HPLC 高效液相色譜法(同濟(jì)大學(xué)分析化學(xué)課程)

同濟(jì)大學(xué)分析化學(xué)課程高效液相色譜簡介HPLC系統(tǒng)固定相與流動(dòng)相HPLC的應(yīng)用HPLC特點(diǎn)*視頻HPLC的特點(diǎn)GC與LC的比較應(yīng)用范圍寬！LC固定相粒度很小<10μm，別離效率很高LC流動(dòng)相選擇余地大LC適合于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、M大的化合物GC限于低沸點(diǎn)LC室溫就做HPLC的特點(diǎn)HPLC就要登場應(yīng)用范圍寬！LC固定相粒度很小<10μm，分離效率很高LC流動(dòng)相選擇余地大LC適合于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、M大的化合物GC限于低沸點(diǎn)LC室溫就做方法未見，廣告先出！每個(gè)新方法都是更好的？高壓泵/儀器貴/溶劑純化嚴(yán)格LC的比較*HPLC簡介：視頻篇

系統(tǒng)

操作

換柱HPLC系統(tǒng)固定相與流動(dòng)相HPLC的應(yīng)用HPLC特點(diǎn)*視頻HPLC

系統(tǒng)溶劑傳輸系統(tǒng)：心臟高壓泵樣品引入系統(tǒng)：自動(dòng)進(jìn)樣器樣品分離系統(tǒng)：關(guān)鍵色譜柱信號檢測系統(tǒng)：檢測器數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：軟件泵的根本原理往復(fù)活塞泵(單向閥)彈簧隔板/紅寶石球串聯(lián)柱塞泵消除流量脈沖

并聯(lián)柱塞泵減小流量脈沖

儀器：手動(dòng)進(jìn)樣器-六通閥/定量環(huán)六通閥定量環(huán)LoadInject通廢液口進(jìn)柱定量環(huán)儀器：自動(dòng)進(jìn)樣器自動(dòng)進(jìn)樣100樣品盤/機(jī)器手/自動(dòng)洗針機(jī)械手樣品盤色譜柱：柱溫箱、色譜柱外掛架柱溫箱外掛架儀器：檢測器-紫外UV/Vis雙燈，全波長檢測ＤＡＤ檢測器流路紫外檢測器：HPLC最愛！儀器：化學(xué)工作站進(jìn)樣器高壓泵流動(dòng)相色譜柱檢測器數(shù)據(jù)處理HPLC系統(tǒng)固定相與流動(dòng)相HPLC的應(yīng)用HPLC特點(diǎn)*視頻固定相與流動(dòng)相反相HPLC

極性:固定相<流動(dòng)相固定相-非極性流動(dòng)相(甲醇,乙腈,THF,二氯乙烷)-極性非極性物質(zhì)后出峰正相HPLC

極性:固定相>流動(dòng)相固定相-極性流動(dòng)相(己烷,庚烷)-非極性極性物質(zhì)后出峰正相色譜20%反相色譜80%正相色譜20%反相色譜80%什么是反相色譜？固定相-填充材料物理性質(zhì)硅膠純度色譜柱尺寸顆粒形狀粒徑表面積孔徑鍵合類型碳覆蓋率封端化學(xué)性質(zhì)固定相-填充材料鍵合類型碳覆蓋率封端化學(xué)性質(zhì)固定相-填充材料流動(dòng)相強(qiáng)調(diào)過濾除微粒純水的故事流動(dòng)相反相色譜最常用乙腈、甲醇、水乙腈–

水、甲醇-水混合流動(dòng)相更常見*HPLC簡介：視頻篇

系統(tǒng)

操作

換柱HPLC系統(tǒng)固定相與流動(dòng)相HPLC的應(yīng)用HPLC特點(diǎn)*視頻HPLC在醫(yī)藥方面的應(yīng)用1、新藥研發(fā)：目標(biāo)物的檢測、純度等

2、藥品的預(yù)處理：片劑，油膏，水劑等

3、體液：血、尿、脊椎液、唾液等

4、抗菌素：青霉素、甾族(激素)等

5、其它……HPLC在環(huán)保方面的應(yīng)用1、農(nóng)藥殘留量分析：含氯農(nóng)藥、有機(jī)磷

農(nóng)藥、除蟲菊等

2、致癌物質(zhì)：硝基呋喃及其代謝物、霉

素、亞硝胺、苯并芘等

3、水質(zhì)分析：內(nèi)分泌污染物等

4、其它……

HPLC在生化方面的應(yīng)用1、蛋白質(zhì)分析

2、肽類的分析

3、核酸

4、氨基酸

5、其它……

HPLC系統(tǒng)固定相與流動(dòng)相HPLC的應(yīng)用HPLC特點(diǎn)*視頻*HPLC簡介：視