銀杏培育指南組培育苗

銀杏培育指南組培育苗范圍本標準規(guī)定了銀杏組培育苗的外植體采集和消毒、培養(yǎng)基配制與保存、接種、瓶苗培養(yǎng)、煉苗與移栽、質(zhì)量標準、商品苗包裝、運輸和檔案管理等技術(shù)要求。本標準適用于銀杏的組培育苗。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程外植體采集和消毒外植體采集外植體主要包括莖尖、莖段和胚。選取1～2年生生長健壯、具有品種典型性狀的優(yōu)良單株，取幼苗外圍當年生幼嫩枝條，采集時間在3～4月；胚取當年種仁，種子采集時間為10月上中旬，沙藏貯存70d～90d。種核除去外種皮、中種皮和內(nèi)種皮，分離出種胚。外植體消毒莖尖和莖段莖尖和莖段剪去葉片，用肥皂水擦洗，然后用自來水沖洗干凈，無菌操作臺下依次用70%酒精消毒30s，含有吐溫20的0.1%氯化汞消毒8min～10min，無菌水沖洗3～5次，然后用無菌濾紙吸去莖尖和莖段表面的水分。種胚種胚先用肥皂水擦洗，然后用自來水沖洗干凈，無菌操作臺下依次用70%酒精消毒30s，含有吐溫20的0.1%氯化汞消毒6min～8min，無菌水沖洗3～5次，然后用無菌濾紙吸去種胚表面的水分。外植體制備莖尖和莖段在無菌環(huán)境下，剪取0.5cm～1.0cm長的莖尖或1cm～2cm長的莖段，每段留1～2個腋芽或頂芽，轉(zhuǎn)入已消毒的培養(yǎng)皿中備用。胚將已消毒的種胚，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中備用。培養(yǎng)基配制與保存培養(yǎng)基的配制與保存執(zhí)行LY/T1882標準。接種在無菌狀態(tài)下，將培養(yǎng)皿中的外植體用鑷子直插式接種于培養(yǎng)瓶中，每瓶接種2～3個。封口膜要及時捆綁，并將品種代號、培養(yǎng)基類型、個人編號以及接種日期標示在瓶上。瓶苗培養(yǎng)初代培養(yǎng)莖段外植體的初代培養(yǎng)使用芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，配方為MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.5mg/L+0.20%AC；胚外植體的初代培養(yǎng)使用MS培養(yǎng)基，pH5.8～6.0。培養(yǎng)溫度為25℃±2℃，置于1500lx～2000lx的光照條件下培養(yǎng)10d～15d，光照8h/d～12h/d。增殖培養(yǎng)外植體增殖3～5倍后，剪成1.0cm～2.0cm帶芽小段，轉(zhuǎn)入新的增殖培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基配方為MS+NAA0.1～0.5mg/L+6-BA0.1～2.0mg/L+0.25%AC。培養(yǎng)條件同初代培養(yǎng)。增殖周期為30d～45d。復(fù)壯繼代培養(yǎng)8～10代后進行復(fù)壯。生根培養(yǎng)選擇生長健壯、葉色正常，高3cm～5cm的嫩莖接種于生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA0.5mg/L。培養(yǎng)條件同初代培養(yǎng)。煉苗與移栽瓶苗煉苗選取有活力，生長健壯，葉色正常，根數(shù)≥5條，根長≥0.8cm的組培苗，溫室自然光閉口煉苗2～3周，開口煉苗5d～9d，溫度保持25℃±3℃。出瓶馴化洗凈組培苗殘留的培養(yǎng)基，移栽到無紡布容器中馴化。栽培基質(zhì)采用細河沙+珍珠巖+草炭土，其體積比為1:1:2，使用前12h～24h用0.5%～0.7%的高錳酸鉀消毒。馴化期間保持溫度20℃～30℃，空氣濕度70%～80%，光照強烈時可使用遮光度60%～70%的遮陽網(wǎng)遮陽。小苗長出新葉后，每7d～10d噴施葉面肥一次。移栽經(jīng)過25d～30d馴化即可移栽至XX。苗期管理執(zhí)行GB/T6001標準。質(zhì)量標準組培苗質(zhì)量標準苗木粗壯、挺直、有活力，具原品種特性。苗高3cm～5cm，葉片≥3片，大小協(xié)調(diào)、有層次感、色澤正常。根3～5條，根長適中，長勢好。同一批次達標的組培苗在90%以上，且培養(yǎng)基無污染。移栽苗的質(zhì)量標準苗木健壯、挺拔，形態(tài)完整，具原品種特性。苗高5cm～10cm，地徑≥0.2cm。葉片≥6片，大小協(xié)調(diào)，色澤正常。根系完整、發(fā)達。同一批次達標的組培苗在90%以上，無檢疫性病蟲害。包裝、運輸包裝瓶苗保留在培養(yǎng)瓶中，出瓶苗洗去X脂后裝入塑料小盒，移栽苗統(tǒng)一泡沫箱包裝?？稍偌油獍b。運輸X脂苗應(yīng)使用紙托盤運輸。裝