藥敏試驗及藥敏試驗結果介紹

藥敏試驗及藥敏試驗成果分析1精選ppt第1頁一、藥敏試驗MIC：在與微生物生長速率有關特定期間間隔內，一般是18－二十四小時，能夠抑制被測菌生長最低藥品濃度。對倍稀釋長處：操作容易敏感株MIC呈正態(tài)分布辨別異常(R)與敏感(S)菌群2精選ppt第2頁藥敏試驗折點建立1.MIC分布

2.藥代動力學和藥效學

定MIC折點3.臨床療效和細菌清除率4.抑菌圈直徑分布…定抑菌圈折點統(tǒng)計學線性回歸計算錯誤率：盡也許減少極主要誤差(假敏感率)3精選ppt第3頁MIC分布4精選ppt第4頁藥代動力學和藥效學藥代動力學：藥品吸取，分布，代謝，排泄藥效學：藥品對機體作用時間依賴型（％T>MIC〕：β－內酰胺類，大環(huán)內酯類濃度依賴型（AUC/MIC比率〕：AGS,FQ這些參數可用于計算具有最佳藥效給藥方案5精選ppt第5頁MIC與抑菌圈直徑線性關系耐藥中介敏感RISLog2.MICD1d2抑菌圈直徑（mm)6精選ppt第6頁抑菌圈直徑與MIC關系7精選ppt第7頁不一樣國家判定折點

－也許不一樣原因：用藥劑量不一樣，服藥間隔不一樣評價敏感時較保守更強調檢測出耐藥株（即特定耐藥群）技術原因：接種、培養(yǎng)基8精選ppt第8頁敏感性分類(NCCLS定義)敏感（Susceptible）用常規(guī)用量治療有效常規(guī)用藥時達成平均血藥濃度超出細菌MIC5倍以上。耐藥（Resistance）用常規(guī)用量治療不能抑制細菌生長MIC高于藥品在血、體液中也許達成濃度9精選ppt第9頁敏感性分類（2）中介(Intermediate)MIC接近血、體液中藥品濃度，治療反應率低于敏感株藥品生理濃集部位有效(尿－FQ)加大用藥劑量也許有效緩沖區(qū)：避免操作系統(tǒng)誤差造成重大成果判定錯誤10精選ppt第10頁藥敏試驗辦法學半定量…紙片擴散法(抑菌圈直徑)MIC法：稀釋法(肉湯、瓊脂)自動化儀法抗生素連續(xù)梯度法(Etest)流式細胞儀11精選ppt第11頁藥敏試驗辦法選擇紙片法有獨特之處選藥靈活、便宜、易懂MIC法：商品肉湯法(自動化法)↑可用于厭氧菌、苛氧菌計算機管理迅速，但也許有錯誤（如誘導型菌）新藥評價12精選ppt第12頁藥敏試驗辦法1（紙片擴散法〕材料：浸有一定Abs干燥園濾紙片步驟：制備菌懸液－涂平板－貼紙片－孵育－卡尺測量抑菌圈直徑－判定R、I、S長處：選藥靈活、便宜、一種平皿可測多種藥缺陷：影響原因多適用于快生長菌、部分苛養(yǎng)菌13精選ppt第13頁紙片擴散法－影響原因MIC接種菌量細菌生長率抗生素含量、擴散性平皿厚度溫度，預孵育時間14精選ppt第14頁紙片擴散法－標準化NCCLS：美國試驗室標準化委員會(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards)每年修訂更改包括質控新藥判定標準特殊耐藥性檢測15精選ppt第15頁NCCLS法規(guī)要求紙片含量、接種濃度、培養(yǎng)基、平皿厚度、判定標準、質控要求常規(guī)測試報告抗生素不一樣藥判定標準不一樣不一樣菌判定標準也不一樣16精選ppt第16頁常規(guī)測試并報告藥品分組(1)

腸桿菌科

綠膿和非腸桿菌科一級氨芐 頭孢他啶唑林，慶大 慶大，替卡，哌拉二級阿米卡星 阿米卡星氨芐/舒，阿莫/克 吡肟，哌酮，氨曲南頭孢膚肟，頭霉 環(huán)丙，亞胺培南，替卡/克噻肟，曲松，環(huán)丙 妥布，磺胺亞胺培南，替卡，哌拉三級氨曲南，頭孢他啶 頭孢曲松卡那，奈替，妥布 氯霉素，奈替四環(huán)素，氯霉素 17精選ppt第17頁常規(guī)測試并報告藥品分組(2)

葡萄球菌

腸球菌一級苯唑，青霉素 青霉素，氨芐二級紅霉素類 萬古霉素克林，萬古三級氯霉素 慶大18精選ppt第18頁常規(guī)測試并報告藥品分組(3)

流感嗜血桿菌

肺炎鏈球菌一級氨芐，青霉素 青霉素，紅霉素TMP/SMZTMP/SMZ二級頭孢膚肟，噻肟 氧氟，四環(huán)素他啶，氯霉素萬古霉素三級阿奇，頭孢克羅 氯霉素，利福平環(huán)丙，亞胺培南 利福平，四環(huán)素19精選ppt第19頁預報用藥(一)

測試藥 菌名 推測其他藥品敏感性

苯唑西林 葡萄球菌 所有β－內酰胺類四環(huán)素 所有（除葡 多西環(huán)素，米諾環(huán)素

萄球菌和不 動桿菌〕紅霉素 G＋球菌 羅紅，克拉，阿奇克林霉素 所有 林可霉素20精選ppt第20頁預報用藥(二)測試藥 菌名 推測其他藥品敏感性氨芐西林 腸球菌 青霉素青霉素G 葡萄球菌 氨芐，美洛，替卡頭孢噻吩 腸桿菌科 拉定，頭孢氨芐，克羅奈啶酸s

腸桿菌科 所有FQs萬古霉素s

所有 替考拉寧s21精選ppt第21頁紙片擴散法操作規(guī)程(一)培養(yǎng)基：MH(反復性好，低抑制劑，營養(yǎng)好)厚度：4mmPH：7.2~7.4pH低時，氨基糖甙,大環(huán)內酯↓pH高時，青霉素類活性↑離子濃度(Ca2+,Mg2+)影響氨基糖甙類、四環(huán)素對Pae活性高時，抑菌圈↓；22精選ppt第22頁紙片擴散法操作規(guī)程(二)接種：純新鮮菌落，0.5號麥氏比濁管菌懸液在15分鐘內種入平皿內紙片中心間距>=24mm孵育：CO2影響Ags,Tet,Macrolides質控:ATCC25922,35218ATCC27853,ATCC2592323精選ppt第23頁紙片擴散法成果判定1.

先看菌名（判定到種〕2.不一樣藥品使用不一樣折點藥名 菌名 R S 菌株1 菌株2Pip/Taz 綠膿 ≤17 ≥18 16R

30SCAZ 綠膿 ≤14 ≥18 16I

19S3.同是S時，偏離敏感折點越高藥,

MIC越低，活性也越高24精選ppt第24頁抑菌圈分布25精選ppt第25頁抑菌圈分布26精選ppt第26頁非NCCLS系統(tǒng)擴散試驗辦法 國家 學會 培養(yǎng)基 評論比較法 UK BSAC Iso-Sensitest 不校正MICsStokes UK BSAC Iso-Sensitest 不校正MICsSFM 法國 SFM MH 與NCCLS相近DIN 德國 DIN MH 與NCCLS相近SIR 瑞典 SMS PDM－ASM MIC有關值低Neo-sensitabs丹麥、比利時 MH 藥片，易保存雙歧 澳大利亞 Sensitest 無中介27精選ppt第27頁藥敏試驗錯誤起源(一)每個系統(tǒng)特有不足（快生長菌〕培養(yǎng)基（成份、厚度、pH、離子濃度）多種材料正確保存(紙片－20℃)操作步驟純菌、35℃、16－28h葡萄球菌、腸球菌24h28精選ppt第28頁藥敏試驗錯誤起源(二)體內、體外試驗不一致性某些菌測某些藥，成果有誤頭孢菌素、氨基糖甙類：沙門菌、志賀菌頭孢菌素：李斯特菌屬頭孢菌素、氨基糖、克林、TMP/SMZ：腸球菌Beta－內酰胺類：MRS雖然敏感，也應報告耐藥29精選ppt第29頁問題菌和耐藥機制有些菌無標準化藥敏試驗棒桿菌、芽胞桿菌、氣單胞菌、巴斯德菌某些耐藥機制需要多種檢測辦法誘導型：VanB,BushI型酶MRS異質型體現ESBL藥敏也許無法檢出新出現耐藥，VISA30精選ppt第30頁藥敏試驗辦法2－肉湯稀釋法4 8 16 32 64128256ug/ml混

混清抗生素倍比稀釋，種菌105CFU/ml，孵育35℃，16-20h，判讀31精選ppt第31頁藥敏試驗辦法2－肉湯稀釋法調整離子濃度MH肉湯宏量肉湯法（2ml,13x100mm） 微量肉湯法（0.1ml,微量板）自動化儀長處：精確，可靠，可用于研究缺陷：勞動強度大細菌生長情況不可查32精選ppt第32頁藥敏試驗辦法3－瓊脂稀釋法濃度16 32 64128256ug/ml制備含對倍抗生素濃度梯度平板，制備菌懸液，點種菌，104/每個點，孵育，判讀成果33精選ppt第33頁藥敏試驗辦法3－瓊脂稀釋法長處：金標準精確可靠可同步測定多株菌（40株）細菌生長情況可查缺陷：測多種藥時勞動強度大制備平皿費時費勁34精選ppt第34頁藥敏試驗辦法4－Etest法

細菌生長區(qū)Etest塑料條橢圓形細菌生長抑制區(qū)2561288016判讀抑菌濃度（MICug/ml)35精選ppt第35頁藥敏試驗辦法4－Etest法長處連續(xù)濃度梯度，與瓊脂稀釋法有關性好影響原因少，穩(wěn)定性高操作簡單，省時缺陷：昂貴用途：快生長菌，苛養(yǎng)菌，厭氧菌，酵母菌， 分枝桿菌36精選ppt第36頁評價藥品體外抗菌活性指標MIC50,MIC90,MIC均值，MIC范圍，R，I，SMIC50/MIC90：MIC從小到排列，位于第50/90百分位菌株MIC值單純比較MIC50，MIC90是片面，還要同步看平均MIC及MIC范圍同步結合R，I，S，（不一樣藥品血濃度不一樣，安全范圍不一樣〕37精選ppt第37頁抗生素細菌人體RESISTANCEPHARMACODYNAMICSINFECTIONIMMUNITYSIDEEFFECTSPHARMACOKINETICS抗生素、細菌、人體38精選ppt第38頁39精選ppt第39頁TimeaboveMIC

CorrelationofserumpharmacokineticswithMIC(susceptibility)

ofanorganism

TimeaboveMICTimeAntibioticconcentration(ug/ml)2DrugADrugBABDrugApresentatconcentrationof2ug/mlfor50%ofdosingintervalDrugBpresentatconcentrationof2ug/mlfor30%ofdosinginterval468040精選ppt第40頁RelationshipbetweenTimeaboveMICand

efficacyinanimalinfectionmodels020406080100020406080100TimeaboveMIC(%)PenicillinsCephalosporinsMortalityafter4daysoftherapy(%)Craig.DiagnMicrobiolInfectDis1996;25:213–21741精選ppt第41頁Antibiotic

concentrationMIC

TimeAreaunderthecurveoverMIC24-hrAUC/MICiscorrelatedwithoutcomeofinfection,themagnituderequiredforsuccessandMICatwhichthisoccursbecomesthePDbreakpoint

24-hrAUC/MIC

CorrelationofserumpharmacokineticswithMIC(susceptibility)

ofanorganism

42精選ppt第42頁Therelationshipbetween‘timeaboveMIC90’andbacteriologicalcureinS.pneumoniae(red)and

H.influenzae(blue)inotitismediaandsinusitisOtitismediaSinusitis‘TimeAboveMIC’(%ofdosinginterval)Bacteriologicalcure(%)020406080100020406080100Craig,ECCMID2023,Stockholm,Sweden43精選ppt第43頁抗生素選擇時需考慮原因藥品感染部位濃度對細菌MIC成果微生物學抗菌機制抗菌譜藥代動力學吸取、分布、代謝、排泄給藥方案藥效學時間/濃度依賴型殺菌劑/抑菌劑組織滲入抗菌時效臨床效果細菌清除患者依從性耐受性耐藥產生44精選ppt第44頁抗生素治療失敗主要原因病人有關原因依從性差不合適給藥途徑免疫抑制病灶藥品原因給藥劑量與方式不當藥效學考慮欠妥藥品失活微生物有關原因病原確立錯誤治療中出現耐藥抗菌活性不足接種效應其他原因非感染（誤診）基礎疾病45精選ppt第45頁抗生素藥效學與藥代動力學關系研究

PK/PD—藥代條件下藥效

PARAMETERS：PK：Cmax、AUC、T1/2

PD：MIC

PK/PD：AUC/MICCmax/MICT>MIC46精選ppt第46頁抗生素藥效學與藥代動力學關系研究

抗生素PK/PD分類抗生素分類PK/PD參數藥品時間依賴型（短PAE）T>MIC青霉素類、頭孢菌素類、氨曲南、碳青霉烯類、大環(huán)內酯類、克林霉素、惡唑烷酮類、氟胞嘧啶時間依賴型（長PAE）AUC24/MIC鏈陽霉素、四環(huán)素、萬古霉素、替考拉林、氟康唑、阿齊霉素濃度依賴型AUC24/MICorCmax/MIC氨基糖苷類、氟喹諾酮類、daptomycin、酮內酯、甲硝唑、兩性霉素B47精選ppt第47頁抗生素藥效學與藥代動力學關系研究

PK/PD研究應用—給藥方案制定與優(yōu)化48精選ppt第48頁抗菌藥品合理應用藥理學考慮藥動學/藥效學參數與抗菌效力（動物模型）參數 藥品 高于MIC時間 青、頭孢、碳青烯、氨曲、大環(huán)、克林 24hAUC/MIC 氨基糖苷、氟喹酮、阿奇 峰值/MIC 四環(huán)、萬古、鏈陽

氨基糖苷、氟喹酮

49精選ppt第49頁

第一大類：

時間依賴殺菌作用（連續(xù)后效應------無或輕、中度）-LAbx（P、Cef、氨曲、碳烯類），克林和大環(huán)

（紅、克）、四環(huán)在MIC4-5倍時殺菌率即處于飽合殺菌范圍主要依賴于接觸時間超出MIC時間是與臨床療效有關主要參數50精選ppt第50頁氨基糖苷類屬于濃度依賴性抗生素體內外研究證明Cmax/MIC為10左右為最佳治療參數對革蘭陽性、陰性菌均具有PAE（0.75~7.5hr）。第二大類:氨基糖苷類一日一次給藥51精選ppt第51頁低濃度易誘導適應性耐藥高濃度不易選擇耐藥高劑量少次數給藥可避免耐藥氨基糖苷類一日一次給藥52精選ppt第52頁氨基糖苷類藥品每日一次給藥理論根據充足臨床療效不變或更加好毒副反應少更具經濟學價值氨基糖苷類一日一次給藥53精選ppt第53頁二、藥敏試驗成果分析54精選ppt第54頁分類方式不也許成果罕見成果（值得注意）罕見矛盾成果有提醒意義成果，成果需要修正

55精選ppt第55頁腸桿菌科細菌成果

A.假如三代和四代頭孢菌素R/I，而一代，二代頭孢或頭孢克肟、頭孢泊肟、氨基青霉素敏感。這樣成果不也許B.脲基青霉素R/I，而氨基和/或羧基青霉素S。這樣成果不也許。C.粘質沙雷菌和斯氏普羅威登斯菌：四環(huán)素或呋喃妥因S，這里細菌對這兩類抗生素天然耐藥，成果不也許。56精選ppt第56頁罕見成果（值得注意）-重作!

腸桿菌科細菌：亞胺培南/美洛培南R（沙雷菌中也許）陰溝腸桿菌、產氣腸桿菌和弗枸：頭孢西丁S奇異變形菌：呋喃妥因和四環(huán)素S一般變形桿菌：頭孢噻吩，氨基青霉素，頭孢呋辛S沙雷菌：頭孢呋辛S對所有受試抗生素均R，不也許成果57精選ppt第57頁罕見矛盾成果假如奈替米星R/I而妥布霉素S（一般二者同步耐藥）假如丁氨卡那R/I，而妥布霉素/奈替米星S（對丁氨卡那耐藥腸桿菌科細菌對其他氨基糖苷類抗生素耐藥）β-內酰胺類抗生素/酶抑制劑R，而該種β-內酰胺類抗生素S，不也許成果。58精選ppt第58頁有提醒意義成果，成果需要修正

A.非ESBL大腸埃希菌，所有氨基青霉素R，阿莫西林/克拉維酸I/S，氨芐西林/舒巴坦I/S，所有三代頭孢S，羧基青霉素R/I，脲基青霉素R/I，說明該菌耐藥性也許是由于取得性β-內酰胺酶引發(fā)。成果應修正為所有青霉素R，所有一代頭孢R。59精選ppt第59頁B.大腸埃希菌，志賀菌或小腸結腸炎耶爾森菌：任何一代頭孢R/I，所有羧基青霉素S，或所有脲基青霉素S，且所有三代頭孢S，說明耐藥性也許是由低水平頭孢菌素酶引發(fā)。成果修正為所有一代頭孢為R，所有氨基青霉素R/I，阿莫西林/克拉維酸R/I，氨芐西林/舒巴坦R/I。60精選ppt第60頁C.大腸埃希菌：所有氨基青霉素R，阿莫西林/克拉維酸或氨芐西林/舒巴坦R，所有一代頭孢菌素R，所有二代頭孢菌素R/所有頭霉素R，所有三代頭孢菌素R/I，說明耐藥性由內在高水平頭孢菌素和/或ESBL引發(fā)，使青霉素、青霉素/酶抑制劑，頭孢菌素和單環(huán)類活性減少。成果修正為所有三代頭孢R，所有青霉素R，氨曲南R，所有二代頭孢R，所有青霉素/酶抑制劑R/I，所有口服三代頭孢R，頭孢哌酮R，所有頭霉素R。61精選ppt第61頁D.大腸埃希菌：所有氨基青霉素R，阿莫西林/克拉維酸R/氨芐西林/舒巴坦R，所有一代頭孢菌素R，所有羧基青霉素/所有脲基青霉素R/I，所有三代頭孢菌素S，說明耐藥性由內在低水平頭孢菌素和/或高水平取得性β-內酰胺酶引發(fā)，使青霉素、青霉素/酶抑制劑，二代頭孢菌素活性減少。成果修正為所有青霉素R，所有青霉素/酶抑制劑R/I。62精選ppt第62頁E.奇異變形桿菌、沙門菌：所有氨基青霉素R，所有三代頭孢菌素S。修正成果為：所有青霉素R，所有一代頭孢菌素R/I。F.ESBL型大腸埃希菌，成果修正為所有青霉素R，所有頭孢菌素，除頭霉素外R，氨曲南R。

63精選ppt第63頁G.一般變形桿菌：所有氨基青霉素R，所有一代頭孢菌素R，所有羧基青霉素R/I或所有脲基青霉素R/I，所有三代頭孢S。說明也許由內在頭孢菌素酶和取得性β-內酰胺酶引發(fā)，使青霉素、青霉素/酶抑制劑、一代二代頭孢菌素活性下降。成果修正為所有青霉素R，所有二代頭孢R/I，所有青霉素/酶抑制劑R/I。64精選ppt第64頁H.一般變形桿菌：所有氨基青霉素R，任何一代頭孢R，所有羧基青霉素或脲基青霉素S，所有三代頭孢菌素S。說明耐藥性由內在頭孢菌素酶引發(fā)，使一代、二代頭孢菌素抗菌活性下降。成果修正為：所有一代頭孢R，所有二代頭孢R/I。I．腸桿菌科細菌：對環(huán)丙沙星耐藥細菌對所有三代喹諾酮類抗生素耐藥。

65精選ppt第65頁J.志賀菌：所有氨基青霉素R，所有三代頭孢S，任何羧基青霉素或任何脲基青霉素R/I，說明耐藥性也許由取得性β-內酰胺酶引發(fā)，使青霉素和一代頭孢菌素抗菌活性下降。成果修正為所有青霉素R，所有一代頭孢菌素R/I。66精選ppt第66頁K．奇異變形菌、沙門菌：所有氨基青霉素R，所有一代頭孢和所有脲基青霉素R/I，所有頭霉素S，任何三代頭孢菌素R/I或頭孢泊肟R，或氨曲南R/I，說明耐藥性也許由ESBL引發(fā)，使青霉素、青霉素/酶抑制劑、頭孢菌素和單環(huán)類抗生素抗菌活性下降。成果修正為：所有青霉素R，所有頭孢菌素（除頭霉素外）R，氨曲南R。

67精選ppt第67頁非發(fā)酵菌銅綠假單胞菌/不動桿菌68精選ppt第68頁不也許成果

A.假如三代和四代頭孢菌素S/I，而一代，二代頭孢或頭孢克肟、頭孢泊肟、氨基青霉素敏感。這樣成果不也許B.所有氨基青霉素，或阿莫西林/克拉維酸，或氨芐西林/舒巴坦，或任何一種一代或任何一種二代頭孢，或任何頭霉素，或任何四環(huán)素，或任何一代喹諾酮類，或復方新諾明S。這樣成果很罕見，銅綠假單胞菌對上述抗生素呈多重耐藥性69精選ppt第69頁C.鮑曼不動桿菌或無硝不動桿菌：所有氨基青霉素或一代二代頭孢或氯霉S，這個成果不可靠，這兩個菌對以上抗生素天然耐藥。D.洋蔥伯克霍爾德菌：氨基糖苷類抗生素或亞胺培南S，這個成果不太也許，該菌對以上抗生素天然耐藥。70精選ppt第70頁罕見成果（值得注意）

A.銅綠假單胞菌：假如亞胺培南R，而頭孢他啶S，替卡西林S，說明耐藥性最大也許為細菌細胞壁通透性下降所致，不批示與其他β-內酰胺類抗生素交叉耐藥。B.不動桿菌屬（洛菲不動桿菌和瓊氏不動桿菌），氣單胞菌屬（嗜水、豚鼠、維羅納氣單胞菌溫和生物變種），支氣管炎博德特菌，淺黃金色單胞菌，多殺巴斯德菌，多食鞘氨醇桿菌，洋蔥伯克霍爾德菌，施氏假單胞菌：對復方新諾明R。這種成果不太也許，這些細菌對該藥一般是敏感。

71精選ppt第71頁罕見矛盾成果

A.丁氨卡那R/I，慶大霉素或奈替米星S。成果矛盾B.妥布霉素R/I，慶大霉素S。成果矛盾C.假單胞菌：派拉西林R/I，任何氨基青霉素S或替卡西林S，該成果不也許，由于對脲基青霉素耐藥細菌一般交叉耐受氨基和羧基青霉素。72精選ppt第72頁有提醒意義成果，成果需要修正

A.非發(fā)酵菌：假如對環(huán)丙沙星R，則說明對其他喹諾酮類抗生素耐藥，成果修正為：所有喹諾酮類抗生素R。B.銅綠假單胞菌：頭孢他啶R/I，替卡西林/克拉維酸R或所有脲基青霉素R，說明細菌對所有三代頭孢、青霉素、青霉素/酶抑制劑及單環(huán)類交叉耐藥。報告修正為：所有三代頭孢R/I，所有青霉素R/I，所有青霉素/酶抑制劑R/I，所有單環(huán)類R/I。73精選ppt第73頁C.銅綠假單胞菌：替卡西林R，替卡西林/克拉維酸R或派拉西林R或阿洛西林R，頭孢他啶S，氨曲南S。說明耐藥性是由取得性β-內酰胺酶引發(fā)。成果修正為所有青霉素R。74精選ppt第74頁葡萄球菌

75精選ppt第75頁

不也許成果

葡萄球菌：青霉素GS或β-內酰胺酶陰性，苯唑西林S，這個成果較罕見，對青