液相色譜基本原理與應(yīng)用課件

液相色譜基本原理與應(yīng)用主講人：張偉液相色譜基本原理與應(yīng)用主講人：張偉1主要內(nèi)容1、液相色譜定義；2、儀器結(jié)構(gòu)與原理；3、主要應(yīng)用領(lǐng)域介紹；4、生產(chǎn)液相色譜儀器的廠家。主要內(nèi)容2一、液相色譜定義高效液相色譜是在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上，引入了氣相色譜的理論，在技術(shù)上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測(cè)器，因而具備速度快、效率高、靈敏度高、操作自動(dòng)化的特點(diǎn)。一、液相色譜定義高效液相色譜是在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上31.高效液相色譜法與氣相色譜法(1)氣相色譜法分析對(duì)象只限于分析氣體和沸點(diǎn)較低的化合物，它們僅占有機(jī)物總數(shù)的20％。對(duì)于占有機(jī)物總數(shù)近80％的那些高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、摩爾質(zhì)量大的物質(zhì)，目前主要采用高效液相色譜法進(jìn)行分離和分析。(2)氣相色譜采用流動(dòng)相是惰性氣體，它對(duì)組分沒(méi)有親和力，即不產(chǎn)生相互作用力，僅起運(yùn)載作用。而高效液相色譜法中流動(dòng)相可選用不同極性的液體，選擇余地大，它對(duì)組分可產(chǎn)生一定親和力，并參與固定相對(duì)組分作用的劇烈競(jìng)爭(zhēng)。因此，流動(dòng)相對(duì)分離起很大作用，相當(dāng)于增加了一個(gè)控制和改進(jìn)分離條件的參數(shù)，這為選擇最佳分離條件提供了極大方便。(3)氣相色譜一般都在較高溫度下進(jìn)行的，而高效液相色譜法則經(jīng)常可在室溫條件下工作。1.高效液相色譜法與氣相色譜法(1)氣相色譜法分析對(duì)象只限于4二、儀器結(jié)構(gòu)與原理高效液相色譜儀一般可分為4個(gè)主要部分：高壓輸液系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)二、儀器結(jié)構(gòu)與原理高效液相色譜儀一般可分為4個(gè)主要部分：5液相色譜基本原理與應(yīng)用ppt課件6液相色譜基本原理與應(yīng)用ppt課件71.高壓輸液系統(tǒng)色譜泵恒壓泵恒流泵氣動(dòng)放大泵注射泵單柱塞泵雙柱塞泵隔膜泵并聯(lián)泵串聯(lián)泵1.高壓輸液系統(tǒng)色譜泵恒壓泵恒流泵氣動(dòng)放大泵注射泵單柱塞泵雙82.進(jìn)樣系統(tǒng)2.進(jìn)樣系統(tǒng)93.分離系統(tǒng)色譜柱

柱溫箱3.分離系統(tǒng)色譜柱104.檢測(cè)系統(tǒng)紫外檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器熒光檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器蒸發(fā)光散射檢測(cè)器質(zhì)譜檢測(cè)器等等4.檢測(cè)系統(tǒng)紫外檢測(cè)器11三、HPLC在各領(lǐng)域的主要應(yīng)用環(huán)境：常見(jiàn)多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯、硝基化合物、酚類化合物、鄰苯二甲酸脂、有機(jī)農(nóng)藥等。農(nóng)業(yè)：土壤礦物成分、肥料、飼料添加劑、茶葉等農(nóng)產(chǎn)品中無(wú)機(jī)和有機(jī)成分等。食品：有機(jī)酸、氨基酸、糖、維生素、脂肪酸、香料、甜味劑、防腐劑、人工色素、病原微生物、霉菌毒素、多核芳烴等。三、HPLC在各領(lǐng)域的主要應(yīng)用環(huán)境：常見(jiàn)多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯12材料：液晶材料、合成高分子材料等?；ぃ簾o(wú)機(jī)化工產(chǎn)品、合成高分子化合物、表面活性劑、洗滌劑成分、化妝品、染料等。生物：氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核糖核酸、生物胺、多糖、酶、天然高分子化合物等。醫(yī)藥：人體化學(xué)成分、各類合成藥物成分、各種天然植物和動(dòng)物藥物化學(xué)成分等。材料：液晶材料、合成高分子材料等。131.環(huán)境保護(hù)HPLC已在環(huán)境監(jiān)測(cè)中得到廣泛應(yīng)用,特別適用于分子量大、揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差的有機(jī)污染物的分離和分析。例如多環(huán)芳烴（PAHs）、鄰苯二甲酸酯類（PAEs）、酚類、多環(huán)聯(lián)苯、聯(lián)苯胺類、陰離子表面活性劑、有機(jī)農(nóng)藥、除草劑等。1.環(huán)境保護(hù)HPLC已在環(huán)境監(jiān)測(cè)中得到14多環(huán)芳烴（PAHs）目前世界上公認(rèn)的多環(huán)芳烴類物質(zhì)為萘、蒽、菲、苯并a芘等16項(xiàng)，特別是苯并a芘是強(qiáng)致癌物質(zhì)，其廣泛存在于大氣飄塵、水、土壤、生物等環(huán)境中，嚴(yán)重影響身體健康?？赡芎卸喹h(huán)芳香烴的材料：電線，插頭，塑料手柄，塑料包裝箱，橡膠手柄，有異味塑料，橡膠產(chǎn)品。在電子電器制造業(yè)中，PAHs通常是作為塑料添加劑進(jìn)入生產(chǎn)環(huán)節(jié)中，如塑料粒子在擠塑的時(shí)候，和模具之間存在黏著，此時(shí)要加入脫膜劑，而脫膜劑中可能含有PAHs。多環(huán)芳烴（PAHs）目前世界上公認(rèn)的多環(huán)15多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖16鄰苯二甲酸酯類化合物（PAEs）鄰苯二甲酸酯類化合物的測(cè)定在全球主要工業(yè)國(guó)的生態(tài)環(huán)境中已達(dá)到了普遍檢出的程度。它在環(huán)境中殘留期較長(zhǎng),生物對(duì)鄰苯二甲酸酯有較強(qiáng)的富集作用。一旦進(jìn)入自然生態(tài)系統(tǒng)中,對(duì)其健康帶來(lái)的危害是無(wú)法估計(jì)的。歐盟將鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二異辛酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二異葵酯(DIDP)6種PAEs列為優(yōu)先控制的有毒污染物。鄰苯二甲酸酯類化合物（PAEs）鄰苯二甲17主要存在于：玩具、食品包裝材料、醫(yī)用血袋和膠管、聚乙烯地板和壁紙、清潔劑、潤(rùn)滑油、個(gè)人護(hù)理用品（如指甲油、頭發(fā)噴霧劑、香皂和洗發(fā)液）等數(shù)百種產(chǎn)品中。主要存在于：玩具、食品包裝材料、醫(yī)用血袋18鄰苯6P標(biāo)準(zhǔn)色譜圖鄰苯6P標(biāo)準(zhǔn)色譜圖19鄰苯16P標(biāo)準(zhǔn)色譜圖鄰苯16P標(biāo)準(zhǔn)色譜圖20多溴聯(lián)苯醚是一種添加型高效阻燃劑，由于其含溴量高，熱穩(wěn)定性好，添加量少，因而被廣泛用于高分子塑料的阻燃。十溴聯(lián)苯醚的熱穩(wěn)定性非常好，適用于要求加工溫度高的聚合物。可用作聚乙烯，聚丙烯，ABS樹(shù)脂，聚苯醚，聚碳酸酯，聚氨酯，聚氯乙烯，環(huán)氧樹(shù)脂，PBT，PET，硅橡膠和三元乙丙橡膠等的阻燃劑，被廣泛用于橡膠運(yùn)輸帶，石油加工，工業(yè)橡膠制品的阻燃添加劑。多溴聯(lián)苯醚是一種添加型高效阻燃劑，由于其21多溴聯(lián)苯醚標(biāo)準(zhǔn)品譜圖多溴聯(lián)苯醚標(biāo)準(zhǔn)品譜圖22農(nóng)藥和除草劑隨著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展和科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人們?yōu)榱双@得農(nóng)業(yè)豐收，化肥、農(nóng)藥、除草劑等的使用量也日益增加，甚至在高爾夫球場(chǎng)、足球場(chǎng)等也使用殺蟲(chóng)劑、滅菌劑等。這些都給環(huán)境帶來(lái)污染。在不揮發(fā)性和受熱易分解的以及極性農(nóng)藥組分監(jiān)測(cè)中HPLC比GC更為合適,而且在這類農(nóng)藥及其降解產(chǎn)物、代謝產(chǎn)物的分析中，HPLC得到廣泛的應(yīng)用，除紫外、示差折光檢測(cè)器外，電化學(xué)、熒光、二極管陣列等檢測(cè)器均有應(yīng)用。農(nóng)藥和除草劑隨著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展和科學(xué)技術(shù)23氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留24甲醛甲醛是一種重要的有機(jī)原料，主要用于人工合成黏結(jié)劑，如：制酚醛樹(shù)脂、合成纖維(如合成維尼綸—聚乙烯醇縮甲醛)、皮革工業(yè)、醫(yī)藥、染料等。還殺菌和防腐能力，可浸制生物標(biāo)本，其稀溶液(0.1—0.5％)農(nóng)業(yè)上可用來(lái)浸種，給種子消毒。甲醛甲醛是一種重要的有機(jī)原料，主要用于25甲醛標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖甲醛標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖26富馬酸二甲酯（DMF）

富馬酸二甲酯簡(jiǎn)稱為DMF。它具有低毒、高效、廣譜抗菌、安全、化學(xué)穩(wěn)定性好、作用時(shí)間長(zhǎng)、適用的PH值范圍寬等特點(diǎn)。廣泛應(yīng)用于食品、飲料、飼料、中藥材、化妝品、魚(yú)、肉、蔬菜、水果等防霉、防腐、防蟲(chóng)、保鮮。富馬酸二甲酯（DMF）富馬酸二甲酯簡(jiǎn)稱為D27富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖282.食品分析中的應(yīng)用

食品營(yíng)養(yǎng)成分分析食品添加劑分析食品污染物分析2.食品分析中的應(yīng)用

食品營(yíng)養(yǎng)成分分析29食品營(yíng)養(yǎng)成分分析

食品營(yíng)養(yǎng)成分有：蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、維生素、香料、有機(jī)酸（檸檬酸、蘋(píng)果酸等）、有機(jī)胺、礦物質(zhì)等食品營(yíng)養(yǎng)成分分析30氨基酸標(biāo)樣色譜圖

氨基酸標(biāo)樣色譜圖

31啤酒中有機(jī)酸分析啤酒中有機(jī)酸分析32食品添加劑分析

食品添加劑指為改善食品品質(zhì)和色、香、味以及為防腐、保鮮和加工工藝的需要而加入的人工合成或者天然物質(zhì)，主要分為甜味劑、防腐劑、著色劑（合成色素如檸檬黃、莧菜紅、靛藍(lán)、胭脂紅、日落黃、亮藍(lán)等）、抗氧化劑等。天然食品添加劑一般對(duì)人體無(wú)害，但目前所使用的絕大多數(shù)是化學(xué)合成添加劑，有的具有一定的毒性，如不加以限制使用，對(duì)人體健康會(huì)產(chǎn)生危害。因此，測(cè)定食品中添加劑的含量以控制其使用量，對(duì)保證食品質(zhì)量，保障人民健康具有十分重要的意義。食品添加劑分析食品添加劑指為改善食品品質(zhì)33防腐劑防腐劑可以抑制食品中微生物的繁殖或殺滅之，防止食物腐敗，保持食品的鮮度和良好品質(zhì)。常用的防腐劑有苯甲酸及其鈉鹽，山梨酸及其鈉鹽等。在我國(guó)，目前食品生產(chǎn)中使用的防腐劑絕大多數(shù)都是人工合成的，使用不當(dāng)會(huì)有一定的副作用；有些防腐劑甚至含有微量毒素，長(zhǎng)期過(guò)量攝入會(huì)對(duì)人體健康造成一定的損害，而且隨著人們對(duì)綠色食品的要求不斷提高，食品中防腐劑含量的測(cè)定就顯得尤其重要。防腐劑防腐劑可以抑制食品中微生物的繁殖或34甜味劑天然甜味劑有蔗糖、葡萄糖、甘草酸鈉鹽等人工甜味劑有糖精及其鈉鹽、環(huán)已基氨基磺酸鈉等。而糖精鈉價(jià)格低廉，添加方便，故使用面很廣。但如不嚴(yán)格控制添加量，過(guò)量會(huì)對(duì)人體造成危害。因此必須對(duì)市售食品中添加劑糖精鈉的情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)。甜味劑天然甜味劑有蔗糖、葡萄糖、甘草酸鈉鹽等35苯甲酸、山梨酸和糖精鈉色譜圖苯甲酸、山梨酸和糖精鈉色譜圖36三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖37食用色素為了改善食品的感官性狀，允許在食品中添加一定限量的食用色素。食用色素可分為食用天然色素和合成色素，天然色素來(lái)源于植物色素和動(dòng)物色素，一般較為安全。但合成色素大都有慢性毒性或致癌性，必須嚴(yán)格控制使用種類及含量。合成食用色素：是以從煤焦油中分離出來(lái)的苯胺染料為原料制成的。這類色素大多對(duì)人體有害，表現(xiàn)在3方面，即一般毒性、致瀉性和致癌性。因此，要嚴(yán)格管理，不得濫用。我國(guó)規(guī)定的人工合成色素也只有5種，就是莧菜紅、胭脂紅、檸檬黃、靛藍(lán)和日落黃，其最大容許使用量都0.01%食用色素為了改善食品的感官性狀，允許在食38莧菜紅、胭脂紅、檸檬黃、靛藍(lán)和日落黃

標(biāo)準(zhǔn)色譜圖莧菜紅、胭脂紅、檸檬黃、靛藍(lán)和日落黃

標(biāo)準(zhǔn)色譜圖39食品污染物分析

霉菌毒素（黃曲霉毒素、黃桿菌毒素、大腸桿菌毒素等）、微量元素、農(nóng)藥殘留等。其中黃曲霉素存在最為普遍，是食品貯存時(shí)由真菌產(chǎn)生的毒素，有致癌作用。食品污染物分析霉菌毒素（黃曲霉毒素、黃桿菌毒素、403.醫(yī)藥中的應(yīng)用合成藥物：抗生素、抗憂郁藥物（冬眠靈、氯丙咪嗪、安定、利眠寧、苯巴比妥等）、黃胺類藥等天然藥物生物堿（吲哚堿、顛茄堿、鴉片堿、強(qiáng)心甙）等3.醫(yī)藥中的應(yīng)用合成藥物：抗生素、抗憂郁藥物（冬眠靈、氯丙咪41生物堿類是存在于生物體（主要為植物）中的一類含氮的堿性有機(jī)化合物，大多數(shù)有復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，氮素多包含在環(huán)內(nèi)，有顯著的生物活性，是中草藥中重要的有效成分之一。在現(xiàn)代的分析手段中，高效液相法是分析和分離生物堿類化合物的主要手段之一。生物堿類是存在于生物體（主要為植物）中的42磺胺類藥物磺43水溶性維生素的分離水444.化工中的應(yīng)用

主要應(yīng)用在無(wú)機(jī)化工產(chǎn)品、合成高分子化合物、表面活性劑、洗滌劑成分、化妝品、染料等。4.化工中的應(yīng)用45偶氮染料偶氮染料偶氮基兩端連接方基的一類有機(jī)化合物)是紡織品服裝在印染工藝中應(yīng)用最廣泛的一類合成染料，用于多種天然和合成纖維的染色和印花，也用于油漆、塑料、橡膠等的著色。在特殊條件下，它能分解產(chǎn)生20多種致癌芳香胺，經(jīng)過(guò)活化作用改變?nèi)梭w的DNA結(jié)構(gòu)引起病變和誘發(fā)癌癥。

偶氮染料偶氮染料偶氮基兩端連接方基的一類有機(jī)化合物46需要檢測(cè)偶氮的產(chǎn)品1服裝、被褥、毛巾、假發(fā)、假眉毛、帽子、尿布以及其他的清潔衛(wèi)生用品、睡袋2鞋、手套、手表帶、手提袋、各種錢包、公文包、椅子套3紡織或皮革玩具、帶有紡織或皮革服裝的玩具、合成染料有機(jī)化合物染料需要檢測(cè)偶氮的產(chǎn)品1服裝、被褥、毛巾、假發(fā)、假眉毛、帽子4724種禁用偶氮染料標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖24種禁用偶氮染料標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖48含氯苯酚含氯苯酚作為一種防腐、防霉、防蛀劑使用在皮革等生態(tài)紡織品行業(yè)中，三氯苯酚具有一定的防霉效果，但是對(duì)人體具有較大的生物毒性，因其有升華的特性，揮發(fā)性極強(qiáng)，吸入或經(jīng)皮膚吸收可引起頭痛、疲倦、眼睛、粘膜及皮膚的刺激癥狀、神經(jīng)痛、多汗、呼吸艱難、發(fā)紺、肝、腎損害等。含氯苯酚含氯苯酚作為一種防腐、防霉、防蛀劑49含氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖含氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖505.生物

主要有：氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核糖核酸、生物胺、多糖、酶、天然高分子化合物等。5.生物51多肽色譜圖多肽色譜圖52果糖色譜圖果糖色譜圖536.材料高分子材料：以高分子化合物為基礎(chǔ)的材料，是由相對(duì)分子質(zhì)量較高的化合物構(gòu)成的。主要包括橡膠、塑料、纖維、涂料、膠粘劑和高分子基復(fù)合材料，所有的生命體都可以看作是高分子的集合。6.材料高分子材料：以高分子化合物為基礎(chǔ)的54環(huán)氧樹(shù)脂含量色譜圖環(huán)氧樹(shù)脂含量色譜圖55熒光增白劑色譜圖熒光增白劑色譜圖56

四、生產(chǎn)液相色譜儀器的廠家

進(jìn)口儀器品牌

國(guó)產(chǎn)儀器品牌（含國(guó)內(nèi)組裝）

四、生產(chǎn)液相色譜儀器的廠家

57進(jìn)口儀器品牌沃特