鮮鐵皮石斛遺傳毒性研究

鮮鐵皮石斛遺傳毒性研究

常綠石頭。這是多年生蕨類(lèi)植物科的一種多年生蕨類(lèi)植物。它是中國(guó)罕見(jiàn)的中藥。主要分布在西南部和東部省份，表皮呈綠色。據(jù)《本草綱目》記載鐵皮石斛能“除痹、下氣、補(bǔ)五臟虛勞贏瘦、強(qiáng)陰益精;久服、厚腸胃、補(bǔ)內(nèi)絕不足、平胃氣、長(zhǎng)肌肉、益智除驚、輕身延年”。鐵皮石斛化學(xué)成分多樣,主要含有生物堿、多糖、氨基酸等材料表面1液氮罐和超凈工作臺(tái)702超低溫冰箱(美國(guó)Thermo公司);HVE50高壓滅菌鍋(美國(guó)Thermo公司);Cryosysterm2000液氮罐(美國(guó)MVE公司);Nu425400E超凈工作臺(tái)(美國(guó)NUARE公司);DM4000/DM2500/DM1000正置顯微鏡及圖像分析系統(tǒng)(德國(guó)Leica公司);DMIL倒置顯微鏡(德國(guó)Leica公司);3111二氧化碳培養(yǎng)箱(美國(guó)Thermo公司);HU400BM榨汁機(jī)(韓國(guó)Hurom公司)。2化水制備汁鮮鐵皮石斛(FD,杭州中美華東制藥有限公司,批號(hào):20120608);取鮮鐵皮石斛10g加200mL純化水榨汁,過(guò)濾;取藥渣,再加300mL純化水榨汁,合并2次濾液并濃縮,得到濃度為100mg(生藥)·mL組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門(mén)菌(TA97,TA98,TA100,TA102和TA1535)均購(gòu)自美國(guó)Moltox公司,臨用前從主平板上選取菌落,37℃恒溫培養(yǎng)箱靜止培養(yǎng)12h,增菌液濃度為每mL(1~2)×103細(xì)胞20細(xì)胞研究進(jìn)展中國(guó)倉(cāng)鼠肺成纖維細(xì)胞(CHL)購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞研究所。SPF級(jí)ICR小鼠由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供,許可證號(hào):SCXK(滬)2007-0005,動(dòng)物合格證號(hào):0037907。方法1平板加入實(shí)驗(yàn)條件采用標(biāo)準(zhǔn)Ames法,非代謝活化(-S9)和代謝活化(+S9),2種平板摻入實(shí)驗(yàn)條件。FD設(shè)5個(gè)劑量組(5000,1000,200,40,8μg·plate2fd中國(guó)糧倉(cāng)肺纖維細(xì)胞chl染色體畸變實(shí)驗(yàn)FD的IC3fd大鼠骨髓檢測(cè)采用紅細(xì)胞微微滴落試驗(yàn)雄性ICR小鼠30只,按體重隨機(jī)分成5個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每組6只,包括FD高、中、低(2,1,0.5g·kg結(jié)果1兩組抑菌率比較非活化系統(tǒng)條件下FD各劑量組回復(fù)突變菌落數(shù)均未超過(guò)陰性對(duì)照2倍,其中TA97在每皿5000μg劑量條件下回復(fù)突變菌落數(shù)減少,較正常對(duì)照組抑菌現(xiàn)象明顯(P<0.05)?；罨瘲l件下FD各劑量組回復(fù)突變菌落數(shù)均未超過(guò)陰性對(duì)照2倍,其中TA100和TA102均有1個(gè)劑量組出現(xiàn)明顯抑菌現(xiàn)象(P<0.05)。陰性對(duì)照組5種鼠傷寒沙門(mén)菌回復(fù)突變菌落數(shù)均在正常突變范圍內(nèi),各陽(yáng)性對(duì)照組5種菌株的回復(fù)突變菌落數(shù)均超過(guò)陰性對(duì)照的2倍以上,且統(tǒng)計(jì)學(xué)差異明顯(P<0.01),表明該實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)合理,結(jié)果見(jiàn)表1。2染色體畸變?cè)囼?yàn)非活化代謝條件下,陰性對(duì)照組染色體畸變率均小于5%,在正常范圍內(nèi),FD各劑量組畸變率在0.5%~4%之間,與陰性對(duì)照組比較無(wú)明顯差異(P>0.05)。陽(yáng)性對(duì)照組,染色體結(jié)構(gòu)畸變率大于10%,明顯高于陰性對(duì)照組(P<0.01),顯示陽(yáng)性結(jié)果,詳見(jiàn)表2。結(jié)果表明FD各劑量組畸變率均<5%,未誘導(dǎo)CHL細(xì)胞染色體畸變。3兩組微核試驗(yàn)率比較,2ICR小鼠分別經(jīng)ig給予FD高、中、低3個(gè)劑量組后微核率與陰性對(duì)照組比較,均無(wú)明顯差異(P>0.05),而陽(yáng)性對(duì)照組較正常對(duì)照組微核率顯著增加(P<0.01)。各組嗜多染紅細(xì)胞與總紅細(xì)胞比值[PCE/(PCE+NCE)]均在0.36~0.60之間,屬于正常范圍。且各組嗜多染紅細(xì)胞占總紅細(xì)胞總數(shù)均未少于陰性對(duì)照組20‰,見(jiàn)表3。結(jié)果表明,FD各劑量的微核率均小于5‰。發(fā)酵鐵皮石斛的抗菌作用本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)鮮鐵皮石斛遺傳毒性研究發(fā)現(xiàn),在本實(shí)驗(yàn)條件下,鮮鐵皮石斛Ames實(shí)驗(yàn)中未見(jiàn)菌株回復(fù)突變數(shù)增加,甚至在高劑量時(shí)出現(xiàn)對(duì)個(gè)別菌株的抑制作用,說(shuō)明鮮鐵皮石斛可能有抗菌作用,與石