dāng)前第11頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)對(duì)強(qiáng)酸不穩(wěn)定，發(fā)生重排PH=2orHgCl2青霉酸+青霉醛酸△青霉醛aβ-環(huán)開(kāi)裂,-CO2abb12當(dāng)前第12頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素的理化性質(zhì)青霉素本身為一元有機(jī)酸，可與鉀、鈉、鎂、鈣、鋁和銨等化合成鹽類(lèi)。青霉素游離酸易溶于醇、酸、醚、酯等一般有機(jī)溶劑，但在碳?xì)浠衔镏腥芙舛群苄?；在水中溶解度也很小，且?huì)迅速喪失抗菌能力。青霉素金屬鹽類(lèi)極易溶于水；幾乎不溶于乙醚、氯仿、醋酸戊酯，略溶于乙醇、丁醇、酮類(lèi)和醋酸乙酯。青霉素鈉鹽、銨鹽、鉀鹽吸濕性依次減小，鈉鹽比鉀鹽更不易保存。青霉素游離酸不耐熱，一般保存于冰箱中；但青霉素鹽的結(jié)晶純品，穩(wěn)定性很好，在干燥條件下可于室溫保存數(shù)年。青霉素鉀鹽結(jié)晶，150℃加熱1.5h效價(jià)無(wú)影響，因此結(jié)晶青霉素可干熱滅菌。青霉素臨床上一般用其鈉鹽、鉀鹽或普魯卡因鹽，增強(qiáng)水溶性。粉針劑，有效期2年臨床用粉針劑，現(xiàn)用現(xiàn)配13當(dāng)前第13頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)抗菌作用和臨床應(yīng)用青霉素主要抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，但對(duì)某些革蘭氏陰性細(xì)菌，螺旋體及放線(xiàn)菌也有較強(qiáng)的抗菌作用。青霉素的抗菌作用與抑制細(xì)胞壁的合成有關(guān)。青霉素臨床上用于治療葡萄球菌傳染癥如腦膜炎、化膿炎、骨髓炎等，溶血性鏈球菌傳染癥如腹膜炎、產(chǎn)褥熱，以及肺炎、淋病、梅毒和炭疽等。14當(dāng)前第14頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素的應(yīng)用溶血性鏈球菌感染。肺炎鏈球菌感染。不產(chǎn)青霉素酶葡萄球菌感染。炭疽。破傷風(fēng)、氣性球疽等梭狀芽孢桿菌感鉤端螺旋體病。流行性腦脊髓膜炎。放線(xiàn)菌病。淋病。除脆弱擬桿菌以外的許多厭氧菌感染。青霉素與氨基糖苷燈藥物聯(lián)合用于治療草綠色鏈球菌心內(nèi)膜炎。15當(dāng)前第15頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝16當(dāng)前第16頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)17當(dāng)前第17頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素制備的一般流程圖菌種孢子制備種子制備發(fā)酵發(fā)酵液預(yù)處理及種子加濾提取及精制成品檢驗(yàn)成品包裝前體發(fā)酵階段提取精制18當(dāng)前第18頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)菌種目前國(guó)內(nèi)青霉素生產(chǎn)菌按其在深層培養(yǎng)中菌絲的形態(tài)分為絲狀菌和球狀菌兩種，根據(jù)絲狀菌產(chǎn)生孢子的顏色又分為黃孢子絲狀菌和綠孢子絲狀菌，常用菌種為綠孢子絲狀菌，如產(chǎn)黃青霉素。19當(dāng)前第19頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)菌種青霉素最初生產(chǎn)菌為音符型青霉菌，生產(chǎn)能力僅為幾十個(gè)單位，不能滿(mǎn)足工業(yè)生產(chǎn)需要。后來(lái)發(fā)現(xiàn)適合深層培養(yǎng)的新菌種——產(chǎn)黃青霉，生產(chǎn)能力100U/ml，經(jīng)不斷誘變選育，目前平均生產(chǎn)能力66000-70000U/ml，國(guó)際最高生產(chǎn)能力已超100000U/ml。20當(dāng)前第20頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素產(chǎn)生菌的生長(zhǎng)過(guò)程分生孢子發(fā)芽期菌絲繁殖期脂肪粒形成期脂肪粒減少，小空孢大空孢自溶菌絲生長(zhǎng)期青霉素分泌期菌絲自溶期21當(dāng)前第21頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)1－4期為菌絲生長(zhǎng)期，3期的菌體適宜為種子。

4－5期為生產(chǎn)期，生產(chǎn)能力最強(qiáng)，通過(guò)工程措施，延長(zhǎng)此期，獲得高產(chǎn)。

在第六期到來(lái)之前結(jié)束發(fā)酵。22當(dāng)前第22頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素發(fā)酵過(guò)程中的代謝變化分為菌體生長(zhǎng)、青霉素合成和菌體自溶三個(gè)階段。菌體生長(zhǎng)階段：發(fā)酵培養(yǎng)基接種后生產(chǎn)菌在合適的環(huán)境中經(jīng)過(guò)短時(shí)間的適應(yīng)，即開(kāi)始發(fā)育、生長(zhǎng)和繁殖，直至達(dá)到菌體的臨界濃度。青霉素合成階段：這個(gè)階段主要合成青霉素，青霉素的生產(chǎn)速率達(dá)到最大，并一直維持到青霉素合成能力衰退。在這個(gè)階段，菌體重量有所增加，但產(chǎn)生菌的呼吸強(qiáng)度一般無(wú)顯著變化。菌體自溶階段：這個(gè)階段菌體衰老，細(xì)胞開(kāi)始自溶，合成青霉素能力衰退，青霉素生產(chǎn)速率下降，氨基氮增加，PH上升。23當(dāng)前第23頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)絲狀菌三級(jí)發(fā)酵工藝流程

冷凍管（25°C，孢子培養(yǎng)，7天）——斜面母瓶（25°C，孢子培養(yǎng)，7天）——大米孢子（26°C，種子培養(yǎng)56h）——一級(jí)種子培養(yǎng)液（27°C，種子培養(yǎng)，24h）——二級(jí)種子培養(yǎng)液（27~26°C,發(fā)酵,7天）——發(fā)酵液。24當(dāng)前第24頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素發(fā)酵過(guò)程青霉素發(fā)酵時(shí)，青霉素生產(chǎn)菌在合適的培養(yǎng)基、PH、溫度和通氣攪拌等發(fā)酵條件下進(jìn)行生長(zhǎng)并合成青霉素。發(fā)酵開(kāi)始前，有關(guān)設(shè)備和培養(yǎng)基（主要是碳源、氮源、前體和無(wú)機(jī)鹽等）必須先經(jīng)過(guò)滅菌，后接入種子。在整個(gè)過(guò)程中，需要不斷通氣和攪拌，維持一定的罐溫和罐壓，在發(fā)酵過(guò)程中往往要加入泡沫劑，假如酸堿控制發(fā)酵液的PH，還需要間歇或連續(xù)的加入葡萄糖及銨鹽等化合物以補(bǔ)充碳源及氮源，或補(bǔ)進(jìn)其他料液和前體等以促進(jìn)青霉素的生產(chǎn)。25當(dāng)前第25頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)青霉素的發(fā)酵發(fā)酵工藝控制：

1.基質(zhì)濃度

2.培養(yǎng)基成分的控制

3.溫度

4.pH值、溶氧

5.菌絲狀態(tài)6.泡沫的控制26當(dāng)前第26頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵工藝控制

1.基質(zhì)濃度：

在發(fā)酵過(guò)程中，常常因?yàn)榍捌诨|(zhì)量濃度過(guò)高，對(duì)生物合成酶系產(chǎn)生阻遏或?qū)z生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制（如葡萄糖的阻遏和抑制,苯乙酸的生長(zhǎng)抑制）,而后期基質(zhì)濃度低限制了菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成。所以，在青霉素發(fā)酵中通常采用補(bǔ)料分批操作法，以維持一定的最適濃度。27當(dāng)前第27頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵工藝控制2.培養(yǎng)基成分的控制:

A.碳源：發(fā)酵中常用乳酸或葡萄糖。

乳糖最為便宜，但因貨源較少，很多國(guó)家采用葡萄糖代替。但當(dāng)葡萄糖濃度超過(guò)一定限度時(shí)，會(huì)過(guò)分加速菌體的呼吸，以至培養(yǎng)基中的溶解氧不能滿(mǎn)足需要，使一些中間代謝物不能完全氧化而積累在菌體或培養(yǎng)基中，導(dǎo)致pH下降，影響某些酶的活性，從而抑制微生物的生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成。目前普遍采用淀粉的酶水解產(chǎn)物，葡萄糖化液流加，以降低成本。28當(dāng)前第28頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵工藝控制B.氮源：

主要有機(jī)氮源為玉米漿、棉籽餅粉、花生餅粉、酵母粉、蛋白胨等。

玉米漿為較理想的氮源，含固體量少，有利于通氣及氧的傳遞，因而利用率較高。有機(jī)氮源還可以提供一部分有機(jī)磷，供菌體生長(zhǎng)。無(wú)機(jī)氮如硝酸鹽、尿素、硫酸銨等可適量使用。29當(dāng)前第29頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵工藝控制C.無(wú)機(jī)鹽：碳酸鈣用來(lái)中和發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的雜酸，并控制發(fā)酵液的pH值為菌體提供營(yíng)養(yǎng)的無(wú)機(jī)磷源一般采用磷酸二氫鉀。另外加入硫代硫酸鈉或硫酸鈉以提供青霉素分子中所需的硫。鐵離子對(duì)青霉素有毒害作用，應(yīng)嚴(yán)格控制發(fā)酵液中鐵含量在30ug/mL以下?，F(xiàn)在還有一些工廠(chǎng)采用鐵罐發(fā)酵，在發(fā)酵過(guò)程中鐵離子便逐漸進(jìn)入發(fā)酵液；發(fā)酵時(shí)間愈長(zhǎng)，則鐵離子愈多。鐵離子在50μg/ml以上便會(huì)影響青霉素的合成。所以青霉素的發(fā)酵罐采用不銹鋼制造為宜。30當(dāng)前第30頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵工藝控制D.前體：前體的加入是青霉素發(fā)酵的關(guān)鍵問(wèn)題之一。添加苯乙酸或者苯乙酰胺，可以借酰基轉(zhuǎn)移的作用，將苯乙酸轉(zhuǎn)入青霉素分子，提高青霉素G的生產(chǎn)強(qiáng)度。但苯乙酸對(duì)發(fā)酵有影響，一般以苯乙酰胺較好。也有采用苯乙酸月桂醇酯，其優(yōu)點(diǎn)是在發(fā)酵中月桂醇酯水解，苯乙酸結(jié)合進(jìn)青霉素成品。而月桂酸作為細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)劑及發(fā)酵液消沫劑，且其毒性比苯乙酸小，但價(jià)格較貴。前體要在發(fā)酵開(kāi)始20h后加入，并在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中控制在50μg/ml左右。前體用量大于0.1%時(shí)，青霉素的生物合成均下降。所以一般發(fā)酵液中前體濃度以始終維持在0.1%為宜。31當(dāng)前第31頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵工藝控制3.溫度：

青霉素發(fā)酵的最適溫度隨所用菌株的不同可能稍有差別,但一般認(rèn)為應(yīng)在25°C左右。溫度過(guò)高將明顯降低發(fā)酵產(chǎn)率,同時(shí)增加葡萄糖的維持消耗,降低葡萄糖至青霉素的轉(zhuǎn)化率。對(duì)菌絲生長(zhǎng)和青霉素合成來(lái)說(shuō),最適溫度不是一樣的,一般前者略高于后者,故有的發(fā)酵過(guò)程在菌絲生長(zhǎng)階段采用較高的溫度，以縮短生長(zhǎng)時(shí)間,到達(dá)生產(chǎn)階段后便適當(dāng)降低溫度,以利于青霉素的合成。

32當(dāng)前第32頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵工藝控制4.pH值、溶氧：

pH值：青霉素發(fā)酵的最適pH值一般認(rèn)為在6.8～7.2左右,應(yīng)盡量避免pH值超過(guò)7.0。因?yàn)榍嗝顾卦趬A性條件下不穩(wěn)定,容易加速其水解。溶氧:對(duì)于好氧的青霉素發(fā)酵來(lái)說(shuō),溶氧濃度是影響發(fā)酵過(guò)程的一個(gè)重要因素。當(dāng)溶氧濃度降到30%飽和度以下時(shí),青霉素產(chǎn)率急劇下降,低于10%飽和度時(shí),則造成不可逆的損害。溶氧濃度過(guò)高,說(shuō)明菌絲生長(zhǎng)不良或加糖率過(guò)低,造成呼吸強(qiáng)度下降,同樣影響生產(chǎn)能力的發(fā)揮。在罐的夾層或蛇管中需通冷卻水以維持一定罐溫。在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中，需不斷通無(wú)菌空氣和攪拌，以維持一定罐壓或溶氧。33當(dāng)前第33頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)5.菌絲狀態(tài)：菌絲濃度：發(fā)酵過(guò)程中必須控制菌絲濃度不超過(guò)臨界菌體濃度,從而使氧傳遞速率與氧消耗速率在某一溶氧水平上達(dá)到平衡。菌絲生長(zhǎng)速度：在葡萄糖限制生長(zhǎng)的條件下，當(dāng)比生長(zhǎng)速率低于0.015h-1時(shí)，比生產(chǎn)速率與比生長(zhǎng)速率成正比。因此,要在發(fā)酵過(guò)程中達(dá)到并維持最大比生產(chǎn)速率,必須使比生長(zhǎng)速率不低0.015h-1。菌絲形態(tài)：青霉素產(chǎn)生菌分化主要呈絲狀生長(zhǎng)和結(jié)球生長(zhǎng)兩種形態(tài)。在絲狀菌發(fā)酵中,控制菌絲形態(tài)使其保持適當(dāng)?shù)姆种Ш烷L(zhǎng)度,并避免結(jié)球,是獲得高產(chǎn)的關(guān)鍵要素之一。而在球狀菌發(fā)酵中,使菌絲球保持適當(dāng)大小和松緊,并盡量減少游離菌絲的含量,也是充分發(fā)揮其生產(chǎn)能力的關(guān)鍵素之一。34當(dāng)前第34頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵工藝控制6.泡沫的控制：

在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生大量泡沫,可以用天然油脂,如豆油、玉米油等或用化學(xué)合成消泡劑“泡敵”來(lái)消泡。應(yīng)當(dāng)控制其用量并要少量多次加入,尤其在發(fā)酵前期不宜多用,否則會(huì)影響菌體的呼吸代謝。

加消沫劑控制泡沫，必要時(shí)還加入酸、堿以調(diào)節(jié)發(fā)酵液的pH。35當(dāng)前第35頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)染菌處理

染菌是發(fā)酵工業(yè)長(zhǎng)期以來(lái)不能徹底解決的問(wèn)題，因此如何解決染菌問(wèn)題就成了發(fā)酵工業(yè)的工作重點(diǎn)之一。要解決染菌問(wèn)題首要問(wèn)題就是要能檢測(cè)出是否染菌。

染菌通常通過(guò)三個(gè)途徑發(fā)現(xiàn)：無(wú)菌試驗(yàn)，發(fā)酵液直接鏡檢，發(fā)酵液的生化分析。其中無(wú)菌試驗(yàn)是判斷染菌的主要依據(jù)。

36當(dāng)前第36頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)染菌的處理染菌在發(fā)酵過(guò)程的每個(gè)階段都可能發(fā)生，下面就各個(gè)不同的階段的染菌情況和處理辦法一一說(shuō)明。

⒈種子培養(yǎng)期染菌

⒉發(fā)酵前期染菌

⒊發(fā)酵中期染菌

⒋發(fā)酵后期染菌

37當(dāng)前第37頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)染菌的處理⒈種子培養(yǎng)期染菌

種子培養(yǎng)主要是生長(zhǎng)繁殖菌體。此時(shí)菌體濃度低，培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富，因此容易染菌。種子培養(yǎng)期染菌，帶進(jìn)發(fā)酵罐中的危害極大，應(yīng)嚴(yán)格控制種子污染。當(dāng)發(fā)現(xiàn)種子受污染后均應(yīng)滅菌后棄去，并對(duì)種子罐、管道進(jìn)行檢查和徹底滅菌。返回38當(dāng)前第38頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)染菌的處理⒉發(fā)酵前期染菌

發(fā)酵前朗主要是菌體生長(zhǎng)繁殖，代謝產(chǎn)物生成很少，染菌后雜菌容易繁殖，與生產(chǎn)菌爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)成分和氧分，嚴(yán)重干擾生產(chǎn)菌的生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物的生成，因此要特別注意發(fā)酵前期的染菌。當(dāng)發(fā)酵前期染菌時(shí)，由于營(yíng)養(yǎng)成分消耗不多，能耗也不大，從經(jīng)濟(jì)性的角度考慮應(yīng)迅速重新滅菌，補(bǔ)充必要的營(yíng)養(yǎng)成分，重新接種進(jìn)行發(fā)酵。返回39當(dāng)前第39頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)染菌的處理⒊發(fā)酵中期染菌

發(fā)酵中期染菌將嚴(yán)重干擾生產(chǎn)菌的代謝，影響產(chǎn)物的生成。如產(chǎn)酸，產(chǎn)泡沫，使菌體自溶，使發(fā)酵液變臭等。發(fā)酵中期染菌，由于營(yíng)養(yǎng)成分大量消耗，一般挽救處理困難，危害性大，發(fā)酵中期染菌應(yīng)做到早發(fā)現(xiàn)，早處理，通常做法是“倒罐”，即用一罐沒(méi)有染菌的發(fā)酵液與染菌的發(fā)酵液混合，使有害菌濃度下降，生產(chǎn)菌濃度提高進(jìn)而重新成為優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)菌群。顯然，倒罐必然造成物料消耗和操作費(fèi)用的增加。

返回40當(dāng)前第40頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)染菌的處理⒋發(fā)酵后期染菌

發(fā)酵后期產(chǎn)物積累較多，效價(jià)已經(jīng)很高，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)接近耗盡，此時(shí)如染菌量不多，可繼續(xù)進(jìn)行發(fā)酵，如嚴(yán)重污染也可提前放罐，停止發(fā)酵，這在經(jīng)濟(jì)上往往是合算的。41當(dāng)前第41頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)下游操作過(guò)濾萃取脫色結(jié)晶42當(dāng)前第42頁(yè)\共有49頁(yè)\編于星期四\13點(diǎn)發(fā)酵液預(yù)處理青霉菌素發(fā)酵后，放罐，加少量絮凝劑沉淀蛋白，然后經(jīng)真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾或板框過(guò)濾（青霉菌絲較粗，過(guò)濾較容易），除掉菌絲體及部分蛋白，過(guò)濾收率一般在90%左右。青霉素易降解，發(fā)酵液及濾液應(yīng)冷卻至10℃低溫保存，備后續(xù)提取精制。通常發(fā)酵液中青霉素濃度很低，僅0.1%~4.5%左右，而雜質(zhì)濃度比青霉素的高幾