第三章藥物雜質檢測技術演示文稿

第三章藥物雜質檢測技術演示文稿當前第1頁\共有122頁\編于星期五\8點優(yōu)選第三章藥物雜質檢測技術當前第2頁\共有122頁\編于星期五\8點導學情景情景描述：一天，小娟發(fā)現(xiàn)阿司匹林長毛了，小娟輕輕一抹，毛沒了，正打算把脫了小毛的藥片放入瓶里，恰好她表姐進來了，看到此情景制止了小娟的行為，把長毛的藥片裝好，準備交到藥店的過期或變質藥品回收處。學前導語：藥品在生產、貯存過程中由于各種因素影響，會發(fā)生變質反應，產生多種雜質，這些雜質不僅沒有治療作用，往往還對人體有害。當前第3頁\共有122頁\編于星期五\8點第一節(jié)雜質的來源與雜質檢查方法一、雜質的來源及分類雜質（impurities）是指：

1.有毒副作用的物質

2.本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質

3.本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學管理的物質當前第4頁\共有122頁\編于星期五\8點藥物的純度和化學試劑的純度的區(qū)別

前者主要從雜質對用藥安全、有效性及藥物的穩(wěn)定性的影響方面考慮，后者是從雜質可能引起的化學變化對試劑的使用范圍和使用目的的影響來考慮。藥品只有兩個等級：合格或不合格?；瘜W試劑有很多等級，如基準試劑、優(yōu)級純（GR）、分析純（AR）、化學純（CP）、色譜純、光譜純。不能用化學試劑的規(guī)格代替藥品標準，不能將化學試劑當做藥品直接用于臨床治療。當前第5頁\共有122頁\編于星期五\8點（一）藥物中雜質的來源1.生產過程中引入（1）原料、反應中間體及副產物

（2）試劑、溶劑、催化劑類

（3）生產中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質當前第6頁\共有122頁\編于星期五\8點2.貯藏過程中產生

水解、氧化、分解、異構化、晶形轉變、聚合、潮解和發(fā)霉等當前第7頁\共有122頁\編于星期五\8點易發(fā)生水解反應的結構：

酯、內酯、酰胺、鹵代烴、苷類等易發(fā)生氧化反應的結構：

醚、醛、酚羥基、巰基、亞硝基、雙鍵等當前第8頁\共有122頁\編于星期五\8點（二）藥物中雜質的分類1.按雜質的產生和分布特點分類（1）一般雜質自然界中分布廣泛容易引入的雜質氯化物硫酸鹽水分重金屬等（2）特殊雜質特定藥物中產生，如阿司匹林中水楊酸硫酸阿托品中莨菪堿。2.按雜質作用特點分類（1）信號雜質（2）有害雜質3.按雜質結構特點分類分為無機雜質和有機雜質當前第9頁\共有122頁\編于星期五\8點二、藥物雜質限量與雜質檢查方法（一）雜質限量指藥物中允許雜質存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示。限量檢查定義：不測定雜質的含量，只檢查雜質是否超過限量的方法。當前第10頁\共有122頁\編于星期五\8點雜質量≤雜質限量＜雜質量藥品合格藥品不合格當前第11頁\共有122頁\編于星期五\8點（二）藥物雜質檢查方法對照法靈敏度法比較法當前第12頁\共有122頁\編于星期五\8點1.對照法限量檢查法（LimitTest）方法：取一定量待檢查雜質的對照液與一定量供試品液在相同條件處理后，比較反應結果，從而判斷供試品中所含雜質是否超限。要求：遵循平行操作原則特點：不需知道雜質的準確含量當前第13頁\共有122頁\編于星期五\8點雜質限量計算雜質限量=雜質的最大允許量/供試品量雜質限量=標準溶液的濃度X標準溶液的體積/供試品量L=CV/S×100%當前第14頁\共有122頁\編于星期五\8點例1對乙酰氨基酚中硫酸鹽的檢查：取本品2.0g，加水100ml，加熱溶解后，冷卻、過濾、取濾液25ml，依法檢查，與標準硫酸鉀溶液1.0ml（1ml相當于100μg的硫酸根）制成的對照液比較、濁度不得更大。求硫酸鹽的限量為多少？當前第15頁\共有122頁\編于星期五\8點例2丙磺舒中檢查重金屬：取丙磺舒1.0g，依法檢查，重金屬不得超過百萬分之十，應取標準鉛液多少ml？（每ml相當于10μg的pb）當前第16頁\共有122頁\編于星期五\8點例3檢查氯化鈉中砷鹽，規(guī)定取標準砷液2.0ml（1ml相當于1ug的As）制備標準砷斑，要求砷含量不得超過0.00004%。問應取供試品多少克。當前第17頁\共有122頁\編于星期五\8點例4磷酸可待因中嗎啡檢查：取本品0.1g，加鹽酸溶液使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15分鐘，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡溶液【取無水嗎啡2.0ml，加鹽酸使溶解成100ml】5.0ml，用同一方法制成的對照液比較，不得變深，問限量為多少？當前第18頁\共有122頁\編于星期五\8點靈敏度法是以反應的靈敏度來控制雜質的限量。系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應條件下，不得有正反應出現(xiàn)。特點：不需對照品。當前第19頁\共有122頁\編于星期五\8點例：純化水中氯化物檢查，在50ml中純化水中加入硝酸5滴，及硝酸銀試液1ml，要求不得發(fā)生渾濁。氯化物的限量就是測定條件下不產生氯化銀的渾濁為限。當前第20頁\共有122頁\編于星期五\8點比較法方法：取供試品一定量依法檢查，測定待檢雜質的吸收度或旋光度等與規(guī)定的限量比較，不得更大。特點：準確測定雜質的吸收度或旋光度并與規(guī)定限量比較，不需要對照物。當前第21頁\共有122頁\編于星期五\8點第二節(jié)一般雜質檢查

藥物中雜質的檢查是利用藥物與雜質之間性質（包括物理、化學性質）的不同，選擇適當有效的方法進行檢查測定。藥典2015年版將一般雜質的檢查方法收載于四部通則中，藥典正文中各藥品的質量標準不再重復記敘這些方法，而是直接引用。當前第22頁\共有122頁\編于星期五\8點一般雜質檢查要求：1.遵循平行操作原則（1）儀器的配對性如納氏比色管應配對，刻度線高低相差不超過2mm，砷鹽檢查時導氣管長度及孔的大小要一致。（2）對照品與供試品的同步操作當前第23頁\共有122頁\編于星期五\8點2.正確的取樣及供試品的稱量范圍（1g不超過±2%，＞1g不超過±1%）3.正確的比色、比濁方法及檢查結果不符合規(guī)定或在限度邊緣時應對供試管和對照管各復查二份當前第24頁\共有122頁\編于星期五\8點一、氯化物檢查法一）檢查原理（對照法）利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀試液作用，生產氯化銀白色渾濁，與一定量標準氯化鈉溶液在相同條件下生成氯化銀渾濁比較，以判斷供試品中氯化物是否超過限量。當前第25頁\共有122頁\編于星期五\8點二）操作方法（藥典附錄）1.供試液：除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。當前第26頁\共有122頁\編于星期五\8點2.對照溶液：另取各藥品項下規(guī)定量的標準氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即得對照溶液。3.比濁：于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比濁。當前第27頁\共有122頁\編于星期五\8點（三）注意事項標準NaCl溶液

10ugCl/ml，50ml溶液中含50～80ug的Cl所顯渾濁梯度明顯，相當于標準NaCl溶液5～8ml。2.反應需在硝酸酸性條件下進行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

當前第28頁\共有122頁\編于星期五\8點（1）加速AgCl渾濁的形成；（2）產生較好的乳濁；（3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。當前第29頁\共有122頁\編于星期五\8點

3.試劑：硝酸銀

4.供試液和對照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

5.避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見光易分解。

6.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。當前第30頁\共有122頁\編于星期五\8點

7.若供試品有色，需經處理后方可檢查。

（1）內消色法：分為兩等分量，一份加硝酸銀，出現(xiàn)沉淀，過濾。再加標準氯化鈉和水，作為對照溶液。

（2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。當前第31頁\共有122頁\編于星期五\8點二、硫酸鹽檢查法檢查原理(對照法)利用硫酸鹽在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇生成白色渾濁，與一定量標準硫酸鉀溶液在相同條件下與氯化鋇生成的渾濁比較，以判斷藥物中硫酸鹽是否超過限量。當前第32頁\共有122頁\編于星期五\8點二）操作方法取規(guī)定量的供試品，加水溶解使成約40ml（如溶液顯堿性，可滴加鹽酸使成中性）；溶液如不澄清，應濾過；置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得供試液。另取各藥品項下規(guī)定量的標準硫酸鉀溶液，按同樣方法制成對照液于供試液與對照液中，分別加入25%氯化鋇溶液5ml，用水稀釋至50ml，搖勻，放置10min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較。當前第33頁\共有122頁\編于星期五\8點三）注意事項標準K2SO4溶液:每1ml相當于0.1mg的SO42－，50ml溶液中含0.1～0.5mg的SO42－所顯渾濁梯度明顯，相當于標準K2SO4溶液1.0～5.0ml。2.反應需在鹽酸酸性條件下進行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。當前第34頁\共有122頁\編于星期五\8點3.試劑：氯化鋇4.供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀5.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。當前第35頁\共有122頁\編于星期五\8點四）干擾及排除加入鹽酸，排除碳酸離子等干擾。溫度太低，水浴加熱，加快渾濁產生。若供試品有色，也可用內消色法即倍量法處理。供試液不澄明，用成酸性的水洗過的濾紙過濾。

當前第36頁\共有122頁\編于星期五\8點三、鐵鹽檢查法1.原理對照法在鹽酸酸性溶液中，鐵鹽與硫氰酸銨生成紅色可溶解硫氰酸鐵配位離子，與標準液用同法處理，進行比較，觀察顏色。當前第37頁\共有122頁\編于星期五\8點2.檢查方法（藥典附錄）除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻（供試液及處理）；如顯色，立即與標準鐵溶液一定量制成的對照溶液比較，即得。當前第38頁\共有122頁\編于星期五\8點對照液：取各藥品項下規(guī)定量的標準鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻當前第39頁\共有122頁\編于星期五\8點3.測定條件（1）標準鐵溶液及對照液用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸鐵銨）配制標準鐵貯備液（加入硫酸防止Fe3+的水解），標準鐵溶液臨用前稀釋而成，標準鐵溶液10gFe3+/ml，50ml溶液中含10～50g的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標準鐵溶液1.0～5.0ml當前第40頁\共有122頁\編于星期五\8點

（2）反應需在鹽酸酸性條件下進行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。

（3）試劑：硫氰酸銨。加過量硫氰酸銨，使反應向正反應方向進行（4）檢查Fe2+和Fe3+

當前第41頁\共有122頁\編于星期五\8點

（5）鐵鹽檢查時，加氧化劑氧化Fe2+為Fe3+。加過硫酸銨可氧化Fe2+為Fe3+，同時可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+

（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。當前第42頁\共有122頁\編于星期五\8點4.干擾及排除

（1）為了提高靈敏度或供試管與對照管色調不一致時，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。

（2）干擾離子的影響（增加酸度，增加硫氰酸銨等

（3）具環(huán)狀結構的有機藥物，需經700～800℃熾灼破壞處理后再依法檢查。當前第43頁\共有122頁\編于星期五\8點四、重金屬（鉛）檢查法

重金屬主要指銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、鎳等，通常在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉試液作用而顯色的金屬雜質。重金屬可以影響藥物的穩(wěn)定性及安全性。重金屬的檢查以鉛的檢查最為代表。當前第44頁\共有122頁\編于星期五\8點重金屬檢查藥典2000收載了四種方法第一法：該法也稱硫代乙酰胺法第二法：熾灼殘渣法第三法硫化鈉法第四法微孔濾膜法當前第45頁\共有122頁\編于星期五\8點第一法（也稱硫代乙酰胺法）1.原理對照法

適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。

CH3CSNH2+H2O→CH3CONH2+H2SPb2++H2S→PbS+2H+（PH3.5）當前第46頁\共有122頁\編于星期五\8點2.操作方法取25ml納氏比色管兩只，甲管中加入標準鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖溶液（pH3.5）2ml后，加水或規(guī)定的溶劑稀釋成25ml，乙管中加入按各藥品項規(guī)定下的方法制成的供試液25ml；再分別于甲、乙兩管中加入硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，比色。當前第47頁\共有122頁\編于星期五\8點

3.測定條件

（1）用硝酸鉛配制標準鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），標準鉛溶液臨用前稀釋而成，標準硝酸鉛溶液10gPb2+/ml，適宜比色范圍為27ml溶液中含10～20g的Pb2+，相當于標準鉛溶液1~2ml。當前第48頁\共有122頁\編于星期五\8點（2）本法用2mlpH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.5，此時硫化鉛沉淀較完全。（酸度大，顏色淺甚至不顯色）

（3）顯色劑：從ChP（1990）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑

當前第49頁\共有122頁\編于星期五\8點3.干擾及排除（1）供試品如有色，需經處理后方可檢查。

A.外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。

B.內消色法

C.改用第四法，微孔濾膜過濾法當前第50頁\共有122頁\編于星期五\8點（2）若供試品中有微量Fe3+存在，會氧化硫化氫生成單質硫，干擾比色，加入抗壞血酸Vc或鹽酸羥胺（0.5～1.0g）還原Fe3+為Fe2+，可消除干擾（3）若藥物本身能生成不溶性硫化物時，可加入掩蔽劑消除干擾。如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Zn2+后（生成穩(wěn)定配合物），依第三法檢查（加入硫化鈉）。當前第51頁\共有122頁\編于星期五\8點第二法熾灼殘渣法

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機藥物。

1.原理對照法

500～600℃熾灼后的殘渣，經處理后，依一法檢查。當前第52頁\共有122頁\編于星期五\8點2.操作方法

取熾灼殘渣，加硝酸，放冷，加鹽酸，加水，加氨水對酚酞顯示中性，再加醋酸鹽緩沖液，加水稀釋作為供試液。另根據規(guī)定配置標準液，用第一法檢查，可得。含鈉及氟的有機藥物應用鉑坩堝、石英坩堝或硬質玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）。當前第53頁\共有122頁\編于星期五\8點第三法硫化鈉法

適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。

1.原理對照法在氫氧化鈉堿性條件下，重金屬雜質與硫化鈉生成有色硫化物，再與標準鉛溶液同法處理的顏色進行比較，來判斷重金屬的含量。當前第54頁\共有122頁\編于星期五\8點2.測定條件

（1）NaOH堿性條件下（2）顯色劑：硫化鈉用于難溶于稀酸能溶于堿水的藥物。如巴比妥類。當前第55頁\共有122頁\編于星期五\8點第四法微孔濾膜法

適用于含2～5g重金屬雜質及有色供試液的檢查。依一法檢查，微孔濾膜過濾后比較色斑。（含量低，難以比色）當前第56頁\共有122頁\編于星期五\8點五、砷鹽檢查法（一）古蔡法1.原理對照法

鋅與酸生成新生態(tài)的氫，砷化氫遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與標準砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較當前第57頁\共有122頁\編于星期五\8點當前第58頁\共有122頁\編于星期五\8點2.操作方法（1）標準砷溶液制備（2）標準砷斑制備（3）供試品砷斑制備（4）比色（5）結果判斷當前第59頁\共有122頁\編于星期五\8點3.注意事項（1）標準砷溶液（三氧化二砷）臨用新配（2）酸為反應物，酸量應足夠，所以加濃鹽酸5ml。當前第60頁\共有122頁\編于星期五\8點B.碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應不斷進行；C.氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；D.可抑制微量銻化氫的干擾，在實驗條件下，100gSb存在也不干擾測定。（3）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：A.還原As5+為As3+，加快反應速度；

當前第61頁\共有122頁\編于星期五\8點（4）醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝管高度60～80mm。（5）鋅粒應無砷（6）砷斑不穩(wěn)定，應立即觀察當前第62頁\共有122頁\編于星期五\8點4.干擾及排除（1）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時，加HNO3，△，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。

當前第63頁\共有122頁\編于星期五\8點（2）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。（3）具環(huán)狀結構的有機藥物，要先行有機破壞后再進行檢查。常用的有機破壞方法：堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查供試品需經有機破壞，則標準砷溶液應平行操作當前第64頁\共有122頁\編于星期五\8點（4）本法適用于不含Sb（銻）或含Sb量小于100g的供試品。當前第65頁\共有122頁\編于星期五\8點七、干燥失重測定法

干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經干燥后所減失的重量，通常以百分率表示。主要是水分，揮發(fā)性物質。方法：一）常壓干燥法、二）干燥劑干燥法、三）減壓干燥法當前第66頁\共有122頁\編于星期五\8點一）常壓干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。操作：將供試品置相同條件已干燥至恒重的扁形稱量瓶中，精密稱定，于烘箱內在規(guī)定溫度下干燥至恒重（連續(xù)兩次干燥后重量差在0.3mg以下），根據減失的量和取樣量計算供試品的干燥失重。當前第67頁\共有122頁\編于星期五\8點注意事項：1.干燥溫度一般為105℃，干燥時間2~4小時，取出于干燥器中冷卻至室溫稱重。2.第二次及以后各次稱重均應在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進行。3.供試品平鋪于稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松物質不超過10mm，顆粒大的需研細4.含結晶水的可提高干燥溫度。當前第68頁\共有122頁\編于星期五\8點5.供試品易熔化的，可先在低溫下干燥，然后在規(guī)定溫度下干燥6.受熱易分解而達不到恒重的，采用一定溫度干燥一定時間減失的重量代表干燥失重。當前第69頁\共有122頁\編于星期五\8點當前第70頁\共有122頁\編于星期五\8點二）干燥劑干燥法適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。將供試品置于干燥器內，利用干燥器內的干燥劑吸收供試品中的水分，干燥至恒重。干燥劑：硅膠、濃硫酸、P2O5

。當前第71頁\共有122頁\編于星期五\8點當前第72頁\共有122頁\編于星期五\8點三）減壓干燥法

適用于熔點低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。

除另有規(guī)定外，壓力應在2.67kPa（20mmHg）以下。減壓干燥器或恒溫減壓干燥器當前第73頁\共有122頁\編于星期五\8點當前第74頁\共有122頁\編于星期五\8點六、酸堿度檢查法溶劑：新沸冷水為溶劑，不溶于水的藥物可以用中性乙醇等有機溶劑溶解，或將藥物與水混搖，使所含酸堿性雜質溶解，濾過，取濾液檢查。當前第75頁\共有122頁\編于星期五\8點一）酸堿滴定法原理：在規(guī)定的指示液條件下，用規(guī)定濃度的酸或堿滴定液滴定供試品溶液中堿性或酸性雜質，以消耗酸或堿滴定液的毫升數(shù)作為限度指標。當前第76頁\共有122頁\編于星期五\8點例：檢查氯化鈉的酸堿度取本品5.0g，加水50ml溶解后，加溴麝香草酚藍指示液2滴，如顯黃色（示為酸性），加氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）0.10ml，應變?yōu)樗{色；如顯藍色或綠色（示為堿性），加鹽酸滴定液（0.02mol/L）0.20ml，應變?yōu)辄S色。當前第77頁\共有122頁\編于星期五\8點二）指示劑法原理：利用規(guī)定指示劑的變色pH范圍控制供試液中酸堿雜質限量。例：純化水的酸堿度檢查取本品10ml，加甲基紅指示液2滴，不得顯色（控制酸度）；另取10ml，加溴麝香草酚藍指示液5滴，不得顯藍色（控制堿度），即純化水酸堿度控制在pH4.2-7.6.當前第78頁\共有122頁\編于星期五\8點三）pH測定法采用電位法直接測定溶液的pH.,準確度高，用于注射液等的檢查。當前第79頁\共有122頁\編于星期五\8點第三節(jié)特殊雜質檢查特殊雜質——是指該藥物的生產和貯存過程中，根據藥物的性質、生產方法和工藝條件，有可能引入的雜質。例：阿司匹林中游離的水楊酸；腎上腺素中的酮體；硫酸阿托品中的莨菪堿等。當前第80頁\共有122頁\編于星期五\8點

藥物中特殊雜質的檢查，主要是根據藥物和雜質在物理和化學性質上的差異來進行的，方法的專屬性十分關鍵：物理法：嗅味、顏色、溶解行為化學法：酸堿差異、氧化還原、雜質與一定試劑產生沉淀（顏色、氣體）等旋光法：比旋度、旋光度分光光度法：紫外、比色原子吸收、紅外等色譜法：紙色譜、薄層色譜、高效液相色譜、氣相色譜當前第81頁\共有122頁\編于星期五\8點物理法1.嗅味及揮發(fā)性差異（雜質有特殊嗅味）例：乙醇中檢查雜醇油，將乙醇滴在無嗅清潔的濾紙上，待乙醇自然揮發(fā)后，不應留有雜油醇異嗅；麻醉乙醚中檢查異嗅：取本品10ml，置瓷蒸發(fā)器中，使自然揮發(fā)，揮散完畢，不得有異味當前第82頁\共有122頁\編于星期五\8點例如：黃凡士林中異性有機物檢查：本品2.0g,直火加熱無辛味。濃過氧化氫中不揮發(fā)性雜質檢查：10ml水浴蒸干殘渣＜15mg當前第83頁\共有122頁\編于星期五\8點2.顏色的差異（控制有色雜質）參照溶液顏色檢查法。例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的檢查：取本品2.0g，加NaOH試液10ml，加水25ml，與黃色3號比色液比，不得更深。當前第84頁\共有122頁\編于星期五\8點3.溶解行為差異（雜質和藥物的可溶性不同）例，檢查硫酸鋇中的酸中溶解物：將供試品加稀鹽酸與純化水煮沸，濾除硫酸鋇后，濾液蒸干，遺留殘渣不得超過規(guī)定限量。例，磺胺嘧啶中原料2-氨基嘧啶等堿性雜質檢查：利用磺胺嘧啶溶于堿，雜質不溶液堿，供試品加氫氧化鈉后澄清為合格。當前第85頁\共有122頁\編于星期五\8點化學法1.酸堿性差異例：苯巴比妥中檢查巴比妥酸：供試品加水煮沸，濾液加甲基橙指示液，不得顯紅色為合格。2.氧化還原性差異例：氯化鈉中碘化物的檢查：供試品中加淀粉混合液（硫酸、亞硝酸、淀粉）濕潤，日光下觀察，5分鐘內不得顯藍色痕跡。當前第86頁\共有122頁\編于星期五\8點酸堿性的差異

1.規(guī)定消耗滴定液體積例如己酸羥孕酮中正己酐、對甲苯磺酸檢查：(NaOH0.02mol/L)

取本品0.20g+中性乙醇+溴麝香草酚藍微藍色＜0.50ml

2.pH法例如乙琥胺中2-甲基-2-乙基丁二酸檢查：0.01g/mlpH3.0～4.5.

3.指示劑法

例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查：其水溶液不得使甲基橙顯紅色。當前第87頁\共有122頁\編于星期五\8點氧化還原性的差異例如：NaCl中I-和Br-檢查EOCl/2Cl-=+1.3595V＞EOBr/2Br-=+1.065V

＞EOI/2I-=+0.5345V,因此+NaNO2+H2SO4+淀粉顯藍色

再例如：鹽酸嗎啡中阿樸嗎啡的檢查：后者可被碘氧化生成水溶性綠色化合物。因此ChP規(guī)定：本品50mg+4mlH2O+1dI2+5ml乙醚乙醚層不得顯紅色；水層不得顯綠色。當前第88頁\共有122頁\編于星期五\8點3.雜質與一定試劑產生沉淀氯化鈉中檢查鋇鹽藥物中草酸鹽的檢查4.雜質與一定試劑產生顏色5.雜質與一定試劑產生氣體藥物中微量硫化物：酸性條件下放出H2S氣體，與醋酸鉛試紙形成棕色硫斑，與標準硫斑比較。氰化物檢查（改進普魯士藍法，氣體擴散三硝基苯酚鋰法）當前第89頁\共有122頁\編于星期五\8點雜質與一定試劑反應產生沉淀例一、間苯二酚中鄰苯二酚檢查：后者+Pb(Ac)2

白色∴ChP規(guī)定：本品0.5g+10mlH2O+2d稀醋酸+0.5mlPb(Ac)2

不得發(fā)生混濁，即為合格。例二、硝酸毛果蕓香堿中其他生物的檢查：后者+氨水+K2Cr2O7∴ChP規(guī)定：本品0.2g+20mlH2O兩份；I份+數(shù)滴氨試液；另

1份+數(shù)滴K2Cr2O7試液，均不得發(fā)生混濁。當前第90頁\共有122頁\編于星期五\8點雜質與一定試劑反應產生顏色例一、鹽酸普萘洛爾中游離α-萘酚檢查：利用后者可與重氮鹽發(fā)生重氮化-偶合反應，生成偶氮染料?！郈hP規(guī)定：供試品20mg+乙醇與10%NaOH液各2ml+重氮苯磺酸試液1ml,放置3min；如顯色，與0.3mlα-萘酚對照液（20μg/ml)比較不得更深。例二、碘他拉酸中氨基化合物的檢查：利用重氮化-偶合反應∴ChP規(guī)定：供試品2.5mg/ml經重氮化-偶合反應后，在波長

485nm測得A＜0.25當前第91頁\共有122頁\編于星期五\8點雜質與一定試劑反應產生氣體

ChP附錄中收載氰化物的兩種檢查方法：第一法：改進普魯士藍法原理：CN-+酒石酸HCN[Fe(CN)6]4-Fe4[Fe(CN)6]第二法：氣體擴散-三硝基苯酚鋰法原理：HCN擴散進入三硝基苯酚鋰試液，生成異紅紫酸鹽，在

500nm波長處測定吸收度?！鱂e2+Fe3+當前第92頁\共有122頁\編于星期五\8點藥物經有機破壞后檢查雜質某些環(huán)狀有機藥物在生產中可能引入磷、硫、鹵素及硒等雜質，這些雜質與有機分子中的碳原子以共價鍵結合，需進行有機破壞后檢查，各國藥典所采用的方法為氧瓶燃燒法。

當前第93頁\共有122頁\編于星期五\8點旋光法具有旋光活性的藥物，測定旋光度或比旋度來控制雜質限量。例如：硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：本品溶液(50mg/ml)α＜-0.4當前第94頁\共有122頁\編于星期五\8點分光光度法由于藥物和雜質的結構不同，對光吸收的性質就有差異，因此，利用雜質與藥物對光選擇性吸收的差異，檢查藥物所含雜質。一）紫外分光光度法二）比色法三）原子吸收分光光度法四）紅外分光光度法當前第95頁\共有122頁\編于星期五\8點一）紫外分光光度法原理：利用紫外分光光度法檢查雜質限量，通常是采用檢查雜質吸收度的方法。配制一定濃度的供試品溶液，選擇在藥品無吸收而雜質有吸收的波長處測定吸收度，規(guī)定測得得吸收度不得超過某一限制。當前第96頁\共有122頁\編于星期五\8點地蒽酚（二羥基蒽醌）λ432nm地蒽酚基本無吸收二羥基蒽醌最大吸收規(guī)定：0.01%的供試溶液在432nm處的A≤0.12當前第97頁\共有122頁\編于星期五\8點再如：苯丙醇中苯丙酮的檢查：可利用供試液的吸收度比來控制雜質;純品苯丙醇A247nm/A258nm=0.59;99.5%時A247nm/A258nm=0.79;

因此規(guī)定供試品A247nm/A258nm

＜0.79;即所含苯丙酮＜0.5%.當前第98頁\共有122頁\編于星期五\8點二）比色法原理：對照法目視比色分光光度計測定吸收度后進行比較當前第99頁\共有122頁\編于星期五\8點三）原子吸收分光光度法原理：是利用待測元素燈發(fā)出的特征譜線通過供試品蒸汽時，被蒸汽中待測元素的基態(tài)原子所吸收，通過測定輻射光強度減弱的程度可求出供試品中待測元素的含量。通常借比較標準品和供試品的吸收度，求得樣品中待測元素的含量。當前第100頁\共有122頁\編于星期五\8點儀器——原子吸收分光光度計。光源：待測元素作為陰極的空心陰極燈原子化器：霧化器和燃燒燈構成，作用是產生原子蒸汽單色器：檢測器：當前第101頁\共有122頁\編于星期五\8點特點：靈敏度高，專屬性強，主要用于金屬元素的測定。方法：取供試品按規(guī)定配制成供試液B；另取等量供試品，加入限量的待測元素溶液，制備成對照液A。先將A液噴入火焰，調節(jié)儀器使具有合適讀數(shù)a；在相同條件下，噴入供試液B，記錄讀數(shù)b。b相當于供試品溶液中待測元素的含量，a-b相對于對照溶液中加按限量加入的待測元素的量。當b<(a-b)時，表示供試品中所含雜質元素符合規(guī)定，當b>（a-b）時，表示供試品中所含雜質元素超過限量，為不合格。當前第102頁\共有122頁\編于星期五\8點限量檢查時：對照品液=供試品+限量-----a

供試品液=------------------b

符合規(guī)定時b＜(a-b);b＞(a-b)不合格。當前第103頁\共有122頁\編于星期五\8點例：肝素鈉中檢查鉀鹽：取本品0.10g，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋置刻度，搖勻，即為供試品溶液B；另取標準氯化鉀溶液5ml，置50ml量瓶中，加B溶液稀釋至刻度線，搖勻，作為對照液A。在766.5nm波長處測定a和b，如果b<(a-b)則肝素鈉中鉀鹽含量合格。供試液供試液+標準KCl原子吸收λ766.5nm測定ba則應b<a-b當前第104頁\共有122頁\編于星期五\8點四）紅外分光光度法原理：某些多晶型藥物由于晶型不同，某些化學鍵的鍵長、鍵角發(fā)生不同程度的變化，可導致紅外吸收光譜中某些特征帶頻率，峰形和強度出現(xiàn)顯著差異。當前第105頁\共有122頁\編于星期五\8點特點：主要用于藥物中無效或低效晶型檢查。例：無味氯霉素混懸劑中A晶型的檢查、甲苯咪唑中A晶型檢查當前第106頁\共有122頁\編于星期五\8點

A晶型C晶型在640cm-1有強吸收吸收很弱在662cm-1吸收很弱有強吸收

662cm-1640cm-1662cm-1640cm-1

對照品+10%A晶型D2D1

供試品D2D1＜10%R=D1/D2

＞R’=D’1/D’2甲苯咪唑中A晶型檢查當前第107頁\共有122頁\編于星期五\8點色譜法色譜法可以利用藥物與雜質的吸附或分配性質的差異，將它們分離、檢測，因而廣泛應用于藥物的雜質檢查中。色譜法檢查特殊雜質的方法有：紙色譜法、薄層色譜法，高效液相色譜法，氣相色譜法。當前第108頁\共有122頁\編于星期五\8點一）紙色譜法（紙層析法，PC)

常用于極性大的藥物的分離、分析，如地高辛中的有關雜質的檢查。當前第109頁\共有122頁\編于星期五\8點方法：取一定量的供試品溶液及雜質限量對照液，于同一色譜濾紙上點樣，展開，處理后比較雜質斑點的個數(shù)、顏色或熒光強度等，從而判斷供試品中所含雜質是否符合限量規(guī)定。當前第110頁\共有122頁\編于星期五\8點例：地高辛中檢查洋地黃毒苷分別點加供試品溶液及洋地黃毒苷對照品溶液于同一色譜濾紙上，以新制的甲酰胺飽和的二甲苯-丁酮溶液上行展開，120℃烘干、放冷、噴新配制的三氯醋酸-氯仿溶液，再于100℃烘干后，在365nm紫外燈光下檢視，供試品溶液所顯斑點的熒光強度與對照液的斑點比較，不得更強。特點：紙色譜展開時間長，斑點較為擴散，應用不如TLC廣泛。當前第111頁\共有122頁\編于星期五\8點二）薄層色譜法在特殊雜質檢查中應用很多，具有靈敏（ug）、簡便、快速、不需特殊設備的優(yōu)點。當前第112頁\共有122頁\編于星期五\8點1.在一定供試品和檢測條件下，不允許有雜質色斑，是利用顯色劑對雜質的最小檢出量控制其限量。（需要顯示劑，不需要對照）例：馬來酸噻嗎洛爾中檢查有關雜質取本品，加甲醇制成每ml含25mg的溶液，吸取上液5μl