體液中的電解質(zhì)

關(guān)于體液中的電解質(zhì)第1頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三概論體液中的離子稱為電解質(zhì)，它們都有維持滲透壓，調(diào)節(jié)酸堿平衡的作用，包括陽離子，如鉀、鈉、鈣、鎂，主要陰離子有氯離子、碳酸氫根離子、磷酸根離子、硫酸根離子，除了這兩種離子，還有一種是有機離子如乳酸和蛋白質(zhì)。體液中電解質(zhì)分布見表1第2頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三第3頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三血漿中的主要電解質(zhì)有Na+、k+、Cl—，細(xì)胞間液通過細(xì)胞膜的過濾，電解質(zhì)成分與血漿類似，不同的是血漿的蛋白質(zhì)多，細(xì)胞間液蛋白質(zhì)少。細(xì)胞外液主要是Na+、Cl—，k+主要分布于細(xì)胞內(nèi)液。按照Donnan平衡學(xué)說，提液中德陽離子與陰離子的總數(shù)相等，并保持平衡的電中性。體液中的電解質(zhì)在體內(nèi)不停地交換，交換的力量是滲透壓，他們的交換依靠體液調(diào)節(jié)和神經(jīng)調(diào)節(jié)。鈣、磷、鎂是人體重要的組成物質(zhì)，它們的濃度依賴腸道的吸收、骨質(zhì)的沉積和吸收、腎臟排泌所調(diào)節(jié)。雪漿中鈣、磷濃度(mg/dl)的乘積在36~40之間。見表2第4頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三表2、血漿中鈣、磷、鎂在體內(nèi)的分布第5頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三幾個相關(guān)的概念：

1.AG(aniongap,陰離子間隙，指細(xì)胞外液的陽離子總數(shù)和陰離子總數(shù)的差值。AG=Na++k+-(Cl—+HCO3—)。AG對于酸堿平衡的判斷有非常重要的作用：AG升高一定是代酸，但代酸不一定是AG升高。2.滲透壓：溶液的滲透壓與電荷或非電荷的顆粒樹相關(guān)。滲透壓計算公式：mOsm/kg=1.86(Na+mmol/L)+葡萄糖mmol/L+尿素mmol/L+9。第6頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三第一節(jié)、K+Na+測定方法（一）離子選擇電極法（ion-selectiveelectrode,ISE）1.原理：離子選擇電極法(ISE)是以測定電池的電位為基礎(chǔ)的定量分析方法，其檢測原理是檢測電極表面電位的改變，比較測定電極與參比電極表面電位變化的差值大小來估計樣本中鈉、鉀離子濃度。第7頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三Na+測定：含玻璃膜的鈉電極是由對Na+具有選擇性響應(yīng)的特殊玻璃毛細(xì)管組成(硅酸鋰鋁玻璃電極)，鈉電極與參比電極之間的電位差隨樣本溶液中Na+活度的變化而改變。K+測定：含液態(tài)離子交換膜的鉀電極是對K+具有選擇性響應(yīng)的纈氨霉素液膜電極，此敏感膜的一側(cè)與電極電解液接觸，另一面與樣本液接觸，膜電位的變化與樣本中K+活度的對數(shù)成正比。第8頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三2.分類：ISE分為直接法和間接法兩類直接電位法是指樣本(血清、血漿、全血)或校準(zhǔn)液不經(jīng)稀釋直接進入ISE管道接觸電極作電位分析，測量的是血清水相中離子的活度。與樣本中脂類、蛋白質(zhì)所占據(jù)的體積無關(guān)，即不受高蛋白血癥和脂血癥等情況的影響間接電位法是指樣本(血清、血漿)和校準(zhǔn)液要用指定離子強度與pH的稀釋液稀釋后再送入電極管道測量其電位。該方法會受到樣本中脂類和蛋白質(zhì)占據(jù)體積的影響。一般ISE的測定均在儀器上操作：第9頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三3.基本操作：1）儀器管道清洗2）兩點定標(biāo)3）標(biāo)本測定4）測定完畢，清洗管道，再關(guān)機。第10頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三（二）火焰光度法1.原理：發(fā)射光譜分析，測定發(fā)射光的強度，樣品中的鉀鈉原子吸收熱能處于激發(fā)態(tài)，發(fā)射特定的波長，迅速回到基態(tài)。2.儀器組成：1）霧化燃燒部分：將稀釋后樣本霧化后與壓縮空氣混合到達(dá)燃燒器。⒉）燃燒部分：燃燒后的火焰經(jīng)反光鏡和聚光鏡使發(fā)射光成一平行線，通過干涉濾光片，到達(dá)光電管。3）光度計：讀出光強度。第11頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三（三）酶法1.原理：酶法測定Na+：是在Na+離子存在下β-半乳糖苷酶水解鄰-硝基酚-β-D-半乳吡喃糖苷(ONPG)，在420nm波長可測定產(chǎn)物鄰-硝基酚(發(fā)色團)顏色產(chǎn)生的速率酶法測定K+：采用掩蔽劑掩蔽Na+，使K+∶Na+選擇性提高至600∶1，用谷氨酸脫氫酶消除內(nèi)源性NH4+的正干擾，利用K+對丙酮酸激酶的激活作用來測定K+的濃度第12頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三參考范圍：血清鈉：135～145mmol/L血清鉀：3.6～5.1mmol/L臨床意義：血鈉降低低鈉血癥指血清鈉<135mmol/L，可由鈉減少或水增多引起（1）消耗性低鈉血癥①胃腸道失鈉②創(chuàng)口大量失鈉③皮膚失鈉④尿鈉排出增多第13頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三（2）稀釋性低鈉血癥因腎病綜合征、肝硬化腹水、右心衰竭等引起抗利尿激素增多，導(dǎo)致血鈉被稀釋血鈉增高高血鈉癥(>145mmol/)較為少見可因攝入鈉過多或水丟失過多而引起。臨床上可見于腎上腺皮質(zhì)功能亢進，嚴(yán)重高滲性脫水，中樞性尿崩癥時尿量大而供水不足時。血鉀降低：血清鉀<3.5mmol/L時稱為低鉀血癥第14頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三引起低鉀血癥的常見原因（1）鉀攝入不足（2）鉀排出增多（3）細(xì)胞外鉀進入細(xì)胞內(nèi)（4）血漿稀釋血鉀增高血清鉀>5.5mmol/L時稱為高鉀血癥。引起高血鉀癥的常見原因（1）鉀輸入過多（2）排泄障礙（3）細(xì)胞內(nèi)鉀向細(xì)胞外轉(zhuǎn)移第15頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三血清氯化物的測定方法簡介：汞滴定法、分光光度法、庫侖電量分析法及最常用的ISE法。1.汞滴定法：最早測定Cl－的方法之一2.分光光度法：硫氰酸汞法既可手工操作，又可作自動化分析，特異性高，準(zhǔn)確度和精密度良好，是臨床使用的常用方法庫侖電量分析法。3.離子選擇電極法：簡便、快速、準(zhǔn)確、精密，目前測定Cl－最好，最多的方法。氯電極是由氯化銀、氯化鐵-硫化汞為膜性材料制成的固體膜電極，對樣本中的Cl－有特殊響應(yīng)。Cl－電極總是與Na+、K+電極配套使用，氯測定所需的試劑和定標(biāo)液也是與鉀、鈉電極應(yīng)用的緩沖液和校準(zhǔn)液組合在一起。第16頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三1.汞滴定法：用標(biāo)準(zhǔn)硝酸汞溶液滴定血清或尿液中的Cl-，Cl-與Hg2+結(jié)合生成可溶性但不解離的氯化汞，當(dāng)?shù)味ǖ竭_(dá)終點時，標(biāo)本中全部Cl-與Hg2+結(jié)合，過量的Hg2+與指示劑二苯卡巴腙作用生成紫紅色絡(luò)合物。根據(jù)硝酸汞的消耗量可以計算出氯化物的濃度。2.分光光度法利用硫氰酸汞與標(biāo)本中氯離子作用，生成不易解離的氯化汞和與Cl-等當(dāng)量的硫氰酸根（SCN-），SCN-與試劑Fe3+反應(yīng)生成橙紅色的硫氰酸鐵，在460nm波長處比色，可定量測出標(biāo)品中的Cl-的量。第17頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三3.電量分析法將標(biāo)本中放置銀電極，在不斷攪拌的條件下導(dǎo)入恒定電流，銀電極在電壓作用下不斷產(chǎn)生銀離子釋放入標(biāo)本溶液中，并與Cl-結(jié)合生成不溶性的AgCl沉淀。當(dāng)Cl-全部與Ag+結(jié)合完畢，溶液中就會有游離Ag+出現(xiàn)，使溶液電導(dǎo)明顯增加，儀器的傳感器和計時器立即切斷電流并計算消耗Cl-所需時間。通過測定標(biāo)本中消耗Cl-所需時間，并與標(biāo)準(zhǔn)液所需時間進行比較，可換算出標(biāo)本中Cl-的濃度，用mmol/L表示。第18頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三4.離子選擇電極法ISE法是目前測定Cl-的最好方法。氯電極常用氯化銀或硫化銀等物質(zhì)作為膜性材料制成固態(tài)膜電極，與參比電極組合在一起形成復(fù)合電極，并與Na+、K+電極組裝在同一臺儀器上，使用較方便，在臨床上得到了廣泛使用參考范圍96～108mmol/L。第19頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三臨床意義血清(漿)氯化物減低：常見原因有氯化鈉的異常丟失或攝入減少。1）胃腸道丟失（2）長期限制氯化鈉的攝入（3）代謝性堿中毒（4）艾迪生病血清(漿)氯化物增高1）高氯血癥性代謝性酸中毒（2）氯化物攝入過多（3）臨床上高氯血癥還常見于高鈉血癥第20頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三第二節(jié)、血清鈣、磷、鎂的測定血清鈣的測定總鈣測定滴定法、比色法、火焰分光光度法、原子吸收分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法、酶法、鄰甲酚酞絡(luò)合酮法（o-CPC）鄰甲酚酞絡(luò)合酮法（o-CPC）：o-CPC是一種金屬絡(luò)合染料，也是酸堿指示劑。在堿性條件下可與鈣螯合生成紫紅色螯合物，與同樣處理的鈣標(biāo)準(zhǔn)液比色，可求得血清鈣的含量。參考范圍：2.1～2.7mmol/L參考范圍2.1～2.7mmol/L離子鈣的測定離子選擇性電極法為主。參考范圍1.15～1.42mmol/L第21頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三血清磷的測定人體內(nèi)的磷元素尚不能直接測定。在臨床化學(xué)實驗室進行的無機磷測定實際上只是直接分析磷酸鹽陰離子（H2PO4-，HPO42-）。方法：1.磷鉬酸還原法標(biāo)本中的磷酸鹽與鉬酸生成無色的磷鉬酸，用還原劑將磷鉬酸還原成藍(lán)色復(fù)合雜聚物鉬藍(lán)，620nm進行比色分析。臨床實驗室較多采用。第22頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三2.磷鉬酸非還原法血清中無機磷在酸性溶液中與鉬酸銨作用形成的磷鉬酸銨雜聚化合物，在340nm或325nm波長的吸光度值與無機磷含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)品比較可計算出標(biāo)本無機磷含量。適用于微量無機磷的測定。3.酶法嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）和黃嘌呤氧化酶（XOD）偶聯(lián)并以過氧化物酶（POD）為指示劑的方法，可用于常規(guī)標(biāo)本的自動分析參考范圍：0.6～1.6mmol/L第23頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三血清鎂的測定原子吸收分光光度法甲基麝香草酚藍(lán)比色法：金屬絡(luò)合指示法Calmagite比色法（鈣鎂試劑法）達(dá)旦黃比色法：染料結(jié)合法尿液離子的測定方法與上述方法類同，但一般為24小時為多。腦脊液氯離子測定也與上述方法一樣。第24頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三離子測定的質(zhì)量控制質(zhì)量控制（qualitycontral,QC）是貫穿檢驗操作的全過程，包括分析前、分析中、分析后三個環(huán)節(jié)。分析前主要包括：人員培訓(xùn)、實驗室配置、儀器的質(zhì)量保證、檢測方法的評價、試劑和儀器的選擇與評價、標(biāo)本的準(zhǔn)備。分析中包括建立項目操作程序、室內(nèi)質(zhì)量控制和結(jié)果分析。分析后包括報告結(jié)果、室內(nèi)質(zhì)量控制的數(shù)據(jù)管理、參加室間質(zhì)量評價、投訴的處理。第25頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三一、室內(nèi)質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)量控制（Internalqualitycontrol,IQC）:主要是控制常規(guī)工作的精密度和準(zhǔn)確度，提高常規(guī)工作的天內(nèi)和天間標(biāo)本的檢測的一致性。1.控制物的種類：液體血清、凍干血清。2.質(zhì)量控制的主要方法：常用均植±標(biāo)準(zhǔn)差方法（X±SD）：A.具體方法：濃度未定的血清，在天內(nèi)、天間反復(fù)測定20次，求出均值（X），標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和變異系數(shù)（CV），繪制質(zhì)量控制圖，得均值線（X）、警告線（X±2SD）、失控線（X±3SD）。第26頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三B.結(jié)果分析：I.95%數(shù)據(jù)落在X±2SD內(nèi)；不能連續(xù)5次在均值的一側(cè)；不能有5次結(jié)果逐漸升高或降低；不能2點落在X±2SD之外；不能有落在X±3SD之外的數(shù)據(jù)II．漂移提示系統(tǒng)誤差；趨勢變化說明試劑或儀器性能變化；精度變化提示測定偶然誤差較大。C．處理；回顧檢查結(jié)果，分析出錯原因，找到糾正措施，填寫失控報告，存檔。第27頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三Westgard多規(guī)則質(zhì)量控制法A.兩份質(zhì)量控制血清，最好是一份為高值，一份低值，在同一質(zhì)量控制圖上，分別繪制質(zhì)量控制圖，一份處于2S~3S界限時，采用其余規(guī)則對質(zhì)量控制圖檢查，若符合其中一條，判為“失控”。B.規(guī)則：12S，即有一控制血清在2S~3S間為警告；13S，有一控制血清超3S，為失控；22S，同一質(zhì)量控制品連續(xù)兩次超2S，或兩質(zhì)控同超2S，為失控，多系統(tǒng)誤差；R4S，同批中一抄+2S，一超-2S，為失控，隨機誤差；41S，一質(zhì)量控制連續(xù)4次抄+1S或-1S，或2份質(zhì)量控制連續(xù)2次超+1S或-1S，失控，系統(tǒng)誤差；10X，一份質(zhì)量控制連續(xù)10次在均值一側(cè)，或兩份結(jié)果同時連續(xù)5次在一側(cè)。為失控，系統(tǒng)誤差。第28頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三二、室間質(zhì)量評價室間質(zhì)量評價（Externalqualityassessment,EQA）,通過各實驗室間的比對，觀察結(jié)果的準(zhǔn)確性。條件：有素質(zhì)高的人員；有室內(nèi)質(zhì)量控制；有良好的質(zhì)量控制血清；有參考實驗室定值；統(tǒng)一質(zhì)量控制血清。方法：1.計算均值與離散度，1S滿意，2S警戒，3S逾界。第29頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三二、室間質(zhì)量評價2.計算變異指數(shù)得分（va