液質(zhì)聯(lián)用操作規(guī)程

液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程1液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程18頁SOP I-Xevo-TQSFSIDCACQUITYJPLC液相色譜儀、TQSMS/MS質(zhì)譜儀，適用于食品、藥品中各種有機物的定性、定量分析，是一種具有高靈敏度的檢測儀器，儀器由主機、計算機和數(shù)據(jù)處理軟件等組成。職責(zé)操作人員依據(jù)本規(guī)程操作儀器，認真填寫試驗使用記錄。保管人員負責(zé)對儀器進展定期維護和保養(yǎng)?？剖邑撠?zé)人負責(zé)監(jiān)視檢查規(guī)程的執(zhí)行。?操作程序日常操作步驟：UPLC―>設(shè)置樣品表一->運行樣品一-定量一-打印報告。注：假設(shè)一個星期內(nèi)不運行樣品請不要關(guān)質(zhì)譜儀，使其保持真空。建project的操作步驟：預(yù)備UPLC—建立的project—用標準品調(diào)諧—編輯質(zhì)譜方法—編輯UPLC方法一-設(shè)開機：徹底開機挨次〔儀器已關(guān)閉〕確定MS及其它儀器電源電纜已連接 ，開氮氣發(fā)生器、開氬氣，小表<0.1mpa。翻開計算機電源>等待windows正常啟動>電腦界面右下角網(wǎng)絡(luò)圖標紅叉。UPLC自動進樣器電源，等到電腦界面右下角網(wǎng)絡(luò)圖標消滅感慨號！。UPLC30s或者是有響聲。翻開質(zhì)譜電源，等待5min，離子源透視鏡里面亮。Masslynx軟件，masslynxinstrument----Masstune---界面菜單欄vacuum-pump同樣界面左側(cè)偏上diagnostics---vacuum---analyserMS1turbospeed]%5804個小時>massconsole--~面左側(cè)xevotqmsdetector力卩號開放---msdisplay>碰撞室真空度>達液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程SOP I-Xevo-TQSFSIDCU7.xe-5mbar。日常開機挨次〔儀器未關(guān)閉〕開氮氣發(fā)生器、開氬氣，小表<0.1mpa,翻開Masslynx軟件，進入工作站。建立工程fileprojectwizard，yes消滅對話框，輸入project,locationC:\MSDATAnext,createexistingprojectastemplate,并c:\masslynx”finishOK。UPLC系統(tǒng)預(yù)備液相的一般流程：預(yù)備流淌相>預(yù)備樣品>>>建立液相方法平衡液相預(yù)備流淌相0.22um的膜過濾緩沖液，全部的緩沖液和超純水都要配制，超純水和緩沖液使用不得超過二天，緩沖鹽肯定要是可揮發(fā)的，而且濃度不要大于

10mM。樣品要求全部樣品都要用流淌相初始梯度比例的溶劑來溶解，并用

0.22um的膜過濾。3.3.3灌注二元泵MasslynxMSConsoleUPLC交互顯示界面，點擊左欄AcquityUPLCSystem>Control>StartUpSystemQSMABsealwash,3分鐘。單擊SM，選擇StrongWash5cycles,Samplesyringe20EquilibratetoMethod0,Start開頭灌注.9min左右。設(shè)定流速，平衡液相MasslynxInletMethod圖標，翻開液相方法編輯窗口，單擊status>ACQUITYAdditionalStatus,AB或流速的位置，消滅流速、比例設(shè)定對話框可設(shè)定流速0.2ml/min,有機相與水相的比例為50:50。液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程SOP I-Xevo-TQSFSIDC預(yù)備質(zhì)譜計算化合物單同位素養(yǎng)量數(shù)Masslynx主界面>單擊Tools〉MolecularWeightCalculator,輸入化合物的分子式〔大寫-C、Br等正確的輸入方法〕,Monoiso,lonMode:離子化模式，+ve正離子，-ve負離子，CalculateIntellistart進展自動調(diào)諧MasslynxMSTune圖標，翻開調(diào)諧窗口，單擊IonMode>ES+或ES-，單擊APIGas圖標 翻開氮氣，單擊翻開高壓選擇MSMode圖標，設(shè)定液相流速0.2ml/min,水：乙腈的比例為50:50。把標準品調(diào)諧液放入質(zhì)譜儀塑料瓶位置處的 A〔或B或C〕號位〔注:濃度在200ppb左右〕FluidicsReservoirA,FlowStateLCPurgePurge完畢FlowStateCombineFunctionMS1scan,Mass為計算出化合物的質(zhì)量數(shù)，span為5，點擊進樣，開頭進樣，直到離子的響應(yīng)比較穩(wěn)定。保存調(diào)諧文件：FileSaveA至已建的工程下。在Masslynx主界面，選擇MsConsole>XevoTQMSDetector選擇Intellistart，選擇SampleTuneandDevelopMethod，ES+單擊StartIntellistart自動調(diào)諧編SwitchtoAdvaneedmodCompoundname化合物名稱MolecularMass/Formula〔分子量或分子式〕AdductA+〔[M+H]+，選擇LoadExistingSampleTune在SampleTuneName。Develop液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程48頁MRMMethod前的方框打鉤，并在方框出輸入MRM方法的文件名，路徑為已建的工程下。在PrintReport前方框打鉤，ConeVoltage，CollisionEnergy處為默認值，F(xiàn)luidics下的FlowPath選擇Combined模式，SampleReservoir和SampleFlowRate參數(shù)與Fuldics下Combined模式下的進樣參數(shù)保持全都。單擊右邊的Start開頭自動調(diào)液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程48頁SOSOP I-Xevo-TQSFSIDCintellistart中自動生成的質(zhì)譜方法：MassLynx主窗口，單擊MSMethod,MSMethod編輯對話框,File>open,選擇Intellistart中保存的質(zhì)譜方法的文件，雙擊方法，如覺察自動調(diào)諧生產(chǎn)的質(zhì)譜方法中局部參數(shù)有誤，則可以在 Channels窗口手動修改參數(shù)，填寫relentinonwindow中的end時間，此時間必需與液相色譜方法運行時間保持一致，選擇AutoDwell,單擊OK，點擊File>SaveAs,保存質(zhì)譜方法文件。建立液相方法編輯液相方法Inlet，輸入溶劑名稱，runtime及梯度洗脫程序，梯度洗脫程序中最終階段時間必需與runtimeOK,選擇File>SaveAs保存LoadMethod，平衡液相。建立樣品列表Masslynx主窗口，選擇File>New建立一個空白的表samplelist。輸入文件名FileNameFileText，雙擊MSFileInletFile,選擇液相方BottleInjectVolume中輸入進樣體積，可右鍵>Add,增加樣品表的行數(shù)，保存樣品表：File>SaveAs。數(shù)據(jù)采集和處理選中要采集的樣品，單擊Run>StartAcquireSampleDataonly”擊OK開頭進樣并采集。在采集過程中，可查看色譜圖，點擊Chromatogram窗口，點擊Real-timeUpdateicon.假設(shè)不能見整個TICDefaultRange圖標。假設(shè)方法中包括多個通道，可通過Display>Mass查看假設(shè)方法中包括多個檢測器或多個Function,Display>TIC查看處理多個Function的數(shù)據(jù)液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程58頁假設(shè)質(zhì)譜方法中有多個FunctionFunction，如想看其次個Function，液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程58頁SOSOPI-Xevo-TQSFSIDC在色譜圖窗口，點擊Display>TICMSScan,選擇AddtraceOK。如想查其次個Function.DaughterScan質(zhì)譜圖，在色譜圖中，選擇Display>TIC,ScanWaveDSAddtraceOK=363.3.選擇Process>Combinespectra分別用右鍵輸入信號和本底噪音.單擊OK.得到DaughterScan的質(zhì)譜圖，單擊Process>Smooth，單擊OK。數(shù)據(jù)處理-外標定量法MasslynxTargetlynx/Editmethod，消滅定量方法編輯對話框，單擊建方法圖標，建一個定量方法。單擊Addnewcompound〔添加的化合物〕圖標，添加一個的化合物。單擊菜單欄update,選中QuantitationIon和CompoundName〔前面打勾〕在Masslynx主頁面，翻開中等偏下低濃度標準品的色譜圖， Display/Masschromatogram選出要定量的化合物的離子對一般強度高的化合物用來做為定量離子，另一個離子對則作為確證離子，用鼠標右鍵在定量離子對色譜圖上拉一下，貝Ucompoundname,AcquisitionFunctionNumber,QuantificationTrace,PredictedRetentionTime和RetentionTimewindow將自動輸入到定量方法中。留意：在色譜圖上拉的時候，要遵循兩個原則，拉的位置要以色譜峰的峰尖左右對稱，拉的寬度要超過峰的起點和終點。單擊工作曲線圖標，在工作曲線設(shè)置頁面，填入ConcentrationUnits:ng/ml,ug/kg，ppb,ppm等。ConcentrationofStandard:Level—選擇ConcAPolynomialTypeLinear.〔可依據(jù)自己行業(yè)的規(guī)定〕CalibrationOriginexclude排解原點包含原點強制過原點WeithtingFunction〔權(quán)重〕_1/x〔依據(jù)自己行業(yè)規(guī)定〕PropagateCalibrationParameters假設(shè)全部的化合物均用一樣的工作曲線的參數(shù)，選Yes液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程68頁SOPI-Xevo-TQSFSIDCApexTrackEnabled〔打勾，YESIntegrationWindowExtent輸入2,選中PropagateIntegrationParameters打勾〕，假設(shè)色譜峰并不是很對稱的色譜圖，可先在色譜圖上先設(shè)定參數(shù)，積分，好積分參數(shù)滿足之后，process/integrate…/copy，TargetlynxEdit/PastTargetlynx方法中。建議用ApexTrack積分方法，Smooth方法建議用smoothiteration1,smoothwidth2。重復(fù)上面的過程，把其他幾個化合物的信息全部參加 ，保存方法：File/SaveAs,保存到當(dāng)前工程的MethDB文件夾中，正確的samplelist表格模板，除了前面進樣時的選項之外，還要有sampletype,ConA,等選中要處理的樣品，ProcessSamples消滅以下圖的對話框，確保選中，Integrate、sample，calibrateStandard,QuantifySampleTargetlynx方法，單擊OK果對話框?？梢罁?jù)自己的需要，用鼠標右鍵，Summary中的選項。關(guān)機程序

ChangColumnOrder來日常關(guān)機：假設(shè)流淌相中有緩沖鹽必需先將緩沖鹽換成水，灌注2分鐘，流速設(shè)為0.2ml/min，80%水相，沖洗至少30分鐘，換成80%有機相，沖洗至少20分鐘，停流3080%20溫。masstune或者電腦下面儀器圖標一界面左側(cè)偏上fluidics---flowstatewaste、關(guān)氬氣，masstune6masstune100masstune界面或者電腦下面儀器圖標左側(cè)偏上。ES+source——temperature---desolvation＞關(guān)氮氣，點擊氮氣發(fā)生器開啟開關(guān)。徹底關(guān)機液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程7液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程78頁SOP I-Xevo-TQSFSIDC3.822泄真空：tune>vacuum>vent---yes>等待渦輪分子泵轉(zhuǎn)速降到10以下,masslynxinstrument----Masstune---界面左側(cè)偏上diagnostics---vacuum---sourceturbospeed]%]退出軟件，其他界面先退出，主界面最終退出3.824>UPLC電源，計算機電源，儀器三個電源挨次無所謂，關(guān)氮氣發(fā)生器，氬氣。假設(shè)有UPSUPS電源，計算機電源。日常維護、保養(yǎng)及留意事項儀器室要保持干凈、干凈、無塵；配套設(shè)施布局合理。20-25C,50-70%,室內(nèi)應(yīng)備有溫度計和濕度計，一般承受空調(diào)和吸濕機調(diào)整溫度和濕度。氣壓過濾機械泵油，停頓樣品采集、停頓流淌相、關(guān)閉高壓、關(guān)閉全部氣流,關(guān)閉離子源內(nèi)的真空隔離閥。用一字鏍絲刀順時針方向擰開機械泵上的 GasBallast30GasBallastESIAPCI源，每天做一次。開高壓之前肯定要