復(fù)方鹽酸貝那普利片中鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平的含量測(cè)定

復(fù)方鹽酸貝那普利片中鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平的含量測(cè)定

鹽酸貝納普利是一種非含基的競(jìng)爭(zhēng)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ce）抑制劑。它可以與血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ce）相結(jié)合，減少ag的功能，使ag將血管緊張素i轉(zhuǎn)化為血管緊張素，以減少血管阻力和血壓。有研究表明作者建立了高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方片中的鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平含量,該方法簡(jiǎn)便快捷,專屬性強(qiáng),結(jié)果準(zhǔn)確,適用于復(fù)方鹽酸貝那普利片的質(zhì)量控制。1儀器、儀器和儀器高效液相色譜儀(包括LC-10AVP泵、SPD-10AVP紫外檢測(cè)器,日本SHIMADZU公司),ANASTAR色譜工作站(天津奧特賽恩斯儀器有限公司),PHS-3C酸度計(jì)(上海雷磁儀器廠),UV-1801紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器公司),KQ-250超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司),Adventurer電子分析天平(美國(guó)奧豪斯國(guó)際貿(mào)易有限公司)。復(fù)方鹽酸貝那普利片(自制,批號(hào):091201、091202、091203),鹽酸貝那普利、苯磺酸氨氯地平對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):100768-200501、100374-200903),甲醇(色譜純,天津康科德科技有限公司),鹽酸(分析純,沈陽(yáng)新西試劑廠),高氯酸鈉(天津瑞金特化學(xué)品有限公司),重蒸水(自制)。22.1理論塔板的確定色譜柱:DiamonsilC鹽酸貝那普利的理論塔板數(shù)4986,苯磺酸氨氯地平的理論塔板數(shù)5673。苯磺酸氨氯地平與鹽酸貝那普利的分離度4.6,兩者達(dá)到了完全分離,色譜峰拖尾因子為1.02。2.22.2.1鹽酸貝那普利與苯磺酸氨氯地平對(duì)照溶液的制備分別取鹽酸貝那普利對(duì)照品約50.0mg與苯磺酸氨氯地平對(duì)照品約31.6mg(相當(dāng)于氨氯地平25.0mg),精密稱定,置100mL量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,放冷至室溫,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,得對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液2.0mL,置于10mL量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,得鹽酸貝那普利與苯磺酸氨氯地平對(duì)照溶液。每1mL中含鹽酸貝那普利100μg,氨氯地平50μg。2.2.2鹽酸貝那普利溶液配制取復(fù)方鹽酸貝那普利片10片,精密稱定,研細(xì),取細(xì)粉約150mg(約相當(dāng)于鹽酸貝那普利10mg,氨氯地平5mg),精密稱定,置50mL量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,放冷至室溫,加流動(dòng)相至刻度,搖勻,濾過(guò),即得。2.32.3.1對(duì)照品溶液的制備分別制備空白輔料溶液(取本品處方比例的輔料,溶液制備方法同供試溶液的制備)、鹽酸貝那普利與苯磺酸氨氯地平的對(duì)照品溶液、復(fù)方鹽酸貝那普利片的供試溶液,按“2.1”條色譜條件進(jìn)樣檢測(cè),記錄色譜圖見(jiàn)圖2。可見(jiàn)空白輔料對(duì)樣品測(cè)定無(wú)干擾,鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平之間分離度良好。2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL,分別置于10mL量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,即得系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。在“2.1”條色譜條件下,分別進(jìn)樣測(cè)定,記錄色譜圖。以對(duì)照品質(zhì)量濃度(2.3.3h進(jìn)樣測(cè)定取“2.2.2”條下的供試溶液,分別于0、2、4、6、8、12h進(jìn)樣測(cè)定。在室溫條件下,峰面積無(wú)明顯變化,鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平兩組分峰面積12h內(nèi)的RSD分別為0.41%和0.51%,表明供試溶液在室溫下放置12h穩(wěn)定。2.3.4外標(biāo)法計(jì)算含量按本品處方比例精密稱取鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平對(duì)照品及空白輔料適量,照樣品測(cè)定質(zhì)量濃度的80.0%、100.0%、120.0%制備供試溶液;另照“2.2.1”條方法制備對(duì)照溶液。分別取上述供試溶液和對(duì)照溶液20μL,進(jìn)樣測(cè)定。以外標(biāo)法計(jì)算含量,結(jié)果見(jiàn)表1。由表1中數(shù)據(jù)可知,該方法回收率較高,能夠準(zhǔn)確測(cè)定樣品濃度。2.3.5進(jìn)樣峰面積測(cè)定取“2.2.2”條下的供試溶液,連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次,記錄峰面積。鹽酸貝那普利峰面積的RSD為0.77%,苯磺酸氨氯地平峰面積的RSD為0.57%,表明該方法精密度良好。2.3.6外標(biāo)法計(jì)算取同批(091201)復(fù)方鹽酸貝那普利自制片,按“2.2.2”條方法平行制備6份供試溶液,分別進(jìn)樣20μL;同時(shí)取對(duì)照溶液20μL進(jìn)樣測(cè)定,按外標(biāo)法計(jì)算。測(cè)得鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平相當(dāng)于標(biāo)示量的平均含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為100.1%和99.5%,RSD分別為0.36%和0.51%(2.4對(duì)照溶液制備取3批自制復(fù)方鹽酸貝那普利片(批號(hào):091201、091202、091203)各10片,分別按“2.2.2”條方法制備供試溶液;另精密稱取鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平對(duì)照品適量,按“2.2.1”條方法制備對(duì)照溶液,進(jìn)樣檢測(cè)。按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算樣品中鹽酸貝那普利和苯磺酸氨氯地平的含量,結(jié)果見(jiàn)表2。3檢測(cè)波長(zhǎng)的確定a.紫外吸收?qǐng)D譜表明,鹽酸貝那普利在240nm的波長(zhǎng)