蘇教高考一輪無菌操作技術(shù)實(shí)踐專選課件

蘇教高考一輪無菌操作技術(shù)實(shí)踐課件固考基·雙基體系優(yōu)化研考點(diǎn)·重點(diǎn)難點(diǎn)探究考點(diǎn)研析營養(yǎng)要素來源功能碳源無機(jī)碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機(jī)物①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物②既是碳源又是能源(有機(jī)碳源)有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉餅等營養(yǎng)要素來源功能氮源無機(jī)氮源無機(jī)氮：NH3、銨鹽、硝酸鹽、N2等合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長因子維生素、氨基酸、堿基①酶和核酸的組成成分②參與代謝過程中的酶促反應(yīng)種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)依據(jù)某些微生物對某些物質(zhì)的特殊需求或抗性而設(shè)計(jì)從眾多微生物中分離所需的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品產(chǎn)生特定的顏色或其他變化鑒別不同種類的微生物用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分對人體有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具干熱滅菌法玻璃器皿、金屬工具高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基及容器比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋；②涂布平板法操作注意事項(xiàng)每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)稀釋度要足夠高，為確保實(shí)驗(yàn)成功可以增加稀釋度菌體獲取在具有顯著的菌落特征的菌落中挑取菌體從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體優(yōu)點(diǎn)可以根據(jù)菌落的特點(diǎn)獲得某種微生物的單細(xì)胞菌落既可以獲得單細(xì)胞菌落，又能對微生物計(jì)數(shù)缺點(diǎn)不能對微生物計(jì)數(shù)操作復(fù)雜，需要涂布多個(gè)平板第一次操作每次劃線之間劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者針對訓(xùn)練考點(diǎn)研析比較項(xiàng)目土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離方法利用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)利用富含纖維素的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)原理只有分解尿素的細(xì)菌能夠合成脲酶，才能在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長因?yàn)榕囵B(yǎng)基中含有豐富的纖維素，因此能夠分解纖維素的微生物具有更多的生存機(jī)會而大量繁殖鑒別在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅說明菌落中的菌體為分解尿素的細(xì)菌剛果紅染色法，周圍出現(xiàn)透明圈的菌落為分解纖維素的微生物的菌落比較項(xiàng)目間接計(jì)數(shù)法(稀釋涂布平板法)直接計(jì)數(shù)法(顯微計(jì)數(shù)法)公式每克樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×MC：某稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)；M：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：每小格平均細(xì)菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)缺點(diǎn)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落不能區(qū)分細(xì)胞死活結(jié)果比實(shí)際值偏小比實(shí)際值偏大比較項(xiàng)目對照重復(fù)目的排除非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響排除偶然因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響實(shí)例空白對照：確定培養(yǎng)基制作是否合格同一稀釋度涂布至少3個(gè)平板針對訓(xùn)練組別平板數(shù)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)取平均值甲組兩個(gè)250和220235乙組三個(gè)160、240和110170丙組四個(gè)280、200、340和160245丁組五個(gè)120、60、270、220和130160悟高考·真題演練酵母膏