中草藥抗病毒研究現(xiàn)狀

中草藥抗病毒研究現(xiàn)狀

雖然在中醫(yī)中沒有病毒的名字，但病毒的治療有記錄，并在幾千年的臨床應(yīng)用中積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。近年來,國內(nèi)外科研工作者已從中草藥中篩選和尋找出一些高效抗病毒藥物,其中有些已被開發(fā)應(yīng)用于臨床。隨著高科技的飛速發(fā)展,中草藥抗病毒研究必將走向細(xì)胞、分子甚至基因水平,這對研究并開發(fā)高應(yīng)用價值的中藥制劑有著非常重要的意義。筆者將通過國內(nèi)外研究概況、中藥抗病毒之機(jī)理、中藥抗病毒的研究思路等幾個方面對近十年來抗病毒中藥的研究進(jìn)展做一綜述。1關(guān)于抗癲癇藥物的研究1.1單味中草藥的使用研究證實(shí),有些中草藥具有非常強(qiáng)的抗病毒作用。在臨床上治療病毒性疾病的單味中藥如清熱藥的板藍(lán)根、黃柏、黃芩、黃連、金銀花、連翹、葉下珠等解表藥的麻黃桂枝香薷紫蘇葉防風(fēng)、薄荷等。根據(jù)臨床實(shí)踐和現(xiàn)代中藥藥理學(xué)的研究,抗病毒中藥可分為兩大類。一是能直接滅活或抑制病毒的中草藥,常用的有醋、黃芪、板藍(lán)根、麻黃、蒼術(shù)、五味子、蠶砂、桑葉、青蒿、馬鞭草、地丁、木賊、紫草、香附、夏枯草、天花粉、甘草、三七、大黃、大青葉、女貞葉、白頭翁、地榆、地骨皮、百部、防風(fēng)、連翹、吳茱萸、虎杖、側(cè)柏葉、二花、魚腥草、茵陳、厚樸、穿心蓮、桂枝、柴胡、菊花、野菊花、黃連、黃柏、蛇床子、蒲公英、薄荷等;二是通過誘生干擾素或促進(jìn)人體免疫功能而達(dá)到抗病毒作用的中藥,常用的有人參、茯苓、豬苓、黨參、黃芪、山藥、首烏、巴戟天、靈芝、黃精、肉蓯蓉、菟絲子、山茱萸、當(dāng)歸、刺五加、枸杞子、蟲草等。在臨床上,使用頻率較高或抗病毒研究較深入的單味中草藥有下述中藥。芍藥具有養(yǎng)血斂陰、養(yǎng)陰平肝及柔肝護(hù)肝的作用芍藥提取物對由單純皰疹病毒(HSV-1)感染所致的皮膚損傷有良好的治療作用,用藥后次日即可生效,5mg/mL組作用強(qiáng)度與陽性對照藥病毒唑十分相近,用藥4h便可基本痊愈;10mg/mL組和2.5mg/mL治療組分別于用藥后6d或7d痊愈。人參人參對HSV-1、柯薩奇B3病毒復(fù)制有明顯抑制作用,同時表現(xiàn)出對病毒感染細(xì)胞有很強(qiáng)的保護(hù)作用,對皰疹型口炎和口腔潰瘍效果顯著,有效率達(dá)88.8%和76.9%,其作用機(jī)理是直接殺傷病毒。艾葉據(jù)研究,艾葉對腺病毒3型、鼻病毒、皰疹病毒,副流感I型病毒仙臺株和流感病毒A等呼吸道病毒進(jìn)行抑制實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,艾葉對這幾種病毒都有抑制作用。張其正等進(jìn)行的研究表明用艾葉煙薰劑點(diǎn)燃(濃度為1g或5g/m3),能在0.5h內(nèi)使流感病毒滴度(EID50)較對照組明顯下降。黃芪1984年侯文德等報道黃芪水煎液對VSV、流感病毒等有一定的抑制作用,對VSV在雞胚細(xì)胞培養(yǎng)上的繁殖平均可抑制10倍。現(xiàn)代研究認(rèn)為,黃芪抗流感病毒作用,系通過提高機(jī)體誘生干擾素能力,從而在一定程度上抑制病毒繁殖。金銀花金銀花所含成分有綠原酸、異綠原酸、黃酮化合物、芳樟醇、雙花醇等。雙花(金銀花)噴霧劑體內(nèi)抗病毒實(shí)驗(yàn)表明,其大小劑量對小鼠流感病毒性肺炎有明顯抑制作用,大劑量(11.4克/千克·天)對小鼠肺內(nèi)流感病毒增殖有顯著抑制作用。連翹連翹是木犀科植物連翹的干燥果實(shí),為中醫(yī)常用的清熱解毒藥,連翹提取物具抗柯薩奇B5、柯薩奇B3V及?？?ECH19V)等病毒作用。張煒等比較連翹、寸冬、雙花、山豆根4種中藥的水煎劑抗柯薩奇B組病毒的活性,以連翹為最佳。野菊花本品為常用的抗菌抗病毒藥,具有較強(qiáng)的抗流感病毒活性。細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)證明,野菊花水提物抗病毒效價1:1024,揮發(fā)油1:8190即可抑制10TCID50流感病毒引起的CPE。蜂膠Amoros氏(1992年)進(jìn)行蜂膠體外抗病毒實(shí)驗(yàn),證實(shí)蜂膠對單純皰疹病毒和皰疹性口腔炎病毒外殼的殺滅作用;還證明蜂膠對脊髓灰質(zhì)炎病毒繁殖的抑制作用較強(qiáng),而腺病毒敏感性較差。立藤智基等(1993年)研究巴西產(chǎn)蜂膠的抗病毒作用,確認(rèn)蜂膠乙醇浸提物能抑制皰疹性口腔炎病毒(VSV)、1型單純皰疹病毒(HSV-1)猴病毒-40(SV-40K)和日本血凝病毒(HVJ)在細(xì)胞培養(yǎng)中增殖。10μg/ml蜂膠使空斑數(shù)減少率分別為:VSV28.8%,HVJ76.2%,SV-4061.1%,HSV-1100%;特別是對HSV-1的作用最強(qiáng),在1μg/ml濃度即呈現(xiàn)空斑減少率100%。1.2對病毒的效果目前許多中草藥的有效抗病毒成分已經(jīng)被證實(shí)并提純,以下即為一些主要抗病毒中藥有效部位或單體成分。大黃醇提液研究證明,大黃醇提液在細(xì)胞培養(yǎng)上有明顯抗病毒作用,對HSV-1的有效抑制濃度為100p.g/mL,并對HSV-1的感染有預(yù)防作用,同時對病毒顆粒也有直接殺傷作用。甘草甜素(GL)也稱為甘草酸(GA)其商品常為甘草酸的鈉鹽。已證實(shí)其肯廣泛的抗病毒譜。梁再賦等在培養(yǎng)的RK細(xì)胞上研究了甘草酸單錢(MAG)的抗HAV-I作用,實(shí)驗(yàn)表明,25mg/ml以上濃度的MAG對PK,3細(xì)胞有毒性作用,12.5mg/mL以下濃度的MAG對細(xì)胞生長無影響,4mg/mL以上濃度的MAG不但具有直接滅活病毒作用,而且也可抑制細(xì)胞內(nèi)的狂SV-1增殖。茶色素已知茶色素的初級氧化產(chǎn)物為茶黃素(TF)。目前從TF中分離出3種單體,分別為TF的單沒食子酸醋A(TFZA),B(TFZB)以及TF雙沒食子酸醋(TF3)。研究結(jié)果表明,TF及其沒食子酸醋對艾滋病毒(包括HIV-1)的逆轉(zhuǎn)錄酶以及各種細(xì)胞的DNA和RNA聚合酶活性具有抑制作用。黃芩素黃芩是常用中藥,具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎的功能。其所含黃芩素(黃芩苷),屬黃酮類似合物,提取方法甚多,現(xiàn)有人用酶法提取,純度可大于99%。近年來研究認(rèn)為,其可以抗艾滋病病毒(HIV),能誘導(dǎo)感染HIV的細(xì)胞凋亡。甘草多糖它也是甘草的成分,具有明顯的抗皰疹性口炎病毒、腺病毒3型、單純皰疹病毒I型、牛痘病毒等活性,能顯著抑制細(xì)胞病變,使組織培養(yǎng)的細(xì)胞得到保護(hù)。甘草皂苷甘草皂苷是甘草根和莖中所含成分之一,根據(jù)報道,其能破壞病毒培養(yǎng)物中的HIV。0.5mg/mL的甘草皂苷對HIV的增殖抑制率達(dá)98%,50%空斑形成抑制值為0.125mg/mL,科研人員認(rèn)為甘草皂苷對病毒的抑制作用可能是通過恢復(fù)T輔助細(xì)胞而發(fā)揮作用的。1.3熱毒清顆粒及病毒的作用利用兩味或兩味以上中藥相配伍,研究中藥在抗病毒方面的協(xié)同作用,最終以取得具有較好臨床療效的新中成藥為目的的研究,是目前中草藥抗病毒的主要研究方向之一。雙黃連粉針劑本方由金銀花、連翹、黃芩組成。研究表明,雙黃連粉針劑具有明顯抗A3V、RSV、ADV-3、HSV-1、HSV-2、CBV-3、CBV-4、新型腸道病毒71型(EV71)的作用;對PolioV-3、ECHO6V、麻疹病毒(MV)、VSV也有一定的抑制作用。在臨床病毒性疾病的治療中已被廣泛應(yīng)用。荊防口服液此口服液由遼寧省興海制藥廠生產(chǎn)。經(jīng)雞胚法和體外實(shí)驗(yàn)研究表明,對AV(FM1株)有顯著的抑制作用;在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究表明,10g/kg劑量的荊防口服液能有效抑制FM1株引起的小鼠肺炎病變的發(fā)生?？共《灸z囊本方由板藍(lán)根、虎杖、紅條紫草、茵陳、蒼術(shù)組成,方2由黃柏、西洋參、虎杖、黃芪、知母組成。經(jīng)透射電鏡負(fù)染法觀察發(fā)現(xiàn),兩方藥物與HSV-2相互作用后,病毒顆粒形狀明顯改變,出現(xiàn)病毒顆粒變形、大小不均、包膜裸露或破損以及病毒顆粒凝集融合成塊或結(jié)構(gòu)模糊不清等。說明此膠囊在體外對HSV-2顆粒的形狀結(jié)構(gòu)、表面成分和分散度均有顯著的破壞作用。熱毒清本方24]由金銀花、魚腥草、大青葉、蒲公英等藥味組成。經(jīng)體外實(shí)驗(yàn)研究、用RT-PCR檢測感染細(xì)胞的人巨細(xì)胞病毒(HCMV)和HCMV感染孕婦的治療試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),“熱毒清”對HCMV增殖有明顯的抑制作用;對HCMV所致細(xì)胞病變有明顯的抑制作用;使孕婦血清中腫瘤壞死因子(TNF-α)和白細(xì)胞介素-2(IL-2)迅速恢復(fù)正常水平。病毒清口服液本方由板藍(lán)根、連翹、貫眾、大青葉、金銀花、藿香、生地、甘草等10味藥組成,體外實(shí)驗(yàn)表明,對HSV-I和ADV-3有明顯的抑制作用。病毒清顆粒劑本方由板藍(lán)根、連翹、大青葉、甘草等10余味藥組成。經(jīng)體外法和雞胚法實(shí)驗(yàn)證實(shí),對ADV-7、RSV、HSV-1、A3V均具有抑制作用;臨床應(yīng)用,對呼吸道感染伴有咽痛、頭痛、發(fā)熱病證者療效亦十分顯著。菊藍(lán)感冒沖劑本方由解放軍醫(yī)院研制。經(jīng)雞胚法實(shí)驗(yàn)研究表明,其提取液對甲、乙型AV和ADV-3有抑制病毒繁殖的作用;體外實(shí)驗(yàn)表明,對ADV亦有抑制作用。熊膽粉牛黃丸本方主要由熊膽粉、人工牛黃、青黛等藥味組成。體外實(shí)驗(yàn)研究表明,其水提液對ADV有較強(qiáng)的抑制作用,但對RSV(南京株)無效。復(fù)方冬夏丸本方由冬夏草、山豆根、板藍(lán)根、黃芪等10多種中藥和海洋生物組成。用酒精和水提法得水溶性有效成分,經(jīng)體外法和間接免疫酶標(biāo)技術(shù)檢測,結(jié)果表明,對Epstein-Barr病毒(EBV)抗原表達(dá)具有顯著的抑制作用。清瘟敗毒飲本方由生石膏、生地、玄參、黃芩、牡丹皮、知母、黃連、梔子、淡竹葉、桔梗、甘草組成。郝氏等用清瘟敗毒飲治療流行性出血熱120例,結(jié)果:治療組平均發(fā)熱天數(shù)、尿蛋白轉(zhuǎn)陰天數(shù)均明顯短于病毒唑?qū)φ彰?說明清瘟敗毒飲加減治療流行性出血熱療效顯著。抗傳染性法氏囊病毒配方應(yīng)如海、蔣作功精選具有較強(qiáng)抗病毒作用和促進(jìn)機(jī)體體液和細(xì)胞免疫、誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生、抗菌消炎作用的10余種中草藥,經(jīng)水提制成復(fù)方中藥抗病毒合劑,并首先試驗(yàn)用于抗傳染性法氏囊病(IBD)。結(jié)果表明,抗病毒合劑對傳染性法氏囊病毒(IBDV)有明顯抑制作用,并對免疫系統(tǒng)和重要實(shí)質(zhì)器官有明顯保護(hù)作用。防治冠狀病毒引起的SARS中藥復(fù)方制劑2003年SARS流行時,國家中醫(yī)藥管理局曾推薦6個預(yù)防性中藥處方,在治療方面,分早期、中期、極期、恢復(fù)期,推薦4個方案。付琦等報道,中西藥聯(lián)合治療SARS,進(jìn)展期用國藥2號,極重期用國藥3號,恢復(fù)期用國藥4號。臨床實(shí)踐證明,中西藥聯(lián)合治療組治愈率高達(dá)95.56%。2直接抗體途徑中草藥抗病毒的主要途徑可分直接抗病毒途徑和間接抗病毒途徑兩種。直接抗病毒途徑是藥物對病毒的直接抑制或損傷作用。中藥間接抗病毒作用是中藥通過對機(jī)體免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)而起到抗病毒的作用,這是中藥抗病毒機(jī)制中不可勿視的重要方面。2.1直接抗病性活性主要是阻斷病毒繁殖過程中的某一環(huán)節(jié)。研究證實(shí),不少中藥具有直接抗病毒活性如荔枝核黃柏大黃丹參葉下珠淡竹葉赤芍、黃芪、綠咖啡豆等。根據(jù)病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)的增殖過程中并結(jié)合中藥抗病毒的相關(guān)研究,可將中藥直接抗病毒作用分為三個階段。2.1.1黃醇提液中的類目前研究表明,中藥在這個環(huán)節(jié)中抗病毒的機(jī)制主要可分為兩類。一類是“直接殺滅”作用,如大黃醇提液中蒽醌類在許多體外實(shí)驗(yàn)中證實(shí),對病毒具有直接的殺滅作用。另一類是阻止病毒顆粒吸附到靶細(xì)胞的過程。研究表明,中藥抗病毒活性成分中的黃酮類,多糖及其衍生物、三萜類化合物及其衍生物、生物堿及苷類等,都是通過阻止病毒顆粒對宿主細(xì)胞的吸附過程,而發(fā)揮抑制病毒作用的。2.1.2半乳聚糖對hsv的作熱作用大量研究證實(shí),硫酸葡萄糖、硫酸半乳聚糖可進(jìn)入被HSV侵染的細(xì)胞內(nèi),抑制一種特殊的逆轉(zhuǎn)錄酶活性,從而對這種DNA病毒產(chǎn)生抑制作用。2.1.3n的作用機(jī)制近年的研究報道認(rèn)為,裂裥菌多糖(Schzophyllan)具有抑制仙臺病毒(Sendaivirus)在細(xì)胞間的擴(kuò)散作用;甘草甜素對VZV的體外抑制研究指出,病毒感染16h后加入甘草甜素,可抑制病毒從感染細(xì)胞向未感染細(xì)胞擴(kuò)散。2.2對免疫細(xì)胞的作用有些中草藥借助其免疫調(diào)節(jié)作用,間接地達(dá)到抗病毒的目的,如黃芪、人參、白芍、橘皮、黃花蒿等。研究證實(shí)許多中藥如人參、豬苓、黃芪、山藥等,均具有促進(jìn)機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的功能。采用體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)相結(jié)合,利用酶標(biāo)、ELISA、PT-PCR等檢測手段,研究中藥有效成分對免疫細(xì)胞的激活、活化、誘生干擾素以及對病毒mRNA和DNA表達(dá)的影響,從而探討中藥通過免疫系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)抗病毒的機(jī)制。研究證實(shí),ConA、LPS能誘導(dǎo)脾臟淋巴細(xì)胞增殖和T、B淋巴雜交瘤細(xì)胞增殖。研究部門中藥復(fù)方及單體對免疫細(xì)胞活化、細(xì)胞分化、細(xì)胞因子合成。單克隆抗體的分泌等行為的影響,結(jié)果表明,研究中藥對IL-2、IL-10、INF-γ和部分單抗的產(chǎn)生有明顯的作用。另有報道證實(shí),硫酸葡萄糖可刺激T淋巴細(xì)胞增殖;硫酸右旋糖酐不僅能激活B淋巴細(xì)胞多克隆形成,還能誘導(dǎo)人類外周T淋巴細(xì)胞增殖和刺激CD4+8-T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2。3聯(lián)合用藥分析中草藥的特點(diǎn)是配伍應(yīng)用,即通過配伍組方來應(yīng)對病情變化實(shí)現(xiàn)治療的個體化和整體性例如虎杖和金銀花聯(lián)用:10%虎杖水煎液對HSV-Ⅰ,HSV-Ⅱ、甲型流感病毒等多種病毒有抑制作用;金銀花對流行性感冒亞洲甲型、孤兒病毒有抑制作用,對皰疹病毒也有一定的抑制效果,如果將兩藥合用,可大大提高抗病毒效果。王志潔等報道,金銀花及虎杖直接抑制HSV-1F株及HSV-1株的ED50均比阿昔洛韋(ACV)ED50小,說明兩者的直接抑制作用比ACV強(qiáng);虎杖和金銀花以不同的ED50比值聯(lián)用時,聯(lián)用后均小于單用的ED50及ACV的ED50,說明聯(lián)用效果比單用及ACV藥效強(qiáng)。因此,利用幾種中草藥配伍組成復(fù)方,探討其在抗