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現(xiàn)代食品檢測技術第二章紫外-可見分光光度法LOGO第一節(jié)紫外可見吸收光譜分析基本原理ξ1.概述紫外一可見吸收光譜:分子價電子能級躍遷。波長范圍:100-750nm(1)遠紫外光區(qū):100-200nm(2)近紫外光區(qū):200-400nm(3)可見光區(qū):400-750m可用于結構鑒定和定量分析。電子躍遷的同時,伴隨著振動轉動能級的躍遷;帶狀光譜LOGO2、吸收曲線4250300350400nmA:吸收波長;E:摩爾吸光系數(shù)1、次峰2、肩峰3、波谷4、最大吸收峰用不同波長的單色光照射,測吸光度LOGO吸收曲線v①同一種物質對不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對應的波長稱為最大吸收波長Ax②不同濃度的同一種物質,其吸收曲如以如如數(shù)南線形狀相似入x不變。而對于不同物質,它們的吸收曲線形狀和Aax則不同。v③吸收曲線可以提供物質的結構信息,并作為物質定性分析的依據(jù)之一。LOGO吸收曲線v④不同濃度的同一種物質,在某一定波長下吸光度A有差異,在A處吸光度A的差異最大。此特性可作作為物質定量分析的依據(jù)v⑤在λ處吸光度隨濃度變化的幅度最大,所以測定最靈敏。吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長的重要依據(jù)LOGO3.電子躍遷與分子吸收光譜4物質分子內部三種運動形式(1)電子相對于原子核的運動;(2)原子核在其平衡位置附近的相對振動;(3)分子本身繞其重心的轉動。分子具有三種不同能級:電子能級、振動能級和轉動能級三種能級都是量子化的,且各自具有相應的能量分子的內能:電子能量Ee、振動能量Ev、轉動能量Er即:E=Ee+Ev+ErAEe>△Ev>△ErLOGO能級躍遷電子能級間躍遷的同時,總伴V"=0B隨有振動和轉動能級間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級6和轉動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜6420純轉動純動遷躍遷y=0線而呈現(xiàn)寬譜帶雙原子分子的三種能級躍遷示意圖LOGO討論(1)轉動能級間的能量差△Er:0.005~0.050eV,躍遷產(chǎn)生吸收光譜位于遠紅外區(qū)。遠紅外光譜或分子轉動光譜(2)振動能級的能量差AEv約為:0.05~1e,躍遷產(chǎn)生的吸收光譜位于紅外區(qū),紅外光譜或分子振動光譜(3)電子能級的能量差△Ee較大1~20eV。電子躍遷產(chǎn)生的吸收光譜在紫外一可見光區(qū),紫外一可見光譜或分子的電子光譜LOGO討論:(4)吸收光譜的波長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間的能量差所決定,反映了分子內部能級分布狀況,是物質定性的依據(jù)(5)吸收譜帶的強度與分子偶極矩變化、躍遷幾率有關,也提供分子結構的信息。通常將在最大吸收波長處測得的摩爾吸光系數(shù)En也作為定性的依據(jù)。不同物質的λ有時可能相同,但E不一定相同;(6)吸收譜帶強度與該物質分子吸收的光子數(shù)成正比,定量分析的依據(jù)。LOGO第二節(jié)紫外可見吸收光譜與分子結構的關系電子躍遷的類型有機化合物的紫外—可見吸收光譜是三種電子躍遷的結果σ電子、T電子、n電子。HEπLπ分子軌道理論:成鍵軌道一反鍵軌道。當外層電子吸收

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