飼料中總磷的測定

飼料中總磷的測定第1頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）1.適用范圍 配合飼料、濃縮飼料、預(yù)混合飼料、單一飼料中的總磷測定2.測定原理 將試樣中的有機(jī)物破壞，使磷元素游離出來，在酸性溶液中，用釩鉬酸銨處理，生成黃色的（NH4）3PO4·NH4VO3·16M0O3，在波長400nm下進(jìn)行比色測定第2頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月3.儀器和設(shè)備實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)或研缽分樣篩：孔徑0.42mm(40目)分析天平：感量0.0001g分光光度計(jì)，有10mm比色池，可在400nm下進(jìn)行比色測定高溫爐：可控溫度在（550±20）℃坩堝：瓷質(zhì)容量瓶：50，100，1000mL刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10mL凱氏燒瓶：250mL或500mL可調(diào)溫電爐：1000W飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第3頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）分光光度計(jì)原理：分光光度計(jì)分析的原理是利用物質(zhì)的對不同波長的光呈現(xiàn)選擇性吸收現(xiàn)象來進(jìn)行物質(zhì)的定性和定量分析根據(jù)相對測量原理先設(shè)定參比樣品（溶劑，蒸餾水，空氣等）的透射比為100%，再測量待測樣品的透射比，從而達(dá)到分析的目的第4頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)準(zhǔn)方形池●上開口，Teflon（聚四氟乙烯，即特富龍。是一種樹脂）蓋子，不密封●兩面透光●內(nèi)部拋光，精細(xì)打磨●適用于所有標(biāo)準(zhǔn)池支架飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第5頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月4.試劑及配置鹽酸溶液：1＋1,V+V濃硝酸高氯酸磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：將磷酸二氫鉀在105℃干燥1小時(shí)，在干燥器中冷卻后稱0.2195g，溶解于蒸餾水中，定量轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml（？），用蒸餾水稀釋到刻度，搖勻，即成50μg/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第6頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月4.試劑及配置⑤釩鉬酸銨顯色試劑：稱取偏釩酸銨（分析純）1.25g，加硝酸250ml，另取鉬酸銨（分析純）25g，加蒸餾水400ml加熱溶解，冷卻后，將此溶液倒入上溶液，加蒸餾水定容至1000ml，避光保存。如生成沉淀則不能繼續(xù)使用鉬酸銨：用作生產(chǎn)高純度鉬制品的基本原料健康危害：吸入、攝入或經(jīng)皮膚吸收后對身體有害，對眼睛、皮膚、粘膜和上呼吸道有刺激作用環(huán)境危害：不燃，有毒，具刺激性飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第7頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月5.試樣的選取和制備取有代表性試樣用四分法縮減至200g，粉碎至40目裝入密封容器中，防止試樣成分的變化或變質(zhì)飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第8頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月6.測定步驟（1）試樣的分解干法（不適用于含磷酸氫鈣的飼料）：稱取試樣2—5g于坩堝中（準(zhǔn)確至0.0002g），在電爐上低溫炭化至無煙為止，再放入高溫爐于（550±20）℃下灼燒3小時(shí)（或測灰分后繼續(xù)進(jìn)行），取出冷卻，在坩堝中加入鹽酸溶液（1+1，V+V）10ml和濃硝酸數(shù)滴，小心煮沸約10分鐘，將此溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，并用熱水洗滌坩堝及漏斗中濾紙，冷卻至室溫后，定容，搖勻，為試樣分解液飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第9頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月6.測定步驟（1）試樣的分解濕法：稱取試樣0.5～5g于凱氏燒瓶中（準(zhǔn)確至0.0002g）。加入硝酸（化學(xué)純）30ml，小心加熱煮沸，至二氧化氮黃煙逸盡，冷卻后加入高氯酸（分析純）10ml，繼續(xù)加熱煮沸至溶液無色，不得蒸干（危險(xiǎn)!）。冷卻后加蒸餾水50ml，并煮沸驅(qū)逐二氧化氮，冷卻后轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，為試樣分解液飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第10頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月6.測定步驟（1）試樣的分解鹽酸溶解法（適用于微量元素預(yù)混料）：稱取試樣0.2～1ｇ（精確至0.0002g）于100ml燒杯中，緩緩加入鹽酸溶液（1+1，V+V）10ml使其全部溶解，冷卻后轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第11頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月6.測定步驟（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制準(zhǔn)確移取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（50ug/ml）0，1.0，2.0，5.0，10.0，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入釩鉬酸銨顯色試劑10ml，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘，以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在400nm波長下，用分光光度計(jì)測定各溶液的吸光度。以50ml溶液中磷含量（μg）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第12頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月PS：吸光度測試方法：1.按動(dòng)“功能鍵”，切換至透射比測試模式2.調(diào)整測試波長3.置入遮光體，合上樣品室，并使其進(jìn)入光路，按動(dòng)“調(diào)0%T”鍵調(diào)T零，此時(shí)儀器顯示“00.0”或“-00.0。完成調(diào)T零后，取出遮光體4.按動(dòng)“功能鍵”，切換至吸光度測試模式5.置入?yún)⒈葮悠?，按?dòng)“調(diào)100%T”鍵，此時(shí)儀器顯示“BL”延時(shí)數(shù)秒后便顯示“-.000”或“.000”6.置入待測樣品，讀取測試數(shù)據(jù)飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第13頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第14頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月6.測定步驟（3）試樣的測定準(zhǔn)確移取試樣分解液1—10ml（含磷50－750ug）容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色試劑10ml，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在400nm波長下，用分光光度計(jì)測得試樣分解液的吸光度。用標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液的含磷量飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第15頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月6.測定步驟（4）測定結(jié)果計(jì)算試樣中總磷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)按下式計(jì)算W(P)=a*10-6(V/V1)/m式中：m:試樣質(zhì)量，gV:試樣分解液總體積，mlV1:比色測定時(shí)所移取試樣分解液體積，mla:由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液含磷量，μg/50ml10-6:從μg轉(zhuǎn)化為g的系數(shù)所得結(jié)果應(yīng)精確到兩位小數(shù)飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第16頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月重復(fù)性:每個(gè)試樣稱取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果含磷量在0.5％以下（含0.5％）以允許相對偏差3％含磷量在0.5％以下，允許相對偏差10％飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第17頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月注意事項(xiàng)1.比色時(shí)，待測液磷含量不宜過濃，最好控制在1ml含磷0.5mg以下2.待測液在加入試液后應(yīng)靜置10分鐘，再進(jìn)行比色，但不能靜置過久飼料中總磷的測定（鉬黃比色法）第18頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月問題：1.為