病原菌的采樣技術

病原菌的采樣(cǎiyànɡ)技術廣州市CDC鄧志愛第一頁，共二十二頁。編輯課件主要(zhǔyào)內(nèi)容如何正確(zhèngquè)采集和處理標本選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法常見病原菌標本的采集食物中毒檢材的處理第二頁，共二十二頁。編輯課件正確采集和處理標本無菌操作血液、腦脊液及穿刺液等---無菌操作糞便、肛拭子和咽拭子等---避免(bìmiǎn)雜菌污染盛放容器無菌容器采集時間和部位在使用抗菌藥物之前；選擇合適的部位第三頁，共二十二頁。編輯課件送檢時間(shíjiān)和方法做好標記填好送檢單立即送檢置運送培養(yǎng)基送檢4℃保存運送35-37℃保溫運送安全防護人、標本、環(huán)境第四頁，共二十二頁。編輯課件選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法(fāngfǎ)依據(jù)：標本來源、可能存在的病原菌血液、腦脊液1.部分標本直接涂片染色鏡檢2.培養(yǎng)基：血培養(yǎng)瓶/管、BAP（血平板）、MAC（麥康凱平板）/EMB（伊紅美藍平板）、CA（巧克力平板）、SA（沙保培養(yǎng)基）3.培養(yǎng)方法：同時在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)第五頁，共二十二頁。編輯課件糞便、肛拭子SS、MAC/EMB、TCBS痰、咽拭子1.可直接涂片染色鏡檢2.BAP、CA、SA、BCYE（軍團菌培養(yǎng)基）3.在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)(péiyǎng)尿1.做細菌計數(shù)2.BAP、MAC/EMB、CA第六頁，共二十二頁。編輯課件膿液、分泌物1.可直接涂片染色鏡檢2.EB(增菌肉湯)、BAP、MAC/EMB、CA3.在需氧、厭氧環(huán)境培養(yǎng)生殖道標本(biāoběn)1.部分標本直接涂片染色鏡檢2.EB、BAP、MAC/EMB、CA、SA眼耳口鼻標本1.部分標本直接涂片染色鏡檢2.EB、BAP、MAC/EMB、CA第七頁，共二十二頁。編輯課件常見病原菌標本的采集血液、腦脊液采血時間(shíjiān)與次數(shù)用藥前24小時內(nèi)采3~4次血液標本，可使細菌檢出率高達99%；一般在病人發(fā)熱初期1~2天內(nèi)或發(fā)熱高峰時采集采血部位一般從肘靜脈采血，亞急性細菌性心內(nèi)膜炎等病人則從肘動脈或股動脈采血第八頁，共二十二頁。編輯課件采血量成人(chéngrén)5~10ml/次，嬰幼兒1~5ml/次腦脊液采集3~5ml/次，35-37℃保溫，立即送檢第九頁，共二十二頁。編輯課件糞便標本自然排便采集法挑取有膿血、粘液或絮狀物部分置采便盒/保存(bǎocún)液/增菌液中送檢直腸拭子采集法置C-B保存液/增菌液中送檢第十頁，共二十二頁。編輯課件呼吸道標本咽拭采集法盡量避免口腔正常(zhèngcháng)菌群污染自然咯痰法用清水反復漱口，用力自氣管深部咳出當日第一口膿痰，置無菌容器中盡快送檢小兒取痰法氣管鏡采集法第十一頁，共二十二頁。編輯課件胃內(nèi)采痰法結核病人可用此法采集氣管穿刺法主要用于厭氧培養(yǎng)呼吸道標本采集注意事項痰液標本以晨痰為佳，咳前要充分漱口，減少口腔(kǒuqiāng)正常菌群的污染采集的痰液標本必須是肺深部的痰液而不是唾液第十二頁，共二十二頁。編輯課件標本(biāoběn)采集后及時送檢，以防某些細菌在外環(huán)境中死亡。作結核分枝桿菌或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時送檢，應放入4℃冰箱，以免雜菌生長做結核分枝桿菌檢查，最好收集24小時痰液有1/4到1/2肺部感染的病人可能發(fā)生菌血癥，可同時做血培養(yǎng)第十三頁，共二十二頁。編輯課件尿液標本中段尿采集法腎盂尿采集法確定菌尿是否來自腎臟膀胱穿刺(chuāncì)尿采集法主要用于厭氧菌培養(yǎng)第十四頁，共二十二頁。編輯課件食物中毒檢材的處理肛拭1.采用C-B保存液和液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基運送。2.C-B管：檢驗人員在接到C-B管樣后，應立即用旋渦振蕩(zhèndàng)器充分振蕩(zhèndàng)混勻，然后用無菌吸管分別吸取混懸液0.5~1ml放入11種增菌液增菌培養(yǎng)，病人肛拭同時接種于11種平板培養(yǎng)基直接分離培養(yǎng)。3.液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基：置厭氧培養(yǎng)箱培養(yǎng)，病人肛拭同時接種血平板/SPS平板直接分離置厭氧培養(yǎng)箱培養(yǎng)。第十五頁，共二十二頁。編輯課件第十六頁，共二十二頁。編輯課件食品(shípǐn)應以無菌操作取適量食品，分別放入12種增菌液管中增菌培養(yǎng)。產(chǎn)氣莢膜梭菌、蠟樣芽胞桿菌分別按國標GB4789.13、14-2003作菌落計數(shù)。第十七頁，共二十二頁。編輯課件外環(huán)境一般不采用直接(zhíjiē)分離培養(yǎng)。分別放入12種增菌液管中增菌培養(yǎng)。第十八頁，共二十二頁。編輯課件嘔吐物需直接進行金葡腸毒素檢測，用MiniVIDAS全自動熒光免疫(miǎnyì)分析儀檢測。同時進行細菌學檢驗。第十九頁，共二十二頁。編輯課件12種增菌培養(yǎng)液：亞硒酸鹽增菌液/MM：培養(yǎng)沙門菌牛肉湯：培養(yǎng)金黃色葡萄球菌(pútáoqiújūn)、蠟樣芽胞桿菌1%葡萄糖肉湯：培養(yǎng)鏈球菌7.5%NaCl肉湯：培養(yǎng)金黃色葡萄球菌嗜鹽增菌液：培養(yǎng)副溶血性弧菌第二十頁，共二十二頁。編輯課件堿性(jiǎnxìnɡ)蛋白胨水：培養(yǎng)霍亂弧菌腸道增菌液：培養(yǎng)致瀉大腸埃希菌GN增菌液:培養(yǎng)志賀菌、變形桿菌LB1增菌液：培養(yǎng)單核細胞增生李斯特氏菌布氏肉湯：培養(yǎng)空腸彎曲菌硫乙醇酸鹽培養(yǎng)液/腦心浸液：培養(yǎng)產(chǎn)氣莢膜梭菌第二十一頁，共二十二頁。編輯課件內(nèi)容(nèiróng)總結病原菌的采樣技術。3.培養(yǎng)方法：同時在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)。2.BAP、MAC/EMB、CA。一般從肘靜脈采血，亞急性細菌性心內(nèi)膜炎等病人則從肘動脈(dòngmài)或股動脈(dòngmài)采血。成人5~