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ReadingCreationofBacterialCellControlledbyaChemicallySynthesizedGenome1990年人類組計劃剛剛起步的時候,科學(xué)家們可能尚沒有這么大的野心。十年過去,2001年,人類組計劃提前完成,科學(xué)家們可能再也坐不住了。技術(shù)的造物的傳統(tǒng)理論,這確實是一個具有十足力的嘗試。Ventor的團隊正是在這樣的背景Ventor團隊計劃這一方案已有相當(dāng)長的時間。他們構(gòu)想著把人工合成的蕈狀體的組替換掉體細胞的遺傳物質(zhì),從而使后者具有蕈狀體的遺傳性狀。要達數(shù)字化組技術(shù)等飛速發(fā)展,讓實驗團隊擁有了基于計算機設(shè)備和人工實驗的樣本。也就是說,Ventor盡管是一個嶄新的具有十足性的嘗試,Ventor的策略卻十分簡約。概括來說,主要分四個個階段:拆—合—替—篩(1)拆:選取Mycosmamycoides,,重排DNA(2)合:這是該實驗成功的關(guān)鍵步驟。完全利用人工拼接出一個較長的顯然技術(shù)上還達不到,Ventor采用了十分取巧的方法:利用酵母菌的自組裝功能,將基人工合成好的轉(zhuǎn)入野生型的M.capricolumsubspeciescapricolum。隨著細菌,原有的與人工合成的可能會分離從而使一些細胞只含有人工合成的(4篩:利用選擇培養(yǎng)的方法淘汰野生型細菌,最后剩下含人工合成的并能正常表達蕈狀體性狀的細菌??偟膩碚f,沒有涉及人工地搭建生物載體,也沒有復(fù)雜的拼接方法,Ventor簡明的實驗得到同樣十分精煉的結(jié)果:產(chǎn)生的新細胞不但具有蕈狀體的性狀, 拆:測出Mycosmamycoides的組序列,以此為藍本,人工合成該序列:這并不是完整長度的,而是1078條平均長度為1780bp的片段。這些片段與天然組序列存在一些差異:去除了一些不重要的,添加阻斷的序列,有27處單核苷酸多肽性和用于區(qū)分天然序列的Watermark。DNA,1010kb(109。間體由于片段過大,不能像10kb一樣在大腸桿菌中穩(wěn)定傳代,因此(1010=10kb③全的合成為了最合成出效的序,要將100kb進行純化,該步較為雜,分為個階段:首要裂解母得到微克級的100kb,用核酸切酶處理并通過陰子交換層,獲得初步純化;為了消除酵線性DNA干擾將初純化的物與融化瓊脂糖合,使凝固的脂糖纖穿過環(huán)質(zhì)粒,后該線DNA可被泳除去。純化完成后采用FIGE法分純化并將三次導(dǎo)入母原生中進行拼接同樣采多重PCR的行篩選最得到11個增子。這11個擴增最后拼成了 kb度的完的序列。④甲基化修飾。由于天然的供體組被甲基化修飾,因此,合成的也替:合成的導(dǎo)入受體細胞中,受體細胞不斷增殖,原可逐漸被分離,即可用人工完全替換掉原 在該過程中,Ventor團隊構(gòu)建的半合成組發(fā)揮了重要作用。一旦存在嚴重突變錯篩:可以觀察到,在一些受體細胞中出現(xiàn)了Mycosmamycoides的性狀。為了在多重PCR擴增中,如果4個Watermark都被擴增出來,證明是合成的新“體。是人造細胞成功反映了Mycosmamycoides的生命體征。就已經(jīng)為組技術(shù)貢獻了大量寶貴的經(jīng)驗,比人類組計劃要超前。Ventor和他的團隊同樣為后人的轉(zhuǎn)染與拼接人工合成等技術(shù)革新提供了指導(dǎo)如果說當(dāng)年克隆羊的技術(shù)是一場科學(xué)的話顯然該實驗又將掀起一次研究的軒然大波。人類不僅可以測出的序列,知道它們的功能,甚至還能夠從它們的功能出發(fā)來合成目的,創(chuàng)造的產(chǎn)物現(xiàn)在相當(dāng)于動物體整個都由人工合成人們可以在上面獲得任何想要的性狀,可以人工合成生物的組,來讓它們地球……人們可以在這上面有無數(shù)的構(gòu)想,主義者認為這是違背了神世界上的有信仰的人十分多這樣會不會在他們之中引涉及到相當(dāng)多的問題。Nature和Science更傾向于把Ventor合成的這一細胞稱為“人造細胞”而造生命,對已知的人工,尚未涉及對的人工設(shè)計。也就是說,合成的

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