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qPCR引物設計從入門到放棄————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:?qPCR引物設計之從入門到放棄常見檢測目的分子的mＲＮA水平ｅg：mouｓeIＬ-１ｂetａ查找該基因的相關信息,NCBIHYPＥRＬINK＂ｈttp:/／www．nｃｂi.nｌm．/"httｐ://wwｗ.ncbｉ．nlｍ.nih．gov/選擇geｎｅ輸入IL-１β，單擊Sｅarｃｈ可以在結果中，需要的種屬，也可以在右邊進行篩選。這里選擇Mｕsmusculuｓ。第一個就是，單擊進去，可以看見GeneID：16１７6再向下找在Geｎeｂank中查找引物序列網址ＨYPEＲLＩＮＫ＂httｐｓ://pga.ｍgh．ｈaｒvａrd.edｕ/ｐｒimｅrｂaｎk/"htｔpｓ://pgａ.mgh.ｈarvａ／pｒimerbａnk/在結果中選擇，PrimerＰair4為驗證過的引物，有擴增曲線，溶解曲線和2%的瓊脂糖凝膠電泳圖。3引物驗證及設計---PｒiｍｅrＢlast為NCBＩ的一個工具，hｔｔｐ:／/www.ncbi.nlm．nｉｈ.gov/ｔｏｏls/pｒimer－blasｔ/３.1進行引物特異性檢測比如在Ｇenｅｂａnk中找到的IＬ－1β的引物，輸入到Primerparａｍeｔers中,3．２PrimｅrBlａst引物設計

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