基于表面活性劑磁性固相萃取光度法測定苯磺酸倍他司汀

基于表面活性劑磁性固相萃取光度法測定苯磺酸倍他司汀

苯磺酸二甲酯主要用于治療性鼻炎和泛射麻醉。由于生物體液基體比較復(fù)雜，所以常結(jié)合使用一定的分離富集技術(shù)測定生物體液中藥物濃度，如液液萃取本研究未經(jīng)合成直接使用Fe1實驗部分1.1苯磺酸倍他司汀國家/國家TU-1901雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用公司)，JJ-1大功率電動攪拌器(常州國華公司)。苯磺酸倍他司汀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(含量99.98%，江蘇聯(lián)環(huán)藥業(yè)公司);坦亮牌苯磺酸倍他司汀片(規(guī)格:10mg/片);試劑均為分析純，水為去離子水。1.2體積，濃度苯磺酸倍他司汀標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取適量苯磺酸倍他司汀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用水溶解并稀釋至適當(dāng)體積，質(zhì)量濃度為1.0mg/mL。SDS溶液:稱取1.0gSDS，用水溶解并稀釋至100mL。pH3.5的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液:稱取20g乙酸鈉，用水溶解，加80mL乙酸，用水稀釋至1L，于酸度計上調(diào)節(jié)至pH3.5。1.3fe公司稱取3.2g無水FeCl用透射電子顯微鏡對合成的材料進(jìn)行表征，結(jié)果表明，F(xiàn)e1.4萃取方法取10mL離心管，準(zhǔn)確加入0.03gFe1.5定容至3.0m在分離后的磁性納米材料中加入無水乙醇，定容至3.0mL。室溫下振蕩10min，用磁鐵吸附分離，將上層清液用水稀釋至5.00mL后于分光光度計測定。1.6超聲溶解法苯磺酸倍他司汀片:取5片研磨成粉末，準(zhǔn)確稱重相當(dāng)于1片藥物的粉末于100mL容量瓶中，加入50mL蒸餾水超聲溶解，使得藥片全部溶解后均勻分散成渾濁液，然后用水定容至100mL。過濾，取續(xù)濾液供測試用。人血清樣的制備:取健康自愿者的血清，加入適量苯磺酸倍他司汀標(biāo)準(zhǔn)溶液后，按1∶4(V/V)的比例加入甲醇去除血清中的蛋白，4000r/min離心分離15min，取上清液分析2結(jié)果與討論2.1測量波長的選擇苯磺酸倍他司汀的吸收曲線如圖1所示，在262nm出現(xiàn)最大吸收峰，后續(xù)研究測定波長固定為262nm。2.2萃取條件優(yōu)化2.2.1sds對萃取性能的影響實驗了SDS、十二烷基苯磺酸鈉(SDBS)、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)、環(huán)糊精(β-CD)等對萃取率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用SDS時萃取效果最好，萃取率可達(dá)90%以上。據(jù)文獻(xiàn)實驗中對SDS的用量也進(jìn)行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)SDS用量為0.5mL時萃取率達(dá)到最大值，實驗中使用0.5mL10g/LSDS進(jìn)行萃取研究。2.2.2ph影響在pH3.0～5.0范圍內(nèi)考察了溶液pH對萃取率的影響，結(jié)果表明，pH3.5時萃取率最大，實驗中控制萃取溶液為pH3.5。2.2.3納米材料比表面積的確定與傳統(tǒng)的微型吸附劑相比，納米材料具有較高的比表面積，因此少量的納米材料就可以獲得較高的吸附效果。在0.005～0.04g范圍內(nèi)研究了Fe2.2.4萃取萃取纖維所受提取和被吸附萃取溶液在離心管中配制好后放入振蕩器中充分振蕩，使藥物與吸附劑充分接觸從而被吸附萃取。在5～20min范圍內(nèi)考察了萃取時間的影響，結(jié)果表明苯磺酸倍他司汀被負(fù)載了SDS的Fe在15℃～40℃范圍研究了溫度對萃取率的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)溫度對萃取率影響不大，因此萃取操作選擇在室溫下進(jìn)行。2.3洗脫期優(yōu)化2.3.1洗脫率的測定固定洗脫劑的用量為2.0mL，洗脫振蕩時間為10min，考察了0.1mol/LHCl、0.1mol/LNaOH溶液、無水乙醇、0.1mol/LNaCl溶液對洗脫率的影響。實驗結(jié)果表明，乙醇的洗脫效果最好，研究中選用乙醇做洗脫劑進(jìn)行后續(xù)研究。同時對洗脫劑的用量進(jìn)行了研究。在1.0～5.0mL范圍之內(nèi)，當(dāng)乙醇用量為3.0mL時洗脫效果最好，洗脫率>90%，實驗中使用3.0mL的乙醇進(jìn)行洗脫研究。2.3.2洗脫率的測定分別在5～30min,15℃～50℃范圍內(nèi)考察了洗脫時間和洗脫溫度對洗脫率的影響，結(jié)果表明在5～20min,15℃～30℃范圍內(nèi)洗脫率達(dá)到最大值且基本不變，之后隨著時間和溫度的增加洗脫率慢慢下降，這可能是由于乙醇揮發(fā)造成洗脫劑量減少的結(jié)果。實驗中控制洗脫時間為10min，洗脫溫度為室溫(15℃～25℃)。2.4材料的重復(fù)使用通過測定萃取率和洗脫率考察了Fe2.5分析與應(yīng)用2.5.1線性方程和檢出限按照實驗操作取不同量標(biāo)準(zhǔn)溶液萃取后洗脫，取洗脫后的上層清液測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)、相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)繪制工作曲線，線性方程為A=-0.00757+0.01476ρ(ρ:μg/mL)，線性范圍為5.0～60.0μg/mL，相關(guān)系數(shù)R=0.9997，檢出限為0.11μg/mL(S/N=3)。2.5.2精密度與重現(xiàn)性配制濃度為10.0,20.0,30.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液各6份，同法進(jìn)行吸附、洗脫試驗，以洗脫液測定吸光度計算精密度，結(jié)果顯示RSD為0.58%～0.92%，表明方法的重現(xiàn)性較好。2.5.3回收率測定結(jié)果實驗中用所研究方法測定了藥片中苯磺酸倍他司汀的含量，結(jié)果為9.82mg/片，標(biāo)示量為10mg/