探究培養(yǎng)液中酵母菌種群的動態(tài)變化

探究培育液中酵母菌數量的動態(tài)變化

1．實驗原理：（1）在含糖的液體培育基（培育液）中酵母菌繁殖很快，飛快形成一個封閉容器內的酵母菌種群，通過細胞計數可以測定封閉容器內的酵母菌種群隨時間而發(fā)生的數量變化。（2）養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數量持續(xù)增長的限制因素。2．實驗目的：（1）通過探究培育液中酵母菌種群數量的變化，嘗試建構種群增長的數學模型。（2）用數學模型解釋種群數量的變化。（3）學會使用血球計數板進行計數。三、探究培育液中酵母菌種群數量的變化1、提出問題：(用問句)2、作出假設:(用陳述句)培育液中酵母菌種群的數量是怎樣隨時間變化的？也可以提出其他的探究問題，例如，在不同溫度（以及通氧、通CO2等）條件下酵母菌種群數量增長的情況如何？不同培育液（如加糖和不加糖）中酵母菌種群數量增長的情況如何？等等。開頭在資源和空間無限多的環(huán)境中,酵母菌呈J型增長,隨著時間的推移環(huán)境中資源和空間逐漸變得有限,代謝廢物的積累，酵母菌呈S型增長.[實驗過程]一、材料用具探究所需要的菌種和無菌馬鈴薯培育液或肉湯培育液、試管、血球計數板（2mm×2mm×0.1mm方格）、滴管、顯微鏡等。二、方法步驟和記錄1、取相同試管若干支，分別加入5ml肉湯培育液，塞上棉塞。2、用高壓鍋進行___________滅菌后冷卻至室溫，標記甲、乙、丙等。3、將酵母菌母液分別加入試管各5ml，搖勻后用______________計數起始酵母液個數，做好記錄。4、將各試管送進恒溫箱，_____________℃下培育7天。高壓蒸汽血球計數板25°液體培育基

馬鈴薯培育液

在計數前，還應有哪些步驟？需注意些什么？培育條件，28℃，連續(xù)培育7天計數培育液配制滅菌接種培育需進行滅菌，防止雜菌干擾，造成試驗數據錯誤如何計數？隨機取樣，多次計數，取平均值（1）血球計數板構造：實物圖正面圖縱切面圖計數室，2個滴液處血球計數板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器。一個特制的可在顯微鏡下觀察的玻片大方格中方格小方格計數室平臺上有九個大方格的方格網，中間大方格為計數室計數室放大計數室有兩種規(guī)格：一是分為16個中方格，每中方格中有25個小方格；另一種是分為25個中方格，每中方格有16個小方格。兩種都共有400個小方格。計數室計數時用25中格的計數板，要按對角線方位，取左上、左下、右上、右下、中央5個中格(即80小格)的酵母菌數。如果是16中格計數板,則只數四角上的四格酵母菌數（即100小格）。然后求出一個小方格的細胞平均數(N)放大放大對于壓在小方格界線上的酵母菌應取相鄰兩邊及頂角計數。c.從試管中吸出培育液進行計數之前，要將試管輕輕震蕩幾次，用滴管吸取少許，從計數板中間平臺兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣摘入一小滴（不宜過多，將計數室布滿即可），勿使氣泡產生，并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。方法

a.視待測菌懸液濃度，以每小格的菌數可數為度。培育后期的樣液稀釋后再計數，加無菌水適當稀釋，如菌液不濃，可不必稀釋。b.取干凈的血球計數板一塊，在計數區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。d.靜置片刻（待細胞全部沉降到計數室底部），將血球計數板置載物臺上夾穩(wěn)，先在低倍鏡下找到計數區(qū)后，再轉換高倍鏡觀察并計數.由于生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀察時應減弱光照的強度。滴液處

e．一般選取計數室內四個角及中央五個中方格計數，若細胞位于小方格的線上，應遵循“數上線不數下線，數左線不數右線”的原則，以削減誤差。f.對于出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算。每個樣品計數應重復3次（每次數值不應相差過大，否則應重新操作），取其平均值,求出每一個小格中細胞平均數（N），按公式計算出每ml菌懸液所含酵母菌細胞數量。g.測數完畢，取下蓋玻片，用水將血球計數板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風機吹干，放入盒內保存。第4天第6天第1天死亡第7天此法計得的是活菌體和死菌體的總和每隔24小時取樣計數。(注意計數時間每天要固定)三、現象觀察每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數板計數酵母菌個數，并作記錄，連續(xù)觀察7天。菌數 時間（天）次數起始1234567123………………………平均多次測量取平均值。削減誤差，力求精準。四、實驗結論1、依據表格平均值作出培育液中酵母菌種群數量7天中的變化曲線。2、培育液酵母菌種群數量隨時間呈__________型增長變化。S探究實驗設計時要遵循的原則：科學性原則、可行性原則、對比原則、單一變量原則和平行重復原則。本探究需要設置對比嗎？如果需要，請商量說明怎樣設計；如不需要，請說明理由。第1天第4天第6天第7天不需要。由于該實驗在時間上形成前后的自身對比1、如果一個小方格內酵母菌過多，難以數清，應當實行怎樣的措施？無菌水稀釋后，再用血球計數板計數.活菌數誕生率>死亡率誕生率≈死亡率誕生率<死亡率調整期對數期穩(wěn)定期衰亡期調整期對數期穩(wěn)定期衰亡期2.商量：血球計數板上的誤差應如何削減，力求精準？多次測量取平均值。一個小組取同樣的菌液進行計數，取平均值。如果鏡檢是發(fā)現小格內酵母菌過多，則應當稀釋后再計數。（2）計算A/5×25×B以一個大方格有25個中方格的計數板為例進行計算：假設五個中方格中總菌數為A，菌液稀釋倍數為B，那么，一個大方格中的總菌數（即0.1mm3中的總菌數）為：提示：1ml＝1cm3=1000mm31ml菌液總的總菌數為：＝A/5×25×B×10×1000＝50000A·B（個）酵母菌計數方法：將計數板放在載物臺的中央，計數一個小方格內的酵母菌數量，再以此為依據，估算試管中的酵母菌總數。為抽樣檢測法抽樣檢測法。在探究“培育液中酵母菌種群的數量變化”的實驗中，某同學的部分實驗操作過程是這樣的：①從靜置試管中吸取酵母菌培育液進行計數，記錄數據；②把酵母菌培育液放置在冰箱中；③第七天再取樣計數，記錄數據，統(tǒng)計分析繪成曲線。請訂正該同學實驗操作中的錯誤。應將試管輕輕震蕩幾次再吸取酵母菌培育液進行計數應連續(xù)七天，每天觀察、取樣計數并記錄數據應將酵母菌培育液放置在適宜溫度下培育鞏固練習在計算酵母菌個數的時候常常用到血球計數板，下列說法正確的是（）A.血球計數板只能對活細菌計數B.血球計數板每個計數室內的容積為1mm3C.血球計數板在滴加樣品的時候應該先滴加，后蓋蓋玻片D.遇酵母出芽，芽體大小達到母細胞的一半時，即作為兩個菌體計數D0.1mm3？

在探究酵母菌種群數量變化時，酵母菌計數通常采納顯微鏡下觀察并用血球計數板計數的方法。血球計數板（見右圖）有16個中方格，每個中方格有25個小方格，小方格的邊長為Xmm，加蓋蓋玻片后的深度為Ymm。若顯微鏡下觀察一個小方格內的酵母菌數為A，則1mL培育液中酵母菌數為（1mL=1000mm3）

A．1000A/X2Y B．300A C．3×103A/X2Y D．AX2Y/1000A取小量酵母菌液直接放入血球計數板直接計數,測得的數目是

A.活細胞數

B.死細胞數

C.菌落數D.細胞總數

直接用血球計數板法無法區(qū)分死細胞和活細胞的,計得的是活菌體和死菌體的總和D死亡五、實驗評價用你所在小組的記錄數值所描種群數量的變化曲線與平均值作出的曲線相比相像程度怎樣？試作出解釋。[誤區(qū)警示]1、操作過程中要建立“有菌”的觀念，不能任意談笑。2、以防培育液帶上雜菌與酵母菌形成__________關系，抑制酵母菌培育。從試管中吸出培育液進行計數時，應將試管__________幾次，以便使酵母菌均勻分布，提高計數的代表性和精準性。3、對于壓在小方格界線上的酵母菌應計數____________兩邊上的菌體數，另兩邊不計數。振蕩競爭同側相鄰在“探究培育液中酵母菌種群數量的變化”實驗中，某同學用顯微鏡觀察計數，統(tǒng)計發(fā)現血球計數板的小方格(2mm×2mm)內酵母菌數量的平均值為13個。假設蓋玻片下的培育液厚度為0.1mm，那么10mL培育液中酵母菌的個數約為A．5.2×104B．3.25×105C．5.2×103D.3.25×104

B（1mL=1000mm3）依據“培育液中的酵母菌種群數量變化”實驗過程，請你設計一個實驗，探究溫度對酵母菌種群數量的影響。1.課題：

2.實驗材料：酵母菌、無菌馬鈴薯培育液、試管、血球計數板、滴管、顯微鏡、三個恒溫培育箱等。3.實驗步驟：（1）把相同量的酵母菌放入三支含有相同的培育液的試管中培育，編號為1、2、3。（2）

（3）4.實驗猜測結果及結論：探究溫度對酵母菌種群數量的影響把1號試管放入5℃的恒溫箱中培育，把2號試管放入28℃的恒溫箱中培育，把3號試管放入70℃的恒溫箱中培育。每天同一時間，各組取出試管，用血球計數板分別計數酵母菌個數，并作記錄，連續(xù)觀察7天。如果酵母菌數目1號＜2號＜3號,說明溫度越高，越適合酵母菌生長。如果酵母菌數目1號＞2號＞3號,說明溫度越低，越適合酵母菌生長。如果酵母菌數目1號＜2號＞3號,說明酵母菌生長有一個最適溫度。31．（8分）為討論酵母菌種群密度的動態(tài)變化，某同學按下表所列條件進行了A、B、C和D共4組實驗，用1000mL錐形瓶作為培育器皿，棉塞封口，在25℃下靜置培育，其他實驗條件均相同，定時用血球計數板計數。依據實驗結果繪出的酵母菌種群密度變化曲線圖如下，請分析回答以下問題。⑴圖中曲線①、②和③分別是______組、_______組和________組的結果。⑵B組和A組的實驗結果不同的緣由是B組______________________________。⑶D組和B組的實驗結果不同的緣由是D組_____________________________。⑷在整個實驗過程中，直接從靜置的培育瓶中取培育原液計數的做法是錯誤的，正確的方法是___________________和____________________________。⑸實驗結束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數板的做法是錯誤的，正確的方法是_____________________________。BAD搖勻培育液后再取樣培育后期的樣液稀釋后再計數培育液較多，與空氣接觸面積較小，供氧少葡萄糖濃度較低，故營養(yǎng)物供應較少浸泡和沖洗為探究培育液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化，某討論性學習小組按表一完成了有關實驗，并定期對培育液中的酵母菌進行計數，繪制出酵母菌細胞數目變化曲線圖。請回答：表一：為了探究培育液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化，某同學按下表完成了有關實驗。⑴A組培育液中酵母菌第

天的增長率最大；第3天后A組培育液中酵母菌數目減緩甚至不增長的緣由是⑵A組與B組酵母菌中數量達到的最大值在生態(tài)學上稱________，組中該數值比B組大的緣由是_______。(3)在該實驗的基礎上，依據你對影響酵母菌種群生長的因素的推測，進一步確定一個探究實驗的課題：

。試管編號培育液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128培育基中營養(yǎng)物質的大量消耗，代謝廢物的積累，pH值的轉變，使環(huán)境阻力增大。環(huán)境容納量A組的培育溫度更適合酵母菌的繁殖，環(huán)境阻力小

探究酵母種群數量與營養(yǎng)物質變化關系(或廢物、pH、溶氧等)的變化關系2(4)圖中缺少C組酵母菌的數目變化曲線，請你依據自己的推測在答題紙相應的圖中補充畫出該曲線。試管編號培育液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128利用計數板可在顯微鏡下對微生物細胞進行直接計數，計數板是一個特制的可在顯微鏡下觀察的玻片，樣品就滴在計數室內，計數室25×16=400個小室組成，容納液體的總體積為0.1ml。現將1ml谷氨酸棒狀桿菌樣品加99ml無菌水稀釋，用無菌吸管吸取少許使其自行滲入計數室，蓋上蓋玻片并用濾紙吸去多余菌液。①實驗前是否需要對計數板、吸管等器具進行滅菌？為什么？②現觀察到圖中所示a、b、c、d、e五個中格80小格內共有谷氨酸棒狀桿菌48個，則上述1ml谷氨酸棒狀桿菌樣品中的細菌有_______個？如何減小誤差？

隨機取樣，多次計數，取平均值需進行滅菌,防止雜菌干擾，造成試驗數據錯誤240000將10毫升酵母菌放在適宜溫度下培育，并于不同時間內等量均勻取樣4次，分別測定樣品中酵母菌的數量和pH值，結果如下表。請分