潔凈室(區(qū))浮游菌測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

如有幫助，歡迎下載支持！1.目的建立一個潔凈（區(qū)浮游菌測定的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程確保潔凈（區(qū)）潔凈程度。2.范圍：適用于潔凈室和潔凈區(qū)、無菌室或局部空氣凈化區(qū)域（包括潔凈工作臺）游菌的測定和環(huán)驗證。3.責(zé)任：質(zhì)量管理部QA監(jiān)測員對本規(guī)程的實施負(fù)責(zé)。4.程序：4.1.術(shù)語和定義：下列術(shù)語和定義適用于準(zhǔn)操作規(guī)程。4.1.1.菌落微生物培由一個或幾個微生物繁殖而形微生物集落，簡稱CFU。通常用個數(shù)表示。4.1.2.浮游菌用本標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)及的方法收集懸浮氣中的活微生物粒子，通過專門的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。4.1.3.浮游菌濃度單位體積空氣中含浮游菌的多少數(shù)度表示，單位是個/3或個/。4.1.4.糾偏限度：對于受控的潔凈室（區(qū)，由使用者自行設(shè)定微生物含量等即進(jìn)行跟蹤。4.1.5.警戒限度：對于受控制的潔凈室（區(qū)，由使用者自行設(shè)定一個微生物戒的偏差值時，應(yīng)證工藝或環(huán)境不受影響的程序及相關(guān)措。4.2.測試方法4..方法提要本操作規(guī)用的方法是計數(shù)濃即通過收集懸游1如有幫助，歡迎下載支持！在空氣生物性粒子于專培養(yǎng)（選擇能實其能夠支持微生物長的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時間和適宜的生長條件讓其繁殖到可見的菌落計數(shù)，以判定該潔凈室的物濃度。4.2.2.人員的職責(zé)及培訓(xùn)潔凈的測試人員應(yīng)進(jìn)行本專業(yè)的培訓(xùn)獲和基本微生物知識。的穿戴方式。4.23.儀器、輔助設(shè)備和培養(yǎng)基大的采樣流量，以保證培養(yǎng)基表不被吹干。本測試需要具、輔助設(shè)備和培養(yǎng)基如下：浮游菌采樣器、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基（見本標(biāo)準(zhǔn)附錄B、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器。4.2.4.浮游菌采樣器原理式采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉(zhuǎn)的平板表面上附著的活微生物粒子經(jīng)培入專氣2如有幫助，歡迎下載支持！將收集到得細(xì)小的空氣流直接撞擊到平板培養(yǎng)表面上附著的活微生物粒培養(yǎng)后形成菌落。本標(biāo)準(zhǔn)操作中使用的菌采樣器為狹縫式采樣。4.2..測試要點4..必須按照測器的檢定周期，對儀器定，使用校驗合，且在使用有效期內(nèi)的儀器。4....的潔凈室內(nèi)和存放（用保護(hù)其他適地外罩保護(hù)儀器。4.2.5..在A級潔室內(nèi)用紙時上面應(yīng)蒙上一張透明不沾塵的覆蓋物在A級潔凈室內(nèi)不能用鉛筆和橡皮。4.5.使用測試儀器時格按照儀器說明書操。4.2.5.4.1.儀器開機，預(yù)熱至穩(wěn)定后，方可按儀器說明書的規(guī)定對儀器進(jìn)行校正，同時檢查采，并根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時間。4.2.5.4.2.采樣口用便于消毒及化學(xué)性能的材料制造。4.2.5.4.3.采樣嚴(yán)禁滲漏，內(nèi)壁滑。4.2.5.4.4.采樣管度應(yīng)根據(jù)測點的高度定量減少彎曲。4.2..培養(yǎng)皿4.2.6.1.一般采用∮90m×15mm規(guī)格的培養(yǎng)皿。可根據(jù)所選用采樣器選擇合適的培養(yǎng)皿。在本標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程中采用150m×15mm規(guī)格的培養(yǎng)皿3如有幫助，歡迎下載支持！4.2.6.2.離心式采樣器采用專用的固形培養(yǎng)條。4.2.7.培養(yǎng)基：大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TS）或沙氏培養(yǎng)基(SDA)或其他用戶認(rèn)可并經(jīng)驗證了的培養(yǎng)基。其配制方法見附錄B。4...恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行校驗。4...測試步驟4..測試前儀器、養(yǎng)皿表面嚴(yán)毒。4.2.9.1.1.采樣器進(jìn)入被測房消毒房間的消毒劑滅菌，用于A級潔凈室的采樣宜預(yù)先放在被測房。4.2.9.1.2.用消劑擦凈培養(yǎng)皿的面。4.2.9.1.3.采樣前，先用消毒劑清洗采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。4.2.9.1.4.采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。4.2.9.1.5.采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒手套操作。4.2.9.1.6.采樣儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開啟浮游菌采樣器，使儀器中于n間。4.2.9.1.7.關(guān)閉浮游菌采樣器，放入培養(yǎng)皿，蓋。4.2.9.1.8.置采樣采樣點后，開啟浮游菌器進(jìn)行采樣。..培養(yǎng)4如有幫助，歡迎下載支持！4.2.10.1.樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。4.2..采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)（配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在30℃~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于2d；采用沙氏培養(yǎng)基(SDA)配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在20℃~2℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于5d。4.0..每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗檢驗培身是否污染可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。.計數(shù)421..用肉眼對培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計數(shù)、標(biāo)記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用5~10倍的放大鏡檢查，有否遺漏。41.若平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。4.2.12.注意事項4.2.12.1.使用前應(yīng)仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。4..2.對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)錄。4.2.12.3.由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面基沉淀物別，必要時用顯鑒別。4.3.測試規(guī)則4..這類測試將會提供浮粒子的環(huán)境條件，例如：這種預(yù)先測包括：5如有幫助，歡迎下載支持！4.3.1.1.產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)（無特殊要度在18℃6℃，相對濕度在455％為宜，同時應(yīng)滿足測試儀器的使用范圍;4.室內(nèi)送風(fēng)量或風(fēng)速試，差的測試；4.3.1.3.高效過濾的泄露測試。4.3.2.測試狀態(tài)靜態(tài)和動態(tài)兩種狀態(tài)均可進(jìn)行測試靜態(tài)測試員于2消毒。測試報告中測試時采用的狀內(nèi)測試人員數(shù)。4.3.3.測試時間4..在空態(tài)或態(tài)a化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運時間不少于1n后開始。對非單向流潔凈室（區(qū)，測試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于30min后開始。在靜態(tài)b測試時，對單向流潔凈室（區(qū)，測試宜產(chǎn)操作人員撤并經(jīng)過10min開始；對非單項流潔凈室（區(qū)，測生產(chǎn)操作人現(xiàn)在并經(jīng)過20min自凈后開始。4.33.2.在動態(tài)測試時，則須記產(chǎn)開始的時間以試時間。4.3.4.浮游菌濃度計數(shù)4..采樣點數(shù)量及其布置4.3.4.1.1.最少采樣點數(shù)目：浮游菌測試的最少采樣點數(shù)目照4.3.4.1.2.采樣點的位置：6如有幫助，歡迎下載支持！浮游菌的采樣點位置可參照。地左右（略高于工作面；4.3.4.1.2.2.送風(fēng)口測點位置離開送風(fēng)面20cm左右；4.3.4.1.2.3.可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點。采樣點布置的規(guī)則見附錄A。4.3.4.2最小采樣量：小采樣量見表1表1最小采樣量潔凈度級別 采樣量L/次A級 10B級 100C級 500D級 1004.3..4.3.采樣次數(shù)：每個采樣點一般采樣一次。4..4.采樣注意項4.3.4.4.1.對于單向流潔凈室（區(qū)）或送風(fēng)口，采樣器采樣口朝向應(yīng)正對氣流方向;對于非單向流潔凈室（區(qū)，采樣口向上。4.3.4.4.2.布置采樣至少應(yīng)盡量避開塵粒較集中的回風(fēng)口。4.3.4.4.3.采樣時試人員應(yīng)站在采樣口的側(cè)，并盡量少走動。4.3.4.4.4.應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。4.3.4.4.5.培養(yǎng)皿在用于檢測時，為避免培養(yǎng)皿運輸或搬動過程造成的影響，取1但7如有幫助，歡迎下載支持?。═SA或SDA內(nèi)培養(yǎng)，結(jié)果應(yīng)落生長。4.3.5.記錄：測試報告應(yīng)包含以下內(nèi)容：4...測試者的名地址，測試日期；4.3.5.2.測試依據(jù)；4.被測潔凈區(qū)）的平面（必時標(biāo)注相鄰區(qū)平面位置；4.3.5.4.目的設(shè)備和數(shù)量和位置；4..5.5.測試結(jié)果；包括統(tǒng)算資料。4.3.6.計算結(jié)果4..用計數(shù)方法各個培養(yǎng)皿的菌。4.3.6.2.每個測點的浮游菌濃度的計算，（1。浮游菌平均濃度（個/m3）=

菌落數(shù) ……………(1)采樣量3024060100東部60103024060100東部60100東部浮游菌平均濃度（個/m3）=80

10.4

=2.5個/m3例2：某測點采樣量為2m3，菌落數(shù)為3，則：浮游菌平均濃度（個/m3）=80

西部北部=1.5個/m3240004.37.結(jié)果評定：每個測點的浮游菌平均濃度必須低于所選評定標(biāo)準(zhǔn)中的界1第一季度 第三季度40002080限。評定標(biāo)準(zhǔn)見表2。208000東部度 三季度西部6第一季表00東部度 三季度西部40 北部20 80第一季度 第三季度0如有幫助，歡迎下載支持！項目 A級 B級 C級 D級合格限值 1 10 100 200浮游菌 糾偏限值 0.75 7.5 75 1503警戒限值 0.5 5 50 100合格限值 1 5 50 100沉降菌（∮90m）糾偏限值 0.75 3.5 35 75h警戒限值 0.5 2.5 25 50表面微生物 合格限值 1 5 25 50（∮55) 糾偏限值 0.75 3.5 18 40 警戒限值 0.5 2.5 12 255．變更歷史版本號 生效日期 變更原因、依據(jù)及詳細(xì)變更內(nèi)容01 年月日 2010版GMP附錄 A潔凈室（區(qū)）采樣點布置A1潔凈室（區(qū)）采樣點布置宜力求均勻，避免采樣點在某局部區(qū)域過于稀疏。下列采多點采樣的采樣布置圖示可作參考（見圖A1。·· ··9如有幫助，歡迎下載支持！注：·為采樣點。 圖A1平面采樣點布置圖A2A級單向流區(qū)域潔凈工作臺或局氣凈化設(shè)施的采樣點宜布置對氣流方向作面上，氣流形式可參考圖A2、A3圖A2 水平單向流的氣流形式圖A3 垂直單向流的氣流形式最少采樣點數(shù)參見４.6.1.1.，采樣點一般在工作臺面上0.2m高度的平面上均勻布置。附錄B（規(guī)范性附錄）培養(yǎng)基菌及準(zhǔn)備1 大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（A）培養(yǎng)基的滅菌及準(zhǔn)備B1.1 培養(yǎng)基采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基，可以按以下處方制備，也可使用按該處方生產(chǎn)的符合要求的脫水培養(yǎng)基配制后按培養(yǎng)基規(guī)定的經(jīng)驗證合格的滅菌程序滅菌。10如有幫助，歡迎下載支持！B.1.2 大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基配方酪蛋白胰酶消化物……………………15g大豆粉木瓜蛋白酶消化物…………………5g氯化鈉………5g瓊脂…………15g純化水……………1000ml取上述成分除瓊脂微熱溶解調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.30.2，約60約）l至無菌平皿90m1）中。加蓋后在室溫放至凝固。）B.2 沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）培養(yǎng)基的菌及準(zhǔn)備葡萄糖………40g酪蛋白胰酶消化物、動物組織化物等量混合……………10g瓊脂……………15g純化水……………1000ml取上述成