第25次課 體內(nèi)藥物分析

體內(nèi)藥物分析第十三章一概述（一）體內(nèi)藥物分析的概念體內(nèi)藥物分析：是一門研究進(jìn)入人或動(dòng)物體內(nèi)，存在于生物樣品（如體液、組織、器官和排泄物等）中的藥物及其代謝物和內(nèi)源性物質(zhì)的質(zhì)與量變化規(guī)律的分析方法學(xué)。（二）體內(nèi)藥物分析的意義

通過體內(nèi)藥物分析結(jié)果可求得藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，可了解藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄情況。因此，體內(nèi)藥物分析為藥物研究、制劑質(zhì)量管理、臨床用藥等提供了數(shù)據(jù)和信息。另外，在用藥過量、誤服或服毒等中毒事件中，為解毒急救或判斷案情，也需要進(jìn)行體內(nèi)藥物分析；還有對(duì)一些興奮劑、致幻劑、鎮(zhèn)靜劑等藥物濫用現(xiàn)象也需要進(jìn)行體內(nèi)藥物進(jìn)行檢測(cè)。返回首頁（三）體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)1．干擾物質(zhì)多：生物樣品中含有大量的內(nèi)源性物，質(zhì)如蛋白質(zhì)、脂肪等，以及代謝物、結(jié)合物等，樣品一般均需經(jīng)過分離、凈化后才能進(jìn)行分析。2．樣品量少、不能重復(fù)取樣：生物樣品多數(shù)在特定條件下采集，無法再次取樣，且濃度低、變化幅度大，在測(cè)定前需濃縮、富集以適應(yīng)分析方法要求。 3．被測(cè)成分濃度低：對(duì)分析方法的靈敏度及專屬性要求較高。4．藥物濃度監(jiān)測(cè)和藥物濫用：要求分析方法簡(jiǎn)便、快速二常用樣品的種類、采集和貯存（一）樣品及采集1、血樣：

血漿：是在加肝素、枸櫞酸、草酸鹽等抗凝劑的全血經(jīng)離心后分取，量約為全血的一半。血清：是血液室溫放置后，自然凝固析出的清液。采?。阂话闶庆o脈取血、針刺手指、耳垂取血2、唾液：

優(yōu)點(diǎn)：樣品易得，取樣無痛苦，尤易為兒童接收。缺點(diǎn)：藥物濃度變化大采?。菏?5分鐘，收集自然流出或經(jīng)舌在口內(nèi)攪動(dòng)流出的唾液。也可采取物理、化學(xué)方法刺激使唾液流出。

3、尿液：

尿樣測(cè)定主要用于藥物劑量回收研究、藥物腎清除率和生物利用度等研究，以及測(cè)定代謝物類型等。

優(yōu)點(diǎn)：采取簡(jiǎn)便，取樣量大，受試者無痛苦。缺點(diǎn)：藥物濃度變化也大，需采集一定時(shí)間內(nèi)的尿樣。采?。簞?dòng)物應(yīng)在代謝籠中進(jìn)行，通過籠下漏斗接收。（二）樣品貯存取樣后最好立即進(jìn)行分析，不能立即分析的，則短期內(nèi)冷藏(4℃)，長(zhǎng)期冰凍(-20℃)。尿液是很好的細(xì)菌生長(zhǎng)液，若需收集24小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間的樣品或不能立即測(cè)定的，應(yīng)置冰箱冷藏或加防腐劑（1%甲苯、過飽和氯仿）保存。

三生物樣品前處理（一）藥物在體內(nèi)的存在形式游離型：原形藥物或代謝物綴合物：藥物或其代謝物與葡萄糖醛酸等結(jié)合結(jié)合物：藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合因此，在樣品測(cè)定之前要進(jìn)行適當(dāng)?shù)臉悠分苽?。包括分離、純化、濃集、必要時(shí)還需對(duì)待測(cè)組分進(jìn)行化學(xué)衍生化。（二）樣品前處理的目的1、提高測(cè)定方法靈敏度、準(zhǔn)確度和專屬性2、保護(hù)測(cè)定儀器不受生物樣品中類脂和蛋白質(zhì)等的污染。（三）樣品的分離與純化包括樣品去除蛋白質(zhì)、綴合物水解和待測(cè)組分的提取。1、去除蛋白質(zhì)（1）加入與水相混溶的有機(jī)溶劑：乙腈、甲醇、乙醇、丙酮等。（2）加入中性鹽：飽和硫酸銨、硫酸鈉、枸櫞酸鹽等。（3）加入強(qiáng)酸：三氯醋酸、高氯酸、硫酸-鎢酸等。（4）加入金屬離子：CuSO4-Na2WO4等。（5）酶解法：常用枯草菌蛋白酶2、綴合物水解尿液中藥物多數(shù)呈綴合物狀態(tài)。（1）酸水解：適量鹽酸（2）酶水解：常用葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶或兩者混合。3、待測(cè)組分的提取提取目的：從大量共存物中分離出所需要的微量組分提取方法：多數(shù)藥物是親脂性的，可用有機(jī)溶劑提取出來，而大多數(shù)內(nèi)源性雜質(zhì)是強(qiáng)極性的，不被提取出。（1）液-液提?。↙LE）：液-液提取中需注意的問題：①適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑：常用乙醚、氯仿等。②適當(dāng)?shù)乃鄍H值：由藥物的pKa值確定，一般堿性藥物在堿性條件、酸