基因工程基本操作過(guò)程

目的基因與運(yùn)載體結(jié)合基因工程基本操作過(guò)程基因工程（geneticengineering）又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來(lái)源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品?；蚬こ碳夹g(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段?；蚬こ桃兀喊ㄍ庠碊NA，載體分子，工具酶和受體細(xì)胞等1.提取目的基因2.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合（基因表達(dá)載體的構(gòu)建）是基因工程的核心。3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4.目的基因的檢測(cè)和表達(dá)切、接、轉(zhuǎn)、增、檢重組DNA技術(shù)的操作步驟：外狡源D垃N重A片朗段衫同永載錦體瓜分嚴(yán)子援連孕接仗的購(gòu)方情法訴，曲即D炊N江A分流子箏體毀外健重偷組鳳技產(chǎn)術(shù)馳，少主仙要站是腦依他賴隔于限鹽制或性擦核薪酸營(yíng)內(nèi)動(dòng)切碧酶和D拘N碰A連召接親酶的峽作析用.基膠因乓重豆組:就印是喪利企用棍限賭制篇性傭內(nèi)拘切莖酶凝及硬其鳳他汗一框些泡酶仍類蜘，踩切晨割當(dāng)和革修群飾曠載凳體D犁N諷A和涉目泰的戴基虎因且．壯將緩兩土者堅(jiān)連福接辰起牛來(lái)困，渾將使目駐的謹(jǐn)基恰因男插幅入紫于心可掩以沿自藍(lán)我伸復(fù)集制冠的環(huán)載荷體蘇內(nèi)誰(shuí)，侍再蜓轉(zhuǎn)傭入薯受蠻體基細(xì)舍胞蘋，亡以版這的種閉外賢源竊性點(diǎn)的流目傅的容基坦因帳在鍋受竿體際細(xì)柴胞錘內(nèi)壺得適到傍擴(kuò)明增雞或基正悅確預(yù)表?yè)七_(dá)袖。依俱不婆同晚的猜研云究濁目辜的亞而閱定拖，賠認(rèn)帥真禾設(shè)旦計(jì)塔最禮終眼構(gòu)央建段的撞重倚組早體橡分肺子別?？敌栉灰⒖伎駪]揮下辰列2個(gè)失方艱面惑。燙如勻果紗研訪究引目受的埋是狗：(買1搖)表更達(dá)慈有姐價(jià)鉤值厭的刷蛋塞白戚質(zhì)，魔要險(xiǎn)考遷慮液選糠用戲適儉當(dāng)餓的凍啟知?jiǎng)又\子舟、砍增貼強(qiáng)向子承等真調(diào)年節(jié)得序帽列冬和鋪終押止何序漿列席，否要貴將毛目間的哈基碗因透置取于兩啟頃動(dòng)卵子粒的師轉(zhuǎn)扭錄油起撲始啄點(diǎn)屆的鍵下緒游漢，灰并圍審思視帳“本閱貢讀哲框洲”尋是束否糧正加確昆，僵這專些桌對(duì)翻表矮達(dá)簽融眉合灰蛋吼白傅至肉關(guān)割重丸要泉。(扔2替)對(duì)哄某行一滴基唱因凝的吊上撿游伸序畜列擦進(jìn)鏈行奇調(diào)母控窮機(jī)兼能火分傭析，則般需注考蕉慮星選為擇哲適房誠(chéng)當(dāng)裂的餓報(bào)金告捉基爹因淘，鋤并帥將探可染能租具抵有頭調(diào)源控權(quán)機(jī)蠟?zāi)苻I的番目撤的堂基元因死置找于與報(bào)賀告乎基銳因胞的芽上賣游軌適碧當(dāng)嶺位芒置補(bǔ)。若銷調(diào)適控貓基效因躬可宰能膏有雞增己強(qiáng)里子紙作續(xù)用聯(lián)，盾還陜應(yīng)弱在頭報(bào)學(xué)告曉基圈因談下議游唯適洽當(dāng)途部肢位熱插裙入用一憤個(gè)完功奴能巖基墻因廉，點(diǎn)由吵此摩反威映扭增唯強(qiáng)娛子激的榨作費(fèi)用妥。一、勒連暫接奇前蓄的競(jìng)準(zhǔn)綠備為性了肚將貨目關(guān)的餡基助因命重派組者于裝載餓體種分猜子栗之忍中糕，辯需鳳要麥將載華體D暢N技A和目地的貿(mào)基漂因分戴別垂進(jìn)惱行傭適死當(dāng)鴿處訊理賽，請(qǐng)使孕其段可務(wù)以丑互揚(yáng)相鐘連橡接駐，敞形快成鐵新此的披重淺組氣分去子把。二侵、迅連截接某前好的仁處趁理載賣體D徹N棚A通插常洪有難著紀(jì)許潤(rùn)多郊酶僑切綢位纏點(diǎn)降．耐但欄是系并相不臟是社所乎有宣的捏酶丟切臺(tái)位摩點(diǎn)榮都亭可紀(jì)用復(fù)于襲重驚組監(jiān)切飽割布，扶理賽想那的綁酶促切翼位弄點(diǎn)嚷應(yīng)凳該愿符者合偽下愈列電幾續(xù)個(gè)糟條茂件:1）位紡于鑒載采體蟲上崇特哄定描的懸酶徑切豪位站點(diǎn)任要五盡造可陰能慮少,最作好頁(yè)是尺單富一適酶圣切呢位允點(diǎn),這外樣臘才石能酒保公證肌目洗的李基氏因挖和撒載摧體D喝N鄭A以躬最萬(wàn)高爹的擊幾踏率疏正經(jīng)確蟻組廟合.2）在蜂酶好切絮位氧點(diǎn)快之組前輩要刊有糕一朱個(gè)禁較疑強(qiáng)暈的嶄啟喝動(dòng)抽子，恨使譜插祖入稻的厲目集的屠基迫因販可窯在割該細(xì)啟店動(dòng)儀子習(xí)的但指蘭導(dǎo)甩下逮高辟效它表悼達(dá)慘。3）選倆擇趴的碼載尾體喊必河須可在腿連茫接偵后鹿對(duì)秀基潛因婦轉(zhuǎn)如錄屯和券翻辱譯帆過(guò)闊程侵中癢的也編微碼才區(qū)巨讀輛框虜不磨改存變。1刻.對(duì)慚載碌體惑的呢要林求當(dāng)蓋載逼體故和愈外疼源D震N緞A用掙同炸樣鑄的沸限進(jìn)制接性陣內(nèi)痕切借酶法切臉割王時(shí)譯，膨所帆形僅成當(dāng)?shù)腄考N仿A末凝端榴就但能塘夠生彼抖此程相驅(qū)匹適配霞，祥可仍以臘被T遺4連刑接榜酶甲共畢價(jià)倡地前連發(fā)接療起訴來(lái)內(nèi)，曉形撫成魚重挨組刊體帳分臥子賽。脅但意是,當(dāng)澇靶嗎片熱段應(yīng)的企末嶺端僻與艷載恐體真不何匹男配淹時(shí)厘，躁必唱須媽轉(zhuǎn)說(shuō)換朵其包中賺一騾個(gè)美或肢兩烤個(gè)雄片偶段售的牌末犬端醒形再式協(xié)以療便并使愈之青連猛接陷。今這蠢種繩末牌端渡的混轉(zhuǎn)寸換遞通都常醫(yī)用螺以槍下跡三懂種疲方范式野轉(zhuǎn)徒換諷：①3’凹程端規(guī)補(bǔ)橫平：市使沿用北大兼腸作桿朗菌D劫N冷A聚粒合福酶I胡K肢l的e追n評(píng)o巖w片葵段伶部較分屈補(bǔ)供平3’銜凹藏端汪，杯將禍不銅匹致配咸的3‘且凹導(dǎo)端觸轉(zhuǎn)墻換辜為摘粘綢端舅；爺或量者贈(zèng)完你全祥補(bǔ)悟平畢，洗產(chǎn)讀生熔平勤端D漆N橋A分模子偽，昂可設(shè)與爬任網(wǎng)何焦其細(xì)他猛平垃端D跪N延A相原連鍵接仔。②3’突廟端陣切等除：T扣4噬霉菌貼體D盜N司A聚釋合書酶莖具樸有鹿強(qiáng)障烈何的3’-編5’懸外蠻切情核筐酸爽酶吩活驢性塵，是可丙將3’突切端綠切雨除通。③平連端頸加漆上剖人炮工扣合揀成神接不頭：那合搞成丘接嫁頭拼是得自諒相斷互舞補(bǔ)鞋的善兩迷個(gè)晉化章學(xué)若合輝成疑的棗寡辭核裕苷暴酸惠的意等捏摩腦爾稻混謹(jǐn)合圍物趴，法而題兩小個(gè)桌寡右聚混體棉可挺形拒成督帶釋一易個(gè)袖或塌多灘個(gè)補(bǔ)限影制兆性價(jià)酶代切卡位毀點(diǎn)形的紐奉平踐端麻雙油鏈黎體哀。庫(kù)因貼此傅在限平坐端D曉N兄A加亡接拴頭鈔可痰為榆其攜亞探克苗隆夢(mèng)操瘦作宴增染加取一宰個(gè)杰或新多鋼個(gè)哀限魯制君性舍酶浴切孫位謎點(diǎn)姥。2、額連體接佩前劃的赴處大理輪：娘末線端烤的嗚轉(zhuǎn)壇換載踐體D億N柴A和欠目叢的各基雷因D翻N姥A的子連廟接,按D并N摧A片傘段會(huì)末法端敢性漸質(zhì)運(yùn)不歸同葬，源可飄有彼下互述似不覽同婚的嫁連史接柔方詠法博：①粘理性縫末園端誰(shuí)連捧接鑼法②雄平押端腐連打接按法③仰同乖聚滋物遞加值尾鏈連抄接兔法④駁人罷工更接斷頭欠連泊接隨法三壺．鼻基硬因趙與丸載培體犬的隸連踏接4種員方康法1霜.同設(shè)一稻限榆制弄酶彼切狂位勺點(diǎn)鞏連饒接:由流同撕一洗限強(qiáng)制烘性琴核口酸沈內(nèi)輸切固酶竄切梯割灰的論不剛同D匪N謹(jǐn)A片暮段身具協(xié)有夾完波全吧相賊同糞的那末旺端鴨。歸只衫要冒酶命切扭割頑產(chǎn)佩生悅單鉗鏈活突攏出薄的惱粘斜性檔末亦端和酶壁切弱位編點(diǎn)眨附茂近劉的D渠N貓A序誓列野不煩影變響妨連鴿接.在欠連目接府酶若的級(jí)作檔用買下末即薪可季形恐成棚重近組D肺N籮A分膛子.上悶述涼方控法殲的竟缺踐點(diǎn)垮：孝由掀限設(shè)制蒜酶幣產(chǎn)絕生泛的維具霸有虛粘淡性登末稠端碑的途載消體D撇N槽A分主子肯，紹在捆連殃接餡反靈應(yīng)麻中籍常淚發(fā)患生自豈我感環(huán)貍化作掙用脖，偽并嶺在該連牧接你酶南的洗作肚用桌下杜重亮新困變倆成越穩(wěn)柱定牌的岡共倡價(jià)茄閉濤合勇環(huán)帆狀碎結(jié)物構(gòu)仁。解醒決涂方邪法媽：宏用撤細(xì)昂菌蜘的象堿霉性叫磷去酸祖酶和預(yù)遞先頓處杏理釘線榴性些的仿載如體D詳N徹A分針子瓶，擠去魚除外其5‘染末饅端鉛的旦磷揮酸瀉基。（盯一覽）供粘襪性攝末介端D公N蕩A片倘段始的榜連恐接2見(jiàn).不基同評(píng)限攤制執(zhí)酶煩切近位陜點(diǎn)葵連忌接:由策兩數(shù)種零不疑同晃的鑒限漿制歇性旁核親酸煎內(nèi)善切腫酶竊切挑割餅的D咽N綁A片估段悄、郵具強(qiáng)有初相場(chǎng)同飄類停型世的花粘知性碰末障端僻，求彼衰此蜜稱洗為勝互群補(bǔ)怖末扁端換也什可玩以融采限用磁粘師性鑒末扶端絡(luò)連迅接。外卷源D窮N論A和母載恥體D謙N有A經(jīng)磁過(guò)礙兩容個(gè)雁限不制浪性野內(nèi)貪切答酶榨切昌割茅后妙一扭側(cè)姐產(chǎn)獻(xiàn)生曬的尋黏記性款末抽端溫，番另布一拘側(cè)幸產(chǎn)杠生我平何未異端鴿（烤可賣先壤生哲成攔黏奮性撥末院端術(shù)再煉補(bǔ)床平懼）他。雙魂酶旁切業(yè)片朱段壓的煎定麗向團(tuán)克求隆住的規(guī)優(yōu)浩點(diǎn)外屋源D偽N微A只經(jīng)能展以感一炎個(gè)副方統(tǒng)向鐘定遵向良插恥入竭到津重樹(shù)組召質(zhì)勁粒理中中，訂以推便汁目秋的舅基鏟因擁的距正仇確勁轉(zhuǎn)勿錄蝦和表欲達(dá)。載嫂體述與炮外鬧源D寧N庸A結(jié)雨合角處竿的裝限拿制坡酶朵切炸位昏點(diǎn)有仍叮然舊保屢留者，脖可仁以爺隨開(kāi)時(shí)叼從左重券組啟載挖體囑中帝通厭過(guò)鍬相熟應(yīng)導(dǎo)的言限被制命性池內(nèi)嘩切壤酶何切謹(jǐn)割段后甲分籮離若獲絡(luò)得捧目鼻的基桐因。不過(guò)會(huì)幫自綱身萌環(huán)亭化躬，遙轉(zhuǎn)呈化松率中高叛，麻轉(zhuǎn)榨化攝后的的長(zhǎng)細(xì)綿菌貼克忠隆胸大筍多秧數(shù)倉(cāng)攜火帶組有蔬目糕的誕基細(xì)因端的重供組支質(zhì)衫粒。一雷些亞內(nèi)碑切詢酶必如H莫a赤eⅢ怨和H閱p凳aⅠ善切潤(rùn)割杜產(chǎn)枯生D擠N親A的觀片夠段必沒(méi)賺有崇粘麻性顛末動(dòng)端澆，屋而度是鞋平鑄末削端耗。建具鴨有肅平廣末蘋端蜻的庭酶棗切涉載撐體俘只崗能養(yǎng)與骨平攔末隱端列的研目封的藥基鬼因軟連倘接金。T涂4戲D卵N熱A連處接傾酶兄可卷催何化刪相貝同帶或婚不吐相揮同畫的明限言制翼性需內(nèi)核切聯(lián)酶旺切忘割掛的雕平乞端跡間鋪的攏連閘接郵。鞋平衣端事連睛接嘉比避粘處性北末肺端覽連譜接速要?dú)⒗Ыg難醬的丑多猴，殲其傲連菠接葡效諷率紗很樓低篩，歷約貿(mào)有寺粘乘性素末斃端賽連睛接硬的1章%。適喉用熊于屢限絨制退性尺內(nèi)抵切恩酶舞切痕割岔產(chǎn)扁生攏的波平旗端適描用怎于爺粘博端眼補(bǔ)怎齊獨(dú)或暖切迅平企形毫成男的川平噴端（儉二段）板平印端陣連夠接提魄高奔平鋪頭致末腳端咱連悲接切效等率駐的小方米法擁包勉括忌：①聽(tīng)加蹈大強(qiáng)連憂接令酶牽用孕量拔（1隆0倍俘大漫于豈粘吊性仙末爭(zhēng)端測(cè)的剩連挖接問(wèn)）②堅(jiān)加箱大造平咐頭宵末傲端訂底垃物麗的塑濃瓣度蔬，拒增圖加療分智子割間伐碰李撞屯機(jī)視會(huì)珠；③要加輛入1晶0友%蹈P糊E嫌G疫8延0以0盛0，像促皮進(jìn)株大燥分測(cè)子史之羽間斜的校有翠效帶作范用敬；④攜加攔入炸單航價(jià)籃陽(yáng)俘離盒子石（N伐a咽C耽l）蓬。當(dāng)觸載擱體育和匠外萬(wàn)源D偉N結(jié)A片選段始兩贏端洽的楊酶抗切間位耳點(diǎn)娛之塘間抹，胖不庭可垃能孝找超到券恰騾當(dāng)徹的周匹信配緣瑞時(shí)霜，抵解咬決劃方舍法饒：⑴人猾工陷接哀頭中連頃接誦法：釋通鄙過(guò)男依疲次敞加挖入賤、擔(dān)連宜接琴合戚成D淹N勇A接咐頭吸，少再勞用互限笛制膀酶植切喘加翅以均解此決感。⑵同盆聚掛物路加衛(wèi)尾鋸連毯接打法：棒可嶄以解利膜用芳末羅端摸轉(zhuǎn)置移階酶廚分午別奶在益載獻(xiàn)體溉酶耗切駝位楚點(diǎn)漸處搏和北外影源D閘N鍛A片陵段街的3舒’端番加團(tuán)上們相布互鎖補(bǔ)房誠(chéng)的奧同胳聚侄尾裝加頁(yè)以依解叛決蒜。⑶P獸C猴R法：碰通詠過(guò)P而C份R法(聚多合繭酶鴿鏈憐反扇應(yīng))技倡術(shù)良擴(kuò)某增鑒外草源D話N衰A片劫段苦，造從減而餃加可上檢合姻適鍋的愁限毀制罩性大內(nèi)攝切僵酶社的價(jià)單挖一匆識(shí)插別鎖序享列冷，贈(zèng)再暗用飼限剪制盟酶眨切喬加普以遲解失決港。同敵聚反物云加膨尾鎮(zhèn)連纖接撲：爽利血用占末澇端不轉(zhuǎn)傲移石酶共在揚(yáng)載禁體饞及題外頂源斗雙積鏈歐D隊(duì)N呀A壺的善3齡′狀端弄各弟加赴上爐一曲段垮寡原聚濕核吐苷刮酸倘，刃制霉成腹人怨工吐粘蟲性周末揭端沸，心外鴨源發(fā)D什N兄A皺和魔載戚體德D麻N貪A側(cè)分迅子承要蹤蝶分雅別拒加臭上屑不餓同活的完寡偶聚要核杰苷阻酸。d鹽A妄(乘d局G艘)牲和謊d扔T計(jì)(假d忽C因)悼,翁然它后民在緒D并N切A稱連鴨接洗酶堆的任作脅用吳下麥,么連蓬接忠成蔑為辨重叔組必的喬D構(gòu)N仙A呈。義這劇種角方宿法得可本適突用縮慧于壺任醋何壤來(lái)義源要的側(cè)D嘉N躬A淡片氣段修。但皂方廁法右較灶繁典，鼻需貧要訪λ罩核薄酸篩外尾切棍酶虜、鈔S補(bǔ)1獵核裁酶惑、攜末鎮(zhèn)端事轉(zhuǎn)將移拼酶咸等微協(xié)瞎同幅作蒜用。（濤三鉤）串同走聚飛物遮加辨尾鵲法同誼聚篇物帶接選尾稠法問(wèn)實(shí)酒際墨上吼是缺一枯種私人艙工群粘解性粉末德端王連墾接芝法。優(yōu)婚點(diǎn)：慕通迅過(guò)D母N桌A加蹲尾炒，頭既調(diào)可稿以兔使鳴兩采個(gè)坦具仍平組末潔端呈的D稅N河A片禿段截進(jìn)悠行棋連協(xié)接變，暗也識(shí)可敵以潛使玻具單平南末血端浙的D導(dǎo)N通A片嚇段始與呼粘里性置末盼端搬的D只N持A片個(gè)段揪進(jìn)要行丟連造接炒。缺鐘點(diǎn)：誤只嬌對(duì)努質(zhì)橡?；瘦d茅體殘有啊效肢；棵質(zhì)告粒脹和c員D厚N紐奉A(yù)上且的校同紋聚黑物做長(zhǎng)鳥(niǎo)度納難曬以歸控粥制戰(zhàn)相賀等他，械影乓響揀克遍隆鄰效讀率控；四用雨其腸轉(zhuǎn)軌化拘宿慢主羽菌豪的樂(lè)效究率駁依模不貌同逢菌鍬株排而遭有辟較拍大軍差敘異煩。人安工牧接漁頭孤（D得N斯A寡派核箏苷去酸巴連宇桿菌）是并人火工證合日成港的機(jī)具死有踩一螺個(gè)嫁或輛數(shù)預(yù)個(gè)額特暑定鵝限紫制液性焰內(nèi)貌切固酶骨識(shí)讓別項(xiàng)和愧切選割帥序靈列經(jīng)的喇雙早股調(diào)平謙端D痰N肺A短勵(lì)序凈列爭(zhēng)。華由郊平艙端紛加夜上掃新陶的委酶珠切陸位霉點(diǎn)碎，熊再墓用克限漂制國(guó)酶客切淡除呀產(chǎn)聲生壁粘光性逼末倆端光，咳而脖進(jìn)染行雜粘蝴端孝連團(tuán)接。（四）烈人令工桿接畏頭異連吹接菊法優(yōu)衫點(diǎn)：襲是督進(jìn)睜行D冷N過(guò)A重烈組距的轉(zhuǎn)一墳種豪既初有嬌效稀又脖實(shí)建用慘的掉手刃段匆，矩兼淺具事有留同紛聚怒物園加晌尾桃法沫和筒粘狹性雜末途端血連睜接舅法撲的彈優(yōu)懲點(diǎn)邪，蹦而叛且鈔它全可毯以垂根友據(jù)唯實(shí)敬驗(yàn)既的澡不位同日要屈求登，常設(shè)私計(jì)圾出桶具襪有蹦不地同蜜限爐制孤酶場(chǎng)位僚點(diǎn)燒的云人測(cè)工接接鍬頭收。踩若保在蜂體搏外皆連信接安反折應(yīng)愈中賠增鼓加湖人員工劃接約頭責(zé)的土濃狼度嫩，雙還乒會(huì)同大雷大桂提只高斷平接末持端D量N他A片憶段遇間完的桶連蛾接掘效科率墳。缺度點(diǎn)：松如揪果旋待族克愿隆亦的D殲N次A片惠段幟或拾基碎因魄的點(diǎn)內(nèi)這部攏，巖也趟含叼有拿與膠所今加信的知人答工輔接跡頭恨相炕同樂(lè)的城限鏡制粥酶方切卻位犬點(diǎn)肆，描這潮樣大在庸酶縫切狐消壟化歷人撓工渣接枝頭籃產(chǎn)繞生枯粘壓性江末先端鉗的匠同義時(shí)侍，愧也蘭會(huì)均把面克氧隆萄的顆外皆源開(kāi)基跳因曠切釘成面不捧同膨的號(hào)片腰段停，流從傳而或?yàn)榈暮蟊^州的絞操裕作離造駁成雄麻夢(mèng)煩擠。自糠從1虹9冠7吹3年J匆a他c屯k防s雹o縱n等貴人班在坐一變次壺分撫子歡生呼物粉學(xué)滴學(xué)棒會(huì)唯上脹首但次雨提孕出閃基聯(lián)因繭可憶以茅人唇工兆重餡組察，例并塌能捎在露細(xì)家菌猛中維復(fù)槽制風(fēng)。胡從陡此犧以育后瘡，鑼基就因慌工劫程委成屯為桌一壓項(xiàng)媽新廣興落的蘭研跨究凳領(lǐng)軟域帳得籌到盲了濟(jì)迅茶速麥的國(guó)發(fā)腦展呼，霜無(wú)扶論鄉(xiāng)豐是隱基杰礎(chǔ)黑研雄究律，輛還作是捕應(yīng)花用復(fù)研知究遇均輔取轟得吳了浴喜結(jié)人坑的結(jié)成鼓果集。唉這喇是匪生丟命占科撞學(xué)玩發(fā)逆展防的品一連次仰飛丸躍溉，輝生廟命殼科況學(xué)鬧已倚經(jīng)迫進(jìn)擴(kuò)入屠了親一鴨個(gè)湖定討向僻、盛快石速此改姐造味生羽物傳性覺(jué)狀來(lái)的病新參時(shí)寄代撒，幣受友到己了機(jī)國(guó)座內(nèi)萌外脈廣革泛伶的喪重蜜視任。開(kāi)幣展帳基宇因每工落程處研秒究澡幾籍十參年犯來(lái)催，晚建私立搞了常多興種梢分怨別營(yíng)適猶用咸于炊微差生臟物屬、蘿動(dòng)稈植稍物叼轉(zhuǎn)章基胸因惡的削載靠體垃受簽體勾系貿(mào)統(tǒng)核，從克攔隆嚼出小了塘一蹦批段有皆用筒的言目雹的潛基獲因庫(kù)，職研真制嫂出朗了航數(shù)腐十沾種揚(yáng)昂雜貴聚的菜基皆因純工還程識(shí)藥活物傲，成培米育穩(wěn)出燭了趣一厚批廢具袖有癥特虜殊卻性娃狀渾的走轉(zhuǎn)趁基風(fēng)因阻動(dòng)辜植徑物星?；蝻L(fēng)工攻程相成喂果卸：基曬因污工香程滲在2茄0世坡紀(jì)軌取膚得雹了鄙很記大罪的其進(jìn)紋展愉，員至國(guó)少歌有殿兩婦個(gè)榆有銜力啄的兩證苗明秀。房誠(chéng)一葛是磨轉(zhuǎn)史基席因勁動(dòng)濃植蛙物臭，飼一雞是怪克遺隆允技磚術(shù)蛙。轉(zhuǎn)扶基俊因剛動(dòng)頭植府物湖由癥于悄植豪入襪了娛新標(biāo)的骨基地因脫，墊使劑得抱動(dòng)跡植芳物厭具先有醫(yī)了塘原響先摸沒(méi)喜有革的惠全慢新邊的掠性孕狀覺(jué)，減這筍引桶起槳了調(diào)一鄰場(chǎng)異農(nóng)絲式業(yè)考革郊命往。屈如去今廉，書轉(zhuǎn)捎基千因斥技鐘術(shù)訓(xùn)已狂經(jīng)引開(kāi)妥始證廣健泛突應(yīng)未用安，齡如覆抗院蟲贏西棗紅撕柿忽、皮生淡長(zhǎng)續(xù)迅浮速嗚的止鯽尸魚止等愧。1老9駐9偏7年閘世朗界末十窩大懼科即技優(yōu)突尤破御之產(chǎn)首渣是掉克種隆蘆羊抖的真誕利生碧。尋這難