2023學(xué)年度人教版選修1專題2第6課時(shí)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)學(xué)案

2023-20232023-2023學(xué)年6課時(shí)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)[學(xué)習(xí)導(dǎo)航]1.原理。2.結(jié)合試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分析微生物數(shù)量測(cè)定試驗(yàn)中產(chǎn)生偏差的緣由及解決措施，學(xué)會(huì)微生物的計(jì)數(shù)方法，并對(duì)培育結(jié)果進(jìn)展分析和評(píng)價(jià)。[重難點(diǎn)擊]1.2.能利用選擇培育基分別細(xì)菌，運(yùn)用相關(guān)技術(shù)解決生產(chǎn)生活中有關(guān)微生物的計(jì)數(shù)問(wèn)題。一、爭(zhēng)論培育基對(duì)微生物的選擇作用篩選菌株自然界中目的菌株的篩選①原理：依據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去查找。TaqDNATaq細(xì)菌就是從熱泉中篩選出來(lái)的。試驗(yàn)室中目的菌株的篩選①原理：人為供給有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括養(yǎng)分、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻擋其他微生物生長(zhǎng)。②實(shí)例：從土壤中篩選能分解尿素的細(xì)菌。③方法：利用選擇培育基進(jìn)展微生物的篩選。選擇培育基概念：允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻擋其他種類微生物生長(zhǎng)的培育基。舉例：篩選土壤中分解尿素的細(xì)菌的選擇培育基是以尿素為唯一氮源，按物理性質(zhì)歸類為固體培育基。篩選分解尿素的細(xì)菌的選擇培育基下面是本課題使用的培育基的配方，請(qǐng)分析并答復(fù)以下問(wèn)題：KHKHPO2 4NaHPO24MgSO·7HO4 2葡萄糖1.4g2.1g0.2g10.0g尿素尿素瓊脂1.0g15.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL該培育基的配方中，為微生物的生長(zhǎng)供給碳源和氮源的分別是什么物質(zhì)？答案碳源是葡萄糖，氮源是尿素。分別分解尿素的細(xì)菌的選擇培育基是如何進(jìn)展選擇的？答案該選擇培育基的配方中，尿素是培育基中的唯一氮源，因此，只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長(zhǎng)。為什么只有能分解尿素的微生物才能在該培育基上生長(zhǎng)？答案分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可將尿素分解成氨，從而為微生物供給氮源。設(shè)計(jì)比照試驗(yàn)如何設(shè)計(jì)比照試驗(yàn)驗(yàn)證該選擇培育基確實(shí)篩選到了能分解尿素的細(xì)菌？答案增設(shè)牛肉膏蛋白胨根底培育基并進(jìn)展涂布平板操作，假設(shè)牛肉膏蛋白胨培育基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培育基上的菌落數(shù)，則說(shuō)明選擇培育基確實(shí)起到了篩選能分解尿素的細(xì)菌的作用。如何設(shè)計(jì)比照試驗(yàn)驗(yàn)證所用的選擇培育基沒(méi)有受到污染？答案設(shè)置一個(gè)未涂布平板的能篩選分解尿素的細(xì)菌的選擇培育基。歸納總結(jié)選擇培育基的分類利用養(yǎng)分缺陷型選擇培育基進(jìn)展的選擇培育：通過(guò)掌握培育基的養(yǎng)分成分，使養(yǎng)分缺陷型微生物不能正常生長(zhǎng)。利用化學(xué)物質(zhì)進(jìn)展的選擇培育：在完全培育基中參加某些化學(xué)物質(zhì)，利用參加的化學(xué)物質(zhì)抑制某些微生物的生長(zhǎng)，同時(shí)選擇所需的微生物。利用培育條件進(jìn)展的選擇培育：轉(zhuǎn)變微生物的培育條件(如高溫、特別pH等)，篩選特定微生物。1.以下有關(guān)微生物篩選的表達(dá)中，不正確的選項(xiàng)是( A.用全養(yǎng)分牛肉膏蛋白胨培育基篩選大腸桿菌B.用高NaCl的培育基篩選抗鹽突變菌株C.含酚紅的尿素培育基篩選鑒別出分解尿素的菌株D.利用高溫條件篩選耐熱的Taq細(xì)菌答案A解析全養(yǎng)分牛肉膏蛋白胨培育基常用于大腸桿菌的培育，該培育基對(duì)微生物無(wú)選擇作用，A項(xiàng)錯(cuò)誤；抗鹽突變菌株具有耐高鹽的力量，因此可以利用高NaCl的選擇培育基進(jìn)展選擇培育，B項(xiàng)正確；分解尿素的菌株能將尿素分解成氨，使培育基pH上升，因此可以利用含CTaq細(xì)菌，D項(xiàng)正確。2.下表是微生物培育基的成分。以下有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的選項(xiàng)是(編號(hào) ① ② ③)④⑤成分 (NH)SO KHPO FeSO42 4 2 4 4含量/g 0.4 4.0 0.5CaCl20.5HO2100mL此培育基可用來(lái)培育自養(yǎng)型微生物此表中的養(yǎng)分成分共有三類，即水、無(wú)機(jī)鹽、氮源C.假設(shè)除去①，此培育基可培育圓褐固氮菌D.培育基中假設(shè)參加氨基酸，則它可充當(dāng)碳源、氮源和生長(zhǎng)因子答案C解析分析題表可知，該培育基成分中含有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源，但不含含碳有機(jī)物，可用來(lái)培育自養(yǎng)型微生物，A、B項(xiàng)正確；圓褐固氮菌同化類型為異養(yǎng)型，培育基中必需存在含碳有機(jī)物，所以該培育基不能用來(lái)培育圓褐固氮菌，C項(xiàng)錯(cuò)誤。方法技巧選擇培育基的常見類型(1)分別微生物所用的選擇培育基肯定是固體培育基，由于菌落只能在固體培育基上形成。(2)常見的選擇培育基①參加青霉素可以分別出酵母菌和霉菌。②參加高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。③無(wú)氮源培育基可以分別固氮微生物。④以石油為唯一碳源的培育基，可以分別能消退石油污染的微生物。⑤將培育基放在高溫環(huán)境中培育，可以分別耐高溫的微生物。二、進(jìn)展微生物數(shù)量的測(cè)定統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目方法：統(tǒng)計(jì)樣品中微生物數(shù)量的方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。常用來(lái)統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法。統(tǒng)計(jì)依據(jù)：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基外表生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推想出樣品中大約含有多少活菌。操作①設(shè)置重復(fù)組，增加試驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。②為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)。③統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌實(shí)際數(shù)目低。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。設(shè)置比照比照試驗(yàn)：是指除了被測(cè)試條件以外，其他條件都一樣的試驗(yàn)。主要目的：排解試驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，提高試驗(yàn)結(jié)果的可信度。例如，為了確認(rèn)培育基是否被雜菌污染，需以不進(jìn)展接種的培育基培育作為空白比照。試驗(yàn)操作流程(1)土壤取樣①取樣緣由：土壤有“微生物的自然培育基”之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。②土壤要求：富含有機(jī)質(zhì)，pH接近中性且潮濕。3～8cm的土壤層。(2)樣品稀釋①稀釋緣由：樣品的稀釋程度直接影響平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目。②稀釋標(biāo)準(zhǔn)：選用肯定稀釋范圍的樣品液進(jìn)展培育，以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間，便于計(jì)數(shù)。微生物的培育與觀看①培育：依據(jù)不同微生物的需要，掌握適宜的培育溫度和培育時(shí)間。②觀看a.24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，最終選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。b.菌落的特征：包括菌落的外形、大小、隆起程度和顏色等。菌種鑒定①原理：細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，使培育基的堿性增加。②方法：以尿素為唯一氮源的培育基中參加酚紅指示劑，培育某種細(xì)菌后，假設(shè)指示劑變紅，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。操作提示(1)無(wú)菌操作①取土樣的用具在使用前都需要滅菌。②試驗(yàn)操作均應(yīng)在火焰旁進(jìn)展。做好標(biāo)記：本試驗(yàn)使用的平板和試管比較多，為避開混淆，使用前應(yīng)標(biāo)明培育基的種類、培育日期以及平板上培育樣品的稀釋度等。制定打算：對(duì)于耗時(shí)較長(zhǎng)的生物試驗(yàn)，要事先制定打算，以便提高工作效率。下面是土壤中尿素分解菌的分別與計(jì)數(shù)的試驗(yàn)流程示意圖，請(qǐng)結(jié)合教材供給的資料分析答復(fù)以下問(wèn)題：試驗(yàn)流程試寫出分別土壤中分解尿素的細(xì)菌的試驗(yàn)流程(用文字和箭頭表示)。答案土壤取樣→樣品稀釋→取樣涂布→微生物培育→觀看并記錄結(jié)果→細(xì)菌計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培育基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230，該同學(xué)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果是否真實(shí)牢靠？為什么？答案不真實(shí)。為增加試驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性，應(yīng)設(shè)置重復(fù)試驗(yàn)，在同一稀釋度下涂布3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)結(jié)果后計(jì)算平均值。321、212、25621舍去，然后取平均值。該同學(xué)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的處理是否合理？為什么？答案不合理。微生物計(jì)數(shù)時(shí)，假照試驗(yàn)中消滅重復(fù)試驗(yàn)的結(jié)果不全都的狀況，應(yīng)分析試驗(yàn)過(guò)程中可能的影響因素，找出差異的緣由，而不能簡(jiǎn)潔地舍棄后進(jìn)展計(jì)數(shù)。平板稀釋度0.1mL的菌液涂布平板，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，得到以下的數(shù)據(jù)，試1g平板稀釋度123104320360356105212234287106212318答案105的稀釋度下取0.1mL涂布的三個(gè)平板上的菌落數(shù)在30～300(212＋234＋287)/3≈244。進(jìn)一步可以換算出1g(244÷0.1)×105＝2.44×108個(gè)。(4)為什么統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低？答案當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀看到的只是一個(gè)菌落。比照試驗(yàn)設(shè)計(jì)的分析分析教材P “設(shè)置比照”中的實(shí)例，探討以下問(wèn)題：22在AA兩種？答案可能是他選擇的土壤樣品不同于其他同學(xué)；也可能是培育基受到了污染或操作失誤。如何設(shè)計(jì)比照試驗(yàn)幫助A同學(xué)排解上述兩個(gè)可能影響試驗(yàn)結(jié)果的因素？答案A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)展試驗(yàn)，假設(shè)結(jié)果與AA同AA同學(xué)配制的培育基在不加土樣的狀況下培育作為空白比照，以推斷培育基是否受到污染。微生物數(shù)量測(cè)定的試驗(yàn)設(shè)計(jì)為什么分別不同的微生物要承受不同的稀釋度？答案土壤中各種微生物的數(shù)量是不同的，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)展分別。本試驗(yàn)中應(yīng)如何統(tǒng)計(jì)培育基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)？答案24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。(3)試驗(yàn)中的無(wú)菌操作主要有哪些？答案①培育基、錐形瓶、試管、鏟子、信封等，需要進(jìn)展滅菌。②稱取土壤要在火焰旁進(jìn)展。③稀釋土壤溶液的每一步操作都要在火焰旁進(jìn)展。歸納總結(jié)分別尿素分解菌操作中的留意事項(xiàng)在試驗(yàn)操作中，每個(gè)步驟都要留意無(wú)菌操作，以防培育基被污染，影響試驗(yàn)效果。樣品稀釋液的最正確濃度為培育后每個(gè)平板上有30～300個(gè)菌落的濃度。細(xì)菌一般選104、105106103104105102、103、104倍稀釋液進(jìn)展培育。為排解非測(cè)試因素(培育基)的干擾，試驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培育基進(jìn)展空白比照。每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布3個(gè)平板，作為重復(fù)試驗(yàn)，求其平均值，假設(shè)其中有菌落數(shù)與其他平板懸殊過(guò)大的，需要對(duì)該平板重制作。如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計(jì)數(shù)”試驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析以下表達(dá)正確的選項(xiàng)是( )A.4號(hào)試管中稀釋液進(jìn)展平板培育得到的菌落平均數(shù)肯定恰為510倍B.5號(hào)試管的結(jié)果說(shuō)明每克該土壤中的菌株數(shù)目為1.7×108個(gè)C.在用移液管吸取菌液進(jìn)展梯度稀釋時(shí)，可用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與無(wú)菌水充分混勻D.3個(gè)平板，該試驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果常會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目高答案C自然界中的微生物往往是混雜生長(zhǎng)的。人們?cè)跔?zhēng)論微生物時(shí)一般要將它們分別提純，然后進(jìn)展數(shù)量的測(cè)定。下面是對(duì)大腸桿菌進(jìn)展數(shù)量測(cè)定的試驗(yàn)，請(qǐng)答復(fù)有關(guān)問(wèn)題：試驗(yàn)步驟102、103、104、105、106的系列稀釋液。②為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)選用 法接種樣品。③適宜溫度下培育。結(jié)果分析①測(cè)定大腸桿菌數(shù)目時(shí)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培育基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，與事實(shí)更加接近的是 。230220260240三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是400、212256289四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、260、240250240②一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為16的培育基上測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為21那么每毫升樣品的菌落數(shù)約是(涂布平板時(shí)所用的稀釋液體積為0.2mL) 。③用這種方法測(cè)定菌體密度時(shí)，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量“少”)，由于

(填“多”或。問(wèn)題導(dǎo)析(1)由于題中操作的目的是對(duì)大腸桿菌進(jìn)展數(shù)量的測(cè)定，所以接種的方法是稀釋涂布平板法。(2)測(cè)定活菌數(shù)量時(shí)，選擇的平板越多誤差越小，且選擇的平板要能形成30～300個(gè)菌落。(3)所做的多個(gè)平板中，假設(shè)其中一個(gè)平板中菌落的數(shù)目明顯多于或少于其他幾個(gè)平板，則說(shuō)明該平板不符合要求，應(yīng)重做或舍棄。答案(1)②稀釋涂布平板(2)①D ②1.06×109個(gè)③多當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀看到的只是一個(gè)菌落解析(1)(2)①應(yīng)選取多個(gè)菌落②212÷0.2×106＝1.06×109(個(gè))。③由于一個(gè)菌落可能由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起生長(zhǎng)而成，所以實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量多。一題多變(1)假設(shè)某同學(xué)的稀釋倍數(shù)僅為104，則測(cè)定的數(shù)值要比題中測(cè)定的數(shù)值高還是低？為什么？答案(2)第(2)問(wèn)第①小題C400平板的可能的緣由。答案①培育基被污染，一些菌落是由雜菌生殖而成的；②接種過(guò)程中由于操作不當(dāng)感染了雜菌；③取菌液時(shí)沒(méi)有搖勻，導(dǎo)致所取菌液中細(xì)菌個(gè)體濃度偏大等。方法技巧用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物的方法稀釋涂布平板操作要求：依據(jù)平行重復(fù)的原則，每一稀釋度的菌液涂布3個(gè)或3個(gè)以上的平板。計(jì)數(shù)的時(shí)機(jī)：當(dāng)各平板上菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)進(jìn)展計(jì)數(shù)。選擇可用于計(jì)數(shù)的平板30～300之間的平板(一樣稀釋度的平板均符合該特點(diǎn))進(jìn)展計(jì)數(shù)，然后取平均值。選擇培育基是依據(jù)某一種或某一類微生物的特別養(yǎng)分要求或?qū)σ恍┪锢?、化學(xué)抗性而設(shè)計(jì)的培育基。利用這種培育基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分別出來(lái)。為選擇酵母菌和硝化細(xì)菌，應(yīng)選用的培育基分別為()伊紅美藍(lán)培育基、含青霉素的培育基B.含青霉素的培育基、含氨的無(wú)機(jī)培育基C.含氨的無(wú)機(jī)培育基、含青霉素的培育基D.含青霉素的培育基、伊紅美藍(lán)培育基答案B解析酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培育基進(jìn)展選擇培育，由于青霉素能夠抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，但不能夠抑制真菌生長(zhǎng)。硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛岷拖跛崴尫诺哪芰堪褵o(wú)機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物以維持自身生命活動(dòng)，利用含氨的無(wú)機(jī)培育基可進(jìn)展選擇培育。以下操作步驟挨次正確的選項(xiàng)是()10g90mL無(wú)菌水的錐形瓶中③吸取0.1mL土壤溶101、102、103、104、105、106、107稀釋度A.①→②→③→④C.①→②→④→③答案C

B.①→③→②→④D.①→④→②→③對(duì)尿素分解菌進(jìn)展初步鑒定時(shí)，可在培育基中參加( )重鉻酸鉀C.剛果紅答案B

酚紅指示劑D.結(jié)晶紫解析對(duì)尿素分解菌進(jìn)展初步鑒定，可在培育基中參加酚紅指示劑。從土壤中分別以尿素為氮源的細(xì)菌，以下試驗(yàn)操作不正確的選項(xiàng)是( A.將土壤用無(wú)菌水稀釋，制備103～106倍的土壤稀釋液B.將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上C.用參加剛果紅指示劑的選擇培育基篩選分解尿素的細(xì)菌D.從四周消滅紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株答案C解析用參加酚紅指示劑的鑒別培育基可以鑒別分解尿素的細(xì)菌。KHPO2 4NaHPO22.1gKHPO2 4NaHPO22.1g4MgSO·7HO1.4g4 20.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL。(1)此培育基 (填“能”或“不能”)用于植物組織培育，理由是 。(2)培育基中參加尿素的目的是 ，這種培育基屬于 培育基?！澳康木鄙L(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培育基中的 和 試驗(yàn)需要振蕩培育，緣由是 。圖中將細(xì)菌轉(zhuǎn)到固體培育基上時(shí)，可承受 或 在含尿素的培育基上接種，獲得單菌落后連續(xù)篩選。初步篩選出來(lái)的菌種還需要用生化的方法作進(jìn)一步的鑒定：在以尿素為唯一氮源的培育基中參加 指示劑，接種并培育初步篩選的菌種，假設(shè)指示劑變成 色，則可準(zhǔn)確說(shuō)明該菌種能夠分解尿素。在試驗(yàn)中，以下材料或用具需要滅菌的是 ，需要消毒的是 (填序號(hào))。①培育細(xì)菌用的培育基與培育皿②玻棒、試管、錐形瓶和吸管③試驗(yàn)操作者的雙手試驗(yàn)完畢后，使用過(guò)的培育基應(yīng)當(dāng)進(jìn)展 處理后，才能倒掉。答案(1)不能缺少植物激素(或缺少植物需要的一些養(yǎng)分成分) (2)篩選目的菌 選擇(3)尿素 葡萄糖 為目的菌供給氧氣 (4)平板劃線法 稀釋涂布平板法 酚紅 紅(5)①②③(6)滅菌解析(1)植物組織培育的培育基中需要含有氮、磷、鉀及鋅、銅、鉬、鐵等元素，需要蔗糖(2)該培育基中尿素是唯一的(3)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培育基中的尿素和葡萄糖，分解尿素的微生物是需氧型微生物，所以在培育(4)假設(shè)pH(5)微生物培育時(shí)，(6)為避開試驗(yàn)后培育基中的微生物污染環(huán)境，使用過(guò)的培育基必需經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄。[根底過(guò)關(guān)]在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或者阻擋其他種類微生物生長(zhǎng)的培育基稱做( )鑒別培育基C.選擇培育基答案C

加富培育基D.根底培育基解析選擇培育基可選擇目標(biāo)微生物，同時(shí)抑制或殺死其他微生物?？梢苑謩e并鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是( A.以尿素為唯一氮源的培育基中參加酚紅指示劑B.以尿素為唯一氮源的培育基中參加二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培育基中參加剛果紅試劑D.以尿素為唯一氮源的培育基中參加雙縮脲試劑答案A解析尿素在尿素分解菌的作用下分解產(chǎn)生氨和CO2，氨會(huì)使培育基的堿性增加，pH上升，酚紅指示劑變紅。尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制選擇培育基時(shí)( A.葡萄糖在培育基中越多越好B.尿素分解菌有固氮力量，故培育基中只需無(wú)機(jī)氮C.尿素在培育基中越少越好D.尿素分解菌無(wú)固氮力量，故培育基中的尿素為化合態(tài)氮答案D解析尿素既可以作為尿素分解菌的氮源，也可以作為其碳源，葡萄糖在培育基中并不是越多越好，葡萄糖過(guò)多會(huì)使培育基的滲透壓過(guò)高，不利于尿素分解菌的生長(zhǎng)生殖，A錯(cuò)誤；尿素分解菌沒(méi)有固氮力量，故培育基中需要添加尿素作為氮源，B錯(cuò)誤；添加尿素的目的是篩選尿素分解菌，其他微生物不能很好地生活在該培育基上，尿素在培育基中不是越少越好，過(guò)少就失去選擇作用，過(guò)多又會(huì)使細(xì)胞失水死亡，C錯(cuò)誤；尿素分解菌無(wú)固氮力量，故培育基中的尿素為化合態(tài)氮，D正確。產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培育基分別是()A一個(gè)細(xì)菌、液體培育基C.一個(gè)細(xì)菌、固體培育基答案C

B.很多細(xì)菌、液體培育基D.很多細(xì)菌、固體培育基解析(液體培育基中肉眼不行見)，菌落可作為菌種鑒別的重要依據(jù)，而多種細(xì)菌形成的菌落，就不行能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)。以下關(guān)于土壤取樣的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是( A.土壤取樣，應(yīng)選取肥沃、潮濕的土壤B.3～8cm左右的土壤層C.取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌D.應(yīng)在火焰旁稱取土壤答案C解析土壤取樣過(guò)程中，為防止雜菌污染，取樣用的小鐵鏟和信封在使用前必需滅菌。某同學(xué)對(duì)101、102、103倍稀釋液中的細(xì)菌進(jìn)展計(jì)數(shù)，平均菌落數(shù)分別為2760、295和16，則樣品中菌落總數(shù)為(所用稀釋液體積為0.1mL)( )A.2.76×104個(gè)/mLC.4.6×104個(gè)/mL答案B

B.2.95×105個(gè)/mLD.3.775×104個(gè)/mL解析為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300295符合要求，其稀釋倍數(shù)為102，所用稀釋液體積為0.1mL，套入計(jì)算公式得樣品中菌落總數(shù)為2.95×105個(gè)/mL。[力量提升]在“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)”課題中，以土壤中的細(xì)菌為爭(zhēng)論對(duì)象，要到達(dá)的目的是( )①?gòu)耐寥乐蟹謩e出能夠分解尿素的細(xì)菌②從土壤中分別出能夠分解氨的細(xì)菌③統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中到底含有多少分解尿素的細(xì)菌④統(tǒng)計(jì)所取土壤樣品中到底含有多少分解尿素的細(xì)菌A.①③C.①②答案AB.②④D.③④解析從土壤中分別分解尿素的細(xì)菌并對(duì)其計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的是每克土壤樣品中含多少分解尿素的細(xì)菌，用公式“每克樣品中菌株數(shù)＝(C/V)×M”進(jìn)展推想，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。8.給無(wú)氮培育基接種土壤稀泥漿的正確方法是( )翻開培育皿蓋，取一根接種環(huán)沾取少許稀泥漿，輕輕地點(diǎn)接在培育基的外表上取一根接種環(huán)在酒精燈的火焰上滅菌后沾取少許稀泥漿，略微翻開培育皿蓋，在培育基的外表輕點(diǎn)翻開培育皿蓋，取一根接種環(huán)在酒精燈的火焰上滅菌后沾取少許稀泥漿，在培育基的外表輕點(diǎn)略微翻開培育皿蓋，取一根接種環(huán)在酒精燈的火焰上滅菌，冷卻后沾取少許稀泥漿，在培育基的外表輕點(diǎn)答案D解析接種過(guò)程中要防止外來(lái)雜菌的入侵，左手將培育皿翻開一條縫隙，右手將接種環(huán)在火焰上滅菌，冷卻后沾取少許稀泥漿，在培育基的外表輕點(diǎn)，用未冷卻的接種環(huán)沾取稀泥漿會(huì)殺滅菌種。333條等長(zhǎng)的平行線(3條線均與圖中的鏈霉素帶接觸)373天，結(jié)果如下圖。從試驗(yàn)結(jié)果分析，以下表達(dá)不正確的選項(xiàng)是()鏈霉素能阻擋結(jié)核桿菌的生長(zhǎng)鏈霉素對(duì)結(jié)核桿菌比對(duì)霍亂菌更有效C.鏈霉素對(duì)結(jié)核桿菌比對(duì)傷寒菌更有效D.鏈霉素可以用于治療傷寒病人答案D解析分析題圖可知，該培育基是含有鏈霉素的選擇培育基，接種的三種細(xì)菌中，霍亂菌和結(jié)核桿菌都可以被殺滅，并且鏈霉素對(duì)結(jié)核桿菌殺滅的有效程度大于對(duì)霍亂菌的有效程度，而傷寒菌的生長(zhǎng)不受影響，所以選項(xiàng)D錯(cuò)誤。以下是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”試驗(yàn)操作的表達(dá)，其中錯(cuò)誤的選項(xiàng)是( A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨固體培育基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.104、105、1060.1mL，分別涂布于各組平板上C.將試驗(yàn)組和比照組平板倒置，37℃恒溫培育D.確定比照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的試驗(yàn)組平板進(jìn)展計(jì)數(shù)答案D解析檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)的試驗(yàn)中，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，A項(xiàng)正確；取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1mL，分別涂布于不同的平板上，B項(xiàng)正確；接種后要將培育皿倒置，置于37℃恒溫培育，C項(xiàng)正確；在確定30～300之間的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。廣東省是我國(guó)甘蔗生產(chǎn)區(qū)之一。甘蔗是一種高光效的C 植物，單位面積產(chǎn)量很高，種植4面積日益擴(kuò)大，目前已成為南方地區(qū)燃料酒精生產(chǎn)的重要原料。利用甘蔗生產(chǎn)燃料酒精的一般工藝流程為：甘蔗→榨汁(蔗糖)―→酵母發(fā)酵→蒸餾→成品(燃料酒精)。選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過(guò)程如下：步驟1：野生菌液體培育一段時(shí)間后承受紫外線照耀誘變處理。步驟2：制備選擇培育基。在根本培育基的根底上，留意 和 ，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。步驟3：將紫外線照耀后的菌液稀釋涂布平板。4：依據(jù)2、34的依據(jù)分別是

，篩選出突變菌。。答案(1)添加高濃度蔗糖(葡萄糖) 調(diào)低pH 是否能在選擇培育基上生長(zhǎng)(2)供給高糖和酸性的篩選環(huán)境；獲得單菌落；能生長(zhǎng)的菌落具有耐高糖和耐酸的特性解析(1)要篩選耐高糖和耐酸的菌種，培育基中必需參加高濃度蔗糖和調(diào)低pH，能在選擇培育基上生長(zhǎng)的即為所需菌種。(2)步驟2是給其供給高糖和酸性的篩選環(huán)境；步驟3是為了4是依據(jù)能生長(zhǎng)的菌株具有耐高糖和耐酸的特性篩選出突變菌。請(qǐng)答復(fù)以下有關(guān)微生物的問(wèn)題：微生物的分布：微生物主要分布在富含 的土壤表層；不同微生物對(duì)pH的要求不同，細(xì)菌常生活在酸堿度 的潮濕土壤中。微生物的消毒和滅菌：在微生物培育中，對(duì)培育基常法進(jìn)展滅菌。假設(shè)要檢測(cè)滅菌是否徹底，可以承受的方法是 。微生物的應(yīng)用：在葡萄酒的自然發(fā)酵過(guò)程中，運(yùn)用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精，請(qǐng)寫出該過(guò)程的化學(xué)反響式： 。在果醋制作時(shí)，運(yùn)用醋酸菌在 和糖源充分的條件下，將糖分解成醋酸。微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是 和 。微生物的鑒定：為檢測(cè)尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的 (填“選擇”或“鑒別”)培育基中參加 指示劑，假設(shè)存在尿素分解菌，則指示劑將變 色。答案(1)有機(jī)質(zhì)接近中性(2)高壓蒸汽滅菌將滅過(guò)菌的培育基在適宜的溫度下放置一段時(shí)間觀看培育基上是否有菌落產(chǎn)生(3)CH O

酶2CH

OH＋2CO

有氧(4)平板劃6線法稀釋涂布平板法(5)選擇酚紅紅

12 6 2 5 2解析(1)壤中。(2)對(duì)培育基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；可通過(guò)在適宜的溫度下放置滅過(guò)菌的培育基，(3)(4)最常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(5)用選擇培育基篩選目的菌——尿素分解