實驗六 薄層色譜儀分離鑒定HUC-5 粗提物_第1頁
實驗六 薄層色譜儀分離鑒定HUC-5 粗提物_第2頁
實驗六 薄層色譜儀分離鑒定HUC-5 粗提物_第3頁
實驗六 薄層色譜儀分離鑒定HUC-5 粗提物_第4頁
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文檔簡介

實驗六薄層色譜儀分離鑒定HUC-5粗提物一實驗?zāi)康耐ㄟ^卡瑪薄層色譜儀分離HUC-5粗提物的實驗，了解薄層色譜分離方法的原理及薄層色譜儀的大致結(jié)構(gòu)；掌握使用薄層色譜儀的及其相關(guān)軟件的方法。二實驗原理將HUC-5粗提物采用半自動上樣法，借助于混合物中的組分，在互不相容的組分件進行吸附或分配，以達到分離的目的。三儀器與藥品瑞士卡瑪（CAMAG，Switzerland）構(gòu)造如下（本實驗室薄層色譜儀包含除6之外的所有部件）。實驗室提取HUC-5粗提物，石油醚：乙酸乙酯：甲醇=5：1：0.9。四實驗方法及操作步驟1.薄層板使用前先活化，如有特殊要求，還應(yīng)預(yù)洗。活化方法：將硅膠板移入烘箱，緩慢升溫至105-110℃恒溫活化半小時，取出放入干燥器中備用。2.點樣點樣是平面色譜中最重要的步驟，點樣過程中產(chǎn)生的誤差無法通過色譜展開和計算來校正。本設(shè)備采用噴霧點樣，條帶狀等多種方式點樣。其中條帶狀點樣適合中藥分析。3.展開展開式薄層色譜中受影響因素最多的步驟，展開劑的選擇、不同展開方式、溫度、展開距離對成分分離的影響。其中展開濕度的影響值得重視且較難控制。本實驗室使用的為全自動展開系統(tǒng)4.色譜后衍生化本實驗室使用的薄層色譜儀器帶熱激發(fā)反應(yīng)，可短時間內(nèi)將展開板進行烘干。5.圖譜記錄和評價該系統(tǒng)優(yōu)點：曝光時間自動偵測、曝光時間課手動調(diào)節(jié)、專業(yè)圖像增強—圖像校正、專業(yè)圖像增強—空白板背景扣除。五軟件設(shè)定 導(dǎo)入雙擊軟件 設(shè)定參數(shù)新建1.點樣器 2.展開器3.觀察器點樣器設(shè)置：進入Linomat5General界面調(diào)整Sequence.defaults進入Sequence界面（調(diào)整Numberoftracks、Bandlength、點樣位置x，y軸、樣點間隔、點樣量、點樣順序等等）2.展開器設(shè)置：新建進入界面設(shè)定參數(shù)（預(yù)飽和時間、預(yù)飽和液所需體積、展開劑體積、展開距離、吹干體積）開始提示加預(yù)報和液加預(yù)飽和液過程中加展開劑展開完畢，待吹干、取出、放入觀察室3.觀察設(shè)置：新建選擇所需要用觀察光，如“254nm，360nm，R，T，RT等等點擊將要觀察所需的光照條件

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