第七章苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析

第七章苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析第一頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一本章內(nèi)容第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第二節(jié)鑒別試驗第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查第四節(jié)含量測定第五節(jié)體內(nèi)藥物分析（自學(xué)）第二頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)乙胺含苯環(huán)的基團

苯乙胺類1、苯環(huán)常被活潑的酚羥基取代2、具有堿性的脂肪乙胺側(cè)鏈，易于被氧化*擬腎上腺素類藥物具有收縮血管、升高血壓、散大瞳孔、舒張血管等藥理作用，臨床上常用于升壓、平喘、充血治療等，應(yīng)用廣泛。第三頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一一、基本結(jié)構(gòu)(Structure)擬腎上腺素類藥物，分子結(jié)構(gòu)中具有苯乙胺基本結(jié)構(gòu)兒茶酚胺類第四頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一苯環(huán)沒有羥基取代，中樞作用加強α位有烴基，α-C為手性C第五頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一弱堿性：

烴胺基側(cè)鏈，仲胺氮－弱堿性。游離堿難溶于水，易溶于有機溶劑；其鹽可溶于水酚羥基特性：鄰苯二酚（或苯酚）結(jié)構(gòu)，與金屬離子絡(luò)合呈色；在空氣中或遇光、熱易氧化，色澤變深；在堿性溶液中更易變色。*光學(xué)活性：手性碳原子，具有旋光性苯環(huán)取代基特性：如鹽酸克倫特羅芳伯氨基；紫外、紅外吸收特性二、化學(xué)性質(zhì)(feature)第六頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一第二節(jié)鑒別試驗(identification)一、與三氯化鐵反應(yīng)(酚羥基)藥物三氯化鐵腎上腺素Adrenaline0.1mol/L鹽酸液中顯翠綠色，加氨試液顯紫色，紫紅色鹽酸異丙腎上腺素Isoprenalinehydrochloride深綠色，滴加新制5%碳酸氫鈉液，顯藍紫色，紅色重酒石酸去甲腎上腺素Noradrenalinebitartrate翠綠色，加5%碳酸氫鈉試液顯藍色，紅色鹽酸去氧腎上腺素Phenylephrinehydrochloride紫色鹽酸多巴胺Dopaminehydrochloride墨綠色，滴加1%氨溶液，顯紫紅色硫酸沙丁胺醇Salbutamolsulfate硫酸沙丁胺醇加三氯化鐵試液2滴，振搖，溶液顯紫色；加碳酸氫鈉試液，即成橙黃色渾濁液第七頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一二、與甲醛－硫酸反應(yīng)具有酚羥基取代的本類藥物，可與甲醛在硫酸中反應(yīng)，形成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色化合物。腎上腺素顯紅色，鹽酸異丙腎上腺素顯棕色至暗紫色，重酒石酸去甲腎上腺素顯淡紅色，鹽酸去氧腎上腺素為顯玫瑰紅→橙紅→深棕紅的變化藥物甲醛－硫酸腎上腺素Adrenaline紅色鹽酸異丙腎上腺素Isoprenalinehydrochloride棕色，暗紫色重酒石酸去甲腎上腺素Noradrenalinebitartrate淡紅色鹽酸去氧腎上腺素Phenylephrinehydrochloride玫瑰紅，橙紅，深棕紅第八頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一三、氧化反應(yīng)（酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀氧化呈現(xiàn)不同顏色）腎上腺素碘或過氧化氫中性或酸性腎上腺素紅放置棕紅色多聚體鹽酸異丙腎上腺素偏酸性條件碘異丙腎上腺素紅硫代硫酸鈉淡紅色溶液重酒石酸去甲腎上腺素酒石酸氫鉀飽和液pH3.56碘試液放置5min硫代硫酸鈉溶液為無色或僅顯微紅色或淡紫色腎上腺素或鹽酸異丙腎上腺素明顯的深紅棕色或紫色第九頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一四、雙縮脲反應(yīng) 鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿，芳環(huán)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)，可顯雙縮脲特征反應(yīng)。

例：Chp2010，鑒別鹽酸麻黃堿 方法：取本品1%水溶液1ml，加硫酸銅試液2滴與20%氫氧化鈉液1ml，即顯藍紫色，加乙醚1ml振搖、放置，乙醚層顯紫紅色，水層變?yōu)樗{色。鹽酸去氧腎上腺素的鑒別：乙醚層不顯色，可與鹽酸麻黃堿區(qū)別

第十頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一五、與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)(Rimini試驗)

重酒石酸間羥胺的脂肪伯氨基重酒石酸間羥胺水溶解亞硝基鐵氰化鈉試液丙酮(無甲醛)數(shù)滴，碳酸氫鈉少量△紅紫色Rimini反應(yīng)例子第十一頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一藥物溶劑濃度(mg/ml)λnm(nm)吸收度(A)重酒石酸間羥胺水0.10272鹽酸異丙腎上腺素水0.052800.50鹽酸多巴胺0.5%硫酸0.03280鹽酸芬氟拉明0.1mol/L鹽酸0.25263,270鹽酸苯乙雙胍水0.012340.60鹽酸克倫特羅0.1mol/L鹽酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇水0.08274鹽酸偽麻黃堿水0.50251,257,263六、UV和IR第十二頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查

(Detectionofspecificimpurities)一、酮體檢查生產(chǎn)工藝：酮體氫化還原制得，若氫化不完全則引入酮體雜質(zhì)。降解產(chǎn)物腎上腺素紅多聚體第十三頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一通過UV光譜檢測Ch.P2010第十四頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一紫外分光光度法檢查酮體的條件及要求

藥物雜質(zhì)

溶劑C(mg/ml)λ(nm)A腎上腺素

腎上腺酮HCl(9→2000)2.0310≤0.05鹽酸去氧腎上腺素

酮體

水2.0310≤0.20重酒石酸去甲腎上腺素去甲腎上腺酮

水2.0310≤0.05鹽酸異丙腎上腺素

酮體

水2.0310≤0.15鹽酸甲氧明

酮胺

水1.5347≤0.06紫外分光光度法檢查酮體的條件及要求第十五頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一二、光學(xué)純度檢查大多數(shù)苯乙胺類擬腎上腺素藥物分子結(jié)構(gòu)中存在手性碳原子通過比旋度測定控制藥物的質(zhì)量ChP2010

藥物

溶劑C(mg/ml)比旋度腎上腺素HCl(9→2000)20-50.0~-53.5鹽酸去氧腎上腺素

水20-42~-47重酒石酸去甲腎上腺素

水50-10.0~-12.0鹽酸麻黃堿

水50-33~-35.5鹽酸偽麻黃堿

水50+61.0~+62.5第十六頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一

手性藥物光學(xué)純度檢查的最佳方法是實現(xiàn)對映體分離分析，目前常用的方法為色譜法和電泳法重酒石酸去甲腎上腺素的光學(xué)純度檢查：稱取重酒石酸去甲腎上腺素消旋體約50mg溶于5ml蒸餾水中，滴加氨水調(diào)pH為78；以乙酸乙酯萃取3次，所得乙酸乙酯層用蒸餾水洗滌2次，再用1g硫酸鈉脫水，過濾除去硫酸鈉，得到溶液置于50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得手性分離系統(tǒng)適用性溶液。同法制備(R)-重酒石酸去甲腎上腺素供試品溶液。取20l注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定。用ChiralpakAD-H色譜柱，以正己烷-乙醇-乙醇胺(800∶200∶2)為流動相；檢測波長為280nm；流速0.8ml/min。對映體的分離因子為7.2。通過手性高效液相色譜法分離，按峰面積歸一化法，可以測定重酒石酸去甲腎上腺素的光學(xué)純度p227例7-8第十七頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一A.TLC法——鹽酸去氧腎上腺素

B.紙色譜法——鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查（Chp2010版）C.HPLC法：大多數(shù)藥物均采用此法

腎上腺素中有關(guān)物質(zhì)的檢查（供試品溶液自身稀釋對照法）三、有關(guān)物質(zhì)檢查Ch.P2010第十八頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一第四節(jié)含量測定(Assay)原料：非水溶液滴定法、溴量法、亞硝酸鈉法制劑：比色法、提取容量法、紫外分光光度法、高效液相色譜法第十九頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一一、非水溶液滴定法(弱堿性)定義：是指在非水溶劑中進行的酸堿滴定測定法.應(yīng)用：主要用于測定有機堿及其氫鹵素鹽、硫酸鹽以及有機酸堿金屬鹽類藥物的含量，也用于測定某些有機弱酸的含量。溶劑的種類：酸性溶劑：冰醋酸堿性溶劑：DMF兩性溶劑：甲醇惰性溶劑：氯仿，甲苯，丙酮第二十頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一為什么要應(yīng)用非水滴定法？

這是因為本類藥物多為弱堿性，在水溶液中用酸堿滴定液直接滴定沒有明顯的突躍，終點難以觀測，常不能獲得滿意的測定結(jié)果。而在非水酸性溶劑中，只要在水溶液中的pKb<10，均可以被冰醋酸均化到溶劑醋酸根水平，相對堿度顯著增強。因而可使弱堿性的藥物都能順利進行滴定。第二十一頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一非水溶液滴定法——主要用于原料藥的測定弱堿BpKb<10則在水溶液中無法進行滴定以高氯酸滴定弱酸為例，在冰醋酸中：BH+A-+HClO4BH+ClO4-+HA有機弱堿鹽：原理第二十二頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一一般方法供試品量（8ml滴定液），冰醋酸或醋酐，（5%醋酸汞的冰醋酸溶液）高氯酸滴定液（0.1mol/L），結(jié)晶紫.空白試驗.

冰醋酸為溶劑醋酸汞消除氫鹵酸的干擾加入醋酐注意防止氨基被乙?；栽诒姿崛芙鈽悠泛髴?yīng)放冷后再加醋酐伯氨基的乙?；锊荒苡媒Y(jié)晶紫為指示劑若堿性較弱則加醋酐使突躍明顯第二十三頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一討論

適用范圍:Kb<10-8的有機堿8＜pKb＜10冰醋酸作溶劑10＜pKb＜12冰醋酸+醋酐pKb＞12醋酐醋酐解離生成的醋酐合乙酰離子[CH3CO+·(CH3CO)2O]比醋酸合質(zhì)子[H+·

CH3COOH]的酸性更強，更有利于堿性藥物的堿性增強。

酸根影響:在醋酸溶劑中：置換順序：高氯酸>氫溴酸>硫酸>鹽酸>硝酸>磷酸>有機酸。不同的酸對滴定終點的顯示有影響，對滴定結(jié)果也有影響?。〉诙捻?，共三十八頁，編輯于2023年，星期一

滴定劑穩(wěn)定性:

醋酸具有揮發(fā)性，且膨脹系數(shù)較大，因此溫度和儲存條件影響滴定劑的濃度。標定與滴定時溫度超過10度，應(yīng)重新標定，如未超過10度，應(yīng)對濃度進行校正：N1=N0/[1+0.0011(t1-t0)]

終點指示方法:電位法和指示劑法電位法：指示電極：玻璃電極參比電極：飽和甘汞電極指示劑：結(jié)晶紫，橙黃Ⅳ，萘酚苯甲醇，喹哪啶紅，孔雀綠等注意：指示劑的終點顏色變化，均需要用電位滴定法來確定。第二十五頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一1.游離弱堿藥物測定:如吡啶類、苯并二氮雜卓類直接測定，根據(jù)堿性強弱不同選擇不同的具體條件。2.HX酸鹽類：如吩噻嗪類加醋酸汞應(yīng)用實例在冰醋酸中不解離BH+Cl-+HClO4→BH+ClO4-+HClBH+Cl-+Hg（Ac）2→2BHAc+HgCl2BHAc+HClO4→BH+ClO4-+HAc醋酸汞的量要加足，否則測定結(jié)果偏低河北醫(yī)科大學(xué)第二十六頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一3.硫酸鹽類藥物的測定有機堿的硫酸鹽，在冰醋酸介質(zhì)中只能被滴定至有機堿的硫酸氫鹽。

硫酸沙丁胺醇冰醋酸+醋酐一元堿1：1BH+ClO4-+H2SO4BH+HSO4-+HClO4在冰醋酸中酸性強，使反應(yīng)不能發(fā)生河北醫(yī)科大學(xué)第二十七頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一硫酸奎寧片ChP（2005）取本品10片，除去糖衣后，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于硫酸奎寧0.3g），置分液漏斗中，加氯化鈉0.5g與0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml，混勻，精密加氯仿50ml，振搖10min，靜置，分取氯仿液，用干燥濾紙濾過。精密量取續(xù)濾液25ml，加醋酐5ml與二甲基黃指示液2滴，用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定，至溶液顯玫瑰紅色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于19.57mg的（C20H24N2O2）2·H2SO4·2H2O。經(jīng)堿化處理，生成奎寧游離堿，然后再用高氯酸滴定第二十八頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一4.硝酸鹽測定硝酸在冰醋酸介質(zhì)中的酸性不強，滴定反應(yīng)可以進行完全，但是硝酸具有氧化性，可以破壞指示劑使其變色，無法指示終點。采用電位法指示終點5.磷酸鹽與有機酸鹽磷酸與有機酸在冰醋酸介質(zhì)中的酸性極弱，不影響滴定反應(yīng)，可直接滴定。第二十九頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一二、溴量法鹽酸去氧腎上腺素測定方法：取本品約0.1g，精密稱定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴滴定液(0.1mol/L)50ml，再加鹽酸5ml,立即密塞，放置15分鐘并時時振搖，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液10ml，立即密塞，振搖后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml溴滴定液(0.1mol/L)相當于3.395mg的C9H13NO2·HCl。第三十頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一①游離溴及碘極易揮散，操作過程中防逸失②不能加入太過量的溴液，以防酚羥基氧化或溴化。一般以過量2％為宜。③平行條件作空白，校正操作中溴及碘揮發(fā)。第三十一頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一三、亞硝酸鈉法

鹽酸克侖特羅分子結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉定量發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽，可用永停滴定法指示終點取本品約0.25g，精密稱定，置100ml燒杯中，加鹽酸溶液(1→2)25ml使溶解，再加水25ml，照永停滴定法，用亞硝酸鈉滴定液(0.05mol/L)滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液(0.05mol/L)相當于15.68mg的C12H18Cl2N2OHCl

第三十二頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一四、紫外分光光度法&比色法苯乙胺類藥物分子具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)具有特征的紫外吸收，Chp2010采用這種方法測定多種紫類藥物。如鹽酸甲氧明注射液，重酒石酸間羥胺注射液。比色法—重氮化-偶合顯色或與亞鐵離子絡(luò)合顯色 以鹽酸克倫特羅為例，測定原理如下：第三十三頁，共三十八頁，編輯于2023年，星期一注意：由于偶合劑（N-(1-萘基)-乙二胺）與亞硝酸也能顯色干擾測定，所以在重氮化后，應(yīng)加入氨基磺酸銨分解剩余的亞硝酸。改錯：P233增加內(nèi)容：…..時時振搖10分鐘，再各加0.1%鹽酸萘乙二胺溶液1ml，搖勻，放置10分鐘，用鹽酸溶液（9→100）…第三十四頁，共三十八頁，編