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結(jié)核病診斷新技術(shù)及其評(píng)價(jià)雞市人民醫(yī)院呼吸科魏勝全結(jié)核病診斷新技術(shù)及其評(píng)價(jià)1內(nèi)容微生物學(xué)檢測生化檢測、細(xì)胞免疫學(xué)檢測四、分子生物學(xué)檢測內(nèi)容2呼吸醫(yī)生的尷尬?你懂的!TB的診斷有時(shí)有多難!病原學(xué)檢測是診斷B最重要的依據(jù)但據(jù)2019年WHO統(tǒng)僅有58%的TB患者有病原學(xué)依據(jù)。先抗炎?再抗癆???實(shí)在不行,上化療????個(gè)呼吸醫(yī)生的尷尬?3前言早期準(zhǔn)確診斷是結(jié)核病(TB)患者得以及時(shí)治療的關(guān)鍵目前的TB診斷水平仍然薄弱。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)估算,2019年的860萬新發(fā)TB患者中,僅登記了570萬,還有217.5萬(253%未被發(fā)現(xiàn)(漏診)。提高診斷技術(shù)則是發(fā)現(xiàn)患者,減少誤診、漏診的2019/1/18前言4微生物學(xué)檢測包括涂片染色鏡檢、結(jié)核分枝桿菌(MTB)分離培養(yǎng)、MTB藥敏和菌在結(jié)被的段團(tuán)態(tài)2但終度,雀莞區(qū)別非MTB(Mycobacteriumtuberculosis)MTB分離培養(yǎng)是確診TB最重要的依據(jù),不僅能取得病原學(xué)結(jié)果目前常用的細(xì)菌培養(yǎng)基包括Lowenstein-Jensen固相培養(yǎng)基(LJ法和Middlebrook7H97H11液體培養(yǎng)基。固相培養(yǎng)基價(jià)格加上菌種鑒定的時(shí)間耗BACTECMGIT960、BacT/Aert3D系統(tǒng)的液體培養(yǎng)基檢測速度有明顯提高(1~4周),但費(fèi)用較高。微生物學(xué)檢測5微生物學(xué)檢測1.1MTB快速培養(yǎng)法BACTECMGIT960系統(tǒng)采用熒光增強(qiáng)原理,在培養(yǎng)管底部包埋對(duì)氧測氧氣濃度變化以監(jiān)測培養(yǎng)管陽性標(biāo)本檢出時(shí)間相對(duì)較均為9續(xù)菌d。BACTECMG|T960系統(tǒng)為目際通行較固體培養(yǎng)法高出10%界限<10個(gè)菌落形成單位(CFU)mL。BacT/Aet3D系統(tǒng)采用比色中初始的CO2相比較,判斷是否存在MTB生長。同時(shí)可以進(jìn)行藥敏檢測。理論上培養(yǎng)速度較LJ法和BACTECMGIT960系統(tǒng)更快(6~22d)2直接顯微鏡檢技術(shù)(MODSMTB在液體培養(yǎng)基中生長會(huì)出現(xiàn)特征性的索狀結(jié)構(gòu)微鏡觀MTB的敏感度為975%,特異度為94.4%,出現(xiàn)陽性結(jié)果的中位時(shí)間約為8d該方法無需昂貴的設(shè)備,簡單,相對(duì)快速微生物學(xué)檢測6生化檢測TB的生化檢測主要包括腺苷脫氨酶(ADA)、乳酸脫氫酶(LDH、血管緊素轉(zhuǎn)化酶(ACE)等酶學(xué)檢測。此類方法簡單快速,適期診斷及別診斷子缺少結(jié)核特異性的酶標(biāo)而無確診價(jià)2.1ADAA是嘌呤核苷代謝中重要胸(腹)腔積液ADA檢測對(duì)結(jié)核性胸ADA濃度以度及敏過80%。胸(腹)腔積液ADA與血清ADA比值≥1更傾向結(jié)核性積液于癌性及非特異性積液,其比值一般<1DA對(duì)于活動(dòng)性TB的敏感度為100%,特異度為97%。腦脊液中活膜炎腦脊液中ADA活性增高ADA濃度≤8U結(jié)核性腦膜炎表明,將ADA濃度>8UL作為結(jié)核性腦膜炎診斷的閾值時(shí),其診斷的總敏感度<59%特異度>96%生化檢測7生化檢測2.2LDH是一種糖酵解酶,幾乎存在于機(jī)體所有組織細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)。對(duì)TB的診斷來說,LDH可用陶(腹)腔積液LDH與血清LDH比值≥0.6,LDH濃度>200UL傾向滲出液液LDH濃度變化無特征性差異度一般>200U,與癌性胸(腹)腔積2.3ACE細(xì)監(jiān)沓度細(xì)逆皮黯及缸于則T日的慘斷說:監(jiān)與結(jié)節(jié)病的鑒別,后者血清ACE濃度升高多見。結(jié)核性胸腔積液ACE濃度一般不升高,胸腔積液ACE與血清ACE比值≥1更傾向結(jié)核性積液,而惡性積液的比值多<1生化檢測8細(xì)胞免疫學(xué)檢測MTB為胞內(nèi)致病菌,因此普遍認(rèn)為TB的發(fā)病過程中細(xì)胞免疫占主導(dǎo)地位。細(xì)胞免疫結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)(tuberculinskintest,TST)和interferongammareleaseassayIGR而結(jié)合上述兩種方法優(yōu)點(diǎn)的改良結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)近年來發(fā)3.1TST即PPD皮試或皮內(nèi)Mantoux試驗(yàn)。TST從1890年發(fā)明以來沿用至今。由于TST存在假陽性結(jié)果和假陽性假陽性結(jié)果態(tài)部分原所致反受性應(yīng)。假陰性結(jié)果有很多潛在的原因,遲發(fā)超敏沒有潛伏性結(jié)核感染(LTB)的檢測金標(biāo)準(zhǔn),導(dǎo)的敏感度和特異度不能準(zhǔn)確評(píng)價(jià)。細(xì)胞免疫學(xué)檢測9、細(xì)胞免疫學(xué)檢測32血清學(xué)檢測O和不少國家推薦使gamm進(jìn)行MTB感染聯(lián)免疫斑(EOT定量檢測全血和(或)外周細(xì)胞在MTB特異性抗原刺激下釋放γ干擾素的水平,用于診斷LTB及輔助診斷TB。目前利用IGRA原理,有2種較為成熟的試劑盒,即QuantiFERONTBellestisIncorporatedAustralOxfordImmunotec,Abingdon藥品監(jiān)督管理局?jǐn)酁镸TBIGRA在24h之內(nèi)復(fù)強(qiáng)效應(yīng)(Booste這種方法無法區(qū)分LTB|與活動(dòng)能單獨(dú)作為TB的確診依據(jù)。、細(xì)胞免疫學(xué)檢測10肺結(jié)核診斷新技術(shù)課件11肺結(jié)核診斷新技術(shù)課件12肺結(jié)核診斷新技術(shù)課件13
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