第10章 表觀遺傳學(xué)

第三篇表觀遺傳學(xué)

第10章表觀遺傳學(xué)1基因組含有兩類遺傳信息一類是傳統(tǒng)意義上的遺傳信息，即DNA序列所提供的遺傳信息；另一類是表觀遺傳學(xué)信息，它提供了何時(shí)、何地、以何種方式去應(yīng)用遺傳信息的指令。2雙胞胎男孩一樣愛零食

通常到了老年，雙胞胎相似性會(huì)減弱

3雙胞胎擁有同一套遺傳物質(zhì),本來應(yīng)該長得一模一樣的,而且在小的時(shí)候雙胞胎的確讓人難以區(qū)分,但是長大后很多就會(huì)明顯長得不一樣了。西班牙國家癌癥中心的FragaMF等通過對(duì)160名3～74歲的雙胞胎進(jìn)行分析,結(jié)果表明,在外界影響下基因組在表達(dá)水平上的不同導(dǎo)致了雙胞胎分道揚(yáng)鑣。其主要原因是DNA的甲基化和組蛋白的乙?；饔米尰虻谋磉_(dá)增強(qiáng)或者減弱。在小的時(shí)候雙胞胎基因的表達(dá)形式幾乎是一樣的,但是年齡在28歲以上的雙胞胎基因表達(dá)特征就會(huì)出現(xiàn)明顯的不同。雖然這些修飾作用可能只是改變了一點(diǎn)點(diǎn),但是造成的影響,特別是在疾病方面是十分明顯的。。4

在相應(yīng)的基因堿基序列沒有發(fā)生變化的情況下，一些生物體的表型卻發(fā)生了改變；有些特征只是由一個(gè)親本的基因來決定，而源自另一親本的基因卻保持“沉默”。對(duì)于這樣一些現(xiàn)象無法用經(jīng)典的遺傳學(xué)理論去加以闡明。5什么是表觀遺傳學(xué)表觀遺傳變異(epigeneticvariation)：在基因的DNA序列沒有發(fā)生改變的情況下,基因功能發(fā)生了可遺傳的變化,并最終導(dǎo)致了表型的變化。它是不符合孟德爾遺傳規(guī)律的核內(nèi)遺傳。表觀遺傳學(xué)（Epigenetics）是研究表觀遺傳變異的遺傳學(xué)分支學(xué)科。表觀遺傳學(xué)研究沒有DNA序列變化的、可遺傳的基因表達(dá)改變。6表觀遺傳變異(epigeneticvariation):可以通過有絲分裂或減數(shù)分裂而傳遞的基因功能的變化，這種變化不涉及基因的DNA序列的改變。已發(fā)現(xiàn)的表觀遺傳變異有甲基化(methylation)、乙酰化(acelylation)等DNA和蛋白質(zhì)的修飾，基因組印記(genomicimprinting)，RNA編輯(RNAediting)，RNA干擾(RNAinterference，RNAi)等。這類變異的遺傳方式不符合孟德爾遺傳規(guī)律。7表觀遺傳學(xué)是沃丁頓(WaddingtonCH)于1942年(Endeavour，1：18)提出的。分化產(chǎn)生各種類型的細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的整套基因始終是保持恒定的，差別只在于不同類型的細(xì)胞內(nèi)的基因處在不同的工作狀態(tài)。所以說，沃丁頓最初是用表觀遺傳來闡述基因表達(dá)同分化發(fā)育之間的關(guān)系。81987年霍利德(HollidayR)指出可以在兩個(gè)層面上研究高等生物的基因的屬性。1.基因在世代間傳遞的規(guī)律——遺傳學(xué)。2.生物從受精卵到成體的發(fā)育過程中基因活性變化的模式——表觀遺傳學(xué)。1994年，霍利德對(duì)表觀遺傳學(xué)的內(nèi)涵又作了補(bǔ)充和修正：表觀遺傳學(xué)研究的是從上代向下代傳遞的信息，而不是DNA序列本身，這是一種不以DNA序列的差別為基礎(chǔ)的細(xì)胞核遺傳。9表觀遺傳變異的方式主要有兩種：1.DNA或蛋白質(zhì)的修飾；2.在DNA和RNA層面上識(shí)別同源的核苷酸序列，從而調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄和mRNA的翻譯。10一、DNA甲基化

甲基化是基因組DNA的一種主要表觀遺傳修飾形式,是調(diào)節(jié)基因組功能的重要手段。SAM：S-腺苷甲硫氨酸11DNA甲基化(methylation)是指在甲基化酶(methylase)的作用下，將一個(gè)甲基(methyl)添加在DNA分子中的堿基上，最常見的是加在胞嘧啶上，形成5-甲基胞嘧啶，用mC來表示。在大腸桿菌E.coli的研究中發(fā)現(xiàn)，含5-甲基胞嘧啶的位置通常成為自發(fā)點(diǎn)突變的熱點(diǎn)，出現(xiàn)C·C轉(zhuǎn)換為A·T的突變。這是因?yàn)?-甲基胞嘧啶會(huì)以相當(dāng)高的頻率自發(fā)產(chǎn)生脫氨作用，用酮基來取代氨基，從而使5-甲基胞嘧啶轉(zhuǎn)換成胸腺嘧啶。12DNA甲基化與基因轉(zhuǎn)錄活性密切相關(guān)。高度甲基化的基因，如女性兩條X染色體中的一條X染色體上的基因，處于失活狀態(tài)。為細(xì)胞存活所需而一直處于活性轉(zhuǎn)錄狀態(tài)的持家基因(house-keepinggene)則始終保持低水平的甲基化。在生物發(fā)育的某一階段或細(xì)胞分化的某種狀態(tài)下，原先處于甲基化狀態(tài)的基因，也可以被誘導(dǎo)去除甲基化(demethylation)而出現(xiàn)轉(zhuǎn)錄活性。13CpG島(CpGisland)CpG常成簇存在，人們將基因組中富含CpG的一段DNA稱為CpG島(CpGisland)，通常長度在1kb～2kb左右。哺乳動(dòng)物基因組中CpG島總居基因起始點(diǎn)附近，故常作為分離基因的一個(gè)標(biāo)志,14在一般哺乳動(dòng)物基因組中，5％的胞嘧啶是甲基化成為mCpG，而且在DNA的兩條單鏈上對(duì)稱出現(xiàn)。mCpG占全部CpG的70％，許多脊椎動(dòng)物基因的轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)附近有高度密集的CpG序列，由于這種重復(fù)序列可用限制性內(nèi)切酶HpaⅡ切成許多個(gè)DNA小片段，所以又把這種CpG重復(fù)序列稱為HTF島(HpaⅡtinyfragments-islands，HpaⅡ小片段島)。mCpG與基因轉(zhuǎn)錄活性的關(guān)系十分密切。15體內(nèi)甲基化狀態(tài)有三種持續(xù)的低甲基化狀態(tài)誘導(dǎo)的去甲基化狀態(tài)高度甲基化狀態(tài)16持續(xù)的低甲基化狀態(tài)如持家基因(house-keepinggenes)，又稱管家基因，是指所有細(xì)胞中均要表達(dá)的一類基因，其產(chǎn)物是對(duì)維持細(xì)胞基本生命活動(dòng)所必需的。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因與核糖體蛋白基因等。17誘導(dǎo)的去甲基化狀態(tài)如發(fā)育階段中的一些基因，在生物發(fā)育的某一階段或細(xì)胞分化的某種狀態(tài)下，原處于甲基化狀態(tài)的基因，也可被誘導(dǎo)去除甲基化(demethylation)而表現(xiàn)出轉(zhuǎn)錄活性。18高度甲基化狀態(tài)如女性的一條縊縮的X染色體19高度甲基化抑制轉(zhuǎn)錄的可能原因(1)甲基化加強(qiáng)了阻遏蛋白或降低了激活蛋白與DNA的結(jié)合；(2)甲基伸入DNA空間結(jié)構(gòu)的大溝，影響了DNA與結(jié)合蛋白的作用；(3)甲基化改變了DNA各構(gòu)象間的平衡，如B-DNA轉(zhuǎn)變成Z-DNA，從而影響了DNA專一序列與相應(yīng)蛋白的結(jié)合；(4)將轉(zhuǎn)錄因子識(shí)別的DNA序列，轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)錄抑制物的結(jié)合位點(diǎn)。20DNA甲基化相關(guān)酶重新甲基化酶維持甲基化酶去甲基化酶2122二、X染色體失活

在雌性哺乳動(dòng)物中，兩條X染色體有一條是失活的,稱為X染色體的劑量補(bǔ)償(dosagecompensation)。23巴氏小體（barrbody）箭頭示巴氏小體24在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)如有兩個(gè)X染色體（通常為雌性），則其中的一個(gè)染色體常表現(xiàn)為異染色質(zhì)，形成巴氏小體（barrbody），又稱X小體。人的胚胎發(fā)育到16天以后，一條X染色體轉(zhuǎn)變?yōu)榘褪闲◇w，呈塊狀緊靠核膜，染色反應(yīng)表現(xiàn)為深染。因此通過檢查羊水中胚胎細(xì)胞的巴氏小體可預(yù)測胎兒的性別。25X染色體失活的機(jī)制

X染色體失活被X失活中心(X-inactivationcenter，Xic)所控制，是一種反義轉(zhuǎn)錄調(diào)控模式。這個(gè)失活中心存在著X染色體失活特異性轉(zhuǎn)錄基因Xist(X-inactive-specifictranscript)，當(dāng)失活的命令下達(dá)時(shí)，這個(gè)基因就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)17kb不翻譯的RNA包裹在合成它的X染色體上，引發(fā)X染色體失活。X失活中心還有“記數(shù)”的功能，即保持每個(gè)二倍體中僅有一條X染色體有活性，其余全部失活，但機(jī)制不明。X染色體的失活狀態(tài)需要表觀遺傳修飾如DNA甲基化來維持。這種失活可以通過有絲或減數(shù)分裂遺傳給后代。26X染色體失活的機(jī)制27X染色體失活是隨機(jī)的28美國賓夕法尼亞州立大學(xué)醫(yī)學(xué)院的CarrelL博士和美國杜克大學(xué)的WillardHF教授提出，其實(shí)失活X染色體上的所有X連鎖基因都有可能保持活性。他們的研究表明2條X染色體中的1條并沒有被完全失活,其中25%的基因還是有活性的，能夠編碼蛋白質(zhì)。

29性連鎖無汗腺外胚層發(fā)育異?；蛟?代女性中出現(xiàn)體細(xì)胞嵌鑲現(xiàn)象。受累者缺乏汗腺。體表無汗腺區(qū)域用藍(lán)色表示

30三色貓（玳瑁貓）

31三、基因組印記孟德爾遺傳規(guī)律認(rèn)為遺傳物質(zhì)不論來自雙親中的哪一方，都具有相同的表型效應(yīng)，等位基因不會(huì)因?yàn)槲挥诓煌H代來源的染色體上而產(chǎn)生不同的效應(yīng)。20世紀(jì)50年代末，發(fā)現(xiàn)果蠅的白眼基因座的一些等位基因在子代中有不同的表達(dá)，這取決于該等位基因來自父方還是母方。32由于源自某一親本的等位基因或它所在染色體發(fā)生了表觀遺傳修飾,導(dǎo)致不同親本來源的兩個(gè)等位基因在子代細(xì)胞中表達(dá)不同，這類現(xiàn)象稱為基因組印記(genomicimprinting)。功能受雙親基因組的影響而被打上親本標(biāo)記的基因,叫印記基因(imprintedgene)。33

基因組印記決定的性狀遺傳不遵循孟德爾定律，而表現(xiàn)為單親依賴性遺傳，似能作為等位基因親源的可識(shí)別標(biāo)志。這突破了孟德爾遺傳學(xué)的兩個(gè)基本假設(shè)：(1)等位基因的等價(jià)性；(2)等位基因的功能同質(zhì)性。34Prader-Willi綜合征(癥狀是肥胖，手、腳都很小，性腺發(fā)育不良，智力低下)患者帶有缺失突變的15號(hào)染色體(15q11)是來自父親的；如果同樣是帶有缺失突變的15號(hào)染色體是來自母親的，則出現(xiàn)Angelman綜合征(又稱“happypuppet”綜合征。這種患者的面容特殊，大嘴傻笑，紅面頰，步態(tài)不穩(wěn)，癲癇，智力低下)。

35有些Prader-Willi綜合征患者的15號(hào)染色體并沒有缺失突變，只是這些患者的兩條15號(hào)染色體都是來自母親。這種現(xiàn)象稱為單親二體性(uniparentaldisomy)。同樣，一些Angelman綜合征患者的染色體也都是正常的，只不過他們的兩條15號(hào)染色體都是來自父親。所以，出現(xiàn)這些綜合征的癥狀，并非是染色體的缺失突變，而是缺少了父方或母方的15號(hào)染色體上的那個(gè)區(qū)段。這說明，15q11這一區(qū)段的功能，來自父方和母方的染色體是不能彼此替代的。36印記失活(imprintingoff):打上基因組印記的基因如處于失活狀態(tài).基因組印記過程是從配子形成時(shí)開始的。一個(gè)個(gè)體表現(xiàn)出上代遺傳下來的基因組印記的效應(yīng)，但當(dāng)該個(gè)體產(chǎn)生自身的配子時(shí)，上代的基因組印記將被消除，而打上自身的基因組印記。即種系(germline)專一的基因修飾作用是可以逆轉(zhuǎn)的。37例：有袋類動(dòng)物的X染色體通常是來自父親的那一條失活，但當(dāng)女兒將父親遺傳給她的那一條失活X染色體傳遞給她的兒子時(shí)，這條染色體又被重新激活。38盡管有些印記基因緊密連鎖，但卻表現(xiàn)出不同的印記效應(yīng)。如小鼠7號(hào)染色體遠(yuǎn)端的IGF2基因和H19基因連鎖，但I(xiàn)GF2是母親印記失活基因，H19則是父方印記失活基因。

39基因組印記控制基因表達(dá)的機(jī)制40基因組印記的模式41四、蛋白質(zhì)感染因子酵母中的遺傳效應(yīng)；包括人類在內(nèi)的哺乳動(dòng)物神經(jīng)疾病的致病因子。421.酵母朊粒的遺傳

酵母中sup35蛋白質(zhì)43[PSI+]對(duì)[psi-]的作用44[PSI+]與[psi-]的區(qū)別[PSI+]細(xì)胞中的Sup35蛋白質(zhì)成簇出現(xiàn)在分立的基因座中，而在[psi-]細(xì)胞中，該蛋白質(zhì)擴(kuò)散在胞漿內(nèi)。在體外，來自[PSI+]細(xì)胞的Sup35蛋白質(zhì)形成淀粉樣纖絲——這些纖絲是特征性地含有大量β片層結(jié)構(gòu)。影響蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的一些條件所起的作用指出了，這是蛋白質(zhì)構(gòu)象(而不是共價(jià)修飾)的參與。復(fù)性處理可使失去[PSI+]狀態(tài)。45Sup35蛋白質(zhì)表觀遺傳效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)證據(jù)46在體外把蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換成失活形式并裝入脂質(zhì)體(實(shí)際上是用人工膜包住蛋白質(zhì))，然后通過脂質(zhì)體同[psi-]酵母融合而直接進(jìn)入酵母細(xì)胞。這些酵母細(xì)胞就變成了[PSI+]。472.朊粒在哺乳動(dòng)物中引起疾病目前已發(fā)現(xiàn)的朊粒疾病羊搔癢癥（scrapie）瘋牛病(BSE)克雅氏病(CJD)庫魯（Kuru）病48朊粒疾病的機(jī)制49PrP蛋白的互作受物種的限制50PrP蛋白的互作限制表明感染需要有內(nèi)源的蛋白質(zhì)，假設(shè)是它提供了被轉(zhuǎn)換成感染因子的原料。病因并不是除掉了PrPc形式的蛋白質(zhì)，因?yàn)闆]有PrPc的小鼠能正常地存活。疾病是起因于PrPSc的功能獲得。51朊粒是表觀遺傳的一個(gè)極端例子，即感染因子是能采取多種構(gòu)象的一種蛋白質(zhì)，它的每一種構(gòu)象都有以自身為模板的屬性。這種屬性很可能涉及蛋白質(zhì)的聚集狀態(tài)。52五、位置效應(yīng)多樣性

位置效應(yīng)多樣性（positioneffectvariegation,PEV）是因靠近異染色質(zhì)而造成的基因表達(dá)沉默。53遺傳上完全相同的細(xì)胞卻有不同的表型。下圖是果蠅眼睛的位置效應(yīng)多樣性的一個(gè)例子，果蠅眼睛的有些區(qū)域沒有顏色，而另一些區(qū)域則呈紅色，因?yàn)橛行┘?xì)胞中的white基因位于異染色質(zhì)旁邊而失活，而另一些細(xì)胞中的基因仍是有活性的。

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基因離異染色質(zhì)越近，基因失活的概率越高。作用于擴(kuò)展播散過程的一個(gè)因素是該區(qū)域中的啟動(dòng)子失活；一個(gè)活性啟動(dòng)子可抑制擴(kuò)展播散。越靠近異染色質(zhì)的基因，越可能被失活。56六、組蛋白密碼

組蛋白經(jīng)共價(jià)修飾而發(fā)生乙?；⒓谆土姿峄?，從而提供一種識(shí)別的標(biāo)志,為其它蛋白與DNA的結(jié)合產(chǎn)生協(xié)同或拮抗效應(yīng)，稱為組蛋白密碼(histonecode)。57組蛋白是真核生物染色體的基本結(jié)構(gòu)蛋白，是一類小分子堿性蛋白質(zhì)，有5種類型：H1、H2A、H2B、H3、H4，它們富含帶正電荷的堿性氨基酸，能夠同DNA中帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)相互作用。58與DNA密碼不同的是，組蛋白密碼和它的解碼機(jī)制在動(dòng)物、植物和真菌類中是不同的。從植物細(xì)胞保留有發(fā)育成整個(gè)植株的全能性和去分化的特性中，就可以看出它們?cè)诮⒑捅３直碛^遺傳信息方面與動(dòng)物是不同的。在組蛋白的修飾中，乙?；?、甲基化研究最多。乙?；揎棿蠖嘣诮M蛋白H3的Lys9、14、18、23和H4的Lys5、8、12、16等位點(diǎn)。這兩種修飾既能激活基因也能使基因沉默。甲基化修飾主要在組蛋白H3和H4的賴氨酸和精氨酸兩類殘基上。在進(jìn)化過程中組蛋白甲基化和DNA甲基化兩者在機(jī)能上被聯(lián)系在一起。5960一般說，組蛋白乙?；潭雀叩膮^(qū)域內(nèi)，基因多半處于活性表達(dá)狀態(tài)。組蛋白也有甲基化修飾，如組蛋白H3和H4中的精氨酸甲基化去除，可引起基因沉默。61七、RNA干擾

RNA干擾(RNAinterference，RNAi)是真核生物中普遍存在的基因表達(dá)沉默現(xiàn)象。它可能是生物體保持自身基因組的穩(wěn)定的一種自我防御機(jī)制。它由雙鏈RNA(double-strandedRNA,dsRNA)啟動(dòng)，在多種酶的參與下,經(jīng)過多個(gè)步驟，最終將具同源序列的mRNA特異性地降解，從而關(guān)閉特定基因的表達(dá)。62RNA干擾是生物在長期的進(jìn)化過程中形成的一種適應(yīng)機(jī)制，是真核基因組抵御病毒侵染、轉(zhuǎn)座子移位和消除異常RNA損害的自我保護(hù)措施，對(duì)生物的生長發(fā)育具有重要意義。

63Fire和Mello于1998年(FireA，elal，Nature，1998，391：806-811)把unc-22基因的有意義RNA、反義RNA和二者的混合物分別導(dǎo)入了線蟲體內(nèi)。結(jié)果高濃度的有意義RNA和反義RNA都可以抑制unc-22基因的表達(dá)，但效率不高?？墒?，有意義RNA同反義RNA的混合物卻產(chǎn)生了高效的抑制作用。電泳檢驗(yàn)的結(jié)果表明這種RNA混合物中主要是雙鏈RNA，而且只有同靶基因mRNA。有同源序列的雙鏈RNA才有抑制靶基因表達(dá)的作用。64652002年，RNA干擾被Science雜志評(píng)為本年度全球十大科技成就之首；2003年美國Fortune(財(cái)富)雜志將RNA干擾與基因重組、單克隆抗體技術(shù)并稱為生物藥業(yè)三大金礦。1993年諾貝爾獎(jiǎng)獲得者PhillipASharp更稱RNA干擾是過去10年,甚至過去數(shù)十年來最重要、最令人興奮的科學(xué)突破。66RNAi的發(fā)現(xiàn)1990年,為加深矮牽?；?petunias)的紫色，Jorgensen等導(dǎo)入了一個(gè)強(qiáng)啟動(dòng)子控制的色素基因。結(jié)果許多花瓣顏色并未加深,反而呈雜色甚至白色。這是由于轉(zhuǎn)基因和同源的內(nèi)源基因的表達(dá)都被抑制了，Jorgensen把這個(gè)現(xiàn)象命名為共抑制(cosuppression)。P35S色素基因Ti質(zhì)粒＋色素基因重組轉(zhuǎn)化繁殖67RNAi的發(fā)現(xiàn)1995年,康奈爾大學(xué)的Guo和Kempheus等在以反義RNA技術(shù)研究秀麗線蟲(C.elegans)中par-1基因的功能時(shí)，意外地發(fā)現(xiàn)，給線蟲注射par-1基因的反義RNA和正義RNA都能阻斷該基因的表達(dá)，沒有出現(xiàn)反義RNA抑制而正義RNA增強(qiáng)該基因表達(dá)的預(yù)期結(jié)果。68RNAi系統(tǒng)的組成dsRNA和siRNA

19ntduplex2nt3’overhangs69RNAi系統(tǒng)的組成Dicer（DCR）Dicer屬RNaseIII家族成員，是一種ATP依賴性核酸內(nèi)切酶，能在體外切割雙鏈RNA為22nt左右的短片段RNA。70longdsRNAsiRNAs21~23ntDicercontainstwoRNAseIIIdomains71siRNA的來源1.雙鏈RNA被核酸酶切割成21-23nt(nucleotide)的小干擾RNA(siRNA)，誘導(dǎo)了靶mRNA的特異性降解。siRNA是RNAi的介導(dǎo)因子。2.內(nèi)源性siRNA。內(nèi)源性siRNA是細(xì)胞的正常成分，其前體在核內(nèi)自身折疊形成發(fā)卡RNA，被酶切成21-23nt的siRNA后釋放進(jìn)入胞漿。這些內(nèi)源性siRNA使細(xì)胞能夠抵御轉(zhuǎn)座子移位和病毒侵襲。72RNAi系統(tǒng)的組成RISCRISC是由siRNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的復(fù)合物,稱為siRNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(siRNA-inducedsilencingcomplex,RISC)。此復(fù)合物特異性地降解靶mRNA，導(dǎo)致特定基因沉默。73RNAi系統(tǒng)的組成RdRPRdRP即RNA依賴的RNA聚合酶。RdRP識(shí)別異常RNA并以其為模板合成dsRNA分子；還受siRNA反義鏈引導(dǎo)以靶mRNA為模板合成新的dsRNA，參與RNAi信號(hào)的擴(kuò)增。74CapAAAAAACapAAAAAACapAAAAAA循環(huán)RdRPDicer切割75RNAi的基本過程起始階段dsRNA(外源的或體內(nèi)產(chǎn)生的)被Dicer切割成21-23nt的siRNA；效應(yīng)階段先是siRNA誘導(dǎo)RISC形成，繼而RISC因siRNA雙鏈解開而活化，反義RNA單鏈介導(dǎo)該活化復(fù)合物識(shí)別并結(jié)合至靶mRNA，在不需ATP參與下切割靶mRNA，核酸外切酶將切割片斷徹底降解。7677RNAi的特征siRNA的特異性抑制作用siRNA都能導(dǎo)致具同源序列的靶mRNA降解，并只降解具有同源序列mRNA,其它的mRNA的表達(dá)不受影響。這種特異性取決于siRNA與靶mRNA之間的互補(bǔ)，嚴(yán)格要求有21bp的配對(duì)，即使一個(gè)堿基錯(cuò)配都可能大大降低甚至完全喪失基因沉默效果。78對(duì)dsRNA長度的依賴性果蠅、線蟲等低等生物中，長鏈dsRNA產(chǎn)生的RNAi明顯強(qiáng)于短鏈dsRNA，有效誘導(dǎo)RNAi的dsRNA長度至少應(yīng)大于40bp。79dsRNA的非特異性抑制作用在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)，長度大于30bp的dsRNA能夠廣泛關(guān)閉蛋白質(zhì)合成，表現(xiàn)為非特異性抑制。80信號(hào)放大作用和高效性少量的甚至幾個(gè)分子的