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實(shí)驗(yàn)七果蠅的雙因子雜交實(shí)驗(yàn)第一頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)果蠅兩對因子雜交實(shí)驗(yàn)的原理和方法。2、驗(yàn)證兩對非等位基因間的自由組合現(xiàn)象和遺傳規(guī)律。3、掌握果蠅的雜交技術(shù),并學(xué)會記錄交配結(jié)果和數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理的方法。第二頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二二、實(shí)驗(yàn)材料黑腹果蠅(Drosophilamelanogaster)品系灰體殘翅:EEvgvg黑檀體長翅:eeVgVg
果蠅的灰體基因(E)與黑檀體基因(e)為一對相對性狀,位于ⅢR70.7位置,而長翅(Vg)與殘翅(vg)為另一對相對性狀,位于ⅡR67.0位置。這兩對基因是沒有連鎖關(guān)系的,位于不同染色體上的非等位基因。
第三頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二三、實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備藥品體視顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、麻醉瓶、毛筆、濾紙、培養(yǎng)皿等。乙醚、玉米粉、瓊脂、紅塘、酵母粉、丙酸等。第四頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二四、實(shí)驗(yàn)原理自由組合規(guī)律:位于非同源染色體上的兩對非等位基因,其雜合體在形成配子時,等位基因彼此分離,進(jìn)入不同的配子中,非等位基因可自由組合進(jìn)入同一配子,結(jié)果產(chǎn)生4種比例相等的配子。若顯性完全,F(xiàn)1自交產(chǎn)生F2代表現(xiàn)出4種表型,比例為9:3:3:1。第五頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二
P:灰體殘翅(♀)×黑檀體長翅(♂)
F1:灰體長翅EeVgvg
F2
四、實(shí)驗(yàn)原理正交:灰殘Eevgvg(♀)×黑長eeVgVg(♂)反交:黑長eeVgVg(♀)×灰殘EEvgvg(♂)注意:雙因子雜交也可做反交,但因殘翅果蠅不能飛,只能爬行,用做母本比較好。正交自交EEvgvg
eeVgVg第六頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二四、實(shí)驗(yàn)原理
EVg1/4Evg1/4eVg1/4Evg1/4EVg1/41/161/161/161/16Evg1/41/161/161/161/16eVg1/41/161/161/161/16Evg1/41/161/161/161/161EEVgVg1EEvgvg9E_Vg_2EEVgvg2Eevgvg2EeVgVg1eeVgVg4EeVgvg2eevgvg1eevgvg3E_vgvg
3eeVg_F2配子第七頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二五、實(shí)驗(yàn)步驟
1.選處女蠅:每組做正交1瓶,正交選灰體殘翅為母本,黑檀體長翅為父本,將舊瓶中的果蠅麻醉全部處死,在8h內(nèi)收集處女蠅至少5只,雌雄分開培養(yǎng),可提前2-3天收集。2.雜交:將處女蠅5只和5只黑檀體雄蠅麻醉、轉(zhuǎn)移到新的雜交瓶中,確保雜交瓶中各只果蠅完全蘇醒,沒有死蠅。貼好標(biāo)簽,于25℃培養(yǎng);3.處死親本:7d后,處死雜交親本。4.觀察F1:再過4-5天,F(xiàn)1成蠅出現(xiàn),連續(xù)觀察2—3天,或在處死親本7天后,集中觀察記錄F1表型。第八頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二五、實(shí)驗(yàn)步驟
4.F1互交:選取5對F1果蠅,分別轉(zhuǎn)入一新培養(yǎng)瓶(不需處女蠅),貼好標(biāo)簽,于25℃培養(yǎng)。5.處死親本:7d后,殺死F1代親本果蠅6.觀察F2:再過5d,F(xiàn)2成蠅出現(xiàn),開始觀察記錄F2,連續(xù)統(tǒng)計7-8d。注意:(統(tǒng)計過的果蠅放入酒精瓶中,殺死)第九頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.觀察并統(tǒng)計F1代表型及個體數(shù),分析相對性狀間的顯、隱性關(guān)系;把你的統(tǒng)計結(jié)果,填入表1
。2.觀察并統(tǒng)計F2代表型及各種表型的個體數(shù),特別要注意新性狀組合個體的出現(xiàn)。計算不同表型個體數(shù)的比例,確定這兩隊基因的遺傳規(guī)律。把你的統(tǒng)計結(jié)果,填入表2
。3.根據(jù)你的結(jié)果,對該實(shí)驗(yàn)F2代的統(tǒng)計結(jié)果作X2測驗(yàn),填入表3
。第十頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二
觀察結(jié)果統(tǒng)計日期灰體殘翅(♀)×黑檀體長翅(♂)
灰體長翅數(shù)灰體殘翅數(shù)黑檀體長翅數(shù)黑檀體殘翅數(shù)表1F1代表型數(shù)量統(tǒng)計表
觀察結(jié)果統(tǒng)計日期
(♀)×
(♂)灰體長翅數(shù)灰體殘翅數(shù)黑檀體長翅數(shù)黑檀體殘翅數(shù)合計六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表2F2代表型數(shù)量統(tǒng)計表第十一頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二灰體長翅數(shù)灰體殘翅數(shù)黑檀體長翅數(shù)黑檀體殘翅數(shù)實(shí)際觀察數(shù)(O)預(yù)期數(shù)(E)偏差(O-E)(O-E)2/E自由度=n-1=表3F2代的統(tǒng)計結(jié)果做X2測驗(yàn)六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
x2=∑(O-E)2/E=第十二頁,共十四頁,編輯于2023年,星期二x2表Pn0.990.950.500.100.050.020.0110.000160.00390.152.713.845.416.6420.02010.1031.394.615.997.829.2130.1150.3522.376.257.829.8411.3540.2970.7113.367.789.4911.6713.2850.5541.1454.359.2411.0713.3915.09102.5583.9409.3415.9918.3121.16
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