Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程

Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程

題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號(hào)共5頁(yè)SOP-YQ-010A第1頁(yè)制訂人審核人批準(zhǔn)人生效日期

一、目的：規(guī)范實(shí)驗(yàn)室Agilent1200高效液相色譜儀的操作維護(hù)方法，保證實(shí)驗(yàn)的有效性。二、適用范圍：適用于實(shí)驗(yàn)室Agilent1200高效液相色譜儀的使用和維護(hù)。三、職責(zé)：所有使用Agilent1200高效液相色譜儀的分析人員，需正確操作，并做好維護(hù)保養(yǎng)和狀態(tài)檢查工作。四、操作步驟1.Agilent1200化學(xué)工作站開(kāi)機(jī)順序(LAN卡聯(lián)接)

1.1、將待測(cè)樣品按要求前處理，準(zhǔn)備HPLC所需流動(dòng)相，檢查線路是否連接完好，廢液瓶是否夠用等

1.2、打開(kāi)計(jì)算機(jī)，進(jìn)入Bootp；1.3、打開(kāi)主機(jī)各模塊電源（不分先后），等待Bootp接收,等待各模塊就緒后,再雙擊工作站圖標(biāo),進(jìn)入化學(xué)工作站；1.4、調(diào)出一個(gè)分析方法，檢查各參數(shù)的設(shè)置；1.5、旋開(kāi)泵上的排氣閥，將工作站中的泵流量設(shè)到5ml/min，溶劑A設(shè)到100%；題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號(hào)共5頁(yè)SOP-YQ-010A第2頁(yè)1.6、在工作站中打開(kāi)泵，排出管線中的氣體數(shù)分鐘；1.7、依此切換到B、C、D溶劑分別排氣；1.8、將工作站中的泵流量設(shè)到1ml/min，多元泵則再設(shè)定溶劑配比，如A=80%，B=20%；1.9、關(guān)閉排氣閥，檢查柱前壓力；1.10、待柱前壓力基本穩(wěn)定后,打開(kāi)檢測(cè)器燈，觀察基線情況；2、數(shù)據(jù)采集方法編輯2.1由運(yùn)行控制進(jìn)入樣品信息，設(shè)定操作者姓名，樣品數(shù)據(jù)文件名等。2.2自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定:1）選擇合適的進(jìn)樣方式,“StandardInjection”----只能輸入進(jìn)樣體積，此方式無(wú)洗針功能?！癐njectionwithNeedleWash”----可以輸入進(jìn)樣體積和洗瓶位置，“UnRegistered”--此方式針從樣品瓶抽完樣品后，會(huì)在洗瓶中洗針?！癠seinjectorprogram”---可以點(diǎn)擊“Edit”鍵進(jìn)行進(jìn)樣程序編輯。2)單擊確定進(jìn)入下一畫(huà)面。2.3泵參數(shù)設(shè)定：（四元泵）1）在流量（Flow）處輸入流量,如1.5ml/min，在溶劑B處輸入70.0,(A=100-B-C-D),也可插入一行時(shí)間列表（Timetable）,編輯梯度。在最大壓力極限處（PressureLimitsMax）輸入柱子的最大題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號(hào)共5頁(yè)SOP-YQ-010A第3頁(yè)耐高壓，以保護(hù)柱子。2）單擊確定進(jìn)入下一畫(huà)面。2.4柱溫箱參數(shù)設(shè)定:1）在柱溫下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,并選中它,點(diǎn)擊更多鍵,選中與左側(cè)一致，使柱溫箱的溫度左右一致。2）單擊確定進(jìn)入下一畫(huà)面。2.5DAD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:1）在波長(zhǎng)下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng),如254nm,在峰寬(響應(yīng)時(shí)間)下方點(diǎn)擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時(shí)間,如>0.1min(2s)。2）在時(shí)間列表中可以插入一行，輸入隨時(shí)間切換的波長(zhǎng)，如1min，波長(zhǎng)=300nm。3）點(diǎn)擊確定進(jìn)入下一畫(huà)面。2.6單擊方法菜單，選中保存方法，輸入一方法名，如“test”，單擊確定。2.7、運(yùn)行序列：新建序列，在序列參數(shù)中輸入樣品信息，在序列表中輸入樣品位置，方法等，運(yùn)行該序列，等儀器就緒，基線平穩(wěn)，從方法菜單中選擇運(yùn)行方法，進(jìn)樣。3、數(shù)據(jù)處理操作步驟3.1由主菜單上的視圖進(jìn)入數(shù)據(jù)分析，到數(shù)據(jù)處理界面；題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號(hào)共5頁(yè)SOP-YQ-010A第4頁(yè)3.2由主菜單上的文件進(jìn)入調(diào)用信號(hào)，調(diào)出要分析的數(shù)據(jù)文件色譜圖；3.3由主菜單上的圖形進(jìn)入信號(hào)選項(xiàng)，調(diào)整譜圖坐標(biāo):1)點(diǎn)自定義量程，在時(shí)間范圍中輸入橫坐標(biāo)(時(shí)間）(例如0到10)；2)在響應(yīng)范圍:中輸入縱坐標(biāo)(響應(yīng)值）(例如-50到800)；3)在量程框中，調(diào)到全部使用相同量程；4)點(diǎn)擊確定退出。3.4由主菜單上的積分進(jìn)入積分事件，設(shè)置、修改積分參數(shù)；1)在斜率靈敏度后，輸入斜率值；2)在峰寬后中，輸入最小峰寬值；3)在最小峰面積后，輸入最小峰面積值；4)在最小峰高后，輸入最小峰高值；5)點(diǎn)擊左上方帶鉤的圖標(biāo)，確認(rèn)；3.5由主菜單上的報(bào)告進(jìn)入設(shè)定報(bào)告，設(shè)置報(bào)告參數(shù)：1)在定量結(jié)果欄中，選擇計(jì)算（面積百分比，外標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)法等）；2)在目標(biāo)欄，選打印機(jī)打印，或屏幕打印；3)點(diǎn)擊確定退出。3.6由主菜單上的報(bào)告進(jìn)入打印報(bào)告，打印報(bào)告；4、關(guān)機(jī)4.1關(guān)機(jī)前，用95%水沖洗柱子和系統(tǒng)0.5-1小時(shí)，流量0.5—1ml/min，再用100%有機(jī)溶劑沖0.5小時(shí)，然后關(guān)泵，（適于反相色譜柱）。題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號(hào)共5頁(yè)SOP-YQ-010A第5頁(yè)[正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗]4.2退出化學(xué)工作站，及其它窗口，關(guān)閉計(jì)算機(jī)（用shutdown關(guān)）。4.3關(guān)閉Agilent1200各模塊電源開(kāi)關(guān)。5、Agilent1200高效液相色譜儀維護(hù)保養(yǎng)：5.1氘燈是易耗品，應(yīng)最后開(kāi)燈，不分析樣品即關(guān)燈；5.2開(kāi)機(jī)時(shí)，打開(kāi)排氣閥，100%水，泵流量5ml/min，若此時(shí)顯示壓力>10bar，則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)玻璃料。5.3流動(dòng)相使用前必須過(guò)濾，不要使用多日存放的蒸餾水（易長(zhǎng)菌）。5.4流動(dòng)相使用前必須進(jìn)行脫氣處理，可用超聲波振蕩10-15min。5.5配制90%水+10%異丙醇，以每分2—3滴的速