《動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體》 全省一等獎(jiǎng)

動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體一、動(dòng)物細(xì)胞融合1．概念：指________或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程，又叫__________。2．過程：含有不同__________的兩個(gè)細(xì)胞―→________細(xì)胞。3．意義：克服了________雜交不親和的障礙。兩個(gè)細(xì)胞雜交遺傳信息雜交遠(yuǎn)緣二、單克隆抗體1．B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：一個(gè)B淋巴細(xì)胞分泌________種特異性抗體；體外培養(yǎng)條件下，B淋巴細(xì)胞________無限增殖。2．制備。一不能雜交瘤細(xì)胞能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞3．應(yīng)用：最廣泛的用途是用作__________________；用于____________；制成“生物導(dǎo)彈”，定向運(yùn)載藥物。體外診斷試劑治療疾病知識(shí)點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞融合1．概念：是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程，又稱細(xì)胞雜交。2．原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。3．誘導(dǎo)方法：物理法——離心、振動(dòng)、電激；化學(xué)法——聚乙二醇；生物方法——滅活的病毒。4．動(dòng)物細(xì)胞融合的過程(如下圖所示)。5．優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。6．植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較。比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性，植物細(xì)胞全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合的方法去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法物理(離心、振動(dòng)、電激)化學(xué)(聚乙二醇)物理、化學(xué)方法(同左)滅活的病毒用途獲得雜種植株主要用于制備單克隆抗體7.已成功的動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)例。生物種類細(xì)胞來源成功年份酵母菌—雞原生質(zhì)體—血紅細(xì)胞1975人—胡蘿卜腹水癌細(xì)胞—原生質(zhì)體1976人—小鼠纖維肉瘤細(xì)胞—畸胎瘤細(xì)胞1978例1動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是(

)A．誘導(dǎo)融合的方法完全相同B．所用的技術(shù)手段完全相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成雜種細(xì)胞解析：首先兩種細(xì)胞工程技術(shù)中都要進(jìn)行細(xì)胞融合，且融合的技術(shù)基本相同；第二，誘導(dǎo)的方法，除動(dòng)物細(xì)胞的融合常用滅活的病毒做誘導(dǎo)劑外，其他的二者基本相同；第三，二者采用的原理不完全相同，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，最終形成的是雜種細(xì)胞，植物體細(xì)胞雜交除細(xì)胞膜的流動(dòng)性外，還有細(xì)胞的全能性，最終雜種細(xì)胞形成的是雜種植株。答案：D1．以下四種細(xì)胞工程技術(shù)中，培育出的新個(gè)體(或細(xì)胞)同時(shí)具有兩個(gè)親本遺傳特性的是(

)①植物組織培養(yǎng)②植物體細(xì)胞雜交③動(dòng)物細(xì)胞融合④核移植A．①②③B．①②④C．②③④D．①③④變式遷移解析：①是通過細(xì)胞脫分化、再分化和有絲分裂形成新個(gè)體的過程，只具有一個(gè)親本遺傳特性。②③④不同程度地都具有雙親遺傳特性。答案：C變式遷移知識(shí)點(diǎn)2單克隆抗體1．概念：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。2．特點(diǎn)：化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。3．制備過程(如下圖所示)。在制備單克隆抗體時(shí)，需經(jīng)兩次篩選，但目的不同。(1)第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后，因?yàn)橛腥N融合情況：B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。而只有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆來的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的單克隆抗體。4．應(yīng)用。(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。(2)用于治療疾病和運(yùn)載藥物：運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)彈”。(3)分離和純化抗原分子。例2下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述，正確的是(

)A．制備過程中不需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B．雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞與癌細(xì)胞的所有特點(diǎn)C．經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細(xì)胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)D．單克隆抗體制備過程中的細(xì)胞兩兩融合得到三種融合細(xì)胞解析：?jiǎn)慰寺】贵w的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與效應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)結(jié)合，得到雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選并經(jīng)單一抗體檢測(cè)后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可得單克隆抗體。雜交瘤細(xì)胞能無限繁殖但不具有癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。經(jīng)過免疫的效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交獲得三種細(xì)胞：效應(yīng)B細(xì)胞與效應(yīng)B細(xì)胞融合形成的融合細(xì)胞、效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的融合細(xì)胞。答案：D2．用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是(

)A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B．用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C．用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體變式遷移解析：酶具有專一性，纖維素酶只能分解纖維素，用纖維素酶處理植物細(xì)胞是植物細(xì)胞工程中用來除去細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的方法，與動(dòng)物細(xì)胞工程無關(guān)。B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞無纖維素。答案：B變式遷