第八章 傳染與免疫放映simpl

第八章傳染與免疫第一節(jié)傳染一、傳染與傳染病幾個概念1疾病:生物體在一定條件下，由體內(nèi)或體外致病因素引起的一系列復雜且有特征性的病理狀態(tài)，即稱疾病。2傳染:又稱感染或侵染，是指外源或內(nèi)源性病原體突破其宿主的免疫“防線”后，在宿主的特定部位定植、生長繁殖或（和）產(chǎn)生酶及毒素，從而引起一系列病理生理的過程。3傳染病:是一類由活病原體的大量繁殖所引起，可從某一宿主個體直接或間接傳播到同種或異種宿主另一些個體的疾病。

（一）病原體病原體的數(shù)量、致病特性和侵人方式是決定傳染結局中的最主要因素。二、決定傳染結局的三大因素又稱致病力，表示病原體致病能力的強弱。構成毒力的因素兩方面:

1．毒力（1）侵襲力包括3種能力:

①吸附和侵入能力：②繁殖與擴散能力：③抵抗宿主防御功能的能力(2)毒素細菌毒素可分兩個大類:①外毒素

→指在病原細菌生長過程中不斷向外界環(huán)境分泌的一類毒性蛋白質，類毒素:用0.3%～0.4%甲醛溶液對外毒素進行脫毒處理，可獲得失去毒性但仍保留其原有免疫原性（抗原性）的生物制品，稱作類毒素?？苟舅?將類毒素注射機體后,可使機體產(chǎn)生對相應外毒素具有免疫性的抗體,稱為抗毒素.②內(nèi)毒素→是G－細菌細胞壁外層的組分之一，其化學成分是脂多糖（LPS）。因它在活細胞中不分泌到體外，僅在細菌死亡后自溶或人工裂解時才釋放，故稱內(nèi)毒素。

③內(nèi)毒素與外毒素的比較鱟（hou

）試劑法（LALtest）:

鱟具有開放性血管系統(tǒng)，每只可采血100～300mL，其血清呈藍色，內(nèi)含血藍蛋白和外源凝集素。鱟血中僅含一種變形細胞，其裂解產(chǎn)物可與G－細菌的內(nèi)毒素(LPS)和脂磷壁酸（膜磷壁酸）等發(fā)生特異性和高靈敏度的凝膠化反應用來檢測內(nèi)毒素的方法。其作用機制是：

應用:臨床診斷，藥品、生物制品和血制品檢驗，食品衛(wèi)生監(jiān)測，以及科學研究等諸多領域。3．侵入門徑(1)消化道(2)呼吸道(3)皮膚創(chuàng)口(4)泌尿生殖道(5)其他途徑2.入侵病原體的數(shù)量

免疫:免疫是機體識別和排除抗原性異物的一種保護性功能。免疫功能包括：①免疫防御②免疫穩(wěn)定③免疫監(jiān)視（二）宿主的免疫力（三）環(huán)境因素病原菌侵入其宿主后，按病原菌、宿主與環(huán)境三方面力量的對比或影響的大小決定著傳染的結局。結局有下列3種。（一）隱性傳染

（二）帶菌狀態(tài)

三、傳染的3種可能結局按發(fā)病部位可分為局部感染和全身感染兩種，按性質和嚴重程度的不同，可把它們分成4類：(1)毒血癥(2)菌血癥如傷寒癥的早期。（三）顯性傳染(3）敗血癥病原體侵入血流并大量繁殖。(4)膿毒血癥敗血癥的同時，又在臟器中引起化膿性病灶者。定義:凡在生物長期進化過程中形成，屬于先天即有、相對穩(wěn)定、無特殊針對性的對付病原體的天然抵抗能力，稱為非特異性免疫也稱先天免疫、或自然免疫.第二節(jié)非特異性免疫（一）皮膚與粘膜作用有3種：①機械性阻擋和排除作用；②化學物質的抗菌作用；③正常菌群的拮抗作用（二）屏障結構1．血腦屏障

2．血胎屏障

一、表皮和屏障結構白細胞的種類二、吞噬細胞及其吞噬作用與非特異性免疫有關的幾類吞噬細胞（一）多形核白細胞（PMN)

多形核白細胞又稱粒細胞。作用：可穿越血管壁，發(fā)揮吞噬功能。嗜中性粒細胞粒細胞嗜堿性粒細胞嗜酸性粒細胞（即嗜伊紅粒細胞）作用:并有吞噬和胞飲功能。

（二）巨噬細胞主要功能有(1)吞噬和殺菌作用(2)抗原遞呈作用(3)免疫調(diào)節(jié)作用(4）抗癌作用1定義:炎癥是機體對病原體的侵入或其他損傷的一種保護性反應，在相應部位出現(xiàn)紅、腫、熱、痛和功能障礙，是炎癥的五大特征。2意義

①集中大量吞噬細胞在炎癥部位；②抗菌因子和抗體發(fā)生局部濃縮；③死亡的宿主細胞堆集可釋放一部分抗菌物質；④氧濃度的下降和乳酸濃度的提高抑制多種病原體的生長；⑤體溫的升高可降低某些病原體的繁殖速度。三、炎癥反應在正常體液和組織中含有多種抗菌物質，如補體、溶菌酶、α和β干擾素、吞噬細胞殺菌素、白細胞素等

四、正常體液或組織中的抗菌物質1、概述定義：補體是指存在于正常人體或高等動物血清中的一組非特異性血清蛋白。在免疫反應中，由于它具有能擴大和增強抗體的“補助”功能，故稱補體。性質：室溫幾天或56℃下10分鐘失活來源：巨噬細胞、腸道上皮細胞及肝脾所產(chǎn)生2、功能激活后的補體參與破壞或清除已被抗體結合的抗原或細胞，（1）發(fā)揮其溶胞作用（2）病毒滅活（3）促進吞噬細胞吞噬（4）釋放組胺。（一）補體2、補體激活途徑

①經(jīng)典途徑②凝集素途徑③替換途徑1.概念干擾素是高等動物細胞在病毒或dsRNA等誘生劑的刺激下，所產(chǎn)生的一種具有高活性、廣譜抗病毒等功能的特異性糖蛋白。功能：

（1）抑制病毒增殖（2）具有免疫調(diào)節(jié)作用（增強NK和T細胞的活力）（3）對癌細胞的殺傷作用。（二）干擾素2.干擾素種類及誘生劑干擾素IFN-α（白細胞干擾素，Ⅰ型干擾素）IFN-β（成纖維細胞干擾素）IFN-γIFN-ω（免疫干擾素或Ⅱ型干擾素）誘生劑：微生物、微生物產(chǎn)物(LPs,真菌多糖等）、多分化合物、植物血凝素、伴刀豆球蛋白、葡萄球菌腸毒素A和卡那霉素等。干擾素的誘導過程和作用機制INF－第三節(jié)特異性免疫

概念A特異性免疫:也稱獲得性免疫，主要功能是識別非自身和自身的抗原物質，并對它產(chǎn)生免疫應答，從而保證機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定狀態(tài)。概述①后天獲得②特異性；③包括體液免疫系統(tǒng)和細胞免疫系統(tǒng)（即細胞介導免疫系統(tǒng)）；④特異性免疫力存在明顯的差別。B特點為：

C獲得方式:特異性免疫可通過自動或被動兩種免疫應答是指一類發(fā)生在活生物體內(nèi)的特異性免疫的系列反應過程。這是一個從抗原的刺激開始，經(jīng)過抗原特異性淋巴細胞對抗原的識別（感應），使它們發(fā)生活化、增殖、分化等一系列變化，最終表現(xiàn)出相應的體液免疫或（和）細胞免疫效應。特點能識別異己、具特異性、記憶性D免疫應答免疫應答過程可分3階段和兩大類型根據(jù)參與的免疫活性細胞的種類和功能的不同，免疫應答又可分為細胞免疫和體液免疫兩類。

細胞免疫：

指機體在抗原刺激下，一類小淋巴細胞（依賴胸腺的T細胞）發(fā)生增殖、分化，進而直接攻擊靶細胞或間接地釋放一些淋巴因子的免疫作用；體液免疫：

則指機體受抗原刺激后，來源于骨髓的一類小淋巴細胞（B細胞）進行增殖并分化為漿細胞，由它合成抗體并釋放到體液中以發(fā)揮其免疫作用。TD抗原和TI抗原TD抗原：即胸腺依賴性抗原，它所激發(fā)的體液免疫應答，必須有TH細胞參予才能完成，TI抗原：非胸腺依賴性抗原，可單獨刺激B細胞產(chǎn)生抗體，不須TH細胞參予，（一）中樞免疫器官又稱一級淋巴器官，是免疫細胞發(fā)生、分化和成熟的部位。

一、免疫器官

1．骨髓青春期后造血多發(fā)生在脊椎骨、胸骨、髂骨（qia）和肋骨中。骨髓中的多能干細胞可分化出：

①髓樣干細胞發(fā)育成紅細胞系、粒細胞系、單核細胞系和巨噬細胞系等；②淋巴干細胞發(fā)育成淋巴細胞、T、B細胞，免疫功能：（1）、各種前體細胞的發(fā)源地（2）、形成抗體的重要部位

（3）、再次免疫應答的發(fā)生的主要場所（主要類別是IgG)2．胸腺位置：胸腔上部，胸骨后方，緊貼大血管之前。分左右兩葉是T細胞分化和成熟的場所。胸腺的主要免疫功能１、Ｔ細胞成熟的場所２、產(chǎn)生胸腺激素胸腺上皮細胞可產(chǎn)生多種小分子的肽類胸腺激素。對誘導Ｔ細胞成熟起重要作用3.法氏囊鳥類所特有，形如囊狀，性成熟后消失。相當于人和哺乳動物骨髓的功能切除不能產(chǎn)生抗體。位置：位于泄殖腔后上方；功能：Ａ、促使鳥類B細胞分化成熟的場所Ｂ、可作為外周淋巴器官，即能捕捉抗原和合成某些抗體。主要是（1）脾臟位于腹腔左上方，分為皮質（白髓）和髓質（紅髓），是T、B細胞定居之地(二)外周免疫器官脾臟的主要免疫功能：Ａ、血液過濾功能吞噬細胞Ｂ、滯留淋巴細胞的作用Ｃ、產(chǎn)生免疫應答的重要場所，是產(chǎn)生抗體的重要器官。Ｄ、產(chǎn)生吞噬細胞增強激素（2）淋巴結。

其他淋巴組織A皮膚淋巴組織B粘膜淋巴組織免疫功能：１、過濾和清除異物作用

２、產(chǎn)生免疫應答的場所

免疫細胞泛指一切具有免疫功能的細胞，包括各類淋巴細胞(T,B,D,NK,NS,K和N細胞等）、粒細胞、單核細胞和各種類型的巨噬細胞等。免疫活性細胞則僅指能特異地識別抗原，即能接受抗原的刺激，并隨后進行分化、增殖和產(chǎn)生抗體或淋巴因子，以發(fā)揮特異性免疫應答的一群細胞.主要指T細胞和B細胞,單核細胞和巨噬細胞也包括免疫活性細胞內(nèi)。二、免疫細胞及其在細胞免疫中的作用

免疫活性細胞來源及功能1。概念T細胞即T淋巴細胞，一種參與特異性免疫應答的小淋巴細胞，主要執(zhí)行細胞免疫功能，包括細胞介導的細胞毒作用和遲發(fā)型超敏反應，也參與抗體的形成和炎癥反應等。2。表面標志包括表面受體和表面抗原兩類。表面受體:是指淋巴細胞表面上能與相應配體（特異性抗原、綿羊紅細胞、補體等）發(fā)生特異性結合的的分子結構。

如受體(E受體)和有絲分裂原受體等。

（一）T細胞表面抗原：是指淋巴細胞或其亞群細胞表面上能被特異性抗體（如單克隆抗體）所識別的表面分子。由于表面抗原是在淋巴細胞分化過程中產(chǎn)生的，故又稱分化抗原。國際上商定以分化群（clusterofdiffierentiation,CD）命名淋巴細胞細胞表面抗原或分子，如CD2、CD4、CD8，已命名上百種。（1）T細胞的表面標志AT細胞抗原受體(TCR），實際上就是T細胞的抗原受體，或稱T細胞受體(TCR），這是它執(zhí)行復雜和精確的識別抗原性異物的物質基礎之一。（2）CD2稱E受體能與綿羊紅細胞（E）結合，形成細胞花環(huán)。此實驗用來鑒定T細胞及檢測外周血中的T細胞的比例及數(shù)目的常用方法。（2）CD3常與TCR緊密結合形成TCR-CD3復合體。功能是將TCR與外來結合的抗原信息傳遞到細胞內(nèi)，啟動細胞內(nèi)的活化過程。（3）CD4和CD8分別為MHCII類分子和I類分子的受體，分別出現(xiàn)在不同功能亞群的T細胞表面。在同一T細胞表面只表達其中一種。因此T細胞可分成兩大亞群：CD4+T細胞和CD8+T細胞前者具有Th功能，后者具有Ts或Tk/Tc功能。正常比例應為2:1（4）有絲分裂原受體能刺激靜止的淋巴細胞轉化成淋巴母細胞，根據(jù)T細胞的發(fā)育階段、表面標志和T細胞免疫功能的不同，可把它分為若干亞群。3、T細胞亞群1．調(diào)節(jié)性T細胞（TR）(1)輔助性T細胞(TH)在體液免疫中發(fā)揮作用，主要功能是輔助B細胞，促使其活化和產(chǎn)生抗體。(2)抑制性T細胞（TS）可抑制TH,TC和B細胞的功能，由它控制淋巴細胞的增殖。2．效應性T細胞（TE）(1)遲發(fā)型超敏T細胞（TDTH）又稱遲發(fā)型T細胞（TD），在細胞介導的免疫中發(fā)揮作用。(2）細胞毒T細胞（TC）又稱殺傷性T細胞，在細胞介導免疫中發(fā)揮作用。Tc能特異地溶解帶Tc抗原的靶細胞，例如腫瘤細胞、移植細胞或受病原體感染的宿主組織細胞等。幾個主要亞群B細胞即B淋巴細胞，一種在細胞膜表面帶有自己合成的免疫球蛋白（也稱膜抗體）的淋巴細胞。也稱骨髓依賴淋巴細胞

（二）B細胞（Bcell)

1．B細胞和表面受體B細胞與T細胞的外形雖相同，包括有絲分裂原受體、抗原受體、補體受體和Fc（抗體的可結晶片段）受體等都有所不同。

（1）B細胞的抗原受體SmIgB細胞的抗原受體是細胞表面的免疫球蛋白SmIg(SIg),主要是單體的IgM和IgD作用:A是抗原的受體,能與相應的抗原特異性結合.B:是表面抗原,具有免疫球蛋白的抗原決定簇,能與抗免疫球蛋白的抗體分子結合C:是鑒別B細胞的主要特征,常用熒光素或鐵蛋白標記的抗免疫球蛋白抗體來鑒別.（2）Fc受體（FcR）能與免疫球蛋白的片段結合,大多數(shù)B細胞有IgG的受體稱FcγR,能特異性地與IgG的Fc片段結合.作用:A:與抗原抗體復合物結合,有利于B細胞對抗原的捕獲及B細胞的激活和抗體的產(chǎn)生B:能以與靶細胞(如腫瘤細胞)上的抗體結合,借以殺死靶細胞(3)補體受體（CR）能與補體成分C3b和C3d發(fā)生特異性結合的受體分別稱為CRⅠ和CRⅡ.作用:有利于B細胞捕捉與補體結合的抗原抗體復合物,CR被結合后,可使B細胞活化.(4)絲裂原受體與有絲分裂原結合的受體.葡萄球菌A蛋白（SPA）是B細胞專有的分裂原.作用:與分裂原結合后促進B細胞分裂.(5)CD79常與B細胞抗原受體（BCR）形成復合物,B細胞所特有。功能與CD3類似,為信號傳遞分子。3.B細胞的亞群按B細胞產(chǎn)生抗體時是否需T細胞的輔助分成兩亞群，（1）B-1（T細胞不依賴性亞群）它只有初級免疫應答反應（產(chǎn)IgM），而無次級免疫應答反應。（2）B-2（T細胞依賴性亞群）必須在T細胞的輔助下才產(chǎn)生IgG和IgM等抗體，有次級免疫應答反應。1．NK細胞概述:NK細胞可在無抗體、無補體或無抗原致敏的情況下就能殺傷靶細胞的淋巴細胞，故稱自然殺傷細胞。即自然殺傷細胞，因其細胞質中有嗜天青顆粒，且細胞較大，故也稱大顆粒淋巴細胞（LGL）。主要存在于外周血和脾臟中。表面受體:

干擾素受體和IL-2受體等生物學功能:

非特異性地殺傷腫瘤細胞,抵抗多種微生物感染,排斥骨髓細胞的移植.

（三）第三淋巴細胞

2．K細胞即殺傷細胞，是一類與NK細胞相似的大顆粒淋巴細胞。通過IgG的Fc片段與K細胞表面的Fc受體的結合，可觸發(fā)K細胞的殺傷活性，故它能專一地但非特異地殺傷被IgG所覆蓋的靶細胞。主要存在于腹腔滲出液、血液和脾臟中。

ADCC:

在特異性的抗體介導下參與的殺傷作用，被稱作抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用。（四）第四淋巴細胞一種同時具備T細胞和NK細胞特征的淋巴細胞，稱為NKT細胞是繼T細胞、B細胞、NK細胞和K細胞之后的第四類淋巴細胞。NKT細胞可以抑制人體內(nèi)TDTH細胞導致產(chǎn)生的自身免疫病。

（五）淋巴細胞再循環(huán)定義:淋巴細胞在在淋巴液、血液和淋巴器官之間的反復循環(huán)意義:在于使帶有各種不同抗原受體的淋巴細胞不斷在體內(nèi)各處巡游，增加與抗原遞呈細胞接觸的機會，使機體更有效地發(fā)揮清除異物性抗原的免疫作用。免疫分子的種類三、免疫分子及其在體液免疫中的作用膜表面抗原分子主要組織相容性復合物抗原白細胞分化抗原粘附因子膜表面免疫分子

抗體補體細胞因子免疫分子體液免疫分子①膜表面抗原受體：T細胞和B細胞表面都存在膜表面抗原受體。功能：識別相應的抗原并相互結合，以啟動特異性免疫應答。②主要組織相容性復合物抗原組織相容性：是指在不同高等動物個體間進行組織或器官移植時，供體與受體雙方彼此可接受的程度。組織相容性抗原：它是由主要組織相容性復合物(MHC）編碼的一類特殊的細胞表面蛋白，代表個體組織特異性的抗原。主要的免疫分子根據(jù)人體MHC抗原的分布、結構和功能分為MHC-I參與肽介導的對靶細胞裂解殺傷作用MHC-II具有與輔助性T細胞結合以及抗原信號傳遞的限制性MHC-III3類。

③白細胞分化抗原（CD）：是各類白細胞表達其不同發(fā)育分化階段所特有的膜表面分子，種類極多，迄今已知道的就有近200種（分別標以CD1，CD2,…）。功能：是參與活化、介導細胞遷移等多種功能。

④粘附分子（AM）：是廣泛分布于免疫細胞和非免疫細胞表面，介導細胞間、細胞與基質間相互接觸和結合的分子。功能：具有參與活化信號轉導、細胞遷移或炎癥反應等。⑤抗體⑥補體⑦細胞因子機體的免疫細胞和非免疫細胞能合成和分泌小分子的多肽類因子，它們能調(diào)節(jié)多種細胞生理功能，稱為細胞因子。細胞因子包括淋巴細胞產(chǎn)生的淋巴因子和單核巨噬細胞產(chǎn)生的單核因子等。目前已知白細胞介素（IL）、干擾素（IFN）、集落刺激因子（CSF）、腫瘤壞死因子（TNF）、轉化生長因子（TGF-β）等均是免疫細胞產(chǎn)生的細胞因子，它們在免疫系統(tǒng)中起著非常重要的調(diào)控作用，在異常情況下也會導致病理反應。

⑧抗原淋巴因子和單核因子1．基本概念A抗原:是一類能誘導機體發(fā)生免疫應答并能與相應抗體或T淋巴細胞受體發(fā)生特異性免疫反應的大分子物質。抗原又稱免疫原?？乖瑫r具備兩個特性：①免疫原性，又稱抗原性，指能刺激機體產(chǎn)生免疫應答能力的特性；②免疫反應性，或稱反應原性，指能與免疫應答的產(chǎn)物發(fā)生特異反應的特性。

（一）抗原（Ag)B完全抗原:凡同時具有免疫原性和免疫反應性的抗原，就是完全抗原，包括大多數(shù)常見的抗原，例如多數(shù)蛋白質、細菌細胞、細菌外毒素、病毒體和動物血清等；c半抗原:凡缺乏免疫原性而有免疫反應性的物質，稱為或不完全抗原.

(1)相對分子質量大大分子是抗原的首要條件，要求:相對分子質量>1.0X104，具免疫原性<4.0x103者，不具免疫原性。這一范圍內(nèi)，一般免疫原性還與相對分子質量成正比。(2)結構復雜一般來說分子結構和空間構象愈復雜則免疫原性越強。蛋白質＞復雜多糖＞核酸2.免疫原性的物質基礎(3)異物性指某抗原的理化性質與其所刺激的機體的自身物質理化性質間的差異程度。要求:抗原都必須是異種或至少是異體的物質。種屬關系越遠，其組織結構間的差異越大，則免疫原性越強。異物性的幾種情況:a、非動物抗原（如葉綠素、微生物）b、異種動物抗原（如鴨源蛋白對兔）c、同種異種抗原（同種動物異體間）d、自身抗原（1）定義:

指位于抗原表面可決定抗原特異性的特定化學基團，又稱抗原表位?？乖瓫Q定簇決定抗原的特異性，即決定著抗原與抗體發(fā)生特異結合的能力。（2）抗原的抗原價：抗原分子的抗原決定簇的數(shù)目。不同抗原決定簇，產(chǎn)生不同種相應的特異性。

3．抗原決定簇抗原決定簇(2)簡單半抗原或稱阻抑半抗原它既無免疫原性也無免疫反應性，但能與抗體發(fā)生不可見的結合，其結果可阻止抗體再與相應的完全抗原或復合半抗原相結合的可見反應，例如S．Pneumoniae莢膜多糖的水解產(chǎn)物、抗菌素、酒石酸、苯甲酸等。4.兩類半抗原

(1)復合半抗原無免疫原性但具免疫反應性，能在試管中與相應抗體發(fā)生特異性結合并產(chǎn)生可見反應。例如細菌的莢膜多糖、二硝基氯苯（DNCB）等。半抗原與抗體結合(1)表面抗原指包圍在細菌細胞壁外層的抗原，主要是莢膜（K抗原）或微莢膜抗原(2)菌體抗原（O抗原）指存在于細胞壁、細胞膜與細胞質上的抗原。(3)鞭毛抗原（H抗原）指存在于鞭毛上的抗原，即鞭毛蛋白抗原，又稱H抗原(4）菌毛抗原由細菌細胞表面的菌毛蛋白所形成的抗原。5．細菌的抗原細菌的外毒素成分為糖蛋白，一般都是抗原性很強的蛋白質。如：破傷風毒素、肉毒素。類毒素則是外毒素經(jīng)甲醛脫毒后對動物無毒、但仍保留強免疫原性的蛋白質。類毒素可免疫宿主動物以制取相應的抗體（俗稱抗毒素），用以治療細菌中毒癥，例如白喉抗毒素和破傷風抗毒素等。

(5）外毒素和類毒素共同抗原:在一個同時存在有多種抗原的復雜抗原系統(tǒng)，例如細菌細胞中，只有該系統(tǒng)自身特有的抗原，稱特異性抗原；而為多種復雜抗原系統(tǒng)所共有的抗原，則稱共同抗原（又稱類屬抗原或交叉反應抗原）。交叉反應:這類由于甲、乙兩菌存在共同抗原而引起甲菌抗原（或抗體）與乙菌的抗體（或抗原）間發(fā)生較弱的免疫反應的現(xiàn)象，稱為交叉反應。6.共同抗原與交叉反應1．概述抗體（Ab)是高等動物體在抗原物質的刺激下，由漿細胞產(chǎn)生的一類能與相應抗原在體內(nèi)外發(fā)生特異結合的免疫球蛋白?？贵w的特點：①僅由魚類以上脊椎動物的漿細胞所產(chǎn)生；②必須有相應抗原物質刺激免疫細胞后才能產(chǎn)生；③能與相應的抗原發(fā)生特異性、非共價和可逆的結合；④其化學本質是一類具有體液免疫功能的球蛋白；⑤因抗體是蛋白質，故既具抗體功能也可作抗原去刺激異種生物產(chǎn)生相應的抗體，這就是抗抗體.(二）抗體

凡具有抗體活性以及與抗體有關的各種球蛋白．，統(tǒng)稱為免疫球蛋白（Ig），因此，免疫球蛋白幾乎是抗體的同義詞。按化學結構和抗原性的差異純化后的Ig已分為5類IgIgG,IgAIgMIgDIgEH鏈:近對稱軸的一對較長的肽鏈，稱為重鏈或H鏈L鏈:外側一對較短的肽鏈，稱為輕鏈或L鏈V區(qū):占重鏈1/4或輕鏈1/2長度的一段區(qū)域，稱可變區(qū)"或V區(qū)C區(qū):占重鏈3/4或輕鏈1／2長度的一段區(qū)域，則稱恒定區(qū)或C區(qū)2．Ig的化學結構

Ig的類別根據(jù)重鏈的血清學類型、相對分子質量大?。▉喕鶖?shù)）和糖含量的不同，可把抗體分成數(shù)類，人的抗體就可分成IgG,IgA,IgM、IgD和IgE5類。這是因為，它們重鏈的血清學類型可分別分為γ、α、μ、δ和ε5種類型。Ig的亞類按其重鏈構造上的變化又可分為多個亞類，人類的IgG就可分為IgGl,IgG2,IgG3和IgG4這4個亞類，它們間除了重鏈間的免疫原性有所不同（分別為Y，、72,73和74）外，其重鏈間的二硫鍵數(shù)目和位置也各不相同（見后）。IgA和IgM的重鏈也至少存在兩個亞類。（1）Ig的類別和亞類型別Ig的型別是按其輕鏈的血清學類型來區(qū)分的,5類Ig只有λ和κ兩種型別。亞型：再按輕鏈可變區(qū)氨基酸序列差異的不同，還可把上述兩型別進一步劃分為數(shù)個亞型。(2)Ig的型別和亞型

不同的Ig及其亞類所含的氨基酸殘基數(shù)是有差別的。輕鏈的氨基酸殘基數(shù)在220個左右重鏈則是輕鏈的加倍，約440個左右(3)Ig肽鏈的氨基酸數(shù)(4)IgG的酶解和化學分解片段

通過Pap水解IgGI可產(chǎn)生兩個相同的抗原結合片段（Fab）和一個可結晶片段（Fc）。①木瓜蛋白酶的酶解片段：

Pep可將IgG1水解成大小不同的兩個片段。大片段是由兩個二硫鍵連接的Fab雙體，故稱F(ab‘)：，它具有Fab的功能，但卻是兩個抗原結合價，且肽鍵稍長。小片段是與Fc相似但分子長度略短的重鏈片段②胃蛋白酶（Pep）的酶解片段當IgG1在pH2.5的酸性條件下用疏基乙醇處理后，可使兩條重鏈間的二硫鍵還原，于是IgGI就分解成兩個對稱的半分子。若進一步再加尿素或氯酸肌等處理，則此半分子又可進一步分解為一重鏈和一輕鏈，同時也就喪失了與抗原結合的能力。③琉基試劑的分解產(chǎn)物：

不同的IgG亞類是不同的。鏈內(nèi)二硫鍵:12～16個（每條輕鏈上有2～3個,重鏈上有4～5個）鏈間二硫鍵:2～11個（IgGI＝2,IgG2＝4,IgG3＝11,IgG4＝4）。(5)Ig的二硫鍵數(shù)有單體、雙體和五體等。①單體：由一個“Y”形分子組成的Ig,稱為單體，例如IgG,IgD和IgE等。②雙體：由兩個"Y"形分子組成的Ig,稱為雙體。(6)Ig的體由5個“丫’形分子分合成的星狀Ig,稱為五體或五分體③五體：

抗原結合價:指每個Ig分子上能與抗原決定簇相結合部位的數(shù)目。(7）Ig的抗原結合價

組成：由一條輕鏈的V區(qū)和一條重鏈的V區(qū)合在一起可組成一個抗原結合價。這可比作一付鉗子只有當兩個夾口同時存在時才能牢牢夾住一個物件那樣。在電子顯微鏡下,游離的Ig分子不能產(chǎn)生清晰的圖像,只有當它與2價的半抗原交聯(lián)成不大的復合物時才能產(chǎn)生清晰的圖像.（9）5類Ig的構象3.5類免疫球蛋白的結構和功能胸腺依賴型抗體的產(chǎn)生的過程：①巨噬細胞（MΦ）的抗原遞呈作用MΦ雖無特異識別抗原的功能，卻能有效地攝取、處理、遞呈抗原和激活T細胞；4.產(chǎn)抗體細胞的激活和抗體的形成②T細胞對B細胞的激活在抗體形成過程中能特異地識別抗原，輔助B細胞，促使B細胞活化和進一步分化成漿細胞以產(chǎn)生抗體；③漿細胞產(chǎn)生抗體B細胞是產(chǎn)生抗體的效應細胞，也有特異識別抗原的功能。機體產(chǎn)生抗體的規(guī)律:即存在初次免疫應答和再次免疫應答兩個階段。特點:5．機體產(chǎn)抗體的兩次應答規(guī)律(1)抗體形成的克隆選擇學說①對抗體產(chǎn)生多樣性的解釋高等動物體內(nèi)天生存在著大量具有不同抗原受體的免疫細胞克隆,每個克隆產(chǎn)生特異抗體的能力不同。②抗原的作用類似“扳機”的的起動作用.某一特定抗原一旦進人機體，選出相應的細胞克?、郛斏锾幱谂咛テ跁r，其免疫系統(tǒng)的發(fā)育還不完善，某一淋巴細胞克隆若接觸相應抗原，則它就被消除或受抑制，形成免疫耐受。④禁忌克隆（天然免疫耐受）可復活或發(fā)生突變，從而又可成為能與自身抗原成分起免疫應答的克隆。6.抗體形成的機制克隆選擇學說圖示體細胞突變學說

①編碼L鏈V區(qū)的基因是由VL序列和J序列組成，編碼L鏈C區(qū)的基因稱C序列。

②編碼H鏈V區(qū)的基因除VH和J序列外，在它們之間還存在一個D區(qū),H鏈的C區(qū)則由CH序列所編碼。

③在胚胎期的細胞中，編碼L鏈V區(qū)的V和J基因間分得很遠，而在成體的B細胞中,V和J可連在一起，但它們與CL序列間仍被內(nèi)含子隔開。只有當整個DNA被轉錄成mRNA后，內(nèi)含子才被切除。H鏈基因的組裝方式與L鏈相似。

④V序列有數(shù)百種不同類型J,D和C基因也有多種，因此,L鏈V-J基因間的組合或H鏈V-D-J基因間的組合是極其多樣的。

⑤V除與J發(fā)生連接外，偶爾亦可與另一種V發(fā)生誤接，從而又增加了抗體蛋白的多樣性。(2）抗體多樣性的分子生物學機制

(1)單克隆抗體（McAb)的定義指由一純系B淋巴細胞克隆經(jīng)分化、增殖后的漿細胞所產(chǎn)生的單一成分、單一特異性的免疫球蛋白分子。(2)淋巴細胞雜交瘤技術淋巴細胞雜交瘤簡稱雜交瘤，是由B淋巴細胞和骨髓瘤細胞兩者融合而成的一種既能在體內(nèi)外大量增殖，又能產(chǎn)生大量McAb的雜種細胞。7.單克隆抗體與淋巴細胞雜交瘤技術

①選擇親本細胞株：第一種親本細胞—骨髓瘤細胞必須事前選用HGPRT酶（次黃嘌呤一鳥嘌呤磷酸核糖基轉移酶）缺陷型細胞或TK酶（胸苷激酶）缺陷型細胞;第二種親本細胞—B淋巴細胞是用SRBC先免疫小白鼠，待其在脾臟內(nèi)形成激活的B淋巴細胞后，再取出脾臟，制成B細胞懸液。

②混合雙親細胞：將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞以2:1至10:1的比例混合。

③促進細胞融合：

融合劑為仙臺病毒（HVJ)或多用PEG。

④淘汰未融合的親本（HAT選擇性培養(yǎng)基）

⑤雜交瘤的擴大培養(yǎng)：優(yōu)良淋巴細胞雜交瘤細胞株可通過注射到動物體內(nèi)增殖，也可在組織培養(yǎng)瓶或新型的細胞培養(yǎng)瓶進行擴大培養(yǎng)。

⑥單克隆抗體的改造

淋巴細胞雜交瘤的制備方法

淋巴細胞雜交瘤制備方法和McAb的方法①McAb在基礎研究中的應用

AMcAb為深入研究Ig的一級結構和高級結構提供了理想的實驗材料B制成熒光抗體探針，借以對生物大分子進行精確定位②在實踐中的應用用于精確地診斷疾病或提供抗病毒病等的高效治療劑；用McAb制成的固相親和層析系統(tǒng)可用以提純相應的抗原；用McAb制備“藥物導彈”則可用作治療腫瘤等的靶向藥物

(3)單克隆抗體的應用第四節(jié)免疫學方法及其應用

(1)特異性抗原決定簇和抗體分子V區(qū)間的各種分子引力是它們間特異性的物質基礎。這種高度特異性是各種血清學反應及其應用的理論依據(jù)。(2)可逆性抗原抗體間的結合僅是一種物理結合，故在一定條件下是可逆的。

一、抗原、抗體反應的一般規(guī)律

(3）定比性

(4)階段性抗原與抗體的反應一般有兩個明顯的階段，第一階段的特點是時間短（一般僅數(shù)秒），不可見；第二階段的時間長（從數(shù)分鐘至數(shù)小時或數(shù)天），可見。第二階段的出現(xiàn)受多種因子影響，(5)條件依賴性最佳條件一般為pH=6～8,溫度為37～45℃,適當振蕩，以及用生理鹽水作電解質等。二、抗原、抗體間的主要反應（一）凝集反應1定義顆粒性抗原（完整的細菌細胞或血細胞等）與相應的抗體在合適的條件下反應并出現(xiàn)肉眼可見的凝集團現(xiàn)象，稱凝集反應或直接凝集反應。2.方法①直接法，包括玻片法和試管法等②間接法，典型的間接凝集試驗又稱被動凝集反應（一）凝集反應

定義:可溶性抗原與其相應的抗體在合適條件下反應，并出現(xiàn)肉眼可見的沉淀物現(xiàn)象，稱為沉淀反應。1．測沉淀反應的經(jīng)典方法（1）環(huán)狀沉淀反應又稱環(huán)狀試驗態(tài)參數(shù)，是一種試管法。如炭疽病檢驗的Ascoli氏試驗(2)絮狀沉淀反應又稱絮狀反應。把抗原與相應抗體在試管內(nèi)或凹玻片上混勻，經(jīng)一段時間后，凡出現(xiàn)肉眼可見的絮狀沉淀顆粒者，即為陽性反應。例如診斷梅毒的康氏試驗和測定抗毒素的絮狀沉淀單位等都用本法。（二）沉淀反應(1)單向瓊糖擴散法(又稱單向免疫擴散法）。將抗原溶液滴加在混有抗體的瓊脂介質小孔中，抗原經(jīng)擴散后，可在小孔周圍適當位置形成一沉淀環(huán)，根據(jù)環(huán)的面積可進行抗原的定量測定。(2)雙向瓊脂擴散法又稱Ouchterlony法或雙向免疫擴散法。將抗原、抗體分別滴加在瓊脂介質的不同小孔中，作相對方向擴散，在兩孔間合適的部位會形成沉淀線。主要方法

原理讓抗原與抗體在半固體凝膠介質中作相對方向的自由擴散或在電場中進行電泳，由于反應物的分子大小、形狀和電荷的不同，導致兩者的擴散或泳動速度的差異，于是會在合適的比例處形成特異的沉淀帶。優(yōu)點靈敏度高、分辨力強等。

2.測沉淀反應的現(xiàn)代方法

是一種將雙向瓊脂擴散法與電泳技術相結合的方法。原理是：抗原與抗體分別置于凝膠板電場負、正極附近的小孔中，通電后，抗原向正極移動，而抗體則向負極移動，結果在兩孔間合適的抗原、抗體濃度處會形成一條沉淀線。此法具有速度快、靈敏度較高等優(yōu)點，應用:乙型肝炎表面抗原(HBsAg）和甲種胎兒蛋白（AFP或aFP)等的檢測。(3）對流免疫電泳法（CIE）

是一種單向瓊脂擴散法與電泳技術相結合的方法。方法:在已混有抗體的凝膠板上挖一小孔，向孔內(nèi)滴加抗原并進行電泳，結果會沿著電泳方向形成火箭形沉淀線。沉淀線的高度與抗原量成正比，可用于AFP等定量測定。

(4）火箭電泳法是一種將火箭電泳與血清免疫電泳相結合的方法。先將血清用電泳分離出各成分，然后切下凝膠板轉移至另一已加有抗血清的凝膠上，進人垂直方向的第二次電泳，形成呈連續(xù)火箭樣的沉淀線(5）雙向免疫電泳法。補體結合試驗是一種有補體參與，并以綿羊紅細胞和溶血素（紅細胞的特異抗體）是否發(fā)生溶血反應作指示的一種高靈敏度的抗原與抗體結合反應。其中共有2個系統(tǒng)和5種成分參與反應：

（三）補體結合試驗（CFT)

基本原理：①補體可與任何抗原和抗體的復合物相結合；②指示系統(tǒng)如遇還未被抗原和抗體復合物所結合的游離補體，就會出現(xiàn)肉眼易見的溶血反應。原理和基本操作中和試驗:由特異性抗體抑制相應抗原的生物學活性的反應.稱為中和試驗.抗原生物學活性:外毒素的毒性酶的催化活性病毒的感染性.（四）中和試驗（一）免疫熒光技術免疫熒光技術又稱熒光抗體法(FAT)，一種將結合有熒光素的熒光抗體與抗原進行反應，借以提高免疫反應靈敏度和適合顯微鏡觀察的免疫標記技術。常用的熒光素有異硫抓酸熒光素(FTTC)、羅丹明等.三、免疫標記技術免疫酶技術又稱酶免疫測定法。一種利用酶作標記的抗體或抗抗體以進行抗原、抗體反應的高靈敏度的免疫標記技術。原理:用酶作標記抗體，以及用酶的特殊底物處理標本來顯示酶標記的抗體。由于酶的催化作用，使原來無色的底物通過水解、氧化或還原反應而顯示出顏色。常用酶:HRP底物:DAB（二）免疫酶技術標記酶應具備：①純度高、特異性強、穩(wěn)定性和溶解度好；②測定方法簡單、敏感、快速；③與底物作用后會呈現(xiàn)顏色；④與抗體交聯(lián)后仍保持酶活性。

簡稱酶標法。被廣泛用于檢測各種抗原或抗體。（1）雙抗體夾心法（sandwichELISA）這是一種測定待測標本中是否含抗原的方法，步驟為：①將含已知抗體的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔內(nèi)，洗滌一次；②加待測抗原，如兩者是特異的，則發(fā)生結合，然后把多余抗體洗除；③加人與待測抗原呈特異的酶聯(lián)抗體（或稱第二抗體），使形成“夾心”；④加入該酶的底物后，若見到有色酶解產(chǎn)物（黑圓點）產(chǎn)生，則說明在孔壁上存在相應的抗原。

1．酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA)

一種檢測血清中是否含特定抗體的方法，步驟為：①將已知抗原吸附在微量滴定板的小孔內(nèi)，用緩沖液洗滌3次；②加待檢抗血清，如其中含特異抗體，則與抗原發(fā)生特異結合，隨即用緩沖液洗滌3次，洗去多余抗體；③加人酶聯(lián)抗抗體（抗人下球蛋白抗體），使它與已吸附的抗原和抗體的復合物相結合，再洗3次，以除去