膠體金免疫層析技術(shù)課件

膠體金免疫層析技術(shù)莊捷膠體金免疫層析技術(shù)1什么叫膠體金免疫層析技術(shù)膠體金免疫層析技術(shù)就是以膠體金為顯色媒介，利用免疫學(xué)中抗原抗體能夠特異性結(jié)合原理，在層析過(guò)程中完成這一反應(yīng)，從而達(dá)到檢測(cè)的目的。什么叫膠體金免疫層析技術(shù)膠體金免疫層析技術(shù)就是以膠體金為顯色2膠體金免疫層析中的三大技術(shù)膠體金技術(shù)：為診斷提供肉眼可見的顯色媒介膜技術(shù)

原料的固化載體，層析的動(dòng)力來(lái)源免疫學(xué)技術(shù)

特異性的檢測(cè)樣本中需要檢測(cè)物質(zhì)膠體金免疫層析中的三大技術(shù)膠體金技術(shù)：3膠體金技術(shù)什么叫膠體金：

膠體金是一群以膠體狀態(tài)，粒徑在微米級(jí)以下的懸浮于水溶液中的金的顆粒。膠體金技術(shù)什么叫膠體金：4膠體金發(fā)展歷史古代：用于提煉長(zhǎng)生不老藥物；

玻璃染色。近現(xiàn)代：19世紀(jì)50年代由MichaelFaraday第一次人工合成純膠體金1971年膠體金被第一次用于電鏡免疫膠體金染色法(IGS)觀察沙門氏菌1974年Romano將膠體金標(biāo)記在第二抗體（馬抗人IgG）上，建立了間接免疫膠體金染色法

1978年geoghega發(fā)現(xiàn)了膠體金標(biāo)記物在光鏡水平的應(yīng)用膠體金發(fā)展歷史古代：5膠體金的結(jié)構(gòu)：膠體金結(jié)構(gòu)：

膠體金顆粒由一個(gè)基礎(chǔ)金核（原子金Au）及包圍在外的雙離子層構(gòu)成，緊連在金核表面的是內(nèi)層負(fù)離子（AuC12－），外層離子層H+則分散在膠體間溶液中，以維持膠體金游離于溶膠間的懸液狀態(tài)。膠體金的結(jié)構(gòu)：膠體金結(jié)構(gòu)：6膠體金的性質(zhì)?染色—不同粒徑，不同顏色?膠體的特性—充分的溶解性，良好的流動(dòng)性?吸附能力—在不改變蛋白性質(zhì)的情況下，穩(wěn)

定迅速的吸附蛋白粒徑顏色2～5nm橙色的10～20nm酒紅色30～80nm紫紅色膠體金的性質(zhì)?染色—不同粒徑，不同顏色粒徑顏色2～5nm橙色7膠體金的應(yīng)用膠體金在電鏡水平的應(yīng)用膠體金在光鏡水平的應(yīng)用膠體金在流式細(xì)胞儀中的應(yīng)用免疫印跡技術(shù)膠體金的應(yīng)用膠體金在電鏡水平的應(yīng)用8膜技術(shù)什么叫硝酸纖維素膜？

以硝酸纖維素為基質(zhì)，經(jīng)過(guò)勻漿，滾筒鋪膜，烘制成型從而制的一定孔徑的硝酸纖維素膜。勻漿配方?jīng)Q定硝酸纖維素膜的性質(zhì)。烘制速度決定硝酸纖維素膜的孔徑。

膜技術(shù)什么叫硝酸纖維素膜？9硝酸纖維素膜的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)硝酸纖維素膜的性質(zhì)：?微孔性：層析動(dòng)力的來(lái)源?多孔性：樣本流動(dòng)性?蛋白吸附能力：?樣本過(guò)濾：孔徑（μM）流速(S/4cm)0.21800.451350.875硝酸纖維素膜的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)硝酸纖維素膜的性質(zhì)：孔徑（μM）流速10硝酸纖維素膜的應(yīng)用?濾膜?分子雜交?核酸、蛋白轉(zhuǎn)印?免疫層析硝酸纖維素膜的應(yīng)用?濾膜11免疫學(xué)的定義是機(jī)體識(shí)別“自身”與“非己”抗原，對(duì)自身抗原形成天然免疫耐受，對(duì)“非己”抗原產(chǎn)生排斥作用的一種生理功能。正常情況下，這種生理功能對(duì)機(jī)體有益，可產(chǎn)生抗感染、抗腫瘤等維持機(jī)體生理平衡和穩(wěn)定的免疫保護(hù)作用免疫學(xué)的定義是機(jī)體識(shí)別“自身”與“非己”抗原，對(duì)自身12免疫學(xué)的發(fā)展?經(jīng)驗(yàn)免疫學(xué)時(shí)期在實(shí)踐中創(chuàng)造性地發(fā)明了人痘苗?經(jīng)典免疫學(xué)時(shí)期由人體現(xiàn)象的觀察進(jìn)入了科學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí)期?近代免疫學(xué)時(shí)期出現(xiàn)了全新的免疫學(xué)理論?現(xiàn)代免疫學(xué)時(shí)期從分子水平對(duì)免疫系統(tǒng)進(jìn)行研究免疫學(xué)的發(fā)展?經(jīng)驗(yàn)免疫學(xué)時(shí)期13抗原抗體的結(jié)合抗原抗體——鑰匙和鎖的關(guān)系抗體能夠特異性的結(jié)合抗原的活性位點(diǎn)?？乖贵w的結(jié)合抗原抗體——鑰匙和鎖的關(guān)系14基因工程—人造蛋白的誕生及意義基因工程指按人們意愿設(shè)計(jì)，通過(guò)改造基因或基因組而改變生物的遺傳特性，從而獲得新的品種貨或產(chǎn)品。意義：可以穩(wěn)定的獲得人類所要的蛋白?；蚬こ獭嗽斓鞍椎恼Q生及意義基因工程指按人們意愿設(shè)計(jì)，通過(guò)15膠體金免疫層析技術(shù)的誕生和發(fā)展

?20世紀(jì)90年代初，第一個(gè)免疫層析產(chǎn)品誕生——用于人絨毛膜促性腺激素(HCG)的測(cè)定。?在其后的20年中，免疫層析產(chǎn)品得到了快速的發(fā)展：項(xiàng)目所占百分比早孕檢測(cè)90%以上毒品檢測(cè)80-90%疾病檢測(cè)30-40%膠體金免疫層析技術(shù)的誕生和發(fā)展?20世紀(jì)90年代初，第一16膠體金免疫層析技術(shù)的特點(diǎn)?快速，定性10分鐘以內(nèi)就可得到檢測(cè)結(jié)果。?無(wú)需設(shè)備

一根檢測(cè)條就能完成檢測(cè)?準(zhǔn)確、靈敏

靈敏度可以達(dá)到10-9數(shù)量級(jí)膠體金免疫層析技術(shù)的特點(diǎn)?快速，定性17膠體金免疫層析技術(shù)的發(fā)展?應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大

疾病診斷，食品安全，藥物檢測(cè)，DNA檢測(cè)?特異性，靈敏度不斷提高?半定量，定量檢測(cè)：

銀染色膠體金免疫層析技術(shù)；

免疫熒光技術(shù)；

時(shí)間分辨熒光技術(shù)

HCG檢測(cè)靈敏度特異性樣本早