知母化學成分及藥理活性研究進展

知母化學成分及藥理活性研究進展

知母是百合科植物知母的根。它具有清熱明火、液體潤干的功效。常用于外感病原體、高熱、易怒、肺熱干渴、肺熱干渴、口渴、內(nèi)臟干燥、發(fā)燒、腸道干澀和便秘。近年來的研究從化學成分、藥理學和制劑學的角度進行了論述。1物理分化1.1呋哌皂苷化合物來源知母主含皂甙,分別是知母皂甙A-Ⅰ、A-Ⅱ、A-Ⅲ、A-Ⅳ、B-Ⅰ和B-Ⅱ,其中知母皂甙A-Ⅲ是薩爾薩皂甙元與知母雙糖結(jié)合而成的雙糖甙,知母皂甙A-Ⅰ是薩爾薩皂甙元β-D-吡喃半乳糖甙。其皂甙元主要是薩爾薩皂甙元。邊氏等從知母根莖乙醇提取物中分離得到20個化合物,采用光譜法和化學方法鑒定其中15個化合物的結(jié)構(gòu),分別為二十九烷醇(Ⅰ)、二十八烷酸混合物(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、胡蘿卜甙(Ⅳ)、菝葜皂甙元(Ⅴ)、馬爾可皂甙元(Ⅵ)、知母皂甙AⅢ(Ⅶ)、知母皂甙BⅠ(Ⅷ)、知母皂甙BⅢ(Ⅸ)、2,6,4’一三羥基-4-甲氧基苯酰酮(Ⅹ)、寶藿甙Ⅰ(Ⅺ)、淫羊藿甙-Ⅰ(ⅩⅡ)、芒果甙(ⅩⅢ)、7-O-葡萄糖基芒果甙(ⅪⅤ)、知母雙糖(ⅩⅤ)。其中化合物ⅤⅢ為新的天然產(chǎn)物,化合物Ⅰ、Ⅺ、ⅩⅡ、ⅩⅣ為首次從知母中分得的已知化合物,體外抗流感甲-Ⅲ型病毒試驗表明:化合物Ⅴ、Ⅵ、知母皂甙AⅢ及芒果甙有較強活性。馬氏等從知母根莖乙醇提取物中,經(jīng)硅膠層析和制備型HPLC分得四種呋甾皂甙,化合物Ⅳ為首次從知母中分離得到,命名為知母皂甙E。孟氏等從知母干燥根莖,經(jīng)溫水浸、大孔吸附樹脂柱層析、正相硅膠柱層析、HPLC、制備薄層等手段,從中分離出三種新的呋甾皂苷化合物,并初步鑒定其化學結(jié)構(gòu),分別命名為timosaponin-BⅣ,timosaponin-BⅤ,timosaponin-BⅥ。三種物質(zhì)經(jīng)水解,所得到的苷元全是菝葜皂苷元,糖部分檢出葡萄糖和半乳糖(4∶1)。洪氏等從西陵采集新鮮的知母根莖中分離得到兩種口山酮甙,即芒果甙(Ⅰ)和7-O-β-D-葡萄糖基芒果甙(7-O-β-D-glucopyranosyl-mangiferin,Ⅱ),后者為一新的化合物,命名為新芒果甙(neomangiferin,Ⅱ)。1.2測定藥物中皂蚤元、實施成分分析關(guān)于知母的質(zhì)量評價《中國藥典》1995年版收載了“薄層色譜法”,按干燥品計菝葜皂甙元(C27H45O3)不得少于1.0%。王氏等用反相高效液相色譜法分別分離并測定了知母中菝葜皂甙元、薩爾薩皂甙元,建立了中藥中菝葜皂甙元、薩爾薩皂甙元分離、測定的色譜方法。在一些以知母作為君藥的組方中,可通過測定知母中的菝葜皂甙元含量來控制質(zhì)量。蘇氏等用樹脂吸附-薄層掃描法測定抗病毒口服液中菝葜皂甙元含量以控制抗病毒口服液的內(nèi)在質(zhì)量。甄氏采用薄層掃描法測定知柏地黃丸中菝葜皂甙元和鹽酸小檗堿的含量以作為該藥的質(zhì)量控制手段。2藥理作用2.1對老年大鼠心肌免疫指標的影響人和動物衰老時常出現(xiàn)腦功能障礙,這種障礙和大腦M膽堿系統(tǒng)的功能低下有密切關(guān)系,包括M膽堿受體密度降低。知母水提物長期口服同時促進腦M受體的合成和降解,對合成的加快作用更強,其提高衰老時腦M受體密度的機制主要在促進受體分子的生成,從而糾正生成和降低的失平衡。范氏等研究結(jié)果表明,知母皂甙元(ZMS)能使培養(yǎng)9～15天的原代培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)細胞的M受體密度上調(diào),但并非ZMS直接作用于M受體結(jié)合位點所引起的,而是由于ZMS能促進M受體的生成。用M受體選擇性烷化劑BCM將腦內(nèi)原有受體不可逆地阻斷,用3H-QNB測定新生受體的時相曲線,通過數(shù)學模型救解生成速率(Pr)和降解速率常數(shù)(K)。二批平行實驗表明,ZMS通過相對加快受體的合成來調(diào)節(jié)衰老動物降低的腦M受體數(shù)。范氏等用放射免疫分析法測定細胞內(nèi)cGMP水平,觀察知母皂甙元不同作用時間對Carbachol刺激下cGMP生成的影響,結(jié)果表明知母皂甙元5min作用于原代培養(yǎng)的神經(jīng)細胞對Carbachol刺激下cGMP的生成無影響,而48h作用明顯提高cGMP生成量。因此,知母皂甙元作用與激動劑和拮抗劑不同,需要較長時間的作用才能發(fā)揮作用。徐氏等研究表明,雄性SD大鼠19～20月齡時起在飼料中加一定量從知母中提取的ZMS,到23～24月齡時用三臂等長Y型迷宮作實驗,其學習和記憶能力明顯高于飼料中不加ZMS的平行對照老年大鼠。知母對老齡大鼠心肌M受體亦有調(diào)整作用,競爭抑制實驗表明,大鼠心肌M受體85%以上是M2亞型,提示知母能上調(diào)M2亞型。知母寧為知母皂甙AⅢ和芒果甙,王氏等觀察不同濃度的知母寧溫育后的老化紅細胞免疫指標和過氧化脂質(zhì)(LPO)水平的改變,發(fā)現(xiàn)知母寧5、15、50、100μg溫育后的老化紅細胞LPO含量的改變,以知母寧50、100μg濃度時LPO水平明顯降低,和對照組相比差異有顯著意義(P<0.05)。提示一定劑量知母寧提高紅細胞CR1活性,可能與抑制脂質(zhì)過氧化反應有關(guān)。2.2受體激動劑劉氏等以放射免疫分析法和放射配基結(jié)合分析法觀察了知母對甲亢模型β腎上腺素受體-cAMP系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用,結(jié)果表明甲亢模型β受體-cAMP系統(tǒng)對β受體激動劑異丙腎上腺素的反應性顯著增強,腎臟β受體最大結(jié)合容量也顯著增加,知母能使兩者降至正常水平,但對β受體的親和力無影響。此外,知母尚可降低甲亢模型的耗氧率,但不影響其血清T3和T4的水平。王氏等研究了知母多糖的降血糖活性,結(jié)果表明知母多糖可使小鼠的血糖及肝糖元含量明顯降低,而血脂含量幾乎沒有變化。2.3知母寧的藥理作用機理李氏等觀察知母寧對急性常壓低氧肺動脈高壓SD大鼠模型平均肺動脈壓(mPAP)、血漿丙二醛(MDA)水平及肺組織磷脂酶A2(PLA2)活力的影響,并以加內(nèi)皮素-1(ET-1)和血小板活化因子(PAF)分別進一步對其作用機理進行探討。結(jié)果表明知母寧確有降低缺氧性肺動脈高壓的作用,其機理可能與拮抗ET-1和PAF的作用有關(guān)。此外,知母寧有與腎上腺糖皮質(zhì)激素相似的預防哮喘發(fā)作的作用。金氏等初步實驗結(jié)果表明,知母皂甙D具有保護心肌I/R損傷的作用,這一作用可能與其抗PAF、抗血小板聚集和清除自由基等機理有關(guān)。知母寧在5-80μg/ml濃度范圍內(nèi)對HL-60細胞生長和增殖有抑制作用,并呈明顯的劑量依賴關(guān)系。知母水提物及總多糖能顯著抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹和醋酸致腹腔毛細血管通透性,且知母水提物的抑制作用具有劑量依賴性。此外,知母口服易致嘔吐,徐氏研究表明,知母皂甙對粘膜無明顯刺激性,其易致嘔吐,是其所含的煙酸引起的。3主要制品中皂蚤元含量的變化知母經(jīng)炮制,可起到殺酶保甙作用,有利于藥材的貯存,傳統(tǒng)制法以鹽炙、酒炙,麩炒和清炒為多,曹氏等采用薄層掃描法測定各炮制品中菝葜皂甙元的含量以初步探討各炮制方法的合理性。結(jié)果表明知母不同炮制品