第三代microbfame全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)的應(yīng)用

第三代microbfame全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)的應(yīng)用

近年來(lái)，許多組織先后引入了全流程酶免費(fèi)分析系統(tǒng)（elisa），以進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（elisa）。全流程酶免疫檢測(cè)設(shè)備的處理速度、精度和重復(fù)性均優(yōu)于人工操作。我站于2003年引進(jìn)瑞士哈美頓公司生產(chǎn)的第三代MicrolabFAME全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)(以下簡(jiǎn)稱“FAME系統(tǒng)”),FAME系統(tǒng)克服了手工操作的局限性,避免了人為因素帶來(lái)的偶然誤差,使試驗(yàn)的精密度、重復(fù)性、靈敏度、特異性有所提高。幾年來(lái),從使用情況看,儀器的各種性能指標(biāo)均符合實(shí)驗(yàn)要求。在使用中發(fā)現(xiàn),除了檢測(cè)試劑本身的穩(wěn)定性、靈敏度和特異性等因素影響檢測(cè)結(jié)果外,還有很多使用和操作方面的問(wèn)題。儀器使用過(guò)程中出現(xiàn)的故障主要是由于對(duì)儀器的性能掌握不熟練及操作不嚴(yán)謹(jǐn)造成的?，F(xiàn)將FAME系統(tǒng)常見(jiàn)故障及排除方法簡(jiǎn)介如下。1fame的應(yīng)用酶免試驗(yàn)全過(guò)程全自化的意義,并非僅僅限于降低勞動(dòng)強(qiáng)度、減少人為的誤差。根據(jù)已發(fā)表的FAME系統(tǒng)評(píng)價(jià)研究報(bào)告,人們發(fā)現(xiàn):全自動(dòng)酶標(biāo)分析系統(tǒng)可以普遍地、顯著地提高酶免試驗(yàn)的靈敏度、特異性和精密度。國(guó)內(nèi)學(xué)者用FAME系統(tǒng)對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行血液篩查試驗(yàn),意在通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化的操作手段及操作過(guò)程,提高血液檢測(cè)的質(zhì)量。以衛(wèi)生部I臨床檢驗(yàn)中心質(zhì)控血清及質(zhì)控血清盤為試驗(yàn)對(duì)象,應(yīng)用FAME系統(tǒng)的試驗(yàn)結(jié)果與常規(guī)酶免設(shè)備試驗(yàn)結(jié)果相比,HBsAg、抗-HCV試驗(yàn)的靈敏性分別提高了1.3%和5.0%,特異性分別提高了4.O%和83%,精密度分別提高了2.0%和2.24%。第三代全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)的基本特征是采用多任務(wù)、多通道,完全實(shí)現(xiàn)平行過(guò)程處理。FAME系統(tǒng)在硬件上采用了綜合模塊化設(shè)計(jì),廣泛采用液體水平檢測(cè)(LLD)技術(shù)、體積與重量傳感、光學(xué)位置傳感等實(shí)現(xiàn)了真正全過(guò)程控制(TPC),特別是專利的洗板液體傳感器,確保了最佳洗板效果,是保障試驗(yàn)特異性的關(guān)鍵。在軟件與功能上,目前仍唯一的全自動(dòng)GMP/GLP規(guī)范符合系統(tǒng),如全面的系統(tǒng)跟蹤記錄(Traceability)與系統(tǒng)追溯(Trackability),標(biāo)本/試劑加樣校驗(yàn)(Sampleverification)及“自由任務(wù)管理”實(shí)現(xiàn)隨時(shí)增加檢測(cè)板。1997年費(fèi)米獲得美國(guó)FDA許可,用于酶免篩查實(shí)驗(yàn)室。2fame系統(tǒng)的常見(jiàn)故障和排除方法2.1酶標(biāo)板的排除主要原因是酶標(biāo)板不規(guī)則,特別是國(guó)產(chǎn)酶免試劑盒的酶標(biāo)板。排除方法是:進(jìn)板前要仔細(xì)檢查酶標(biāo)板的外形是否規(guī)則,位置擺放是否正確。一旦卡板不僅實(shí)驗(yàn)失敗,而且損害儀器設(shè)備。2.2酶標(biāo)板掃描的排除主要原因是:酶標(biāo)板條不完整或透視鏡表面不干凈。排除方法是:(1)酶標(biāo)板掃描前必須完整。(2)每次維護(hù)設(shè)備時(shí)要觀察透視鏡表面是否干凈,若有灰塵或纖維,必須擦拭干凈。2.3機(jī)組件操作成功,確定吸液接頭類型,把好運(yùn)行環(huán)環(huán)板主要原因是:(1)樣品抗凝效果不佳,有纖維蛋白存在,使洗板機(jī)吸液針頭堵塞。當(dāng)自動(dòng)沖洗不成功后,設(shè)備自動(dòng)鎖定洗板機(jī)組件,酶標(biāo)板退出。(2)實(shí)驗(yàn)編程存在缺陷,相鄰洗板間隔時(shí)間太短,時(shí)間表?yè)頂D。排除方法是:(1)檢查加樣中有無(wú)血凝塊,發(fā)現(xiàn)后用針頭挑出。如洗板機(jī)吸液針頭堵塞發(fā)生在第一次洗板,應(yīng)快速將酶標(biāo)板取出,手工洗板后再放入孵育槽中。用細(xì)通絲疏通吸液針頭。(2)實(shí)驗(yàn)編程時(shí)要充分考慮實(shí)驗(yàn)中所需洗板的次數(shù)及相鄰洗板間隔時(shí)間不要太短,時(shí)間表安排要合理。2.4洗液的使用和排除主要原因是:花板(指酶標(biāo)實(shí)驗(yàn)顯色后顏色差別較大)除本底高外,與洗液配置濃度及洗液的專項(xiàng)使用有關(guān),特別HBsAg檢驗(yàn)用板,靈敏度高,易花板。另一原因與退板相同,就是洗板機(jī)針頭堵塞,吸不干凈,導(dǎo)致洗板不好而致花板。排除方法是:準(zhǔn)確配置洗液濃度,使用專項(xiàng)廠家的試驗(yàn)用洗液,不要混用。洗板機(jī)針頭堵孔問(wèn)題處理同上。3日常操作中的注意事項(xiàng)為保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的正常運(yùn)行,延長(zhǎng)儀器的使用壽命,也為保證日常工作的順利完成,必須注意在日常操中的一些細(xì)節(jié)問(wèn)題。3.1選擇沖洗液制備主要是指在開(kāi)關(guān)機(jī)時(shí)做的管道沖洗,須用多量蒸餾水和指定沖洗液進(jìn)行沖洗,此步驟雖然簡(jiǎn)單,但不能省略,因其可保證每條工作通道的順暢,對(duì)于試驗(yàn)的順利進(jìn)行及延長(zhǎng)儀器的壽命都尤其重要。3.2留置吸干由于工作繁忙,一般在開(kāi)機(jī)做冷啟動(dòng)(即初始化)時(shí)的過(guò)程觀察往往被忽略。不過(guò),仍然建議能盡量留意包括:進(jìn)板架和主傳輸帶移動(dòng)的聲音有無(wú)異樣(提示有無(wú)松動(dòng)或有無(wú)異物卡位),預(yù)洗板時(shí)有無(wú)吸干和放滿水(提示針孔有無(wú)堵塞)等情況,可及早發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及早解決。3.3項(xiàng)目編程的基本時(shí)間如何做到充分利用儀器,爭(zhēng)取時(shí)間,盡量縮短板與板之間等待的時(shí)間(包括減少灰?guī)У某霈F(xiàn)),如何進(jìn)行項(xiàng)目編程則顯得至關(guān)重要。在編程時(shí),應(yīng)注意統(tǒng)籌安排,充分調(diào)動(dòng)儀器的時(shí)間和空間,減少出現(xiàn)儀器閑置的情況,從而縮短等待時(shí)間,提高工作效率。3.4加剩余液體注意洗液桶的清潔問(wèn)題,當(dāng)天用完必須倒干桶中剩余的液體,避免長(zhǎng)菌,如出現(xiàn)漏水或不出水現(xiàn)象,則停止使用。洗站應(yīng)盡量保持干燥,特別在關(guān)機(jī)后,必須用抹布抹干上面的水漬。3.5fame系統(tǒng)的維護(hù)試劑是進(jìn)行試驗(yàn)的基本條件,它的質(zhì)量直接影響到最后的試驗(yàn)結(jié)果。所以,應(yīng)注意以下三點(diǎn):(1)定期更換試劑槽,一般一周一次;(2)每天使用前應(yīng)觀察槽中的試劑有無(wú)長(zhǎng)菌、發(fā)霉的現(xiàn)象,如有,應(yīng)馬上更換;(3)使用后應(yīng)及時(shí)將試劑盤放人冰箱保存。FAME系統(tǒng)準(zhǔn)備工作較繁瑣,處理過(guò)程相對(duì)較長(zhǎng),設(shè)備程序緊湊、連貫性強(qiáng),每一過(guò)程的失敗,均影響下一步操作,所以發(fā)生故障的機(jī)率較大,往往來(lái)不及處理而造成實(shí)驗(yàn)終止,