基因診斷培訓(xùn)講義

第16章基因診斷王慧蓮概述幾乎所有的疾病均在一定程度上與基因有某種聯(lián)系，基因的改變，或是疾病發(fā)生的原因，或是疾病發(fā)生的結(jié)果，或是疾病發(fā)生時的伴隨現(xiàn)象，而這些現(xiàn)象的出現(xiàn)是有規(guī)律的。因此，可以通過檢測基因的改變來反映疾病的發(fā)生和發(fā)展，療效和預(yù)后基因診斷：是以DNA或RNA為診斷材料，通過檢查基因的存在、缺陷或表達異常，對人體狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過程。基因診斷經(jīng)歷了三個基本發(fā)展階段第一階段：２０世紀(jì)８０年代，以DNA分子雜交為基礎(chǔ)，通過限制性片段長度多態(tài)性性（RFLP)分析進行．第二階段：應(yīng)用PCR技術(shù)．第三階段：應(yīng)用基因芯片技術(shù)．第宴一護節(jié)揮基米因營診鐮斷王的情基廈礎(chǔ)災(zāi)技燙術(shù)一.基犯因池診湖斷甩中牧常寸用倍的尋幾夠種別技傘術(shù)（蹈一悄）婦核樸酸戴雜丹交（咽二沃）P謠C終R（三孕）D公N尿A序跌列頓測逢定（阿四旁）D衛(wèi)N安A芯般片筑技弟術(shù)(一)核造酸垮分碰子踢雜沾交岡技糧術(shù)(烤1洲)方蒸法:以賤已找知析順恐序壘核恒酸貝片嶼段繁作練為砍探陜針,經(jīng)自放攔射似性畏或巡壽非摸放羅射胳性油物駐質(zhì)殊標(biāo)況記粱后,再撐與截未源知銀的烘目愛的匆核蹄酸眼片陡段定進龍行現(xiàn)雜厲交暑反練應(yīng),分英離婦已臘雜赤交悶和鐮未快雜文交爸的治標(biāo)曾記棗核僻酸儲鏈,通咳過捐標(biāo)中記漠信射號述的鑒檢拔測通就足可久以推對黑未吼知糊的圣目銷的胸核凈酸發(fā)鏈跑進鈴行瞧定黃性呈、芝定艱量便分氏析.(2敲)幾能種檢不芝同雷形飼式塌的澆核款酸男分送子溜雜劑交a神.街S走o崗u鬧t個h稈e傲r場n印稅跡(府s伶o突u舌t酷h繩e奔r批n織b辱l肌o陜t發(fā))雜存交:用險于D可N怪A的處檢擱測氣，察可土用表于秋基畝因露的掀限按制棉性廁內(nèi)冠切渣酶竹譜蕉分殿析見，吊基仔因印突鉗變說分顏析爪等飄．b囑.羅N駐o遼r譜t高h襯e菠r滴n印微跡(畫N咱o翼r亮t喉h暗e蘋r津n君b微l假o手t惑)雜前交:用房誠于R留N許A的原檢鎮(zhèn)測陽，疾能嚇對幅組序織敗細(xì)誕胞搬中詳?shù)母揽俁向N關(guān)A或m浙R西N養(yǎng)A進俯行琴定渾性墳和圾定頁量西分慰析逐．c煮.斑顆點劃雜唇交糾（d麥o膨t見b終l因o薄t愧)秧:既抽可妹以顏檢膠測D糟N漢A也幅可鮮以溪檢紐奉測R祝N睛A激,用撈于川特槽定孫基檢因通及鏟其閘表霸達抹的躬定午性夠和塊定把量事分槐析酒．懷方賢法閑簡讓單仿、柔靈冊敏害；蠅但鞠特服異那性呢低栽．原儀位射雜則交煙（i倍n奮s扒i間t炒u史h如y舍b挪r才i扣d煙i柔z碗a維t碎i切o疼n將)具:是酸細(xì)稱胞維學(xué)軟技漆術(shù)削與巡壽核抵酸固雜惜交遼技羞術(shù)刑結(jié)幼合薪的奏一少種說核溫酸巧分癢析鞠檢源測赤技依術(shù)外．稀可寫分顫為D義N涌A原行位司雜梅交飲和R閃N法A原本位龜雜頁交,用靠于釀檢榆測都染悟色象體圣中案特百定怠的寄基打因禁位猾置粘，疲用呈于艦染仆色妹體尖疾籃病妻的駁診指斷置．分吧類:記①玻展片奴原胡位據(jù)雜娃交:如謹(jǐn)中溪期喝的缺染港色剩體慌和拼組織堪切炒片.②膜晌上孩原敘位債雜擇交:將企菌則落石或廁噬愚菌豎斑番影伙印撇在慎尼龍慌膜(如偽硝獸酸蒜纖確維常膜)原沉位年雜饑交反的貧鏡智像流圖(二)虛P篩C濃R技監(jiān)術(shù)茶在原基叔因得診天斷息中訓(xùn)的夜應(yīng)枕用（白１囑）園等寫位廣基載因矮特品異燙性廟寡垮聚休核鹽苷他酸掠（a示l金l土e貪l趨e孫s釀p前e采c豪i念f賓i異c浙o白l盯i編g擠o惠n糖n竟u捧c桂l謹(jǐn)e分o帥t屋i即d效e具,悔A嘴S傾O欄)探呼針罰斑碧點棋雜塌交仙：P優(yōu)C槳R擦-款A(yù)葵S暖O該嫩方乞法致是診名斷棕已衡知暗點扁的塊突壺變特：需耽分站別壩合爹成昏野肆生才型要和摔突寸變盾型換探禁針昏．霧在雕基飼因動診共斷威時跟，己只培需竊用P號C序R擴社增咳受高檢炸者沙目臭的D坑N順A片稻段切，講再令分播別鑼與抄上嚇述攜探損針狀雜佳交御．耀雜貝交筆的引結(jié)孔果肅有處如陽下除幾峰種問情區(qū)況史：①鍛P蜜C南R擴獻增刺產(chǎn)賀物標(biāo)與球正抗常排探慣針推雜況交藥，校不班與甲突四變爸探勸針針雜槍交總-心-茂不存框在接這央種端突除變蛾；②只皇與閥突再變買探剪針嗎雜因交嚇-趙-潔突舒變枝基夠因艘為只純途合鞠子扎；③與銅正甘常牙探希針打和唐突燥變土探膚針柴都為可帥雜掠交雷-嚼-組突耗變而基妖因叔為流雜允合董子聞；④與揮正艱常窯探緊針巖和消突障變責(zé)探昂針瓶都蛇不聚能清雜吹交鼠-偶-礙突衡變攪基安因弓不代屬薪于倘已小發(fā)現(xiàn)忠的柏類列型（老２耕）斧單布鏈催構(gòu)燃象賓多劣態(tài)膽性街（s檢i良n銷g雖l斧e那s宿t套r昂a尚n哪dc工o烏n都f姐o跪r督m銀a訪t著i鼓o容n亞p愛l黎o帖y常m充o抵r撇p完h硬i罰s導(dǎo)m愈,半S義S感C擺P倍)分柿析是酸一亂種籠基決于罩單自鏈D腥N盡A構(gòu)訂象穗差哲別針來港檢孝測星點垃突榮變爹的被方墾法償．D蹄N胡A變累性狐形噴成盤單方鏈耗，負(fù)在驚中敢性桶條極件纏下謠長譽度沾相猛同置的宣單室鏈他指D淹N協(xié)A退,如她果后堿慚基鳴組臨成森和(或)排磨列慎順賀序凱不衰同,形講成戰(zhàn)的蠟構(gòu)墊象老就親不量同,這頂樣貪就敘形而成裂了農(nóng)單森鏈株構(gòu)慚象酒多翼態(tài)貿(mào)性.這場些族分衛(wèi)子案在有非權(quán)變繡性P村A恥G譜E中廊電洋泳這中故表螺現(xiàn)須出饑不向同拿的賣遷披移莖率.S若S蠟C塞P特輔別礦適擱于歐分庫析待小銷于奪4雀0裳0b外p的P毅C澇R產(chǎn)鋪物臟。倘據(jù)校認(rèn)塌為S侮S奶C簽P可裳以姨區(qū)夕分絹1b邀p的愈差嘗異P赤C比R惰-縱S犯S弦C濱P分金析縣不伙能想確挑定膀基碗因蕩變?nèi)愅系木蛢?nèi)話容逮，磨因噴此占電父泳騙后臣結(jié)酬果姻有舅差旦異太后敲還所需蠅進采行荷測艱序錘分亦析灰，喝確帖定灑變斗異合性府質(zhì)(業(yè)3麻)限饑制洪性緩片顆段汁長男度臘多揮態(tài)輝性幅（r違e殼s情t滿r討i資c場t征i數(shù)o炭n鼓f慢r爛a拼g裹m悔e聲n薪t凳l承e滋n潤g聽t績h鐮p更o摸l按y絮m蠅o鞭r(nóng)雞p畫h粱i痰s支m北s誦,掘R偽F往L話P美）分禾析基獅因瞇突普變爛導(dǎo)朋致兇的閑基遭因肆堿修基斤組維成錄或(和)順需序招發(fā)賄生識改藝變,會求在割基糠因繡結(jié)債構(gòu)曠中奮產(chǎn)盜生窗新極的皺限臂制當(dāng)性趟內(nèi)沈切洪酶遙位望點拾或謹(jǐn)使糞原污有劇的楚位俱點吧消賺失.用懸限子制晝酶胳對塊不進同陣個箭體予基案因深組方進掉行顫消躬化妹時摧，聽其厘電晌泳藝條金帶娛的何數(shù)兼目預(yù)和截大扶小雷就環(huán)會研產(chǎn)殺生陸改挨變薯，花根旅據(jù)距這枯些推改面變疑可生以序判型斷筐出制突爭變須是餓否南存左在.限艱制爬性蝕片組段罵長矮度昏多宵態(tài)利性R溫F迅L辯P茶s谷(墻r旋e尊s煮t殊r居i超c享t凱i目o怒n舊f脂r劍a征g燈m熟e掠n冒t療l票e予n病g駱t綢h撿p既o灘l壇y姨m戰(zhàn)o飯r須p鳳h計i少s抗m箏s與)樣品一樣品二1咳9級8饅7年,前H袋.猴D耀o章n翅i武s厲-無K椅e寄l聾l價e輕r等編人設(shè)以R籮F木L極P為驗遺擋傳狡標(biāo)迫記協(xié)繪恐制床了吃第鑰一仁張賭人類類墳遺故傳縱圖飯譜(夏4與)導(dǎo)P坦C深R炕+變駝性拆梯躲度刷凝巴膠讀電誦泳槳分搜析吧技旺術(shù)雙他鏈D皆N員A在舌一省定鄉(xiāng)豐濃須度營變訂性鉆劑(尿扁素,甲撕酰攏胺)作診用亞下,會至變抱性奶而促解泰鏈,導(dǎo)商致D讓N明A分桃子鞭電坦泳咸遷宋移佩率誼變揭化.當(dāng)素在恨不蛙同冤梯縱度忽濃誘度漢變返性版膠掛中繪電里泳敗時,D屬N讓A泳古動栗到腎變宵性頂劑市濃謙度撿能劃使D惑N卸A發(fā)冬生聞變地性體，D磁N饒A開甜始覆解閣鏈珠，各從愿而搭不幼同再的D俯N竊A片早段單會鍋形有成痕不魄同鳳的匪遷役移億率遍條柿帶岸．優(yōu)筆點：鴨可窮靠叨，信檢飄出慨單錫堿市基伶突鍬變簡率江可恨達雅９喝５淋％上．缺個點：儲富李含等高醒熔顏點G涂C區(qū)白時斧，桿則郊難鉗以扁檢唱測幟出安突變歇．（妙５陷）帖用報甲光基紹化淹特捎異凝性P默C錫R（m獻e造t燃h藝y編l匪a答t牛i疏o味n砌-僵s忠p判e丹c攻i肢f抱i辦c湯P脹C礦R擦)進印行某分碰析在P郊C州R擴純增羊前進，虧先詢用恢化川學(xué)產(chǎn)試品劑節(jié)（N士a新H棕S另O州3佳)處舅理地模攪板D純N垃A效,將票所姥有準(zhǔn)未濟甲制基孤化繡的際胞趟嘧抹啶滲（C顏)轉(zhuǎn)陜變護成咽尿游嘧呈啶(說U確)，稈在P急C翠R擴莫增售時爆，U與只引微物臨中A配妖對窮；專而C弓p臥G島攔上鴨甲扣基欣化叛的C不廈受練影版響飄，蕩在羊擴芒增宴時粉仍微與G配叨對,基暑于誘這箭種嗓差畫異胡可蓋以沿進煩行迎甲恐基螞化嗚特樸異饞性P心C右R．設(shè)愈計約一董對甲法基稼化鮮特旅異姥性雜引磁物頭（住引揪物妥中G結(jié)幫合斬模畜板芽中C齒)曉;和長非呈甲帳基壟化窩特秤異姐性趕引漂物耳（柱引碼物該中A結(jié)醒合杯模拼板料中U注)斃,通乳過P腿C玻R擴姿增蹦就茶可介檢熱測掩出帝甲撿基誼化深等倘位賞基除因儉化確學(xué)牌修眼飾成的D梢N反A序遣列桑和節(jié)非轟甲崇基光化著等申位權(quán)基腦因灣序針列范．用嫁于底一恰些惡疾榜病勝和土腫走瘤淘的泛基黎因逆診臟斷樓．(胳6麗)采郵用P棚C微R技關(guān)術(shù)漂對更靶嶼核首酸啊進精行績定捏量買分序析定吉量P耀C剖R帶(鎖q液u改a窗n桑t像i翅a扣t黑i促v革e驕P伸C吩R削,漿Q阿-津P紐奉C背R夏)吳:就授是壯對鵲靶蠶核固酸贈分捷子嚼進慮行疫定桂量撈分憶析貞的拳技況術(shù).根夠據(jù)P紡C腹R擴片增浴指葉數(shù)田增謹(jǐn)長寬期壞原槍理拘，粗理亭論群上喬擴圍增廉產(chǎn)恩物銹累課積何分腹子償數(shù)N烘=嶺N丑o懂(墓1赴+凱E期)宵,其浩中E是基指潔每侮次鍬循貼環(huán)鞏中緣瑞參疤與例復(fù)螞制疑的謹(jǐn)模南板害數(shù)驕與薯總瘦模闖板校數(shù)膠的橋比屆率.通筐過N值淺可麗求軍出N桿o竭.但P態(tài)C擇R擴抬增信時劫平獅臺摩期(蹤蝶1薄5舅-筋2蒸5暈)的慈出喚現(xiàn)血會刃影煙響小測綁量稀的沫準(zhǔn)鋤確是度.定碗量P顏C茂R的下策砍略乏和綱方眉法家較眨多.na推.通腎過韻測塊定P戒C刻R產(chǎn)欲物照量方嬌法:對朝已水知殘量叔的鈔靶D姿N掀A進材行亡系酒列咱稀喉釋,比嫩較映待炮測偉樣貍品棉和奔已朱知乘系攝列奴稀牛釋舌樣曾品扛的P屠C炭R產(chǎn)概量,還乒可惰對勝未嚷知慶量絮的恒靶D太N酬A進辜行滅絕狹對綿定霧量.b抗.采儲用之極提限方稀拳釋妹法而對要靶億核紙酸礎(chǔ)進香行條定隱量轟分斑析:方案法:將經(jīng)待鳳測D果N邀A標(biāo)突本今進抖行棵倍饅數(shù)緒稀紐奉釋,直揀至紛擴餐增任不類到糊靶廟基記因炮的牌稀遍釋講度,用點稀射釋廚程舌度賢表仔示醒啟和始額靶瓣基姻因運分角子做數(shù)區(qū)的覆相腹對治量,是座一通種說半濟定煉量闊方販法.c蝴.采滿用迎非公競真爭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泰些陵與路人萍腫總瘤壯發(fā)脹生旁有釘關(guān)志的帶病明毒搏如:Burkitt

淋巴瘤人類乳頭瘤病毒(HPV)宮頸癌通過檢測這些病毒的基因就可以幫助診斷相應(yīng)的腫瘤.EB病毒四恐.昂通呢過稍檢梳測攀腫塘瘤進標(biāo)搭記塑物王基發(fā)因礦或m樓R鍬N狀A(yù)診占斷廢腫機瘤腫爭瘤擺標(biāo)收志歡物（t訓(xùn)u棵m走o芝r死m(xù)妨a隆r史k盞e真r瓜)是孟由薄腫育瘤濕組浴織言細(xì)痕胞乳產(chǎn)禁生隸的氏，偶與腥腫拴瘤術(shù)形斥成皺和竿發(fā)兄展察相殘關(guān)梅的蜘物毒質(zhì)拳，尖包矩括熄：鎮(zhèn)腫涉瘤技抗按原丙，暈激板素民，企酶深和封同雅工走酶美。宗僅短存睜在輔腫胸瘤