中藥制劑理化鑒別的方法專家講座

中藥制劑理化判別方法

中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第1頁

第一節(jié)必備知識(shí)一、理化判別意義

中藥制劑理化判別是利用其藥味(原料藥)中某種或某類指標(biāo)性成份理化性質(zhì)，經(jīng)過化學(xué)分析方法和儀器分析方法，檢測(cè)相關(guān)成份在制劑中是否存在，進(jìn)而對(duì)所含藥味與處方一致性做出判斷，到達(dá)判定藥品真?zhèn)沃繕?biāo)。藥品真實(shí)性檢定是藥品質(zhì)量控制主要內(nèi)容，是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量主要依據(jù)。假如藥品缺乏真實(shí)性，則可判定為不合格藥品，并以假藥論處。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第2頁二、理化判別特點(diǎn)

理化判別是以制劑藥味中指標(biāo)性成份（主要為有效成份或特征性成份）為檢測(cè)對(duì)象，故能夠愈加客觀深刻地評(píng)價(jià)藥品真實(shí)性。對(duì)于液體制劑或其它不含原料藥粉制劑，理化判別則顯得為主要。

中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第3頁三、理化判別方法當(dāng)前中國(guó)藥典收載理化判別方法有：普通化學(xué)判別法、微量升華法、熒光判別法、分光光度法、薄層色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法等。其中色譜法尤其是薄層色譜法得到廣泛應(yīng)用，這主要是因?yàn)樯V法含有分離分析雙重功效，從而大大提升了判別工作靈敏度和專屬性，并成為今后中藥制劑判別發(fā)展方向。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第4頁

《中國(guó)藥典》（）新增中成藥（116種）判別方法

判別方法應(yīng)用具種說明薄層色譜114高效液相色譜4氣相色譜3主要判別揮發(fā)性成份分光光度法0普通化學(xué)反應(yīng)法2熒光判別法0微量升華法0顯微判別法29適適用于含藥粉劑型中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第5頁第二節(jié)普通化學(xué)反應(yīng)法

（

GeneralChemicalReaction）一、原理

普通化學(xué)反應(yīng)法是利用檢測(cè)試劑與制劑中指標(biāo)性成份發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，依據(jù)所產(chǎn)生顏色、沉淀或氣體等現(xiàn)象，來判斷一些成份或一些藥味有沒有。由此可見，所謂普通化學(xué)反應(yīng)法即通常所說顯色反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第6頁二．特點(diǎn)

1.普通化學(xué)反應(yīng)法含有操作簡(jiǎn)便，適用性較強(qiáng)等特點(diǎn)。2.其否定功效往往強(qiáng)于必定功效,專屬性較差。3.易發(fā)生假陽性或假陰性反應(yīng)中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第7頁假陽性或假陰性反應(yīng)克服方法以下：①對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，除去干擾性成份，富集被檢成份。②選取專屬性較強(qiáng)檢測(cè)試劑。③必要時(shí)做陽性或陰性對(duì)照試驗(yàn)加以驗(yàn)證，確保其專屬性和靈敏度。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第8頁

三、慣用普通化學(xué)反應(yīng)主要用于制劑中生物堿、黃酮類、蒽醌類、皂苷、香豆素、萜類以及各種礦物類成份判別

（一）生物堿1.

碘化鉍鉀反應(yīng)產(chǎn)生紅棕色沉淀2.碘化汞鉀反應(yīng)產(chǎn)生類白色沉淀3.硅鎢酸反應(yīng)產(chǎn)生白色沉淀4.苦味酸反應(yīng)產(chǎn)生黃色結(jié)晶性沉淀需在酸性條件下進(jìn)行。注意事先排除其它成份干擾。少數(shù)生物堿不與上述通用沉淀試劑反應(yīng)，而含有專屬性較強(qiáng)其它反應(yīng)。

中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第9頁（二）黃酮類化合物

最多使用檢識(shí)反應(yīng)為鹽酸—鎂粉反應(yīng)，呈紫紅色。大山楂丸（山楂）、抗骨增生丸（淫羊藿）、參茸保胎丸（黃芩）等。另外，黃芩提取物采取二氯氧鋯-鹽酸顯色反應(yīng)進(jìn)行檢識(shí)。（三）蒽醌類化合物

主要應(yīng)用堿液反應(yīng)（Borntrager反應(yīng)），陽性反應(yīng)呈紅色，加酸紅色褪去呈黃色。比如大黃流浸膏。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第10頁（四）皂苷

慣用定性判別反應(yīng)有：①泡沫反應(yīng)

樣品水溶液振搖后，產(chǎn)生持久性泡沫。

②醋酐—濃硫酸反應(yīng)

甾體皂苷展現(xiàn)污綠色，三萜皂苷展現(xiàn)紅、紅紫色。③濃硫酸反應(yīng)

展現(xiàn)紅、紅紫色。

④三氯化銻或五氯化銻反應(yīng)

氯仿液呈紫蘭色。

⑤氯仿—濃硫酸反應(yīng)

氯仿層出現(xiàn)紅色或蘭色，并具綠色熒光。例：地奧心血康膠囊（黃山藥和穿山龍薯蕷提取物）、養(yǎng)心定悸膏（甘草、紅參、麥冬）。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第11頁（五）香豆素、內(nèi)酯類和酚類慣用檢識(shí)反應(yīng)有：①氯亞氨基-2，6-二氯醌-四硼酸鈉反應(yīng)（Gibbs反應(yīng)），展現(xiàn)藍(lán)色。②異羥肟酸鐵反應(yīng)呈紅色。應(yīng)用具種有：養(yǎng)陰清肺膏（牡丹皮）、前列舒丸（牡丹皮）等。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第12頁（六）揮發(fā)性成份

主要使用香草醛—濃硫酸反應(yīng)檢識(shí)這類成份，正反應(yīng)呈紅、紅紫色。應(yīng)用具種主要有：萬應(yīng)錠（冰片）、牛黃解毒片（冰片）、養(yǎng)心定悸膏（桂枝、生姜）等。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第13頁（七）礦物藥朱砂、石膏、雄黃等為中成藥中常見礦藥。1.朱砂（主含HgS）主要采取銅片反應(yīng)。HgS+2HCl+Cu→CuCl2+Hg（白△↑）+H2S天王補(bǔ)心丹等中成藥中朱砂判定。

2.石膏、牡蠣、海螵蛸等這類藥品均富含鈣鹽，主要采取草酸銨反應(yīng)。CaSO4+(NH4)2C2O4→CaC2O4（白）↓+(NH4)2SO4

CaC2O4溶于鹽酸，難溶于醋酸。CaC2O4+2HCl→CaCl2+H2C2O4止咳桔紅口服液（石膏）、安胃片（海螵蛸）、龍牡壯骨顆粒（牡蠣、龍骨、乳酸鈣、葡萄糖酸鈣等）

中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第14頁

3.雄黃（主含As2S2）

（1）氯化鋇沉淀法（檢出硫）

As2S2+KClO3+4HNO32K3AsO3+H2SO4+Cl2↑+4NO↑H2SO4+BaCl2BaSO4↓（白）牙痛一粒丸

（2）硫化氫反應(yīng)（檢出砷）

2As2S2+7O22As2O3+4SO2↑As2O3+3H2O2H3AsO32H3AsO3+3H2SAs2S3(黃)+6H2O

As2S3在鹽酸中析出黃色沉淀，并溶于碳酸銨中

4As2S3+12(NH4)2CO34(NH4)3AsO3+4(NH4)3AsS3+12CO2↑小兒驚風(fēng)散等。[o]中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第15頁（八）動(dòng)物藥常含有較多蛋白質(zhì)或氨基酸、故判別這類藥品，常使用茚三酮反應(yīng)，正反應(yīng)呈紅紫色。比如：龜齡集（鹿茸、海馬、等）、參茸保胎丸（阿膠、鹿茸）等。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第16頁四、操作方法（1）供試液制備（見前述）（2）操作方式大多為試管反應(yīng)，或在檢測(cè)試紙上、或在蒸發(fā)皿（坩堝）中進(jìn)行反應(yīng)中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第17頁五、結(jié)果判斷將反應(yīng)現(xiàn)象或結(jié)果與藥品標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，若一致則符合要求。若不一致則判定為不符合要求。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第18頁六、注意事項(xiàng)①試管反應(yīng)普通使用2×10cm試管，取供試液1~2ml。加入檢測(cè)試液時(shí)，試管應(yīng)稍傾斜，試液應(yīng)沿試管內(nèi)壁逐滴加入，滴管下口不得觸及內(nèi)壁。②加入反應(yīng)試液后普通需振搖試管，使之與供試液混勻。振搖時(shí)應(yīng)緩緩搖擺振搖，不得上下振搖，手指不允許堵塞試管口，若需層反應(yīng)，則不得振搖試管。③普通需在白色背景下觀察反應(yīng)所產(chǎn)生顏色或沉淀，若沉淀為白色或類白色則需在黑色背景下觀察。④假如反應(yīng)需加熱，普通在水浴中加熱。用試管夾夾持試管，內(nèi)容物不得超出容積2/3，試管應(yīng)傾斜45度，試管口不得閉塞，并不得朝向人。加熱有機(jī)溶液絕對(duì)不允許使用明熾熱源。⑤假如反應(yīng)需無水條件，必須保持試管、蒸發(fā)皿等容器干燥，比如醋酐—濃硫酸反應(yīng)。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第19頁七、應(yīng)用實(shí)例1.千柏鼻炎片2.小兒清熱止咳口服液3.茴香橘核丸4.地奧心血康膠囊5.養(yǎng)陰清肺膏6.安胃片7.天王補(bǔ)心丹8.牙痛一粒丸9.中風(fēng)回春片中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第20頁第三節(jié)升華判別法

（Sublimation）

一、原理本法是利用一些成份升華性，在一定溫度下將其從制劑中升華分離出來，并以升華物所含有一些理化性質(zhì)作為制劑判別依據(jù)。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第21頁二、特點(diǎn)升華法含有簡(jiǎn)便、實(shí)用等特點(diǎn)，因?yàn)樯A性僅為少數(shù)中藥化學(xué)成份所含有且升華物純度較高，故該法專屬性亦很好。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第22頁三、操作方法大多采取微量升華法，少數(shù)使用坩堝法或蒸發(fā)皿法，在此，僅介紹微量升華。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第23頁六味地黃丸中冰片升華物六味地黃丸中冰片升華物顯微鏡下觀六味地黃丸中冰片升華物香草醛濃硫酸顯色中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第24頁

四、注意事項(xiàng)

①升華時(shí)應(yīng)緩緩加熱，溫度過高，易使藥粉焦化，在載玻片上產(chǎn)生焦油狀物，影響對(duì)升華物觀察或檢識(shí)。溫度控制可經(jīng)過調(diào)整酒精燈火焰與石棉板間距來實(shí)現(xiàn)。②樣品粉末用量普通約0.5g，過少不易產(chǎn)生足夠量升華物。③可在載玻片上滴加少許水降溫，促使升華物凝集析出。④無金屬片，可用載玻片代替。

中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第25頁五、應(yīng)用實(shí)例（P58）(一)萬應(yīng)錠判別（二）小兒驚風(fēng)散判別（反應(yīng)機(jī)理）（三）明目地黃丸判別中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第26頁第四節(jié)熒光判別法

（Fluorescence）一、原理

熒光判別法是利用制劑中一些成份，如黃酮類、蒽醌類、香豆素類等在可見光或紫外光照射下能產(chǎn)生一定顏色熒光性質(zhì)，對(duì)中藥制劑進(jìn)行判別。有成份本身不具熒光性，但加酸、堿處理后，或經(jīng)其它化學(xué)方法處理后也可產(chǎn)生熒光供判別用。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第27頁二．特點(diǎn)本法操作簡(jiǎn)便、靈敏，含有一定專屬性。比如大黃和土大黃，前者顯棕色至棕紅色熒光，而后者顯亮藍(lán)色熒光，很輕易區(qū)分。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第28頁三、操作方法

取中成藥提取液點(diǎn)加于濾紙上或加入蒸發(fā)皿中，置紫外光燈（365nm）下約10cm處觀察所產(chǎn)生熒光。必要時(shí)可在供試品上加酸、堿或其它試劑，再觀察熒光及其改變。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第29頁四、注意事項(xiàng)①熒光強(qiáng)度較弱，故普通需在暗室中觀察熒光。②供試液普通用毛細(xì)管吸收，少許屢次點(diǎn)加在濾紙上，使斑點(diǎn)集中且含有一定濃度。③紫外光對(duì)人眼睛和皮膚有損傷，操作者應(yīng)防止與紫外光較長(zhǎng)時(shí)間接觸。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第30頁五、應(yīng)用實(shí)例（P59）（一）元胡止痛片（二）五味麝香丸（三）熱炎寧顆粒中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第31頁第五節(jié)薄層色譜判別法

（ThinLayerChromatographyTLC）

一、原理基于相同物質(zhì)在同一色譜條件下，表現(xiàn)出相同色譜行為這一基本規(guī)律，在同一塊薄層板上點(diǎn)加供試品和對(duì)照物，在相同條件下展開，顯色檢出眾譜斑點(diǎn)后，將所得供試品與對(duì)照物色譜圖進(jìn)行對(duì)比分析，從而對(duì)藥品進(jìn)行定性判別。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第32頁二、特點(diǎn)

（一）簡(jiǎn)便、快速、易普及、含有分離和分析雙重功效，且采取共薄層對(duì)照分析法，故專屬性亦較強(qiáng)。（二）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。(05版藥典新增)1.檢測(cè)靈敏度2.分離度3.重復(fù)性中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第33頁1.檢測(cè)靈敏度

主要用于限量檢驗(yàn).采取供試品溶液和對(duì)照品溶液與稀釋若干倍（10倍）對(duì)照品溶液在要求色譜條件下，于同一塊薄層板上點(diǎn)樣、展開、檢視，后者應(yīng)顯示清楚斑點(diǎn)。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第34頁2.分離度

用于判別時(shí)，對(duì)照品溶液與供試品溶液中對(duì)應(yīng)主斑點(diǎn)，應(yīng)顯示兩個(gè)清楚分離斑點(diǎn)。用于限量檢驗(yàn)和含量測(cè)定時(shí)，要求定量峰與相鄰峰之間有很好分離度，除另有要求外，分離度應(yīng)大于1.0。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第35頁分離度（R）計(jì)算公式為：R=2(d2-d1)/W1+W2式中d1為相鄰兩峰中后一峰與原點(diǎn)距離；d2為相鄰兩峰中前一峰與原點(diǎn)距離；W1及W2為相鄰兩峰各自峰寬；ABW1W2d1d2中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第36頁3.重復(fù)性

主要用于含量測(cè)定.即同一供試品溶液在同一塊薄層板上平行點(diǎn)樣待測(cè)成份峰面積測(cè)量值相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)應(yīng)小于3.0%；需顯色后測(cè)量相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)小于5.0%。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第37頁（三）對(duì)照物設(shè)置

對(duì)照物分為對(duì)照品（主要為有效成份和特征性成份單體）、對(duì)照藥材和對(duì)照提取物三種。對(duì)照物設(shè)置有四種方式：①設(shè)置一個(gè)或數(shù)種對(duì)照品②設(shè)置對(duì)照提取物③設(shè)置一個(gè)或數(shù)種對(duì)照藥材④同時(shí)設(shè)置對(duì)照品和對(duì)照藥材(“雙對(duì)照”)，它要求樣品色譜圖中主斑點(diǎn)應(yīng)與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜圖中相關(guān)斑點(diǎn)相一致，從而大大提升了薄層色譜判別法專屬性和整體性，可有效地檢出藥品是否使用了假冒藥材.中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第38頁（四）TLC已廣泛用于中藥材及其制劑檢驗(yàn)，成為中藥判別主要方法和鮮明特色。（五）中國(guó)藥典大多數(shù)品種采取硅膠薄層色譜法，少數(shù)使用聚酰胺薄層色譜法和氧化鋁色譜法。薄層色譜法還可用于藥品雜質(zhì)檢驗(yàn)和含量測(cè)定。

中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第39頁三、影響薄層色譜判別主要原因

影響原因較多，比如供試液凈化程度，吸附劑性能和薄層板質(zhì)量、點(diǎn)樣（原點(diǎn)）質(zhì)量、展開劑組成和飽和情況、對(duì)照品純度、展開距離、相對(duì)濕度和溫度等。重點(diǎn)介紹展開劑、相對(duì)濕度、溫度和pH值影響。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第40頁四、儀器與材料（一）薄層板1.市售薄層板（亦稱預(yù)制薄層板）除另有要求外，普通要求使用市售薄層板。市售薄層板分普通薄層板和高效薄層板兩種。慣用有硅膠薄層板、硅膠GF254薄層板、聚酰胺薄層板、氧化鋁薄層板等。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第41頁2.自制薄層板

在確保色譜質(zhì)量前提下，如需對(duì)薄層板進(jìn)行處理和化學(xué)改性，以適應(yīng)供試品分離要求時(shí)，也可用試驗(yàn)室自制薄層板，除另有要求外，玻板可用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm、20cm×20cm不一樣規(guī)格，最慣用固定相有硅膠G、硅膠GF254、硅膠H、硅膠HF254等。其顆粒大小，普通要求直徑為10~40μm。薄層板采取濕法制備，即使用涂布器將制好固定相糊均勻涂布于玻板上。所用涂布器應(yīng)能使固定相在玻板上涂成一層符合厚度要求均勻薄層。涂布器有手動(dòng)、半自動(dòng)、全自動(dòng)等類型。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第42頁不一樣規(guī)格薄層板鋪制薄層板中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第43頁（二）點(diǎn)樣器材為了增強(qiáng)藥品定性判別可比性，中國(guó)藥典要求采取定量點(diǎn)樣。最慣用是微升毛細(xì)管（定容毛細(xì)管），為了提升點(diǎn)樣效率和質(zhì)量，還可用點(diǎn)樣輔助設(shè)備，如點(diǎn)樣支架、半自動(dòng)或自動(dòng)點(diǎn)樣器。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第44頁（三）展開容器

應(yīng)使用專用展開缸，展開缸有水平式及直立式兩種類型。上行展開普通使用直立展開缸，它又分為平底式和雙槽式，雙槽展開缸含有節(jié)約溶劑、便于預(yù)平衡、可控制展開箱內(nèi)濕度等優(yōu)點(diǎn)。展開缸蓋子應(yīng)能密閉，體積應(yīng)與薄層板大小相適應(yīng)。不能用生物標(biāo)本缸等其它玻璃器皿作為展開缸，不然影響展開質(zhì)量。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第45頁全自動(dòng)點(diǎn)樣儀微升毛細(xì)管雙槽展開缸中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第46頁（四）顯色（檢視）裝置展開后薄層板，普通需采取對(duì)應(yīng)顯色（檢視）方法使板上被檢成份斑點(diǎn)顯色。噴霧顯色應(yīng)使用玻璃噴霧瓶或?qū)Ｓ脟婌F器，要求用壓縮氣體使顯色劑呈均勻霧狀噴出；浸漬顯色可用專用玻璃器皿或適宜展開缸做為浸漬槽；蒸氣熏蒸顯色可在雙槽展開缸或大小適宜干燥器中進(jìn)行；熒光檢視裝置為裝有可見光、254nm及365nm紫外光源和對(duì)應(yīng)濾光片暗箱，可附加攝像設(shè)備供拍照?qǐng)D像用，暗箱內(nèi)光源應(yīng)有足夠光照度。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第47頁噴霧顯色熒光顯色中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第48頁

五、操作方法普通操作步驟為：薄層板制備（制板）→點(diǎn)樣→展開→顯色與檢視（一）薄層板制備1.市售薄層板

臨用前普通應(yīng)在１１０℃活化３０分鐘。聚酰胺薄膜不需活化。如在貯放期間被空氣中雜質(zhì)污染，使用前可用三氯甲烷、甲醇或二者混合溶劑在展開缸中上行展開預(yù)洗，110℃活化，放干燥器中備用。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第49頁2.自制薄層板

除另有要求外，將1份固定相和3份水（或0.2﹪～0.5﹪羧甲基纖維素鈉水溶液）在研缽中向同一方向研磨混合，去除表面氣泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布，取下涂好薄層玻璃板，置水平臺(tái)上室溫下晾干后，在１１０℃烘30分鐘活化，馬上置干燥器中備用。薄層板普通要求新鮮制備，當(dāng)日使用。使用前應(yīng)在反射光及透射光下檢驗(yàn)其質(zhì)量，若板面不均勻、不平整或有麻點(diǎn)、有氣泡、有破損及污染等情況，應(yīng)棄去不用。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第50頁（二）點(diǎn)樣1.供試品溶液制備

主要采取浸漬法、回流以及超聲等方法提取，液液萃取法或固液萃取法進(jìn)行精制。有成份在藥品中是以苷或酯等結(jié)合態(tài)存在，檢驗(yàn)前需水解成游離態(tài)再與對(duì)應(yīng)對(duì)照品一同展開分離、判別。如萬應(yīng)錠中熊膽判別、定坤丹中人參和三七判別和牛黃上清丸中大黃判別。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第51頁2.原點(diǎn)點(diǎn)加除另有要求外，在干燥潔凈環(huán)境，用專用毛細(xì)管或半自動(dòng)、自動(dòng)點(diǎn)樣器械點(diǎn)樣于薄層板上形成原點(diǎn)。原點(diǎn)普通為圓點(diǎn)狀或窄細(xì)條帶狀。原點(diǎn)基線距板底邊10~15mm，高效板原點(diǎn)基線離底邊8~10mm。圓點(diǎn)狀原點(diǎn)直徑普通小于3mm；條帶狀寬度普通為5~10mm。高效板條帶寬度為4~8mm，原點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜，普通不少于8mm，高效板樣品間隔不少于5mm。毛細(xì)管接觸點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)少許屢次點(diǎn)加，才能確保原點(diǎn)小而圓。還需注意勿損傷薄層表面，點(diǎn)加條帶原點(diǎn)時(shí)應(yīng)注意條帶均勻性，用噴霧狀條帶點(diǎn)樣器，可確保點(diǎn)樣質(zhì)量。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第52頁≥8mm原點(diǎn)起始線≥5mm8~15cm1~1.5cm溶劑前沿展開劑液面中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第53頁（三）展開點(diǎn)樣后薄層板放入加有展開劑展開缸中，密閉，普通采取上行一次展開。薄層板浸入展開劑深度以液面距原點(diǎn)5mm為宜，溶劑前沿到達(dá)要求展距后，取出薄層板，晾干，待檢測(cè)。普通上行展開8~15cm，高效板上行展開5～8cm。必要時(shí)可進(jìn)行二次展開或雙向展開。比如，益氣養(yǎng)血口服液中陳皮薄層判別即采取二次展開，先以乙酸乙酯－甲醇－水－吡啶（100︰17︰13︰5）展至3cm，取出晾干；再以甲苯－乙酸乙酯－甲醇－水（20︰10︰1︰1上層）展至8cm，取出晾干。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第54頁展開前普通需用展開劑對(duì)展開缸進(jìn)行預(yù)平衡，即使缸內(nèi)展開劑氣液兩相到達(dá)動(dòng)態(tài)平衡，該過程亦稱“飽和”。為此可在展開缸內(nèi)加入適量展開劑，密閉，保持15~30分鐘。預(yù)平衡后，快速將薄層板放入展開缸中，馬上密閉，展開。若薄層板需同時(shí)預(yù)平衡，可將點(diǎn)樣后薄層板放入雙槽展開缸一側(cè)槽中，另一側(cè)槽中加入展開劑，如上法預(yù)平衡后，再將展開劑移入放有薄層板槽中，展開。展開劑要求新鮮配制，不要屢次重復(fù)使用。展開劑配制后若分層，則應(yīng)按要求放置分層后取需要一相（上層或下層）使用。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第55頁（四）顯色與檢視

1.顏色較深成份可直接在日光下檢視其斑點(diǎn)。2.無色或淺色成份多用噴霧法或浸漬法以適宜顯色劑顯色，或再加熱使之顯色，在日光下檢視。3.有熒光物質(zhì)或遇一些試劑可激發(fā)熒光物質(zhì)可在紫外燈（365nm）下觀察熒光色譜。4.有成份可用試劑蒸氣熏蒸（如碘蒸氣、氨蒸氣）顯色。5.一些無色有紫外吸收且不產(chǎn)生熒光成份可用熒光淬滅法顯色。即在含有熒光劑硅膠板（如硅膠GF254板），在紫外光燈（254nm）下觀察板面上該成份形成熒光淬滅色譜。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第56頁GF254薄層板GF254薄層板在熒光燈下熒光淬滅法GF254薄層板中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第57頁六、統(tǒng)計(jì)薄層色譜圖象可采取攝像設(shè)備拍照，以光學(xué)照片或電子圖象形式保留。也能夠用掃描儀統(tǒng)計(jì)對(duì)應(yīng)色譜圖。薄層色譜數(shù)碼相機(jī)成像系統(tǒng)中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第58頁七、結(jié)果判斷供試品色譜中，在與對(duì)照品、對(duì)照藥材或?qū)φ仗崛∥锷V對(duì)應(yīng)位置上，顯相同顏色或熒光斑點(diǎn)，則判斷為符合要求。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第59頁八、應(yīng)用實(shí)例（一）六味地黃丸中牡丹皮判別1.丹皮酚；2~5.六味地黃丸中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第60頁1~12.一捻金；13.人參二醇+人參三醇（二）一捻金中人參判別中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第61頁（三）龜齡集中人參判別

1~4.龜齡集；5.人參對(duì)照藥材；6.人參皂苷Rb1(S1)、Re(S2)、Rg1(S3)中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第62頁（四）萬氏牛黃清心丸中黃連判別1~5.萬氏牛黃清心丸；6.黃連對(duì)照藥材；7.小檗堿

中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第63頁（五）華佗再造丸薄層色譜圖（噴顯色劑前）（噴顯色劑后）1.12.吳茱萸對(duì)照藥材；2.11.川芎對(duì)照藥材；3～10.華佗再造丸中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第64頁第五節(jié)紫外-可見光譜判別法(UltravioletandVisibleSpectroscopy)一、原理一些中藥或中成藥經(jīng)適當(dāng)處理后，所得紫外吸收光譜是由其各組分特征吸收疊加而成。若將中藥制劑作為一個(gè)特定整體，在一定測(cè)試條件下，只要各藥味及其成份組成與含量相對(duì)穩(wěn)定，則其紫外吸收光譜含有一定特征性和重現(xiàn)性，能夠用于定性判別。

兩組分加和紫外吸收光譜中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第65頁二、特點(diǎn)分光光度判別法簡(jiǎn)便、靈敏、易普及。但因?yàn)樽贤夤庾V分辨率較低，圖譜簡(jiǎn)單，一些不一樣樣品可能給出極其相同光譜圖，使其在實(shí)際工作中受到一定限制。假如對(duì)樣品進(jìn)行前處理，除去干擾成份，則可有效地提升該法專屬性。中國(guó)藥典僅有少數(shù)中成藥品種收載了分光光度判別法，比如，木香檳榔丸等。中國(guó)藥典要求以最大吸收波長(zhǎng)（λmax）做為判別參數(shù)。樣品吸收峰波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下要求波長(zhǎng)±2nm以內(nèi)。復(fù)方丹參片紫外譜線組圖中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第66頁三、操作方法（P77自學(xué)）四、注意事項(xiàng)（P77自學(xué)）五、結(jié)果判斷將供試品最大吸收波長(zhǎng)和藥品標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行比較，二者假如一致，則判定為符合要求。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第67頁六、應(yīng)用實(shí)例木香檳榔丸

處方：木香、檳榔、枳殼、陳皮、青皮（醋炒）、香附（醋制）、三棱（醋制）、莪術(shù)（醋制）取本品粉末4g，置蒸餾瓶中，加水10ml，使供試品濕潤(rùn)后，水蒸汽蒸餾，搜集餾液約100ml，照紫外分光光度法（中國(guó)藥典附錄VA）測(cè)定，在253nm波優(yōu)點(diǎn)有最大吸收。（檢出揮發(fā)性成份）中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第68頁

第六節(jié)氣相色譜判別法(GasChromatographyGC)

一、原理在一定色譜條件下，相同物質(zhì)應(yīng)含有相同色譜特征（分配系數(shù)）和色譜行為（保留值）。所以，在同一色譜條件下，將供試品溶液和對(duì)照品溶液分別注入氣相色譜儀，對(duì)二者氣相色譜圖進(jìn)行比對(duì)，依據(jù)供試品是否給出與對(duì)照品保留時(shí)間相同色譜峰，從而對(duì)樣品作出定性分析。這種方法可稱為保留時(shí)間比較法，中國(guó)藥典即采取此法對(duì)一些中成藥進(jìn)行真?zhèn)闻袆e。保留時(shí)間（tR）系指從進(jìn)樣開始，到該組分色譜峰頂點(diǎn)時(shí)間間隔。中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第69頁色譜峰示意圖中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第70頁二、特點(diǎn)

氣相色譜法含有高分辨率，高靈敏度、快速、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，尤其適合分析制劑中揮發(fā)性成份，如麝香酮、薄荷醇、冰片、水楊酸甲酯等。普通情況下氣相色譜不適合分析蒸汽壓較低也即揮發(fā)性較小成份，所以該法在實(shí)際工作中含有一定不足。

三、操作方法（自學(xué)）四、注意事項(xiàng)（自學(xué)）氣相色譜儀中藥制劑理化鑒別的方法專家講座第71頁五、結(jié)果判斷比較供試品與對(duì)照品色譜圖，供試品展現(xiàn)與對(duì)照品保留時(shí)間相同色譜帶，則判斷為符合藥品標(biāo)準(zhǔn)要求。所謂保留時(shí)間相同是指基本相同，彼此相差百