第12章-喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析陳濤陳宏宇

喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析第十二章14314006陳濤14314003陳宏宇

抗瘧藥(antimalarialdrugs)作用于瘧原蟲(chóng)生活史的不同環(huán)節(jié)，從而抑制或殺滅瘧原蟲(chóng)。根據(jù)用藥的目的，將抗瘧藥分為三類：主要用于控制癥狀的抗瘧藥(如磷酸氯喹、硫酸奎寧、磷酸咯萘啶，青蒿素，蒿甲醚，青蒿琥酯，本芴醇等)；主要用于控制復(fù)發(fā)和傳播的藥物(如磷酸伯氨喹等)；主要用于病因性預(yù)防的抗瘧藥(如乙胺嘧啶、磺胺類等)。一、喹啉類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)硫酸奎寧Quinine

Sulfate

二鹽酸奎寧Quinine

Dihydrochloride

磷酸哌喹Piperaquine

Phosphate

磷酸氯喹Chloroquine

Phosphate磷酸咯萘啶Malaridine

Phosphate磷酸伯氨喹Primaquine

Phosphate喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，環(huán)上雜原子的反應(yīng)性能基本與吡啶相同。

喹啉類藥物的物理性質(zhì)、鑒別、檢查及含量測(cè)定藥物名稱物理性質(zhì)鑒別檢查含量硫酸奎寧QuinineSulfate白色細(xì)微的針狀結(jié)晶，輕柔，易壓縮；無(wú)臭，味極苦；遇光漸變色；水溶液顯中性反應(yīng)。在三氯甲烷-無(wú)水乙醇(2:1)中易溶，在水、乙醇、三氯甲烷或乙醚中微溶。[

]D(0.1mol/LHCl溶液)-237o～-244o。1.熒光反應(yīng)2.綠奎寧反應(yīng)3.氯化鋇反應(yīng)4.IR1.酸度2.三氯甲烷-無(wú)水乙醇不溶物.3.其他金雞納堿(TLC).4.干燥失重.5.熾灼殘?jiān)撬味ǘ}酸奎寧QuinineDihydrochloride白色粉末；無(wú)臭，味極苦；遇光漸變色；水溶液顯酸性反應(yīng)。在水中極易溶解，在乙醇中溶解，在三氯甲烷中微溶，在乙醚中極微溶解。[

]D(0.1mol/LHCl溶液)-223o～-229o。1.熒光反應(yīng)2.綠奎寧反應(yīng)3.IR4.氯化物反應(yīng)1.酸度.2.硫酸鹽.3.其他金雞納堿(TLC).4.干燥失重.5.熾灼殘?jiān)?6.鋇鹽非水滴定磷酸哌喹PiperaquinePhosphate類白色至淺黃色的結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，味微苦；遇光易變色。在水中微溶，在無(wú)水乙醇或三氯甲烷幾乎不溶。1.硫氰酸銨反應(yīng)2.UV3.IR4.磷酸鹽反應(yīng)1.酸度2.有關(guān)物質(zhì)（TLC）3.水分非水滴定(提取后)磷酸氯喹ChloroquinePhosphate白色結(jié)晶性粉末，無(wú)臭，味苦。遇光漸變色；水溶液顯酸性反應(yīng)。在水中易溶，在乙醇、三氯甲烷、乙醚中幾乎不溶。1.UV2.IR3.磷酸鹽反應(yīng)1.酸度.2.溶液的澄清度.3.有關(guān)物質(zhì)(TLC).4.干燥失重.5.重金素.6.砷鹽非水滴定磷酸咯萘啶MalaridinePhosphate黃色至橙黃色結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，味苦；具引濕性。在水中溶解，在乙醇或乙醚中幾乎不溶。1.三硝基苯酚反應(yīng)2.UV3.IR4.磷酸鹽反應(yīng)1.酸度.2.水中不溶物.3.氯化物4.甲醛.5.四氫吡咯.6.干燥失重非水滴定(電位法)磷酸伯氨喹PrimaquinePhosphate橙紅色結(jié)晶性粉未，無(wú)臭，味苦。在水中溶解，在三氯甲烷或乙醚中不溶。1.硫酸鈰銨反應(yīng)2.UV3.IR4.磷酸鹽反應(yīng)1.酸度.2.有關(guān)物質(zhì)（TLC）.3.殘留溶劑.4.干燥失重非水滴定(電位法)(一)典型藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì)(二)主要化學(xué)性質(zhì)

奎寧為二元生物堿，其中奎寧環(huán)上的氮原子的堿性較強(qiáng)(pKa8.8)，與強(qiáng)酸形成穩(wěn)定的鹽，奎寧和奎尼丁均與二元酸成鹽，如與硫酸成鹽；喹啉環(huán)上的氮原子堿性較弱(pKa4.2)，不能與硫酸成鹽。磷酸氯喹和磷酸伯氨喹為三元生物堿；磷酸咯萘啶為五元生物堿；磷酸哌喹為六元生物堿。

1.堿性(二)主要化學(xué)性質(zhì)喹啉類抗瘧藥基本都具有手性，硫酸奎寧為左旋體，其比旋度為-237o至-224o；二鹽酸奎尼也為左旋體，其比旋度為-223o至-229o。磷酸哌喹和磷酸咯萘啶不具有手性。

2.旋光性(二)主要化學(xué)性質(zhì)3.熒光特性硫酸奎寧和二鹽酸奎尼在稀硫酸溶液中均顯藍(lán)色熒光。4.紫外吸收光譜特征由于喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，具有共軛體系，可用紫外吸收光譜的特征鑒別該類藥物。二、鑒別試驗(yàn)(一)綠奎寧反應(yīng)(二)光譜特征(三)無(wú)機(jī)酸鹽(一)綠奎寧反應(yīng)

奎寧為6-位含氧喹啉衍生物，可以發(fā)生綠奎寧反應(yīng)(Thalleioquinreaction)。反應(yīng)基本機(jī)制是6-位含氧喹啉，經(jīng)氯水(或溴水)氧化氯化，再以氨水處理縮合，生成綠色的二醌基亞胺的銨鹽。

(一)綠奎寧反應(yīng)硫酸奎寧和二鹽酸奎尼的綠奎寧反應(yīng)機(jī)制同上。取其水溶液，加溴試液0.2ml和氨試液1ml，即顯翠綠色，加酸成中性變成藍(lán)色，成酸性時(shí)則為紫紅色。翠綠色可轉(zhuǎn)溶于醇、三氯甲烷中而不溶于醚。因此ChP2010采用此反應(yīng)鑒別硫酸奎寧和二鹽酸奎尼。ChP2010硫酸奎寧的綠奎寧反應(yīng)鑒別：取本品約5mg，加水5ml溶解后，加溴試液3滴與氨試液1ml，即顯翠綠色。(二)光譜特征1.紫外吸收光譜特征由于喹啉類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，具有共軛體系，可用紫外吸收光譜的特征鑒別該類藥物。

ChP2010采用本法鑒別磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯氨喹。(二)光譜特征2.熒光光譜特征利用硫酸奎寧和二鹽酸奎寧在稀硫酸溶液中均顯藍(lán)色熒光。

ChP2010硫酸奎寧的熒光鑒別：取本品約20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即顯藍(lán)色熒光。(二)光譜特征3.紅外吸收光譜特征硫酸奎寧、二鹽酸奎寧、磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯氨喹在ChP2010中均采用紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別。

ChP2010磷酸氯喹的IR鑒別：取本品約0.5g，置分液漏斗中，加水25ml溶解后，加氫氧化鈉試液5ml、乙醚50ml振搖提取，醚層用水洗滌后通過(guò)置有無(wú)水硫酸鈉的漏斗濾過(guò)，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)梦逖趸诪楦稍飫p壓干燥至析出結(jié)晶，其紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與氯喹的對(duì)照?qǐng)D譜一致。(三)無(wú)機(jī)酸鹽1.硫酸鹽的鑒別反應(yīng)利用硫酸奎寧的硫酸根，顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)進(jìn)行鑒別。取供試品溶液，滴加氯化鋇試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。取供試品溶液，加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。取供試品溶液，加鹽酸，不生成白色沉淀(與硫代硫酸鹽區(qū)別)。

(三)無(wú)機(jī)酸鹽2.氯化物的鑒別反應(yīng)

二鹽酸奎寧中具有鹽酸根，即顯氯化物的鑒別反應(yīng)進(jìn)行鑒別。取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性后,滴加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機(jī)堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過(guò)除去，取濾液進(jìn)行試驗(yàn)。取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤(rùn)，緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使用水濕潤(rùn)的碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色。

(三)無(wú)機(jī)酸鹽3.磷酸鹽的鑒別反應(yīng)

磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯氨喹都具有磷酸根，顯磷酸鹽反應(yīng)進(jìn)行鑒別。取供試品的中性溶液，加硝酸銀試液，即生成淺黃色沉淀；分離，沉淀在氨試液或稀硝酸中均易溶解。取供試品溶液，加氯化銨鎂試液，即生成白色結(jié)晶性沉淀。取供試品溶液，加鉬酸銨試液與硝酸后，加熱即生成黃色沉淀；分離，沉淀能在氨試液中溶解。

三、純度檢查理化特性：

硫酸奎寧為白色細(xì)微的針狀結(jié)晶，輕柔，易壓縮；無(wú)臭，味極苦；遇光漸變色；水溶液顯中性反應(yīng)。在氯仿-無(wú)水乙醇(2:1)的混合液中易溶，在水、乙醇、氯仿或乙醚中微溶。

有關(guān)物質(zhì)根據(jù)硫酸奎寧的制備工藝，產(chǎn)品中有關(guān)物質(zhì)主要是生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的中間體以及副反應(yīng)產(chǎn)物。通過(guò)檢查以下項(xiàng)加以控制：酸度三氯甲烷-乙醇中不溶物質(zhì)其他金雞納堿等(一)硫酸奎寧的檢查

(一)硫酸奎寧的檢查1.酸度主要是在成鹽過(guò)程中引入。檢查法：取本品0.20g，加水20ml溶解后，用酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定，pH值應(yīng)為5.7～6.6。2.三氯甲烷-乙醇中不溶物質(zhì)本項(xiàng)檢查主要控制藥物在制備過(guò)程中引入的醇中不溶性雜質(zhì)或無(wú)機(jī)鹽類等。

檢查法：取本品2.0g，加三氯甲烷-無(wú)水乙醇(2:1)混合溶液15ml，在50℃加熱10分鐘后，用稱定重量的垂熔坩堝濾過(guò)，濾渣用上述混合溶液分5次洗滌，每次10ml，在105℃干燥至恒重，遺留殘?jiān)坏眠^(guò)2mg。

(一)硫酸奎寧的檢查T(mén)LC檢查法：取本品，加稀乙醇制成每1ml中約含10mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，加稀乙醇稀釋制成每1ml中約含50

g的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取上述兩種溶液各5

l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-丙酮-二乙胺(5:4:1.25)為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，微熱使展開(kāi)劑揮散，噴以碘鉑酸鉀試液使顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。3.其他金雞納堿

本項(xiàng)檢查主要控制硫酸奎寧中的其他生物堿，采用HPLC或TLC中的主成分自身對(duì)照法或雜質(zhì)對(duì)照品對(duì)照法進(jìn)行檢查。3.其他金雞納堿BP7HPLC檢查法：

金雞納生物堿的HPLC分析系統(tǒng)適用性試驗(yàn)示意圖1-cinchonine;2-cinchonidine;3-dihydrocinchonine;4-dihydrocinchonidine;5-quinidine;6-quinine;7-diydroquinidine;8-dihydroquinine;9-epiquinidine;10-epiquinine(二)磷酸咯萘啶的純度檢查磷酸咯萘啶(瘧乃停)對(duì)瘧原蟲(chóng)紅細(xì)胞內(nèi)期裂殖體有殺滅作用。與氯喹無(wú)交叉抗藥性，臨床上用于治療抗氯喹株惡性瘧和搶救腦型瘧等兇險(xiǎn)型瘧疾。磷酸咯萘啶在生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中引入的有關(guān)物質(zhì)，通過(guò)溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)等項(xiàng)目的檢查進(jìn)行控制。磷酸咯萘啶為黃色至橙黃色結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，味苦；具引濕性。在水中溶解，在乙醇或乙醚中幾乎不溶。ChP2010磷酸咯萘啶進(jìn)行酸度、水中不溶物、氯化物、甲醛、四氫吡咯、干燥失重的檢查。(二)磷酸咯萘啶的純度檢查1.酸度主要是在成鹽過(guò)程中引入。本品水溶液的pH值如小于2.4，刺激性較大。檢查法：取本品1.0g，加水25ml溶解后，用酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定，pH值應(yīng)大于2.4。2.水中不溶物本品加水溶解后，稍放置即有黃色不溶物產(chǎn)生，影響質(zhì)量。故質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)按給藥途徑不同，規(guī)定其不同限量以控制質(zhì)量。檢查法：取本品2.0g，加水25ml振搖使溶解，放置30分鐘，用置105℃恒重的4號(hào)垂熔玻璃坩堝濾過(guò)，沉淀用水15ml分次洗滌，在105℃干燥4小時(shí)，遺留殘?jiān)坏眠^(guò)4mg(供注射用)或7mg(供口服用)。

(二)磷酸咯萘啶的純度檢查3.氯化物系生產(chǎn)工藝中帶入。檢查時(shí)為了避免溶液顏色的干擾，先加堿使咯萘啶沉淀析出，然后再對(duì)濾液進(jìn)行檢查。檢查法取本品0.10g，加水4ml使溶解，加20％碳酸鈉溶液5ml，搖勻，使沉淀完全，用5號(hào)垂熔玻璃漏斗濾過(guò)，容器用水15ml分次洗滌、濾過(guò)，合并濾液，加水使成25ml，依氯化物法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液3.0ml制成的對(duì)照液比較，不得更濃(0.03％)。

(二)磷酸咯萘啶的純度檢查4.甲醛在合成磷酸咯萘啶的反應(yīng)中使用了甲醛進(jìn)行縮合，甲醛具有毒性，應(yīng)對(duì)產(chǎn)品中可能剩余的甲醛進(jìn)行檢查。檢查法：取本品50.0mg，加水2ml使溶解，加5%碳酸鈉溶液4ml，攪勻，濾過(guò)，濾液加硫酸溶液(1→2)3ml，冷卻后加品紅亞硫酸試液5ml，在20～30℃保溫30分鐘，如顯色，與新制的甲醛溶液(每1ml含甲醛0.10mg的水溶液)1.0ml用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深(0.2%)。5.四氫吡咯在合成磷酸咯萘啶的反應(yīng)中使用了四氫吡咯進(jìn)行縮合，四氫吡咯具有毒性，應(yīng)對(duì)產(chǎn)品中可能剩余的四氫吡咯進(jìn)行檢查。檢查法：取本品10mg，加水2ml溶解后，加5％碳酸鈉溶液2ml，攪拌，濾過(guò)，濾液加新制的亞硝基鐵氰化鈉乙醛試液1ml，搖勻，5分鐘內(nèi)不得顯藍(lán)紫色。

四、含量測(cè)定硫酸奎寧具有生物堿的性質(zhì)，很難在水溶液中用酸直接滴定。而在非水酸性介質(zhì)中，堿性顯著增強(qiáng)，即可以在冰醋酸或醋酐等酸性溶液中，用高氯酸滴定液直接滴定，以指示劑或電位法確定終點(diǎn)。由于硫酸為二元酸，在水溶液中能進(jìn)行二級(jí)解離，但在冰醋酸介質(zhì)中，只能解離為HSO4ˉ，所以生物堿的硫酸鹽在冰醋酸中只能滴定至硫酸氫鹽。

(BH+)2?SO42-+HClO4BH+?ClO4-+BH+?HSO4ˉ

測(cè)定時(shí)還應(yīng)注意生物堿分子結(jié)構(gòu)中氮原子堿性的強(qiáng)弱，正確判斷反應(yīng)的摩爾比，以準(zhǔn)確計(jì)算結(jié)果。(一)硫酸奎寧的含量測(cè)定(一)硫酸奎寧的含量測(cè)定取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酐5ml與結(jié)晶紫指示液1～2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于24.90mg的(C20H24N2O2)2·H2SO4。

ChP2010硫酸奎寧的含量測(cè)定法：奎寧為二元堿，喹核氮可與硫酸成鹽，喹啉環(huán)氮不與硫酸成鹽，但在冰醋酸介質(zhì)中用高氯酸滴定時(shí)，卻能與高氯酸成鹽。即：因此，1mol硫酸奎寧消耗3mol高氯酸滴定液。即1mol奎寧可以結(jié)合4mol質(zhì)子，其中1mol質(zhì)子是硫酸提供的，其它3mol質(zhì)子是由高氯酸提供的。USP與本法相同。(一)硫酸奎寧的含量測(cè)定

取本品20片，除去包衣后，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于硫酸奎寧0.3g)，置分液漏斗中。加氯化鈉0.5g與0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml，混勻，精密加三氯甲烷50ml，振搖10分鐘，靜置，分取三氯甲烷液，用干燥濾紙濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，加醋酐5mL與二甲基黃指示液2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯玫瑰紅色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于19.75mg的(C20H24N2O2)2·H2SO4

·2H2O。ChP2010硫酸奎寧片的含量測(cè)定法：測(cè)定中1mol硫酸奎寧可轉(zhuǎn)化為2mol奎寧，每1mol奎寧消耗2mol高氯酸，故1mol硫酸奎寧消耗4mol高氯酸。反應(yīng)式為：(一)硫酸奎寧的含量測(cè)定

顯然其片劑分析與原料藥有所不同。另外還應(yīng)注意考察共存物的干擾，片劑中如有較多輔料，如硬脂酸鹽、苯甲酸鹽等，也消耗高氯酸滴定液，故應(yīng)先用強(qiáng)堿溶液堿化，使之游離，經(jīng)三氯甲烷提取分離后，再用高氯酸滴定液滴定。

USP34硫酸奎寧片含量的HPLC測(cè)定法

(二)磷酸氯喹制劑的含量測(cè)定

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于磷酸氯喹0.13g)，置200ml量瓶中，加0.lmol/L鹽酸溶液適量，充分振搖使磷酸氯喹溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2ml，置100ml量瓶中，用0.lmol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，在343nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；另取磷酸氯喹對(duì)照品適量，精密稱定，加0.lmol/L鹽酸溶液溶解并定是稀釋制成每lml中約含13μg的溶液，同法測(cè)定，計(jì)算，即得。本品含磷酸氯喹(C18H26ClN3·2H3PO4)應(yīng)為標(biāo)示量的93.0%～107.0%。ChP2010中磷酸氯喹片的紫外-可見(jiàn)分光光度含量測(cè)定法：(二)磷酸氯喹制劑的含量測(cè)定

ChP2010中磷酸氯喹注射液(本品含磷酸氯喹的滅菌水溶液。含磷酸氯喹(C18H26ClN3·2H3PO4)應(yīng)為標(biāo)示量的95.0%～105.0%。)的含量的提取酸量測(cè)定法：

精密量取本品適量(約相當(dāng)于磷酸氯喹0.3g)，用水稀釋至30ml，加20%氫氧化鈉溶液3ml，搖勻，用乙醚提取4次，每次20ml，合并乙醚液，用10ml水洗滌，水洗滌液再用15ml乙醚提取1次，合并前后兩次的乙醚液，蒸發(fā)至近2～3ml時(shí)，精密加鹽酸滴定液(0.lmol/L)25ml，溫?zé)嵴羧ヒ颐巡⑹箽堅(jiān)芙?，冷卻，加溴甲酚綠指示液數(shù)滴，用氫氧化鈉滴定液(0.lmol/L)滴定。每lml鹽酸滴定液(0.lmol/L)相當(dāng)于25.79mgC18H26ClN3·2H3PO4

。

USP采用提取后HPLC測(cè)定磷酸氯喹注射液的含量。

第二節(jié)青蒿素類藥物的分析(3R,5aS,6R,8aS,9R,12S,12aR)-八氫-3,6,9-三甲基-3,12-氧橋-12H-吡喃并[4,3-j]-1,2-苯并二塞平-10(3H)-酮青蒿素(artemisinin)又名黃蒿素，是我國(guó)學(xué)者從從菊科植物黃花蒿(artemisiaannuaL.)中提取分離得到的一個(gè)含過(guò)氧基團(tuán)的新型倍半萜內(nèi)酯。青蒿素簡(jiǎn)介1986年中醫(yī)研究院研制的青蒿素抗瘧藥獲得我國(guó)實(shí)施新藥審批辦法以來(lái)的第1個(gè)新藥證書(shū)。但是，由于當(dāng)時(shí)中國(guó)還沒(méi)有專利法，所以，我國(guó)沒(méi)有申請(qǐng)發(fā)明專利。青蒿素是一種高效、速效、低毒的新型抗瘧藥。本品為脂溶性，易透過(guò)血腦屏障。在體內(nèi)代謝很快，排泄快，有效血藥濃度維持時(shí)間短。主要用于耐氯喹的惡性瘧，包括腦型瘧的搶救。因有效血藥濃度維持時(shí)間短，殺滅瘧疾原蟲(chóng)不徹底，復(fù)燃率高達(dá)30%，與伯氨喹合用，可使復(fù)燃率降至10%。青蒿素的多種衍生物均是治療瘧疾的有效單體，國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的首創(chuàng)新藥。隨著對(duì)青蒿素類藥物藥理作用研究的不斷深入，證實(shí)其具有抗瘧、抗孕、抗纖維化、抗血吸蟲(chóng)、抗弓形蟲(chóng)、抗心律失常和腫瘤細(xì)胞毒性等作用。青蒿素發(fā)展史將青蒿素結(jié)構(gòu)中C-10位羰基還原成羥基得到雙氫青蒿素，進(jìn)一步烷氧基化得到蒿甲醚，而進(jìn)行酯化可得到青蒿琥酯。

1990年，為了控制瘧疾對(duì)青蒿素的耐藥性，世界衛(wèi)生組織建議在治療中必須將青蒿素同別的抗瘧藥聯(lián)合使用。2007年5月，在瑞士日內(nèi)瓦舉行的第60屆世界衛(wèi)生大會(huì)上，世界衛(wèi)生組織聲明，單方青蒿素會(huì)引發(fā)耐藥性，建議在全球范圍內(nèi)推廣復(fù)方類抗瘧藥。一、青蒿素類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)青蒿素Artemisine雙氫青蒿素Dihydroartemisinin青蒿琥酯Artesunate蒿甲醚Artemether將青蒿素結(jié)構(gòu)中C-10位羰基還原成羥基得到雙氫青蒿素(dihydroartemisinin)，進(jìn)一步烷氧基化得到蒿甲醚(artemether)，而進(jìn)行酯化可得到青蒿琥酯(artesunate)。藥物名稱物理性質(zhì)鑒別檢查含量青蒿素Artemisine無(wú)色針狀結(jié)晶，味苦。在丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷中易溶，在甲醇、乙醇、稀乙醇、乙醚及石油醚中溶解，在水中幾乎不溶；在冰醋酸中易溶。熔點(diǎn)為150～153℃[

]D(無(wú)水乙醇)+75o～+78o。1.碘化鉀試液-淀粉2.羥肟酸鐵反應(yīng)3.HPLC4.IR1.有關(guān)物質(zhì)(TLC)2.干燥失重HPLC法雙氫青蒿素Dihydroartemisinin白色針狀結(jié)晶；無(wú)臭，味苦。在三氯甲烷中易溶，在丙酮中溶解，在甲醇或乙醇中略溶，在水中幾乎不溶。熔點(diǎn)為145～150℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。1.碘化鉀試液-淀粉2.香草醛硫酸反應(yīng)3.旋光4.IR1.有關(guān)物質(zhì)(TLC)2.干燥失重3.水分4.熾灼殘?jiān)?.重金素HPLC法青蒿琥酯Artesunate白色結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，幾乎無(wú)味。在乙醇、丙酮或三氯甲烷中易溶，在水中極微溶解。熔點(diǎn)為131～136℃(口服用)或132～137℃(注射用)[

]D(二氯甲烷)+4.5o～+6.5o。1.香草醛硫酸反應(yīng)2.羥肟酸鐵反應(yīng)3.HPLC4.IR1.酸度2.溶液的澄清度3.氯化物4.有關(guān)物質(zhì)(HPLC)5.水分6.熾灼殘?jiān)?.重金素HPLC法蒿甲醚Artemether白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無(wú)臭；味微苦。在丙酮或三氯甲烷中極易溶解，在乙醇或乙酸乙酯中易溶，在水中幾乎不溶。熔點(diǎn)為86～90℃。[

]D(無(wú)水乙醇)+168o～+173o。1.碘化鉀試液-淀粉2.香草醛硫酸反應(yīng)3.HPLC4.IR1.氯化物2.有關(guān)物質(zhì)(TLC)3.殘留溶劑(GC)4.干燥失重5.熾灼殘?jiān)麳PLC法青蒿素類藥物的物理性質(zhì)、鑒別、檢查及含量測(cè)定

(一)典型藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì)

UV吸收特性由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核，不具有共軛體系，其紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但C-10由于取代基的不同具有一定吸收特征。

(二)主要化學(xué)性質(zhì)氧化性由于青蒿素類是具有過(guò)氧橋的倍半萜內(nèi)酯類化合物，這類化合物具有氧化性。

旋光性青蒿素類藥物都均有旋光性，均為右旋體藥物。青蒿素其比旋度為+75o～+78o。蒿甲醚其比旋度為+168o～+173o。

水解反應(yīng)青蒿素結(jié)構(gòu)中由于有內(nèi)酯，在堿性條件下，發(fā)生水解，但其他藥物由于母核中沒(méi)有內(nèi)酯，沒(méi)法發(fā)生水解。二、鑒別試驗(yàn)(一)、呈色反應(yīng)(二)、吸收光譜特征(三)、色譜法(一)呈色反應(yīng)

ChP2010青蒿素的鑒別：取本品約5mg，加無(wú)水乙醇0.5ml溶解后，加碘化鉀試液0.4ml，稀硫酸2.5ml與淀粉指示液4滴，立即呈紫色。

ChP2010雙氫青蒿素片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于雙氫青蒿素20mg)，加無(wú)水乙醇2ml使雙氫青蒿素溶解，濾過(guò)，濾液中加碘化鉀試液2ml與稀硫酸4ml，搖勻，加淀粉指示液數(shù)滴，溶液即顯藍(lán)紫色。由于青蒿素類是具有過(guò)氧橋的倍半萜內(nèi)酯類化合物，這類化合物具有氧化性。在酸性條件能將I-氧化成I2與淀粉指示液，生成藍(lán)紫色。

1.碘化鉀試液-淀粉反應(yīng)(過(guò)氧橋的氧化反應(yīng))

(一)呈色反應(yīng)

含有內(nèi)酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件與羥胺作用，生成羥肟酸；在稀酸中與高鐵離子呈色。ChP2010收載了青蒿素和青蒿琥酯的羥肟酸鐵鑒別反應(yīng)。

2.羥肟酸鐵反應(yīng)

ChP2010青蒿素的鑒別：取本品約5mg，加無(wú)水乙醇0.5ml溶解后，加鹽酸羥胺試液0.5ml與氫氧化鈉試液0.25ml，置水浴中微沸，放冷后，加鹽酸2滴和三氯化鐵試液1滴，立即顯深紫紅色。

ChP2010青蒿琥酯的鑒別：取本品約50mg，加含7％鹽酸羥胺的乙醇溶液(80→100)1ml，再加乙醇制氫氧化鉀試液3ml，置水浴中加熱至沸，放冷，加稀鹽酸至呈酸性，再加三氯化鐵試液l滴，即顯紫紅色。(一)呈色反應(yīng)香草醛-硫酸溶液又稱硫酸香蘭素顯色劑，很多的物質(zhì)如有機(jī)酸、揮發(fā)油、甾醇、萜類等都可以顯色。

3.香草醛-硫酸反應(yīng)

ChP2010青蒿琥酯的鑒別：取本品約50mg，加三氯甲烷1ml溶解后，取3～4滴置白瓷板上，待三氯甲烷揮發(fā)后，加2％香草醛硫酸溶液1滴，顯紅色。

硫酸香草醛溶液顯色原理:使羧基脫水，增加雙鍵結(jié)構(gòu)，再經(jīng)雙鍵位移，雙分子縮合等反應(yīng)生成共軛雙鍵系統(tǒng)，又在酸作用下形成陽(yáng)碳離子鹽而顯色。是一種通用顯色劑。

(二)、吸收光譜特征青蒿素類抗瘧原料藥在ChP2010中均采用紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別。1.紅外吸收光譜特征

ChP2010青蒿琥酯片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于青蒿琥酯0.1g)，加15ml丙酮振搖使溶解，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)霉枘z為干燥劑減壓干燥。殘?jiān)募t外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與青蒿琥酯的對(duì)照?qǐng)D譜一致。

但是制劑的紅外光吸收?qǐng)D譜鑒別須經(jīng)提取分離，殘?jiān)稍锖?，進(jìn)行紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜比較。要求所得的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜一致。(二)、吸收光譜特征

由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核，不具有共軛體系，其紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但C-10由于取代基的不同具有一定吸收特征。ChP2010均未采用本法鑒別所收載青蒿素類藥物。

2.紫外吸收光譜特征(三)