中國NMOMS診斷標(biāo)記的篩選與評估機(jī)制

中國NMOMS診斷標(biāo)記的篩選與評估機(jī)制開題報(bào)告多發(fā)性硬化(MultipleSclerosis,MS)是一種炎癥介導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病，主要涉及細(xì)胞免疫。視神經(jīng)脊髓炎(Neuromyelitisoptica(Devic’sdisease,NMO)也是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥性脫髓鞘性綜合癥，特點(diǎn)主要是嚴(yán)重的視力損害和脊髓損害，在早期被認(rèn)為不累及大腦，它與體液紊亂有關(guān)。臨床孤立綜合征(CIS)

排除其他疾病的情況下,中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘事件的急性或亞急性單次發(fā)作,持續(xù)時(shí)間在24h以上。CIS患者臨床表現(xiàn)為脊髓、腦干或視神經(jīng)受累,但是在疾病的時(shí)間演變和空間進(jìn)展方面尚不能滿足多發(fā)性硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)。CIS患者可以有MS、視神經(jīng)脊髓炎、橫斷性脊髓炎、急性播散性腦脊髓炎等多種轉(zhuǎn)歸。一、概念鑒別的分界點(diǎn)在那里？開題報(bào)告如何從早期預(yù)估它的轉(zhuǎn)歸CISNMOMS？二、研究背景二、研究背景開題報(bào)告如何區(qū)分？診斷試驗(yàn)診斷標(biāo)準(zhǔn)新的診斷標(biāo)記二分類數(shù)據(jù)靈敏度,特異度,似然比,優(yōu)勢比（包括集群二分類）有序數(shù)據(jù)連續(xù)數(shù)據(jù)經(jīng)驗(yàn)ROC,擬合ROC,ROC面積,固定FPR面積等診斷結(jié)果（T）金標(biāo)準(zhǔn)（D）合計(jì)

病例（D+）對照（D-）陽性（T+）陰性（T-）合計(jì)TP（真陽性）FP（假陽性）TP+FPTN（假陰性）TN(真陰性）FN+TNTP+FNFP+TNN二、研究背景開題報(bào)告Sen=P(T+|D+)=TP(TP+FN)=TPRSpe=P(T-|D-)=TN(FP+TN)J=Sen+Spe-1=TPR-FPRLR+=TPR/FPR=Sen/(1-Spe)LR-=(1-TPR)/(1-FPR)=(1-Sen)/Spe二、研究背景開題報(bào)告中國NMO/MS的診斷標(biāo)準(zhǔn)或西方國家的診斷標(biāo)準(zhǔn)是否符合中國的患者？現(xiàn)有的診斷指標(biāo)系統(tǒng)評價(jià)NMO-IgG的系統(tǒng)評價(jià)新型診斷標(biāo)記物篩選與評價(jià)缺乏X水平區(qū)分MS與NMO的ROC曲線二、研究背景開題報(bào)告1.NMO-IgG可能是區(qū)分MS與NMO的高特異性生物標(biāo)記2.通過蛋白質(zhì)組學(xué)篩選新型診斷標(biāo)記物可能有助于進(jìn)一步區(qū)分MS與NMO，提高二者的診斷準(zhǔn)確率新型診斷標(biāo)記物篩選根據(jù)單項(xiàng)試驗(yàn)的敏感度、特異度和ROC曲線等指標(biāo)，同時(shí)進(jìn)行多項(xiàng)試驗(yàn)聯(lián)合應(yīng)用、新舊指標(biāo)綜合分析與評估，優(yōu)化中國MS或NMO患者的診斷與鑒別診斷方案，從而有助于推動我國MS或NMO研究的進(jìn)展。（1）中國NMO-IgG血清學(xué)的流行病學(xué)臨床開展NMO-IgG檢測意義開題報(bào)告

（2）了解NMO-IgG對中國NMO/MS的區(qū)分作用。

（3）對確診的首次的MS/NMO或CIS的患者NMO-IgG情況進(jìn)行前瞻性研究，追蹤疾病的轉(zhuǎn)歸[自然病史的追蹤（陽性，陰性，不同滴度等亞組分析追蹤轉(zhuǎn)歸與預(yù)后（生存分析等）]。（4）治療追蹤（能不能作為end-point評價(jià)指標(biāo)）等。二、研究背景開題報(bào)告前瞻性研究二、研究背景開題報(bào)告1.NMO-IgG可能是區(qū)分MS與NMO的高特異性生物標(biāo)記2.通過蛋白質(zhì)組學(xué)篩選新型診斷標(biāo)記物可能有助于進(jìn)一步區(qū)分MS與NMO，提高二者的診斷準(zhǔn)確率新型診斷標(biāo)記物篩選根據(jù)單項(xiàng)試驗(yàn)的敏感度、特異度和ROC曲線等指標(biāo)，同時(shí)進(jìn)行多項(xiàng)試驗(yàn)聯(lián)合應(yīng)用、新舊指標(biāo)綜合分析與評估，優(yōu)化中國MS或NMO患者的診斷與鑒別診斷方案，從而有助于推動我國MS或NMO研究的進(jìn)展。二、研究背景開題報(bào)告2.通過蛋白質(zhì)組學(xué)篩選新型診斷標(biāo)記物可能有助于進(jìn)一步區(qū)分MS與NMO，提高二者的診斷準(zhǔn)確率二、研究背景開題報(bào)告標(biāo)本來源優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)血液收集相對簡單。（1）可溶性標(biāo)記物存在晝夜效應(yīng)變化（例如IL-6的變化達(dá)350%）。（2）測量水平受到肝臟生物降解及腎臟分泌影響。（3）抗凝物質(zhì)應(yīng)用影響血清的蛋白水平。（4）分離技術(shù)與標(biāo)本貯存亦影響檢測水平。（5）收集與處理的時(shí)間要嚴(yán)格控制。腦脊液（1）與病變位置接近，反映顱內(nèi)相關(guān)的炎癥過程。（2）腦脊液收集可防止肝臟生物降解及腎臟分泌作用。（1）侵入性操作。（2）量產(chǎn)生亦不穩(wěn)定，晝夜有明顯變化。（3）是否優(yōu)于尿液或血液目前尚不清楚。尿液非侵入性方法取標(biāo)本。（1）容易受細(xì)菌感染或污染的影響。（2）能測定的指標(biāo)有限。淚液少用。少用。

用于生物標(biāo)記的體液二、研究背景開題報(bào)告authorThemejournalD'AguannoSElectrophoreticseparationsofcerebrospinalfluidproteinsinclinicalinvestigationsClinChemLabMed.2007PanSAcombineddatasetofhumancerebrospinalfluidproteinsidentifiedbymulti-dimensionalchromatographyandtandemmassspectrometry.Proteomics.2007KolarcikCPlasmaandcerebrospinalfluid-basedproteinbiomarkersformotorneurondisease.MolDiagnTher.2006BiringerRGEnhancedsequencecoverageofproteinsinhumancerebrospinalfluidusingmultipleenzymaticdigestionandlineariontrapLC-MS/MS.BriefFunctGenomicProteomic.2006SchuhmannMUBraininjuryandproteomics/peptidomics:isitrelevant?anoverviewActaNeurochirSuppl.2005RighettiPGProteomeanalysisintheclinicalchemistrylaboratory:mythorreality?ClinChimActa.2005RomeoMJCSFproteome:aproteinrepositoryforpotentialbiomarkeridentification.ExpertRevProteomics.2005YuanXProteomicsanalysisofhumancerebrospinalfluid.JChromatogrBAnalytTechnolBiomedLifeSci.2005FinnieCAspectsofthebarleyseedproteomeduringdevelopmentandgerminationBiochemSocTrans.2004RohlffCProteomicsinneuropsychiatricdisordersIntJNeuropsychopharmacol.2001RohlffCProteomicsinmolecularmedicine:applicationsincentralnervoussystemsdisorders.Electrophoresis.2000二、研究背景開題報(bào)告CSF蛋白組學(xué)的一些文獻(xiàn)二、研究背景開題報(bào)告但是，畢竟蛋白組學(xué)是近年新興的學(xué)科，不同于基因組學(xué)，它反映了轉(zhuǎn)錄后蛋白裝配、修飾等過程，其技術(shù)亦日新月異，仍是將來發(fā)現(xiàn)疾病標(biāo)記的重要方法。而在中國，MS患者的腦脊液蛋白組學(xué)的研究尚未深入，針對MS、NMO、CIS或治療前后亞群的蛋白質(zhì)分析也是目前亟待回答的問題。當(dāng)然診斷的標(biāo)記如能篩選出，同樣仍需要我們從靈敏度、特異度、一致率、優(yōu)勢比、Youden指數(shù)、ROC曲線下面積進(jìn)行評價(jià)它的診斷確準(zhǔn)度。正如許多的生物標(biāo)記的篩選一樣，候選的標(biāo)記結(jié)果往往得不出肯定的結(jié)論，而且難于重復(fù)，蛋白質(zhì)組學(xué)在上述MS的腦脊液研究中結(jié)果亦是如此。三、研究目的、意義開題報(bào)告課題設(shè)想、目的、意義首先回顧性的分析現(xiàn)有的診斷標(biāo)記的診斷準(zhǔn)確度，探討舊方法對診斷的貢獻(xiàn)值及不足之處，為新方法的開展與評估提供理論的依據(jù)其次檢測我國MS,NMO,CIS及對照組NMO-IgG抗體的診斷確準(zhǔn)度指標(biāo)，為其臨床應(yīng)用打下基礎(chǔ)。

再次,通過蛋白組學(xué)的方法篩選對診斷MS,NMO有鑒別意義的生物標(biāo)記,并評估其診斷的準(zhǔn)確度。最后,進(jìn)行多項(xiàng)試驗(yàn)指標(biāo)的聯(lián)合應(yīng)用,新舊指標(biāo)進(jìn)行綜合分析，優(yōu)化診斷MS或NMO的診斷方案。四、研究內(nèi)容開題報(bào)告（1）回顧性抽樣計(jì)劃研究：回顧在本課題組確診的“多發(fā)性硬化，視神經(jīng)脊髓炎”和對照病例或健康對照的資料，分析常用指標(biāo)的診斷準(zhǔn)確度，確定指標(biāo)的最佳決策界值。（2）回顧性+前瞻性研究血清NMO-IgG診斷價(jià)值：a.按確診的MS、NMO、其它神經(jīng)疾病患者和健康對照分組，檢測患者血清的NMO-IgG，評價(jià)試驗(yàn)的準(zhǔn)確度，同時(shí)對MS和NMO組患者進(jìn)行亞群分組（如治療前后等），評價(jià)試驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確度?；颊邫z測NMO-IgG，評價(jià)試驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確度；隨訪追蹤1年，觀察血清陽性與陰性患者的臨床轉(zhuǎn)歸情況，并重新評估。開題報(bào)告四、研究內(nèi)容（3）新型的診斷標(biāo)記的篩選與評價(jià)：a.收集MS、NMO、其它神經(jīng)疾病患者和非神經(jīng)系統(tǒng)疾病患對照組的腦脊液，2D電泳、質(zhì)譜技術(shù)和生物信息學(xué)方法篩選可能診斷蛋白標(biāo)記。b.免疫分子生物學(xué)方法反證診斷標(biāo)記的在不同分組中的分布情況，評價(jià)診斷標(biāo)記的診斷準(zhǔn)確度。c.CIS患者檢測該種標(biāo)記物，評價(jià)試驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確度；隨訪追蹤1年，觀察腦脊液陽性與陰性患者的臨床轉(zhuǎn)歸情況，并重新評估。（4）多元回歸分析聯(lián)合多種診斷標(biāo)記的診斷準(zhǔn)確度，決定最佳決策界值，優(yōu)化臨床診斷方案。二、研究背景開題報(bào)告五、關(guān)鍵問題與技術(shù)（1）NMO-IgG的檢測原間接免疫熒光法過程繁雜，是國內(nèi)難以開展該項(xiàng)檢測的一個(gè)重要原因。由于目前已發(fā)展多項(xiàng)技術(shù)對該抗體進(jìn)行檢測，尤其是ELISA方法，簡單實(shí)用，因此有望可解決這問題。（2）蛋白組學(xué)對診斷標(biāo)記的篩選蛋白質(zhì)組學(xué)的整個(gè)過程受影響的因素較大，而目前對體液低豐度蛋白的篩選存在一定的難度，有可能難以篩選到具有一定特異性標(biāo)記物。蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)日進(jìn)千里，利用先進(jìn)的分離篩選技術(shù)可能有助于上述缺點(diǎn)的改善。（3）二分度資料的分析如何轉(zhuǎn)為有序數(shù)據(jù)進(jìn)行ROC曲線分析。（4）其它：金標(biāo)準(zhǔn)開題報(bào)告主要研究方法

確定入選病例組的“金標(biāo)準(zhǔn)”SAS，SPSS等軟件對指標(biāo)進(jìn)行計(jì)算與評估間接熒光免疫分析NMO-IgG抗體（滴度）

蛋白組質(zhì)學(xué)分析(雙向電泳,質(zhì)譜,信息學(xué)等）六、研究方案六、研究方案開題報(bào)告技術(shù)路線回顧MS/NMO/對照資料OB,BAEP,腦脊液,MRI等靈敏度特異度ROC曲線優(yōu)勢比似然比等重新評估上述指標(biāo)的診斷準(zhǔn)確度。為中國MS或NMO診斷與鑒別診斷提供臨床決策點(diǎn)的依據(jù)。第一部分回顧分析現(xiàn)有指標(biāo)的診斷準(zhǔn)確度六、研究方案開題報(bào)告技術(shù)路線第二部分NMO-IgG抗體對中國NMO/MS診斷的準(zhǔn)確度研究

確診MS確診NMO對照CIS患者NMO-IgG陽性陰性靈敏度，特異度，ROC曲線，優(yōu)勢比，似然比等陽性陰性MSNMOX靈敏度,特異度，ROC曲線，優(yōu)勢比，似然比等綜合評價(jià)隨訪分析再評價(jià)MSNMO六、研究方案開題報(bào)告技術(shù)路線第三部分蛋白質(zhì)組學(xué)篩選生物標(biāo)記及評估

確診MS確診NMO對照CIS樣本處理2D-電泳異常的蛋白點(diǎn)色譜分析生物信息學(xué)推測蛋白鑒定初篩過程六、研究方案開題