第九章吸光度法

第九章吸光度法第一頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四

基于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收而建立起來的分析方法稱為吸光光度法,主要有:紅外吸收光譜：分子振動(dòng)光譜，吸收光波長(zhǎng)范圍2.51000m,主要用于有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)鑒定。

紫外吸收光譜：電子躍遷光譜，吸收光波長(zhǎng)范圍200400nm（近紫外區(qū)），可用于結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析。

可見吸收光譜：電子躍遷光譜，吸收光波長(zhǎng)范圍400750nm，主要用于有色物質(zhì)的定量分析。

本章主要講授可見吸光光度法。什么叫吸光光度法?第二頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四靈敏度高準(zhǔn)確度能夠滿足微量組分的測(cè)定要求：相對(duì)誤差2～5％操作簡(jiǎn)便快速應(yīng)用廣泛特點(diǎn)如何進(jìn)行測(cè)定?可以直接測(cè)什么物質(zhì)?第三頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四§9.1吸光光度法的基本原理9.1.1物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收溶液的顏色由透射光波長(zhǎng)還是由入射光波長(zhǎng)決定?第四頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四/nm顏色互補(bǔ)光400-450紫黃綠450-480藍(lán)黃480-490綠藍(lán)橙490-500藍(lán)綠紅500-560綠紅紫560-580黃綠紫580-600黃藍(lán)600-650橙綠藍(lán)650-780紅藍(lán)綠不同顏色的可見光波長(zhǎng)及其互補(bǔ)光第五頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四吸收光譜物質(zhì)的電子結(jié)構(gòu)不同，具有不同的量子化能級(jí),其能量差也不同,吸收光的波長(zhǎng)也不同，這就構(gòu)成了物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收基礎(chǔ).物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收hM+M*第六頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四吸收光譜300400500600700/nm3501.00.60.2525545Cr2O72-MnO4-350A第七頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四定性分析基礎(chǔ)定量分析基礎(chǔ)物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，A與c成正比。ABAAC增大第八頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.1.2光的吸收基本定律:朗伯-比爾定律A=lg(1/T)=

-lgT=lg(I0/I)=abcb—cmc—g·L-1a—L·g-1·cm-1T—透光度全部吸收T=0.0%全部透射T=100.0%第九頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四影響的因素入射光波長(zhǎng)物質(zhì)的性質(zhì)溶劑和溫度

>5×104為高靈敏度;越大,方法靈敏度越高:

<104為低靈敏度.

>105為超高靈敏度;L·mol-1·cm-1當(dāng)c的單位用mol·L-1表示時(shí)，用表示.=Ma

－摩爾吸收系數(shù)，

A＝bc

第十頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四例：鄰二氮菲分光光度法測(cè)Fe2+。

(Fe2+)=5.0×10-4g·L-1,b=2cm,在波長(zhǎng)508nm處測(cè)得A=0.19，計(jì)算a和。解：=Ma=55.85×190=1.1×104L·mol-1·cm-1p243第十一頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四吸光度的加合性

A=A1+A2+…+An

=1bc1+2bc2+…+nbcn第十二頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.1.3偏離比爾定律的原因AC正偏離負(fù)偏離01234c(mg/mL)A。。。。0.80.60.40.20A＝bc工作曲線法(標(biāo)準(zhǔn)曲線)單色光：具有單一波長(zhǎng)的光。復(fù)合光：具有不同波長(zhǎng)的光復(fù)合在一起。第十三頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四非單色光引起的偏離設(shè)入射光僅由1

和2

兩種波長(zhǎng)組成，兩波長(zhǎng)下比爾定律都是適用的：1+2：

1：

2：

A與c不成直線關(guān)系。第十四頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四1對(duì)應(yīng)的1較小2對(duì)應(yīng)的2較大A或21第十五頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四化學(xué)因素引起的偏離●

吸光質(zhì)點(diǎn)間相互作用引起的偏離.●

吸光質(zhì)點(diǎn)形式變化引起的偏離.例：Cr2O72-+H2O2H++2CrO42-（橙色）（黃色）

第十六頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四§9.2光度計(jì)及其基本部件單波長(zhǎng)單光束分光光度計(jì)檢測(cè)系統(tǒng)0.575光源單色器吸收池第十七頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四第十八頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四第十九頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四分光光度計(jì)的主要部件光源：發(fā)出所需波長(zhǎng)范圍內(nèi)的連續(xù)光譜，有足夠的光強(qiáng)度,穩(wěn)定?？梢姽鈪^(qū)：鎢燈，碘鎢燈(320～2500nm)紫外區(qū)：氫燈，氘燈(180～375nm)單色器：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置。棱鏡:玻璃350～3200nm,石英185～4000nm

光柵:波長(zhǎng)范圍寬,色散均勻,分辨性能好,使用方便第二十頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四棱鏡：依據(jù)不同波長(zhǎng)光通過棱鏡時(shí)折射率不同入射狹縫準(zhǔn)直透鏡棱鏡聚焦透鏡出射狹縫白光紅紫λ1λ2800600500400第二十一頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四吸收池：(比色皿)用于盛待測(cè)及參比溶液。 可見光區(qū)：光學(xué)玻璃池 紫外區(qū)：石英池檢測(cè)系統(tǒng)：利用光電效應(yīng)，將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換成電流訊號(hào)。

檢測(cè)器：光電池，光電管，光電倍增管顯示器：低檔儀器：刻度顯示中高檔儀器：數(shù)字顯示，自動(dòng)掃描記錄第二十二頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四作業(yè)P268習(xí)題:1,2,3，4,5,6第二十三頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.3.1顯色反應(yīng)的選擇*反應(yīng)生成的有色化合物組成恒定，穩(wěn)定。§9.3顯色反應(yīng)與顯色條件的選擇例：分光光度法測(cè)Cu2+用銅氨配合物測(cè)Cu2+，

=1.2102L·mol-1·cm-1雙硫腙法測(cè)Cu2+，

=5.0104L·mol-1·cm-1*靈敏度高，一般>104*選擇性好*顯色劑在測(cè)定波長(zhǎng)處無明顯吸收。對(duì)比度：λmax>60nm第二十四頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.3.2顯色條件的選擇c(R)c(R)1.顯色劑用量（cM、pH等條件固定）Mo(SCN)32+淺紅Mo(SCN)5橙紅Mo(SCN)6-淺紅M+R

MR第二十五頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四副反應(yīng)M+nR=MRnOH-H+型體的變化RH=R-+H+

12生成不同配比的配合物例：磺基水楊酸–Fe3+pH=2~3FeR紫紅色pH=4~7FeR2橙色pH=8~10FeR3黃色2.酸度（cM、cR等條件固定）酸度的影響第二十六頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四pH1<pH<pH2pH酸度的選擇第二十七頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四3.顯色溫度實(shí)際工作中，作A~T曲線，尋找適宜反應(yīng)溫度.ATATATAT第二十八頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四4.顯色時(shí)間T1(℃)T2(℃)t(min)A實(shí)際工作中，作A~t曲線，尋找適宜反應(yīng)時(shí)間.t(min)A第二十九頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四5.干擾的消除Co2＋,Fe3+Co2+FeF63-Co(SCN)2(藍(lán))NaFSCN－例：測(cè)Co2＋(含F(xiàn)e3+)1)加入配位掩蔽劑或氧化還原掩蔽劑。第三十頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四例：測(cè)Fe3＋

(控制pH)Fe3+,Cu2+FeSSal（紫紅）Cu2+pH2.5SSal2)選擇適當(dāng)?shù)娘@色條件以避免干擾。3)分離干擾離子也可選擇適當(dāng)?shù)墓舛葴y(cè)量條件（例如適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)或參比溶液），消除干擾。4)第三十一頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.3.3顯色劑無機(jī)顯色劑:

SCN-

[Fe(SCN)]2+H2O2

[TiO·H2O2]2+：：：：助色團(tuán):－NH2，－OH，－X（含孤對(duì)電子）O生色團(tuán)：－N＝N－，－N＝O，OC=S,－N有機(jī)顯色劑:第三十二頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四有機(jī)顯色劑NNNOH

OHON型：PAR[4-（2-吡啶偶氮）-間苯二酚]OHCOOHSO3HOO型：磺基水楊酸NNNN型：鄰二氮菲S型：雙硫腙NHNHNCN=S第三十三頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四三元配合物在光度分析中的應(yīng)用特性簡(jiǎn)介由一個(gè)中心金屬離子與兩種(或兩種以上)不同配位體形成的配合物，稱為三元(多元)配合物。三元配合物主要類型有：三元離子締合物、三元混配配合物、三元膠束(增溶)配合物。應(yīng)用特點(diǎn)?CH3－C－C－CH3HO－NN－OH==丁二酮肟第三十四頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四§9.4吸光度測(cè)量條件的選擇9.4.1入射光波長(zhǎng)的選擇一般選擇max為測(cè)定波長(zhǎng),為什么?如果在max處有共存組分的干擾，如何選擇測(cè)定波長(zhǎng)?AA第三十五頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.4.2參比溶液的選擇

用參比溶液調(diào)T=100%（A=0），再測(cè)樣品溶液的A，即消除了吸收池對(duì)光的吸收、反射，溶劑、試劑對(duì)光的吸收等。為什么要使用參比溶液？

如何選擇參比溶液?

p257第三十六頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.4.3吸光度讀數(shù)范圍的選擇光度計(jì)的讀數(shù)誤差一般為0.2～2％(ΔT)，由于T與濃度c不是線性關(guān)系，故不同濃度時(shí)的ΔT引起的濃度誤差不同。100806040200T%

c1

c2

c3

T

T

T-透光率讀數(shù)誤差

cc1c1c2c2c3c3><為什么要控制適宜的吸光度（讀數(shù)范圍）?第三十七頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四

－lgT=εbc微分：－dlgT＝－0.434dlnT=-0.434T-1dT=εbdc兩式相除得：

dc/c=（0.434/TlgT）dT

以有限值表示可得：

Δc/c=（0.434/TlgT）ΔT

討論:濃度測(cè)量相對(duì)誤差大?。é/c）與什么因素有關(guān)?若ΔT=1%,透光率讀數(shù)范圍是多少時(shí),濃度測(cè)量相對(duì)誤差較小?第三十八頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四1086420204060800.70.40.20.1AT%Er(36.8)0.434實(shí)際工作中，應(yīng)控制T在10～70％,

A在0.15～1.0之間(調(diào)c,b)第三十九頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四§9.5吸光光度法的應(yīng)用1.單組分的測(cè)定p258

通常采用A-C標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測(cè)定。2.多組分的同時(shí)測(cè)定p260

⑴若各組分的吸收曲線互不重疊，則可在各自最大吸收波長(zhǎng)處分別進(jìn)行測(cè)定。這本質(zhì)上與單組分測(cè)定沒有區(qū)別。⑵若各組分的吸收曲線互有重疊，則可根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。

Aλ1=εaλ1bca＋εbλ1bcb

Aλ2=εaλ2bca＋εbλ2bcb

第四十頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.5.2高含量組分的測(cè)定--示差法

普通分光光度法一般只適于測(cè)定微量組分，當(dāng)待測(cè)組分含量較高時(shí)，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍低于待測(cè)溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。設(shè)：待測(cè)溶液濃度為cx，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為cs(cs<cx)。則：Ax=εbcxAs=εbcsΔＡ＝Ａx－Ａs=εb(cx－cs）=εbΔc測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差ΔＡ。第四十一頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四

ΔＡ＝Ａx－Ａs=εb(cx－cs）=εbΔc測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差ΔＡ。示差法測(cè)得的吸光度與Δc呈直線關(guān)系。由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的Δc值，則待測(cè)溶液濃度cx：cx=cs+Δc第四十二頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四普通法：cs的T=10%；cx的T=5%示差法：cs做參比，調(diào)T=100%cx的T=50%；標(biāo)尺擴(kuò)展10倍第四十三頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.5.3酸堿解離常數(shù)的測(cè)定一元弱酸HB

HB==H++B-在某一波長(zhǎng)下，酸HB和堿B-均有吸收，液層厚度b=1cm，根據(jù)吸光度的加和性；A=AHB+AB-

第四十四頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.5.4絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定摩爾比法:M+nLMLn固定CM，改變CL，以吸光度A為縱坐標(biāo)，CL/CM為橫坐標(biāo)作圖。

配合比=?第四十五頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四穩(wěn)定常數(shù)：若形成1:1的配合物cM=[M]+[ML]cL=[L]+[ML]若金屬離子和配位劑在測(cè)定波長(zhǎng)沒有吸收，則A=[ML](b=1cm)A0=[ML]=CM

==CLA0A/(CM-[ML])(CL-[ML])K穩(wěn)==A(CM-A)(CL-A)ACM(-A)(A0-A)A0=CM

第四十六頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四

不需空白溶液作參比；但需要兩個(gè)單色器獲得兩束單色光(λ1和λ2)；以參比波長(zhǎng)λ1處的吸光度Aλ1作為參比，來消除干擾。在分析渾濁或背景吸收較大的復(fù)雜試樣時(shí)顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、測(cè)量精密度等方面都比單波長(zhǎng)法有所提高。ΔＡ＝Aλ2－Aλ1＝（ελ2－ελ1)bc兩波長(zhǎng)處測(cè)得的吸光度差值ΔＡ與待測(cè)組分濃度成正比。ελ1和ελ2分別表示待測(cè)組分在λ1和λ2處的摩爾吸光系數(shù)。

9.5.4雙波長(zhǎng)分光光度法第四十七頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四關(guān)鍵問題:關(guān)鍵問題是測(cè)量波長(zhǎng)λ2和參比波長(zhǎng)λ1的選擇與組合。以兩組分x和y的雙波長(zhǎng)法測(cè)定為例：設(shè)：x為待測(cè)組分，y為干擾組分，二者的吸光度差分別為ΔＡx和ΔＡy，則該體系的總吸光度差ΔＡx+y為：

ΔＡx+y=ΔＡx+ΔＡy如何選擇波長(zhǎng)λ1、λ2有一定的要求。第四十八頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四選擇波長(zhǎng)組合λ1、λ2的基本要求是：

⑴選定的波長(zhǎng)λ1和λ2處干擾組分應(yīng)具有相同吸光度，即：ΔAy=ΔＡyλ2－ΔＡyλ1=0故：

ΔＡx+y=ΔＡx=(εxλ2－εxλ1)bcx此時(shí)：測(cè)得的吸光度差ΔＡ只與待測(cè)組分x的濃度呈線性關(guān)系，而與干擾組分y無關(guān)。若x為干擾組分，則也可用同樣的方法測(cè)定y組分。

可采用作圖法選擇符合上述兩個(gè)條件的波長(zhǎng)組合。⑵在選定的兩個(gè)波長(zhǎng)λ1和λ2處待測(cè)組分的吸光度應(yīng)具有足夠大的差值。第四十九頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.3.1顯色反應(yīng)的選擇*反應(yīng)生成的有色化合物組成恒定，穩(wěn)定?！?.3顯色反應(yīng)與顯色條件的選擇例：分光光度法測(cè)Cu2+用銅氨配合物測(cè)Cu2+，

=1.2102L·mol-1·cm-1雙硫腙法測(cè)Cu2+，

=5.0104L·mol-1·cm-1*靈敏度高，一般>104*選擇性好*顯色劑在測(cè)定波長(zhǎng)處無明顯吸收。對(duì)比度：λmax>60nm第五十頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.3.2顯色條件的選擇c(R)c(R)1.顯色劑用量（cM、pH等條件固定）Mo(SCN)32+淺紅Mo(SCN)5橙紅Mo(SCN)6-淺紅M+R

MR第五十一頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四副反應(yīng)M+nR=MRnOH-H+型體的變化RH=R-+H+

12生成不同配比的配合物例：磺基水楊酸–Fe3+pH=2~3FeR紫紅色pH=4~7FeR2橙色pH=8~10FeR3黃色2.酸度（cM、cR等條件固定）酸度的影響第五十二頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四pH1<pH<pH2pH酸度的選擇第五十三頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四3.顯色溫度實(shí)際工作中，作A~T曲線，尋找適宜反應(yīng)溫度.ATATATAT第五十四頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四4.顯色時(shí)間T1(℃)T2(℃)t(min)A實(shí)際工作中，作A~t曲線，尋找適宜反應(yīng)時(shí)間.t(min)A第五十五頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四5.干擾的消除Co2＋,Fe3+Co2+FeF63-Co(SCN)2(藍(lán))NaFSCN－例：測(cè)Co2＋(含F(xiàn)e3+)1)加入配位掩蔽劑或氧化還原掩蔽劑。第五十六頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四例：測(cè)Fe3＋

(控制pH)Fe3+,Cu2+FeSSal（紫紅）Cu2+pH2.5SSal2)選擇適當(dāng)?shù)娘@色條件以避免干擾。3)分離干擾離子也可選擇適當(dāng)?shù)墓舛葴y(cè)量條件（例如適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)或參比溶液），消除干擾。4)第五十七頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.3.3顯色劑無機(jī)顯色劑:

SCN-

[Fe(SCN)]2+H2O2

[TiO·H2O2]2+：：：：助色團(tuán):－NH2，－OH，－X（含孤對(duì)電子）O生色團(tuán)：－N＝N－，－N＝O，OC=S,－N有機(jī)顯色劑:第五十八頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四有機(jī)顯色劑NNNOH

OHON型：PAR[4-（2-吡啶偶氮）-間苯二酚]OHCOOHSO3HOO型：磺基水楊酸NNNN型：鄰二氮菲S型：雙硫腙NHNHNCN=S第五十九頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四三元配合物在光度分析中的應(yīng)用特性簡(jiǎn)介由一個(gè)中心金屬離子與兩種(或兩種以上)不同配位體形成的配合物，稱為三元(多元)配合物。三元配合物主要類型有：三元離子締合物、三元混配配合物、三元膠束(增溶)配合物。應(yīng)用特點(diǎn)?CH3－C－C－CH3HO－NN－OH==丁二酮肟第六十頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四§9.4吸光度測(cè)量條件的選擇9.4.1入射光波長(zhǎng)的選擇一般選擇max為測(cè)定波長(zhǎng),為什么?如果在max處有共存組分的干擾，如何選擇測(cè)定波長(zhǎng)?AA第六十一頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.4.2參比溶液的選擇

用參比溶液調(diào)T=100%（A=0），再測(cè)樣品溶液的A，即消除了吸收池對(duì)光的吸收、反射，溶劑、試劑對(duì)光的吸收等。為什么要使用參比溶液？

如何選擇參比溶液?

p257第六十二頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.4.3吸光度讀數(shù)范圍的選擇光度計(jì)的讀數(shù)誤差一般為0.2～2％(ΔT)，由于T與濃度c不是線性關(guān)系，故不同濃度時(shí)的ΔT引起的濃度誤差不同。100806040200T%

c1

c2

c3

T

T

T-透光率讀數(shù)誤差

cc1c1c2c2c3c3><為什么要控制適宜的吸光度（讀數(shù)范圍）?第六十三頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四

－lgT=εbc微分：－dlgT＝－0.434dlnT=-0.434T-1dT=εbdc兩式相除得：

dc/c=（0.434/TlgT）dT

以有限值表示可得：

Δc/c=（0.434/TlgT）ΔT

討論:濃度測(cè)量相對(duì)誤差大?。é/c）與什么因素有關(guān)?若ΔT=1%,透光率讀數(shù)范圍是多少時(shí),濃度測(cè)量相對(duì)誤差較小?第六十四頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四1086420204060800.70.40.20.1AT%Er(36.8)0.434實(shí)際工作中，應(yīng)控制T在10～70％,

A在0.15～1.0之間(調(diào)c,b)第六十五頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四§9.5吸光光度法的應(yīng)用1.單組分的測(cè)定p258

通常采用A-C標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測(cè)定。2.多組分的同時(shí)測(cè)定p260

⑴若各組分的吸收曲線互不重疊，則可在各自最大吸收波長(zhǎng)處分別進(jìn)行測(cè)定。這本質(zhì)上與單組分測(cè)定沒有區(qū)別。⑵若各組分的吸收曲線互有重疊，則可根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。

Aλ1=εaλ1bca＋εbλ1bcb

Aλ2=εaλ2bca＋εbλ2bcb

第六十六頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.5.2高含量組分的測(cè)定--示差法

普通分光光度法一般只適于測(cè)定微量組分，當(dāng)待測(cè)組分含量較高時(shí)，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍低于待測(cè)溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。設(shè)：待測(cè)溶液濃度為cx，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為cs(cs<cx)。則：Ax=εbcxAs=εbcsΔＡ＝Ａx－Ａs=εb(cx－cs）=εbΔc測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差ΔＡ。第六十七頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四

ΔＡ＝Ａx－Ａs=εb(cx－cs）=εbΔc測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差ΔＡ。示差法測(cè)得的吸光度與Δc呈直線關(guān)系。由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的Δc值，則待測(cè)溶液濃度cx：cx=cs+Δc第六十八頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四普通法：cs的T=10%；cx的T=5%示差法：cs做參比，調(diào)T=100%cx的T=50%；標(biāo)尺擴(kuò)展10倍第六十九頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.5.3酸堿解離常數(shù)的測(cè)定一元弱酸HB

HB==H++B-在某一波長(zhǎng)下，酸HB和堿B-均有吸收，液層厚度b=1cm，根據(jù)吸光度的加和性；A=AHB+AB-

第七十頁(yè)，共七十六頁(yè)，編輯于2023年，星期四9.5.4絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定摩