藥用植物蜘蛛香揮發(fā)油的超臨界co

藥用植物蜘蛛香揮發(fā)油的超臨界co

蜘蛛香是指屬于真菌科的不必列出的植物的蜘蛛香（valeniajatamansijna）的干燥根莖和根系。它被記錄在《中國藥典》（1977年版）中。具有鎮(zhèn)靜安神、理氣止痛、消炎止瀉、驅(qū)風除濕等功效。它是中國西南部大多數(shù)少數(shù)民族的常用藥物。其揮發(fā)油是鎮(zhèn)靜、抗腫瘤、抗菌抗病毒的主要活性成分,傳統(tǒng)提取多采用水蒸氣蒸餾法,但該法存在提取時間長、成分易破壞等缺點?，F(xiàn)在應用廣泛的超臨界CO2萃取(SFE-CO2)工藝提取揮發(fā)油具有溫度低,產(chǎn)率高等優(yōu)點,而目前尚未見用于提取蜘蛛香揮發(fā)油的報道。作者應用該法制備蜘蛛香揮發(fā)油,通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(GC-MS)分析成分并與傳統(tǒng)工藝水蒸氣蒸餾法進行比較,為合理高效地開發(fā)利用蜘蛛香提供依據(jù)。1揮發(fā)油提取器3-三醇超臨界萃取儀(北京化工集團);GCMS-QP500型氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津);揮發(fā)油提取器;無水乙醇(分析純);CO2(北京市北氧特種氣體研究所有限公司)。藥材蜘蛛香購于云南省大理市永平縣漕澗鄉(xiāng),經(jīng)北京中醫(yī)藥大學中藥學院石晉麗副教授鑒定。2方法2.1萃取器系統(tǒng)過流系統(tǒng)稱取蜘蛛香粉末1200g(40目),干燥,裝入萃取器中;水浴使萃取器溫度達到36.6℃;通入CO2,置換掉系統(tǒng)空氣打開壓縮機,調(diào)節(jié)背壓閥使萃取器內(nèi)壓力達到25MPa;調(diào)節(jié)萃取器出口閥,使CO2流量達到25kg·h-1;使解析壓力達到4.2MPa,解析溫度達到26.8℃;維持體系在此狀態(tài)2h,打開分離器取出產(chǎn)品稱重;萃取完畢后關閉壓縮機、鋼瓶,放空CO2,取出黃褐色流浸膏萃取物,計算收得率為8.85%。2.2制備成汁、提取稱取蜘蛛香粉末100g(40目),置1000mL的圓底燒瓶中,加水700mL,用水蒸氣蒸餾提取。蒸餾6h,餾出液加入NaCl至飽和,按餾出液與乙醚比為1∶1的量用乙醚萃取餾出液,乙醚層為淡黃色,靜置24h得揮發(fā)油,計算收得率為0.82%。2.3worm-ms分析條件2.3.1傳輸線溫度石英毛細管柱HP(0.2μm×0.32mm×5.30m),進樣口溫度250℃,傳輸線溫度250℃,載氣He,流速1μL·min-1,分流比10∶1。程序升溫:柱溫60℃,保持2min,以8℃·min-1的速度升至100℃,再以8℃·min-1的速度升至200℃,保持20min。2.3.2質(zhì)量分析條件EI離子源70eV,質(zhì)量范圍m/z50～650,檢索Nist譜庫。3fe-co萃取揮發(fā)油中化合物的組成各取SFE-CO2萃取物及水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油適量,用正己烷稀釋100倍。經(jīng)GC-MS分析,得到SFE-CO2萃取揮發(fā)油總離子圖(圖1)和水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油總離子圖(圖2),經(jīng)計算機檢索Nist數(shù)據(jù)庫并查閱文獻及標準圖譜,對二者的化學成分進行了鑒定及相對百分含量的測定,并按結構進行分類,見表1。從SFE-CO2萃取揮發(fā)油中鑒定出74種化合物(占總產(chǎn)物96.04%),相對含量在1%以上的有23種(占總產(chǎn)物82.14%)。其中倍半萜類44種(56.76%)、烷烴類10種(19.26%)、酸類5種(10.58%)、單萜類6種(2.23%)和其他類9種(7.21%)。含量最大的5種成分依次為1,10-二氫奴卡酮(9.76%)、異戊酸(7.94%)、1,2-二去氫香木蘭(7.66%)、廣藿香醇(5.88%)和(-)長蠕吉碼烯(5.61%)。從水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油中鑒定出59種化合物(占總產(chǎn)物98.34%),相對含量在1%以上的有5種(占總產(chǎn)物90.29%)。其中酸類4種(86.46%)、倍半萜類29種(9.3%)、單萜類12種(0.83%)、烷烴類6種(0.55%)和其他類8種(1.20%)。含量最大的5種成分依次為異戊酸(70.43%)、3-甲基戊酸(15.66%)、廣藿香醇(2.02%)、1,2-二去氫香木蘭(1.12%)、δ-愈創(chuàng)木烯(1.06%)。4有機組分的提取通過以上實驗分析,這兩種提取方法對提取的揮發(fā)油無論在成分還是其相對含量均存在一定差異。二者提取產(chǎn)物的主要組分為倍半萜類、烷烴類和酸類化合物。從總離子圖可見SFE-CO2產(chǎn)物在全程均檢測出大量物質(zhì)峰,主要為倍半萜類和烷烴類,各成分含量差異相對較小,范圍為0.10%～9.76%;水蒸氣蒸餾法產(chǎn)物主要為酸類和倍半萜類,由總離子圖可見絕大部分為異戊酸(70.43%)和3-甲基戊酸(15.66%),而以后其他成分峰則十分微小,相對含量差異懸殊,范圍為0.02%～2.02%。SFE-CO2萃取得到74個化合物而水蒸氣蒸餾得到59個化合物,其中40個化合物相同。相同化合物在2種方法所得的產(chǎn)物中分別占74.59%與95.24%,主要是一些分子量小、易揮發(fā)的化合物;不同組分在兩種方法所得的產(chǎn)物中分別占21.45%與3.10%。這種差異可能是由于處于超臨界狀態(tài)的二氧化碳具有很強的溶解能力,能將蜘蛛香中所含的各種原始組分有效提取出來;而水蒸氣蒸餾法提取時,有些相對分子質(zhì)量大、沸點高、揮發(fā)性小的化合物難于提取出來,加之溫度高、時間長、造成某些化合物的分解破壞。文獻資料顯示纈草屬揮發(fā)油由其成分多樣性而具獨特的藥理活性,如愈創(chuàng)木烷型倍半萜具有鎮(zhèn)靜等作用。蜘蛛香揮發(fā)油藥用成分主要為有機萜類物質(zhì)。蜘蛛香SFE-CO2萃取物中萜烯及其含氧衍生物含量較高,說明采用SFE-CO2法能將蜘蛛香有效組分有效提取出來。水蒸氣蒸餾法中作為無機溶劑的水對有機萜類物質(zhì)的溶解能力有限;水蒸氣溫度高容易破壞蜘蛛香有效成份中萜類氧化物的化學結構,可能導致藥理活性降低。研究結果表明,采用SFE-CO2法萃取蜘蛛香揮發(fā)油,避免了因水提取過程中濕、熱等引起揮發(fā)、氧化等物理化學變化而帶來的有效成分損失,實現(xiàn)對蜘蛛香高效提取分離過程。采用水蒸氣蒸餾時,僅有