組織學(xué)與胚胎學(xué)課件

第14章

DNA的生物合成（復(fù)制）DNABiosynthesis(Replication)第14章DNA的生物合成（復(fù)制）復(fù)制(replication)

是以DNA為模板的DNA合成，是基因組的復(fù)制過程。在這個過程中，親代DNA作為合成模板，按照堿基配對原則合成子代分子，其化學(xué)本質(zhì)是酶促脫氧核苷酸聚合反應(yīng)。

復(fù)制親代DNA子代DNA復(fù)制(replication)是以DNA為模板的DNA合成本章主要內(nèi)容：DNA復(fù)制的基本規(guī)律DNA復(fù)制的酶學(xué)和拓?fù)鋵W(xué)變化原核生物DNA復(fù)制的過程真核生物DNA生物合成過程逆轉(zhuǎn)錄和其他復(fù)制方式本章主要內(nèi)容：DNA復(fù)制的基本規(guī)律DNA復(fù)制的基本特征BasicRulesofDNAReplication第一節(jié)DNA復(fù)制的基本特征第一節(jié)復(fù)制的方式——半保留復(fù)制

(semi-

conservativereplication)

雙向復(fù)制

(bidirectional

replication)

半不連續(xù)復(fù)制

(semi-discontinuousreplication)一、復(fù)制的基本規(guī)律：復(fù)制的方式——半保留復(fù)制(semi-conserva

DNA生物合成時，母鏈DNA解開為兩股單鏈，各自作為模板(template)按堿基配對規(guī)律，合成與模板互補(bǔ)的子鏈。子代細(xì)胞的DNA，一股單鏈從親代完整地接受過來，另一股單鏈則完全從新合成。兩個子細(xì)胞的DNA都和親代DNA堿基序列一致。這種復(fù)制方式稱為半保留復(fù)制。（一）半保留復(fù)制概念:DNA生物合成時，母鏈DNA解開為兩股單鏈，各自作為模板(AGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACC母鏈DNACCACTGGGGTGACCAGGTACTGTCCATGACTCCATGACAGGTACTG復(fù)制過程中形成的復(fù)制叉AGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACCAGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACC+子代DNAAT母鏈DNACGATTA復(fù)制過程中形成的復(fù)制叉ATAT+子按半保留復(fù)制方式，子代DNA與親代DNA的堿基序列一致，即子代保留了親代的全部遺傳信息，體現(xiàn)了遺傳的保守性。半保留復(fù)制的意義:遺傳的保守性，是物種穩(wěn)定性的分子基礎(chǔ)，但不是絕對的。按半保留復(fù)制方式，子代DNA與親代DNA的堿基序列一致，即子原核生物復(fù)制時，DNA從起始點(diǎn)向兩個方向解鏈，形成兩個延伸方向相反的復(fù)制叉(replicationfork)，稱為雙向復(fù)制。復(fù)制中的復(fù)制叉的形成（二）DNA復(fù)制從起始點(diǎn)向兩個方向延伸復(fù)制叉原核生物復(fù)制時，DNA從起始點(diǎn)向兩個方向解鏈，形成兩個延伸方A.環(huán)狀雙鏈DNA及復(fù)制起始點(diǎn)B.復(fù)制中的兩個復(fù)制叉C.復(fù)制接近終止點(diǎn)(termination,ter)oriterABCA.環(huán)狀雙鏈DNA及復(fù)制起始點(diǎn)oriterA真核生物每個染色體有多個起始點(diǎn)，是多復(fù)制子的復(fù)制。習(xí)慣上把兩個相鄰起始點(diǎn)之間的距離定為一個復(fù)制子(replicon)。復(fù)制子是獨(dú)立完成復(fù)制的功能單位。5’3’oriorioriori5’3’真核生物每個染色體有多個起始點(diǎn)，是多復(fù)制子的復(fù)制。習(xí)慣上把兩5’5’3’3’5’3’oriorioriori5’3’復(fù)制子5’5’3’3’解鏈方向ori5’5’3’3’5’3’oriorioriori5’3’復(fù)制（三）DNA一股子鏈復(fù)制的方向與解鏈方向相反導(dǎo)致半不連續(xù)復(fù)制3′5′3′3′5′3

5

3

5

解鏈方向領(lǐng)頭鏈(leadingstrand)后隨鏈(laggingstrand)（三）DNA一股子鏈復(fù)制的方向與解鏈方向相反導(dǎo)致半不連續(xù)復(fù)領(lǐng)頭鏈(leadingstrand)

：順著解鏈方向生成的子鏈，復(fù)制是連續(xù)進(jìn)行的，這股鏈稱為領(lǐng)頭鏈。后隨鏈(laggingstrand)

：另一股鏈因為復(fù)制的方向與解鏈方向相反，不能順著解鏈方向連續(xù)延長，這股不連續(xù)復(fù)制的鏈稱為后隨鏈。岡崎片段(okazakifragment)

：復(fù)制中后隨鏈上的不連續(xù)片段。半不連續(xù)復(fù)制：領(lǐng)頭鏈連續(xù)復(fù)制而隨從鏈不連續(xù)復(fù)制。領(lǐng)頭鏈(leadingstrand)：順著解鏈方向生成的DNA復(fù)制的酶學(xué)和拓?fù)鋵W(xué)變化第二節(jié)TheEnzymologyandTopologyofDNAReplicationDNA復(fù)制的酶學(xué)和拓?fù)鋵W(xué)變化第二節(jié)TheEnzymol參與DNA復(fù)制的物質(zhì):底物(substrate)：dATP,dGTP,dCTP,dTTP；模板(template)：解開成單鏈的DNA母鏈；引物(primer)：提供3

-OH末端使dNTP可以依次聚合；聚合酶(polymerase):

依賴DNA的DNA聚合酶，簡寫為DNA-pol；其他的酶和蛋白質(zhì)因子。參與DNA復(fù)制的物質(zhì):底物(substrate)：dATP核苷酸和核苷酸之間生成磷酸二酯鍵(dNMP)n

+dNTP→(dNMP)n+1

+PPi核苷酸和核苷酸之間生成磷酸二酯鍵(dNMP)n+dNTP聚合反應(yīng)的特點(diǎn):DNA新鏈生成需引物和模板；新鏈的延長只可沿5→3

方向進(jìn)行。聚合反應(yīng)的特點(diǎn):DNA新鏈生成需引物和模板；一、DNA聚合酶催化核苷酸之間聚合全稱：依賴DNA的DNA聚合酶(DNA-dependentDNApolymerase)簡稱：DNA-pol活性：1)5

3

的聚合活性2)核酸外切酶活性一、DNA聚合酶催化核苷酸之間聚合全稱：依賴DNA的DNA聚5′CGCTTCAGGATA

3′

|||||||||||3′TCGAAGTCCTAGCGAC5′3

5

外切酶活性:5

3

外切酶活性:?能切除突變的DNA片段。能辨認(rèn)錯配的堿基對，并將其水解。核酸外切酶活性:

5′CGCTTCAGDNA-polⅠDNA-polⅡDNA-polⅢ（一）原核生物的DNA聚合酶分為三型DNA-polⅠ（一）原核生物的DNA聚合酶分為三型催化DNA聚合參與DNA損傷的應(yīng)急狀態(tài)修復(fù)修復(fù)合成、切除引物、填補(bǔ)空隙功能20？400分子數(shù)/細(xì)胞10？1亞基數(shù)－－+5外切酶活性+++

5外切酶活性+++5聚合酶活性polIIIpolIIpolI原核生物中的DNA聚合酶催化DNA聚合參與DNA損傷的應(yīng)急狀態(tài)修復(fù)修復(fù)合成、切除引物功能：1.DNA-pol（109kD）對復(fù)制中的錯誤進(jìn)行校讀，對復(fù)制和修復(fù)中出現(xiàn)的空隙進(jìn)行填補(bǔ)。功能：1.DNA-pol（109kD）對復(fù)制中的錯誤進(jìn)323個氨基酸小片段5

核酸外切酶活性大片段/Klenow片段

604個氨基酸DNA聚合酶活性

5

核酸外切酶活性N端C端木瓜蛋白酶DNA-polⅠKlenow片段是實驗室合成DNA，進(jìn)行分子生物學(xué)研究中常用的工具酶。

323個氨基酸小片段5核酸外切酶活性大片段/Kl2.DNA-polⅡ（120kD）DNA-polII基因發(fā)生突變，細(xì)菌依然能存活。DNA-polⅡ?qū)δ０宓奶禺愋圆桓?，即使在已發(fā)生損傷的DNA模板上，它也能催化核苷酸聚合。因此認(rèn)為，它參與DNA損傷的應(yīng)急狀態(tài)修復(fù)。2.DNA-polⅡ（120kD）DNA-polII基功能：3.DNA-polⅢ

(250kD)是原核生物復(fù)制延長中真正起催化作用的酶。功能：3.DNA-polⅢ(250kD)是原核生物復(fù)２個核心酶1個

-復(fù)合物（

、

、

、

、

、

6種亞基）1對

-亞基（可滑動的DNA夾子）DNA聚合酶Ⅲ全酶結(jié)構(gòu)全酶結(jié)構(gòu)包括：２個核心酶DNA聚合酶Ⅲ全酶結(jié)構(gòu)全酶結(jié)構(gòu)包括：（二）常見的真核細(xì)胞DNA聚合酶有五種起始引發(fā)，引物酶活性++--高高高？中12.514.04.016.5分子量(kD)εδγβαDNA-pol填補(bǔ)引物空隙，切除修復(fù)，重組線粒體DNA復(fù)制5￠→3￠聚合酶活性16.5參與損傷與修復(fù)生物學(xué)功能3￠→5￠外切酶活性延長子鏈的主要酶，解螺旋酶活性+25.5（二）常見的真核細(xì)胞DNA聚合酶有五種起始引發(fā)，引物酶活性+二、DNA聚合酶的堿基選擇和校對功能實現(xiàn)復(fù)制的保真性復(fù)制按照堿基配對規(guī)律進(jìn)行，是遺傳信息能準(zhǔn)確傳代的基本原理。此外還需酶學(xué)的機(jī)制來保證復(fù)制的保真性。二、DNA聚合酶的堿基選擇和校對功能實現(xiàn)復(fù)制的保真性復(fù)制按照遵守嚴(yán)格的堿基配對規(guī)律；聚合酶在復(fù)制延長時對堿基的選擇功能；復(fù)制出錯時DNA-pol的及時校讀功能。DNA復(fù)制的保真性至少要依賴三種機(jī)制：遵守嚴(yán)格的堿基配對規(guī)律；DNA復(fù)制的保真性至少要依賴三種機(jī)制（一）復(fù)制的保真性依賴正確的堿基選擇DNA聚合酶靠其大分子結(jié)構(gòu)協(xié)調(diào)非共價（氫鍵）與共價（磷酸二酯鍵）鍵的有序形成。嘌呤的化學(xué)結(jié)構(gòu)能形成順式和反式構(gòu)型，與相應(yīng)的嘧啶形成氫鍵配對，嘌呤應(yīng)處于反式構(gòu)型。

（一）復(fù)制的保真性依賴正確的堿基選擇DNA聚合酶靠其大分子結(jié)（二）核酸外切酶活性在復(fù)制中辨認(rèn)切除錯配堿基并加以校正核酸外切酶(exonuclease)是指能從核酸鏈的末端把核苷酸依次水解出來的酶，外切酶是有方向性的。

（二）核酸外切酶活性在復(fù)制中辨認(rèn)切除錯配堿基并加以校正核酸外A：DNA-pol的外切酶活性切除錯配堿基；并用其聚合活性摻入正確配對的底物。B：堿基配對正確，DNA-pol不表現(xiàn)活性。DNApolⅠ的校讀功能A：DNA-pol的外切酶活性切除錯配堿基；并用其聚合活性摻三、復(fù)制中的解鏈伴有DNA分子拓?fù)鋵W(xué)變化DNA分子的堿基埋在雙螺旋內(nèi)部，只有把DNA解成單鏈，它才能起模板作用。

三、復(fù)制中的解鏈伴有DNA分子拓?fù)鋵W(xué)變化DNA分子的堿基埋在（一）解螺旋酶（helicase）

DnaB蛋白：

利用ATP供能，作用于氫鍵，使DNA雙鏈解開成為兩條單鏈。DnaBDnaC解鏈方向（一）解螺旋酶（helicase）DnaB蛋白：DDNA聚合酶不能從頭合成DNA鏈，只能延長已有的DNA或RNA引物鏈。引物酶在復(fù)制起始時催化RNA引物合成，提供3

-OH末端，使DNA-pol能夠催化dNTP聚合。（二）引物酶（Primase）DNA聚合酶不能從頭合成DNA鏈，只能延長已有的DNA或RN5′3′5′RNA引物5′5′RNA引物3′引物酶屬DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶，但不同于催化轉(zhuǎn)錄過程的RNA聚合酶。在E.coli，引物酶是dnaG基因的產(chǎn)物DnaG。5′3′5′RNA引物5′5′RNA引物3′引物酶屬DN（三）單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）在復(fù)制中維持模板處于單鏈狀態(tài)并保護(hù)單鏈的完整。（三）單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）在復(fù)制中維持模板108局部解鏈后（四）DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶復(fù)制過程正超螺旋的形成：改變DNA超螺旋狀態(tài)、理順DNA鏈108局部解鏈后（四）DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶復(fù)制過程正超螺旋的形成解鏈過程中正超螺旋的形成解鏈過程中正超螺旋的形成既能水解、又能連接磷酸二酯鍵。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ

拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ拓?fù)洚悩?gòu)酶分類：拓?fù)洚悩?gòu)酶作用特點(diǎn)：既能水解、又能連接磷酸二酯鍵。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ拓?fù)洚悩?gòu)酶分類拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ切斷DNA雙鏈中一股鏈，使DNA解鏈旋轉(zhuǎn)不致打結(jié)；適當(dāng)時候封閉切口，DNA變?yōu)樗沙跔顟B(tài)。反應(yīng)不需ATP。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ切斷DNA分子兩股鏈，斷端通過切口旋轉(zhuǎn)使超螺旋松弛。利用ATP供能，連接斷端，DNA分子進(jìn)入負(fù)超螺旋狀態(tài)。作用機(jī)制：拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ切斷DNA雙鏈中一股鏈，使DNA解鏈旋轉(zhuǎn)不致打結(jié)拓?fù)涿傅淖饔梅绞剑和負(fù)涿傅淖饔梅绞剑航M織學(xué)與胚胎學(xué)課件連接DNA鏈3

-OH末端和相鄰DNA鏈5

-P末端，使二者生成磷酸二酯鍵，從而把兩段相鄰的DNA鏈連接成一條完整的鏈。1.DNA連接酶的作用方式：（五）DNA連接酶（DNAligase）連接DNA鏈3-OH末端和相鄰DNA鏈5-P末端，使二者HO5’3’3’5’DNA連接酶ATPADP5’3’5’3’2.DNA連接酶的作用：OPO-O-OOPOO-OHO5’3’3’5’DNA連接酶ATPADP5’3’5’3’在復(fù)制中起最后接合缺口的作用。在DNA修復(fù)、重組及剪接中也起縫合缺口作用。也是基因工程的重要工具酶之一。3.DNA連接酶的功能：在復(fù)制中起最后接合缺口的作用。3.DNA連接酶的功能：原核生物DNA復(fù)制過程TheProcessofDNAReplicationinprokaryotes第三節(jié)原核生物DNA復(fù)制過程第三節(jié)DNA的復(fù)制過程復(fù)制的起始鏈的延長復(fù)制的終止DNA的復(fù)制過程復(fù)制的起始一、復(fù)制起始：DNA解鏈形成引發(fā)體需要解決兩個問題：1.DNA解開成單鏈，提供模板。2.形成引發(fā)體，合成引物，提供3-OH末端。一、復(fù)制起始：DNA解鏈形成引發(fā)體需要解決兩個問題：1.E.coli復(fù)制起始點(diǎn)oriCGATTNTTTATTT···GATCTNTTNTATT···GATCTCTTATTAG···11317293244···TGTGGATTA-‖-TTATACACA-‖-TTTGGATAA-‖-TTATCCACA5866166174201209237245串聯(lián)重復(fù)序列反向重復(fù)序列5

3

5

3

1.DNA解鏈E.coli復(fù)制起始點(diǎn)oriCGATTNTTTATTT··3

5

3

5

2.引發(fā)體的形成和引物合成含有解螺旋酶、DnaC蛋白、引物酶和DNA復(fù)制起始區(qū)域的復(fù)合結(jié)構(gòu)稱為引發(fā)體。DnaADNA拓?fù)洚悩?gòu)酶DnaB、DnaC引物酶SSB35352.引發(fā)體的形成和引物合成含有解螺旋酶、D3

5

3

5

引物是由引物酶催化合成的短鏈RNA分子。引物3'HO5'引物酶3535引物是由引物酶催化合成的短鏈RNA分子。引物引發(fā)體和復(fù)制叉的生成引發(fā)體和復(fù)制叉的生成二、DNA的延長復(fù)制的延長指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP的方式逐個加入引物或延長中的子鏈上，其化學(xué)本質(zhì)是磷酸二酯鍵的不斷生成。

二、DNA的延長復(fù)制的延長指在DNA-pol催化下，dNTP5'3'5'dATPdGTPdTTPdCTPdTTPdGTPdATPdCTPOH3'3'DNA-pol5'3'5'dATPdGTPdTTPdCTPdTTP領(lǐng)頭鏈的合成：領(lǐng)頭鏈的子鏈沿著5

→3

方向可以連續(xù)地延長。領(lǐng)頭鏈的合成：領(lǐng)頭鏈的子鏈沿著5→3方向可以連續(xù)地延長。后隨鏈的合成后隨鏈的合成同一復(fù)制叉上領(lǐng)頭鏈和隨從鏈由相同的DNA-pol催化延長

同一復(fù)制叉上領(lǐng)頭鏈和隨從鏈由相同的DNA-pol催化延長復(fù)制過程簡圖岡崎片段復(fù)制過程簡圖岡崎片段原核生物基因是環(huán)狀DNA，雙向復(fù)制的復(fù)制片段在復(fù)制的終止點(diǎn)(ter)處匯合。oriter

E.coli8232SV40oriter500三、復(fù)制的終止原核生物基因是環(huán)狀DNA，雙向復(fù)制的復(fù)制片段在復(fù)制的終止點(diǎn)(5

5

5

RNA酶OHP5

DNA-polⅠdNTP5

5

PATPADP+Pi5

5

DNA連接酶子鏈中的RNA引物被取代：555RNA酶OHP5DNA-polⅠdNTP5DNA連接酶DNA連接酶真核生物DNA生物合成過程TheProcessofDNABiosynthesisineukaryotes第四節(jié)真核生物DNA生物合成過程第四節(jié)哺乳動物的細(xì)胞周期DNA合成期G1G2SM

真核生物DNA復(fù)制在細(xì)胞周期的S期進(jìn)行，也可分為起始、延長和終止三個階段，每個階段的基本過程與原核生物DNA復(fù)制相似，但存在不少差異。

哺乳動物的細(xì)胞周期DNA合成期G1G2SM真核生物與原核生物DNA復(fù)制的差異：真核生物復(fù)制子多、岡崎片段短、復(fù)制叉前進(jìn)速度慢等；DNA復(fù)制從引發(fā)進(jìn)入延伸階段發(fā)生DNA聚合酶

/

轉(zhuǎn)換；切除岡崎片段RNA引物的是核酸酶RNAseHⅠ和FEN1等。

真核生物與原核生物DNA復(fù)制的差異：真核生物復(fù)制子多、岡崎片真核生物每個染色體有多個起始點(diǎn)，是多復(fù)制子復(fù)制。復(fù)制有時序性，即復(fù)制子以分組方式激活而不是同步起動。復(fù)制的起始需要DNA-polα(引物酶活性)和polδ(解螺旋酶活性)參與。還需拓?fù)涿负蛷?fù)制因子(RF)。

一、真核生物復(fù)制的起始與原核基本相似真核生物每個染色體有多個起始點(diǎn)，是多復(fù)制子復(fù)制。復(fù)制有時序性增殖細(xì)胞核抗原（proliferationcellnuclearantigen，PCNA）在復(fù)制起始和延長中起關(guān)鍵作用，PCNA

形成閉合環(huán)形的可滑動DNA夾子，在RFC的作用下結(jié)合于引物－模板鏈，可以使DNA-polδ獲得持續(xù)合成能力。PCNA水平也是檢驗細(xì)胞增殖的重要指標(biāo)。增殖細(xì)胞核抗原（proliferationcellnucDNA-polδ和polα分別兼有解螺旋酶和引物酶活性。在復(fù)制叉及引物生成后，polδ通過PCNA的協(xié)同作用逐步取代polα，在RNA引物的3

-OH基礎(chǔ)上連續(xù)合成領(lǐng)頭鏈。隨從鏈合成方式也與其相似。

二、真核生物復(fù)制的延長發(fā)生DNA聚合酶α/δ轉(zhuǎn)換DNA-polδ和polα分別兼有解螺旋酶和引物酶活性。3

5

5

3

領(lǐng)頭鏈3

5

3

5

親代DNA后隨鏈引物核小體三、真核生物DNA合成后立即組裝成核小體

3553領(lǐng)頭鏈3535親代DNA后隨鏈引物核染色體DNA呈線狀，復(fù)制在末端停止。復(fù)制中有岡崎片段的連接，還有復(fù)制子之間的連接。染色體兩端DNA子鏈上最后復(fù)制的5‘端RNA引物，去除后留下缺口。四、端粒酶參與解決染色體末端復(fù)制問題染色體DNA呈線狀，復(fù)制在末端停止。四、端粒酶參與解決染色體線性DNA復(fù)制的末端前導(dǎo)鏈產(chǎn)生完整的子染色單體。后隨鏈3

端留下縮短的未復(fù)制的ssDNA區(qū)。線性DNA復(fù)制的末端前導(dǎo)鏈產(chǎn)生完整的子染色單體。5

3

3

55

3

3

5+5

3

3

3

3

5

5

53355335+5333355端粒(telomere)：指真核生物染色體線性DNA分子末端的結(jié)構(gòu)。端粒酶參與解決染色體末端復(fù)制問題端粒(telomere)：指真核生物染色體線性DNA分子末端粒的功能：維持染色體的穩(wěn)定性維持DNA復(fù)制的完整性端粒的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：由末端單鏈DNA序列和蛋白質(zhì)構(gòu)成。末端DNA序列是多次重復(fù)的富含TG堿基的短序列。TTTTGGGGTTTTGGGG…端粒的功能：維持染色體的穩(wěn)定性端粒的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：由末端單鏈DN端粒酶(telomerase)端粒酶RNA(hTR)端粒酶協(xié)同蛋白(hTP1)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTRT)

組成：

生殖細(xì)胞、胚胎細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中有端粒酶，但正常人體細(xì)胞中無端粒酶，每進(jìn)行一次DNA復(fù)制，縮短的序列是端粒序列。端粒酶(telomerase)端粒酶RNA(hTR)組成：端粒酶的爬行模型端粒酶的爬行模型逆轉(zhuǎn)錄和其他復(fù)制方式ReverseTranscription&OtherDNAReplicationWays第五節(jié)逆轉(zhuǎn)錄和其他復(fù)制方式第五節(jié)某些病毒的遺傳物質(zhì)是RNA。少數(shù)低等生物如M13噬菌體，它的感染型只含單鏈DNA。原核生物的質(zhì)粒，真核生物的線粒體DNA，都是染色體外存在的DNA。這些非染色體基因組，采用特殊的方式進(jìn)行復(fù)制。組織學(xué)與胚胎學(xué)課件逆轉(zhuǎn)錄(reversetranscription)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以RNA為模板合成DNA的過程。逆轉(zhuǎn)錄酶一、逆轉(zhuǎn)錄病毒的基因組RNA以逆轉(zhuǎn)錄機(jī)制復(fù)制RNADNA逆轉(zhuǎn)錄(reversetranscription)在逆（一）逆轉(zhuǎn)錄過程逆轉(zhuǎn)錄酶RNA酶逆轉(zhuǎn)錄酶RNARNA-DNA

雜交體單鏈DNA雙鏈DNA（一）逆轉(zhuǎn)錄過程逆轉(zhuǎn)錄酶RNA酶逆轉(zhuǎn)錄酶RNARNA-DNA整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA中整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA中分子生物學(xué)研究可應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄酶，作為獲取基因工程目的基因的重要方法之一，此法稱為cDNA法。

以mRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成的與mRNA堿基序列互補(bǔ)的DNA鏈。

試管內(nèi)合成cDNA:cDNAcomplementaryDNA：逆轉(zhuǎn)錄酶

AAAA

TTTTAAAASI核酸酶

DNA聚合酶Ⅰ堿水解

TTTT分子生物學(xué)研究可應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄酶，作為獲取基因工程目的基因的重要（二）逆轉(zhuǎn)錄的發(fā)現(xiàn)發(fā)展了中心法則

1.逆轉(zhuǎn)錄酶和逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象，是分子生物學(xué)研究中的重大發(fā)現(xiàn)，發(fā)展了中心法則。

2.逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象說明至少在某些生物，R