植物組織培養(yǎng)-蝴蝶蘭組織培養(yǎng) 課件

植物組織培養(yǎng)蝴蝶蘭花梗培養(yǎng)版權(quán)所有：昌平職業(yè)學(xué)校植物組織培養(yǎng)任務(wù)1：蝴蝶蘭介紹版權(quán)所有：昌平職業(yè)學(xué)校蝴蝶蘭介紹蝴蝶蘭，又稱蝶蘭，蘭科蝴蝶蘭屬，屬名Phalaenopsis（為希臘語Phalaina(蛾)與Opsis(模樣)二語組合而成）因其花形似蝶，故名。此屬原產(chǎn)地為熱帶亞洲至澳大利亞，約40種，我國6種，全部為附生蘭。全屬約20個原生種。由于花大、花期長，花色艷麗色澤豐富，花形美麗別致，如蝴蝶翩翩飛舞，深受人們喜愛，百賞不厭，被譽(yù)為是“洋蘭皇后”。蝴蝶蘭蝴蝶蘭介紹蝴蝶蘭介紹蝴蝶蘭是草莖類植物，莖短，有肥厚多肉的葉片，綠色或帶有紅褐色斑塊，花莖從靠近上部的葉腋間抽出，有花數(shù)奪至多朵，不同種有較大的差異?；ㄉ邪住ⅫS、粉紅、紅、紫紅及各種復(fù)色。1、蝴蝶蘭生長習(xí)性蝴蝶蘭介紹高溫多濕河川海岸邊的森林樹木是蝴蝶蘭附著生長的地方，盆栽通常用苔蘚、蕨根、樹皮塊栽植在透氣和排水十分好的多孔盆中。1.蝴蝶蘭生長習(xí)性蝴蝶蘭介紹2、蝴蝶不同生長時期蝴蝶蘭所需光、溫、肥料的比較光度（Lux）最適溫度（℃）肥料小苗（穴盤基1.5″）中苗（2.5″）大苗（3.5″）開始催花前四十五天盆花開始催花花梗20cm后開始開花6000-800012000-1500015000-2000015000-2000025000-30000日溫夜溫26-2826-2826-2826-2826-2826-2826-2823-2423-2423-2423-2518-2018-2016-18N:P:KEC值（北京）20：20：2020：20：2020：20：209：45：1520：20：2020：20：2020：20：200.6-0.81.0-1.21.2-1.51.2-1.51.2-1.5蝴蝶蘭介紹3、蝴蝶蘭生產(chǎn)流程組培瓶苗穴盤苗1.5

〃小苗2.5〃中苗3.5〃大苗組培瓶苗組培瓶苗溫室馴化3-5周栽培2-3個月栽培3-4個月栽培3-5個月栽培5個月催花4個月葉尖距＜4cm葉尖距＞4cm葉尖距5-6cm葉尖距10-14cm葉尖距18-22cm低溫處理假鱗莖成熟5片葉植物組織培養(yǎng)任務(wù)2：蝴蝶蘭花梗的接種與處理版權(quán)所有：昌平職業(yè)學(xué)校蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟花梗側(cè)芽培養(yǎng)誘導(dǎo)腋芽萌發(fā)外植體選擇和消毒花梗消毒和接種初代培養(yǎng)繼代增殖生根培養(yǎng)壯苗培養(yǎng)蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟（二）擦拭超凈工作臺一般情況下，選取蝴蝶蘭的花梗作為外植體，因為花梗不損傷植株而且成活率高。（一）外植體的選擇標(biāo)準(zhǔn)：選擇優(yōu)良的種質(zhì)，品種的選擇要有前瞻性。選擇健壯的植株，要求母株無病蟲害、無畸形變異、無病毒。選擇最適的時期，最好選擇在春秋濕度低的季節(jié)，花朵開放2-3朵時采切。一、花梗選擇與處理蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟（二）擦拭超凈工作臺（二）花梗消毒處理選取剪下適合標(biāo)準(zhǔn)的花梗，放在自來水下沖洗；將花梗剪成一芽一段，用75%的酒精浸泡，放在超聲波清洗器上清洗2分鐘；將每段花梗芽剝?nèi)グ?，再放?%的次氯酸鈉溶液中，在超聲波清洗器中清洗8-10分鐘。一、花梗選擇與處理蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟（二）擦拭超凈工作臺在超凈工作臺上，將消毒沖洗好的花梗接種到試管培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基為MS+6-BA3~5mg/l+椰汁100ml+糖30g+瓊脂6g，pH5.6~5.8。培養(yǎng)溫度25-28℃，光照1500-2000lux，每天光照10-12h，接種7天后，側(cè)芽膨大并向外伸長，30d左右長出小葉，50d左右長成具3-5片小葉的單株小苗。二、蝴蝶蘭花梗接種蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟（二）擦拭超凈工作臺選取外植體蝴蝶蘭開花約一個月后，大多選取已開有少數(shù)花的健壯花序，切取帶有花梗和芽的節(jié)段蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟（二）擦拭超凈工作臺外植體消毒超聲波振蕩消毒液浸泡蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟（二）擦拭超凈工作臺蝴蝶蘭花梗側(cè)芽切割接種蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟（二）擦拭超凈工作臺蝴蝶蘭腋芽萌發(fā)蝴蝶蘭花梗側(cè)芽培養(yǎng)步驟（二）擦拭超凈工作臺蝴蝶蘭腋芽增殖蝴蝶蘭腋芽增殖植物組織培養(yǎng)任務(wù)3：蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)版權(quán)所有：昌平職業(yè)學(xué)校蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)培養(yǎng)中溫度、光照、濕度等各種環(huán)境條件，培養(yǎng)基組成、pH值、滲透壓等各種化學(xué)環(huán)境條件都會影響組織

一、培養(yǎng)條件對組培苗的影響蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)二、影響組培苗培養(yǎng)的因素溫度光照濕度培養(yǎng)基的滲透壓PH值植物組織培養(yǎng)時培養(yǎng)基的pH值大多在5.0—6.5調(diào)節(jié)滲透壓常常從糖入手植物材料一般最適溫度在25±2℃之間最常用的光周期是光照16h，黑暗8h一般情況下，培養(yǎng)器內(nèi)相對濕度應(yīng)達(dá)100%，培養(yǎng)室內(nèi)環(huán)境的相對濕度在70%—80%氣體氧氣是愈傷組織生長所必需的環(huán)境條件蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)（一）光照的影響

培養(yǎng)中光照也是重要的條件之一，主要表現(xiàn)在光強(qiáng)、光質(zhì)、以及光周期等方面：

光周期：黑暗與光照交替的時間光量：光照強(qiáng)度光質(zhì)：光的波長蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)1.離體培養(yǎng)中光周期的調(diào)節(jié)最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。愈傷組織誘導(dǎo)階段，一般采用三種做法：全暗、周期性光照、散射性光照。依據(jù)植物種類不同做法不同，多數(shù)植物適合全暗或周期性光照，器官發(fā)生階段：一般給予周期性光照比較好。蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)2.光量的影響光照強(qiáng)度對培養(yǎng)細(xì)胞的增殖和器官的分化有重要影響，從目前的研究情況看，光照強(qiáng)度對外植物體、細(xì)胞的最初分裂有明顯的影響。蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)2.光量的影響一般來說，光照強(qiáng)度較強(qiáng)，幼苗生長的粗壯，而光照強(qiáng)度較弱幼苗容易徒長。離體培養(yǎng)條件下常用的光量，一般為1000-4000lx（勒克斯）。離體培養(yǎng)中通常難以達(dá)到4000lx，一般光量在2000-3000lx。光照強(qiáng)度的高低直接影響器官分化的頻率。高光量可以降低植物體內(nèi)生長素水平，低光量使植物體內(nèi)生長素素水平較高，容易生根。蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)（二）溫度的影響培養(yǎng)都是在23～27℃之間進(jìn)行，一般采用25±2℃。喜溫性植物：茄科、禾本科、蘭科等。培養(yǎng)溫度一般控制在26-28℃；冷涼性植物：百合科、十字花科、菊科等。通常培養(yǎng)溫度控制在18-22℃或<25℃。蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)（三）濕度的影響組織培養(yǎng)中濕度的影響有兩個方面：一是培養(yǎng)容器內(nèi)的濕度條件，容器內(nèi)主要受培養(yǎng)基水分含量和封口材料的影響。一是環(huán)境的濕度條件。環(huán)境的相對濕度一般要求70～80%。常用加濕器或經(jīng)常灑水的方法來調(diào)節(jié)濕度蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)（四）PH值

多在5.5-6.5左右，一般培養(yǎng)基皆要求不同的植物對培養(yǎng)基最適PH值的要求也是不同的，大5.8，這基本能適應(yīng)大多數(shù)植物培養(yǎng)的需要。

蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)（四）PH值一般來說PH值高于6.5時，培養(yǎng)基全變硬；低于5時，瓊脂不能很好地凝固。因為高溫滅菌會降低PH值（約0.2-0.3個PH值）因此在配制時常提高PH值0.2-0.3單位。蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)（五）滲透壓培養(yǎng)基中由于有添加的鹽類、蔗糖等化合物，因此，而影響到滲透壓的變化。通常1-2個大氣壓對植物生長有促進(jìn)作用，2個大氣壓以上就對植物生長有阻礙作用，而5-6個大氣壓植物生長就會完全停止，6個大氣壓植物細(xì)胞就不能生存

蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)（五）滲透壓-滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)

培養(yǎng)基各種物質(zhì)中，糖對培養(yǎng)基滲透壓起決定性作用。因此調(diào)節(jié)滲透壓往往從調(diào)節(jié)糖濃度著手。糖除了作為滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)外，還是培養(yǎng)基重要的碳源和能源。另外，甘露醇，山梨醇等也可以作為調(diào)節(jié)物質(zhì)。蝴蝶蘭組培苗培養(yǎng)（六）氣體

氧氣是培養(yǎng)中必需的因素，瓶蓋封閉時要考慮通氣問題，可用附有濾氣膜的封口材料。通氣最好的是棉塞封閉瓶口，但棉塞易使培養(yǎng)基干燥，夏季易引起污染。固體培養(yǎng)基可加進(jìn)活性炭來增加通氣度，以利于發(fā)根。培養(yǎng)室要經(jīng)常換氣，改善室內(nèi)的通氣狀況。液體振蕩培養(yǎng)時，要考慮振蕩的次數(shù)、振幅等，同時要考慮容器的類型、培養(yǎng)基等。植物組織培養(yǎng)任務(wù)4：蝴蝶蘭組培苗過渡栽培版權(quán)所有：昌平職業(yè)學(xué)校蝴蝶蘭組培苗過渡栽培生根苗移栽前,連同培養(yǎng)瓶一起從培養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到智能溫室,馴化3-5周。蝴蝶蘭組培苗的馴化蝴蝶蘭組培苗過渡栽培組培苗移栽包苗技術(shù)流程蝴蝶蘭組培苗過渡栽培蝴蝶蘭組培苗移栽生產(chǎn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)

小苗中苗大苗催花前盆花

1.5”2.5”3.5”45天催花花梗開花光度（Lux）6000-800012000-1500015000-2000015000-2000025000-30000最適溫度（℃）26-2826-2826-2826-2826-2826-2822-2423-2423-2423-2423-2523-2