蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法

蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法專利01專利背景附圖說明發(fā)明內(nèi)容技術(shù)領(lǐng)域目錄03020405權(quán)利要求榮譽(yù)表彰實(shí)施方式目錄0706基本信息《蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法》是魯南制藥集團(tuán)股份有限公司于2015年7月13日申請(qǐng)的專利，該專利的公布號(hào)為CNB，授權(quán)公布日為2017年2月8日，發(fā)明人是張貴民、蘇瑞強(qiáng)、劉武占?！厄隍妓幉牡馁|(zhì)量檢測(cè)方法》公開了一種蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法以蜈蚣中3，8?二羥基喹啉為指標(biāo)成分，采用高效液相色譜法或薄層色譜法對(duì)蜈蚣藥材進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。該發(fā)明技術(shù)方案首次將3，8?二羥基喹啉作為蜈蚣藥材質(zhì)量檢測(cè)的指標(biāo)成分。該方法操作簡便，條件可控，專屬性強(qiáng)，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好，可有效彌補(bǔ)中國藥典中蜈蚣藥材質(zhì)量檢測(cè)方法的不足，具有很強(qiáng)的實(shí)用性。2020年7月14日，《蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法》獲得第二十一屆中國專利獎(jiǎng)優(yōu)秀獎(jiǎng)。（概述圖為《蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法》摘要附圖）專利背景專利背景蜈蚣為蜈蚣科動(dòng)物少棘巨蜈蚣ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch的干燥體。春、夏二季捕捉，用竹片插入頭尾，繃直，干燥。具有熄風(fēng)鎮(zhèn)痙，通絡(luò)止痛，攻毒散結(jié)之功效，用于肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)，痙攣抽搐，小兒驚風(fēng)，中風(fēng)口歪半身不遂，破傷風(fēng)，風(fēng)濕頑痹，偏正頭痛，瘡瘍，瘰疬，蛇蟲咬傷。蜈蚣主要含組織胺樣物質(zhì)及溶血性蛋白質(zhì)，此外尚含氨基酸、脂肪酸、膽固醇及微量元素（苗明三.現(xiàn)代實(shí)用中藥質(zhì)量控制技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：1055）?！吨袊幍洹?010年版一部中蜈蚣的質(zhì)量檢測(cè)項(xiàng)目僅有性狀、水分、總灰分、浸出物（國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[S].2010年版一部.化學(xué)工業(yè)出版社，2010：335-336），缺乏專屬性強(qiáng)的薄層色譜鑒別或含量測(cè)定等質(zhì)量檢測(cè)項(xiàng)目，使得蜈蚣藥材的質(zhì)量難以得到有效地保證。中國國內(nèi)有報(bào)道對(duì)蜈蚣中氨基酸類成分（吳剛.少棘蜈蚣研究[J].生物化學(xué)雜志，1992，24（11）：650）和組織胺（鄧芳，方紅.蜈蚣藥材中毒性成分組織胺的含量測(cè)定[J].中草藥，1997，28（8）：472）進(jìn)行測(cè)定，氨基酸類成分及組織胺在多數(shù)動(dòng)植物組織中廣泛存在，此類成分專屬性不強(qiáng)，難以有效檢測(cè)蜈蚣的質(zhì)量。韓國學(xué)者從蜈蚣中分離得到喹啉類化合物3，8-二羥基喹啉，具有抗腫瘤活性（Surk-SikMoon等.Jineol，aCytotoxicAlkaloidfromtheCentipedeScolopendrasubspinipes[J].Nat.Prod.1996，59:777-779），但未見以對(duì)蜈蚣中的3，8-二羥基喹啉為指標(biāo)成分建立測(cè)定方法的報(bào)道。該發(fā)明人從蜈蚣中分離得到了3，8-二羥基喹啉，其為黃綠色粉末，以此成分作為蜈蚣的指標(biāo)成分，首次建立了蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法。發(fā)明內(nèi)容專利目的改善效果技術(shù)方案發(fā)明內(nèi)容專利目的《蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法》的目的是提供一種蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法。該方法是以蜈蚣中的3，8-二羥基喹啉為指標(biāo)成分，采用高效液相色譜法檢測(cè)蜈蚣中指標(biāo)性成分3，8-二羥基喹啉的重量百分比或用薄層色譜法鑒別蜈蚣中3，8-二羥基喹啉。

技術(shù)方案《蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法》技術(shù)方案以高效液相色譜法測(cè)定蜈蚣中的3，8-二羥基喹啉，包括下列步驟：1）對(duì)照品溶液制備：精密稱取3，8-二羥基喹啉對(duì)照品，用甲醇溶解，配制成對(duì)照品溶液；2）供試品溶液的制備：取蜈蚣藥材粉末，精密稱定，加25倍量甲醇，稱重，超聲處理30分鐘，取出，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過，作為供試品溶液；3）樣品的測(cè)定：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，色譜條件：進(jìn)樣體積5微升；流速：0.6-1.0毫升/分鐘；檢測(cè)波長252納米；柱溫：35-50℃；流動(dòng)相:甲醇-10毫摩爾/升磷酸二氫鉀溶液＝28-36:72-64。優(yōu)選地，步驟1）所述3，8-二羥基喹啉對(duì)照品濃度為0.00362毫克/毫升。優(yōu)選地，步驟3）所述色譜條件為：進(jìn)樣體積5微升；流速：0.6毫升/分鐘；檢測(cè)波長：252納米；柱溫：40℃；流動(dòng)相:甲醇-10毫摩爾/升磷酸二氫鉀溶液＝28:64?！厄隍妓幉牡馁|(zhì)量檢測(cè)方法》技術(shù)方案已薄層色譜法鑒別蜈蚣中3，8-二羥基喹啉，包括以下步驟：1）對(duì)照品溶液的制備：取3，8-二羥基喹啉對(duì)照品適量，加甲醇溶解，配制成濃度為0.1毫克/毫升-1.改善效果與2015年7月之前的技術(shù)比較，《蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法》蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法首次將3，8-二羥基喹啉作為蜈蚣藥材質(zhì)量檢測(cè)的指標(biāo)成分，采用高效液相色譜法和薄層色譜法對(duì)蜈蚣藥材進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，操作簡便，條件可控，專屬性強(qiáng)，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好，可有效彌補(bǔ)中國藥典中蜈蚣藥材質(zhì)量檢測(cè)方法的不足，具有很強(qiáng)的實(shí)用性。該發(fā)明技術(shù)方案也可為中藥制劑中蜈蚣的質(zhì)量檢測(cè)提供參考。

附圖說明附圖說明圖1是3，8-二羥基喹啉對(duì)照品的HPLC圖；圖2是蜈蚣藥材的HPLC圖，其中峰1是3，8-二羥基喹啉；圖3是不同批次的蜈蚣的薄層色譜圖。

技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)領(lǐng)域《蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法》涉及一種蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法，屬于中藥領(lǐng)域。

權(quán)利要求權(quán)利要求1.一種蜈蚣藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，該方法采用高效液相色譜法檢測(cè)蜈蚣中指標(biāo)性成分3，8-二羥基喹啉的重量百分比或采用薄層色譜法鑒別蜈蚣中3，8-二羥基喹啉；所述高效液相色譜法包括以下步驟：1）對(duì)照品溶液制備：精密稱取3，8-二羥基喹啉對(duì)照品，用甲醇溶解，配制成對(duì)照品溶液；2）供試品溶液的制備：取蜈蚣藥材粉末，精密稱定，加25倍量甲醇，稱重，超聲處理30分鐘，取出，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過，作為供試品溶液；3）樣品的測(cè)定：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，色譜條件：進(jìn)樣體積5微升；流速：0.6-1.0毫升/分鐘；檢測(cè)波長252納米；柱溫：35-50℃；流動(dòng)相:甲醇:10毫摩爾/升磷酸二氫鉀溶液＝28-36:72-64；所述薄層色譜法包括以下步驟：1）對(duì)照品溶液的制備：取3，8-二羥基喹啉對(duì)照品適量，加甲醇溶解，配制成濃度為0.1毫克/毫升-1.實(shí)施方式實(shí)施方式實(shí)施例1蜈蚣藥材質(zhì)量檢測(cè)方法1）對(duì)照品溶液的制備：精密稱取3，8-二羥基喹啉，用甲醇溶解，配制成0.00362毫克/毫升的3，8-二羥基喹啉對(duì)照品溶液；2）供試品溶液的制備：取蜈蚣藥材粉末1克，精密稱定，加甲醇25毫升，稱重，超聲處理30分鐘，取出，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過，作為供試品溶液；3）樣品的測(cè)定：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，色譜條件：色譜柱：KromasilC18（4.6毫米×250毫米，5微米）流速：0.6毫升/分鐘；檢測(cè)波長252納米；柱溫：35℃；進(jìn)樣體積5微升；流動(dòng)相:甲醇-10毫摩爾/升磷酸二氫鉀＝28:64。4）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密吸取濃度為0.00362毫克/毫升的3，8-二羥基喹啉對(duì)照品溶液1微升、2微升、4微升、8微升、10微升、12微升，按上述色譜條件測(cè)定的峰面積，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程Y＝7774.301X-44.053，r＝9994，線性范圍0.00362微克—