第七章 常用分子生物學(xué)技術(shù)的原理及應(yīng)用(二)

第七章常用分子生物學(xué)技術(shù)的原理及應(yīng)用（二）Thepopulartechnologyinmolecularbiology:

principleandapplicationMolecularCloningVectorsplasmidphagecDNAgenomiclibrariescDNAlibrariesDNAligationRecombinantDNAmoleculesTransformationSelectionchromosomewalkingmolecularhybridizationDNAsequencingThepolymerasechainreaction(PCR)inversePCRreversetranscriptasePCR

QuantitativePCRasymmetricPCRRNAiMultiplexPCRSouthernBlottingDNA?ngerprintingWesternblottingNorthernblottingArbitraryprimerPCRfluorescenceinsituhybridization(FISH)GenechiporDNAchip上一章常用技術(shù)詞匯

四核酸序列分析

Nucleicacidsequenceanalysis核酸序列分析的基本原理化學(xué)裂解法(Maxam-Gillbert法)略DNA鏈的末端合成終止法(Sanger法)(Sanger雙脫氧鏈終止法)HOPOPOPOCH2OOOOHOHOHOA,C,GorT1′3′OHαβγ5′雙脫氧核苷三磷酸脫去二、DNA鏈末端合成終止法Sanger1958年和1980年兩次獲Nobel獎(jiǎng)TheNobelPrizeinChemistry1980"forhisfundamentalstudiesofthebiochemistryofnucleicacids,withparticularregardtorecombinant-DNA""fortheircontributionsconcerningthedeterminationofbasesequencesinnucleicacids"PaulBergWalterGilbertFrederickSanger1/2oftheprize1/4oftheprize1/4oftheprizeStanfordUniversityStanford,CA,USAHarvardUniversity,BiologicalLaboratoriesCambridge,MA,USAMRCLaboratoryofMolecularBiologyCambridge,UnitedKingdom

1926-1932-1918-三、DNA自動(dòng)測(cè)序用熒光替代放射性核素標(biāo)記是實(shí)現(xiàn)DNA序列分析自動(dòng)化的基礎(chǔ)。用不同熒光分子標(biāo)記4種ddNTP，然后進(jìn)行Sanger測(cè)序反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)電泳（平板電泳或毛細(xì)管電泳）分離。通過4種激光激發(fā)不同大小DNA片段上的熒光分子使之發(fā)射出4種不同波長(zhǎng)熒光，檢測(cè)器采集熒光信號(hào)，并依此確定DNA堿基的排列順序。

ABIPRISM310型DNA測(cè)序儀主要用于DNA序列分析

(包括DNA測(cè)序,衛(wèi)星序列、雜合子序列和三聯(lián)體序列分析，單鏈構(gòu)象多態(tài)分析,長(zhǎng)片段PCR分析)，遺傳疾病診斷，親子鑒定等PE3700型DNA測(cè)序儀DNA自動(dòng)測(cè)序結(jié)果舉例五、生物大分子相互作用研究技術(shù)

TheMethodofProtein-proteinandProtein-DNAInteractionStudy一、蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)酵母雙雜交各種親和分析（標(biāo)簽蛋白沉淀、免疫共沉淀等）熒光共振能量轉(zhuǎn)換效應(yīng)分析噬菌體顯示系統(tǒng)篩選常用蛋白質(zhì)相互作用的研究技術(shù)標(biāo)簽融合蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)是一個(gè)基于親和色譜原理的、分析蛋白質(zhì)體外直接相互作用的方法。（一）標(biāo)簽蛋白沉淀標(biāo)簽融合蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)主要用于證明兩種蛋白分子是否存在直接物理結(jié)合、分析兩種分子結(jié)合的具體結(jié)構(gòu)部位及篩選細(xì)胞內(nèi)與融合蛋白相結(jié)合的未知分子。標(biāo)簽融合蛋白沉淀實(shí)驗(yàn)流程示意圖（二）酵母雙雜交技術(shù)的基本原理和用途酵母雙雜交系統(tǒng)的應(yīng)用證明兩種已知基因序列的蛋白質(zhì)可以相互作用的生物信息學(xué)推測(cè)。分析已知存在相互作用的兩種蛋白質(zhì)分子的相互作用功能結(jié)構(gòu)域或關(guān)鍵的氨基酸殘基。將擬研究的蛋白質(zhì)的編碼基因與BD基因融合成為“誘餌”表達(dá)質(zhì)粒，可以篩選AD基因融合的“獵物”基因表達(dá)文庫(kù)，篩選未知的相互作用蛋白質(zhì)。電泳遷移率變動(dòng)測(cè)定(electrophoreticmobilityshiftassay，EMSA)或稱凝膠遷移變動(dòng)實(shí)驗(yàn)(gelshiftassay)最初用于研究DNA結(jié)合蛋白與相應(yīng)DNA序列間的相互作用，可用于定性和定量分析，已經(jīng)成為轉(zhuǎn)錄因子研究的經(jīng)典方法。目前這一技術(shù)也被用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定RNA序列間的相互作用。二、DNA-蛋白質(zhì)相互作用分子分析技術(shù)（一）電泳遷移率變動(dòng)測(cè)定放射自顯影未結(jié)合探針結(jié)合有蛋白的探針標(biāo)記探針1X1X1X1X核蛋白提取物1X10X10X未標(biāo)記探針10X凝膠遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖凝膠遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)(chromatinimmunoprecipitationassay,ChIP)是目前可以研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用的主要方法。（二）染色質(zhì)免疫沉淀法染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)流程及結(jié)果示意圖六、遺傳修飾動(dòng)物模型的建立及應(yīng)用Theestablishmentandapplicationofheredity-modifiedanimalmodel

轉(zhuǎn)基因技術(shù)采用基因轉(zhuǎn)移技術(shù)使目的基因整合入受精卵細(xì)胞或胚胎干細(xì)胞，然后將細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物子宮，使之發(fā)育成個(gè)體。

轉(zhuǎn)基因——被導(dǎo)入的目的基因轉(zhuǎn)基因動(dòng)物(transgenicanimal)——目的基因的受體動(dòng)物一、轉(zhuǎn)基因技術(shù)核轉(zhuǎn)移技術(shù)

即動(dòng)物整體克隆技術(shù)，將動(dòng)物體細(xì)胞核全部導(dǎo)入另一個(gè)體的去胞核的卵細(xì)胞內(nèi)，使之發(fā)育成個(gè)體，即克隆(clone)。

二、核轉(zhuǎn)移技術(shù)有目的去除動(dòng)物體內(nèi)某種基因的技術(shù),稱為基因剔除（geneknock-out）或基因靶向滅活(genetargeting)。三、基因剔除技術(shù)四、基因轉(zhuǎn)移和基因剔除技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用建立動(dòng)物模型①單基因決定疾病模型

基因剔除獲得性突變(gain-of-functionmutation)②多基因決定疾病模型七、基因組學(xué)的建立及應(yīng)用Theestablishmentandapplicationofgenome人類基因組計(jì)劃基因組分類病毒基因組原核生物基因組真核生物基因組一、病毒基因組1．每種病毒有__種核酸，成分為__；2．病毒核酸大小差別很大，通常為__bp；3．除__外，所有病毒基因都是__拷貝的。4．大部份病毒核酸是由__條雙鏈或單鏈分子構(gòu)成，僅少數(shù)RNA病毒由__個(gè)核酸片段組成．

5．真核病毒基因__內(nèi)含子，噬菌體（感染細(xì)菌的病毒）基因中__內(nèi)含子．6．__(有或沒有)重疊基因．1．通常由__DNA分子組成2．__子結(jié)構(gòu)是原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)之一3．基因密度__，編碼區(qū)比例__；重復(fù)序列__；含有同基因；GC含量變化__。4．非編碼區(qū)主要為__序列5．__(有或無)轉(zhuǎn)座現(xiàn)象。6．__DNA具有自主復(fù)制能力二、原核生物基因組一、病毒基因組1．每種病毒只有一種核酸，或者DNA，或者RNA；2．病毒核酸大小差別很大，3X103一3X106bp；3．除逆病毒外，所有病毒基因都是單拷貝的。4．大部份病毒核酸是由一條雙鏈或單鏈分子(RNA或DNA)，僅少數(shù)RNA病毒由幾個(gè)核酸片段組成．

5．真核病毒基因有內(nèi)含子，而噬菌體（感染細(xì)菌的病毒）基因中無內(nèi)含子．6．有重疊基因．1．通常由環(huán)狀雙鏈DNA分子組成2．操縱子結(jié)構(gòu)是原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)之一3．基因密度高，編碼區(qū)比例大；重復(fù)序列少；含有同基因；GC含量變化大4．非編碼區(qū)主要為調(diào)控序列5．存在轉(zhuǎn)座現(xiàn)象6．質(zhì)粒DNA具有自主復(fù)制能力二、原核生物基因組癌癥艾滋病人口增長(zhǎng)糧食短缺環(huán)境污染生命科學(xué)人類基因組計(jì)劃的緣起

人類基因組計(jì)劃的緣起人類基因組計(jì)劃的動(dòng)議過程1984年DOE委托Alta,WhiteR.,MendelsonhmM科學(xué)家舉行專業(yè)會(huì)議。1985年提出人類基因組計(jì)劃的動(dòng)議。1986年McKusickV將從整個(gè)基因組層次上研究遺傳的科學(xué)定義為基因組學(xué)。1986年DulbeccoR在“Science”上發(fā)表文章。人類基因組計(jì)劃的動(dòng)議過程1987年DOE和NIH下?lián)苎芯拷?jīng)費(fèi)。1988年成立了國(guó)家人類基因組研究中心,Watson任第一任主任。人類基因組計(jì)劃的目標(biāo)HGP（人類基因測(cè)序計(jì)劃）其目標(biāo)是通過以美國(guó)為主的全球性的國(guó)際合作，在大約15年的時(shí)間里完成人類24條染色體的基因組作圖和DNA全長(zhǎng)序列分析，進(jìn)行基因的鑒定和功能分析。建立指導(dǎo)人類進(jìn)化的“說明書”（人類遺傳信息數(shù)據(jù)庫(kù)）人類基因組計(jì)劃的發(fā)展進(jìn)程預(yù)計(jì)完成30億對(duì)堿基的測(cè)序。美國(guó)承擔(dān)了全部任務(wù)的54%，英國(guó)33%，日本7%，法國(guó)2.8%，德國(guó)2.2%。中國(guó)于1999年9月加入人類基因組計(jì)劃并承擔(dān)了1%

的測(cè)序任務(wù)。人類基因組計(jì)劃的研究策略遺傳圖譜：指基因或?qū)Ｒ坏亩鄳B(tài)性DNA標(biāo)記的相對(duì)位置的圖譜。物理圖譜：確定各測(cè)序片段連接順序及遺傳標(biāo)志間物理距離的圖譜。序列圖譜：核酸序列圖?；驁D譜：基因組中占2-5%長(zhǎng)度的全部基因按照具體位置、次序排列成的線性圖。1998年1998年，生產(chǎn)DNA測(cè)序儀的最大廠家Perkin-Elmer(簡(jiǎn)稱PE)公司與文特爾領(lǐng)導(dǎo)的基因研究所合作成立了塞萊拉（Celera）遺傳信息公司，并宣布他們將利用最新技術(shù)在3年內(nèi)完成人類基因組的測(cè)序工作，這使得該計(jì)劃處于一種公私競(jìng)爭(zhēng)的狀態(tài)，從而加快了人類基因組的研究步伐。人類基因組計(jì)劃的發(fā)展進(jìn)程2000年人類基因組工作草圖繪制成功人類基因組計(jì)劃的發(fā)展進(jìn)程2001年2月12日，美、英、日、法、德、中6國(guó)科學(xué)家指出：人類基因總數(shù)只有3~3.5萬個(gè),編碼序列占2%。2001年7月10日，中國(guó)“人類基因組計(jì)劃”重大項(xiàng)目秘書長(zhǎng)楊煥明教授宣布：在人類基因組完成圖的繪制工作中，中國(guó)已率先超額（1.13%）完成所承擔(dān)的任務(wù)。中國(guó)人類基因組計(jì)劃發(fā)展進(jìn)程1993年，中國(guó)人類基因組計(jì)劃（CHGP）啟動(dòng)，首先開展了“中華民族基因組中若干位點(diǎn)基因結(jié)構(gòu)的研究”。1997年，我國(guó)啟動(dòng)了“重大疾病相關(guān)基因的定位、克隆、結(jié)構(gòu)與功能研究”項(xiàng)目。并在上海和北京相繼成立了國(guó)家人類基因組南、北兩個(gè)中心。中國(guó)人類基因組計(jì)劃研究成果1%測(cè)序任務(wù)，第三條染色體3000萬bp精確度99.99%發(fā)現(xiàn)142個(gè)基因，其中80個(gè)為預(yù)測(cè)基因癌癥基因組學(xué)另一項(xiàng)遠(yuǎn)征計(jì)劃的提出——癌癥基因組計(jì)劃的動(dòng)議過程

（TheCancerGenomeAtlas.TCGA）2005年，一項(xiàng)為期10年、耗資15億美元的計(jì)劃誕生。50種主要癌癥的12500份腫瘤樣品中系統(tǒng)地搜尋常見的基因突變。（單核苷酸變異（SNP）、小插入和小缺失（indel）、拷貝數(shù)變化染色體結(jié)構(gòu)重排（CNV））等。EricLander癌癥基因組計(jì)劃的動(dòng)議過程

（TheCancerGenomeAtlas.TCGA）2005年12月13日,美國(guó)宣布啟動(dòng)癌癥基因組計(jì)劃這項(xiàng)為期10年的工程將幫助癌癥專家闡明驅(qū)動(dòng)每種不同腫瘤癌變的特殊變異行為。2020年前找到所有導(dǎo)致細(xì)胞癌變的基因。埃利亞斯·澤古尼癌基因組特征認(rèn)證中心中央生物樣品核心資源庫(kù)信息資料協(xié)調(diào)中心基因組測(cè)序中心中國(guó)癌基因組計(jì)劃發(fā)展進(jìn)程

呂有勇教授為CCGC秘書長(zhǎng)。初步確定選擇我國(guó)常見的高發(fā)腫瘤（食管癌、鼻咽癌、胃癌、肺癌、肝癌、結(jié)腸直腸癌、白血病等）進(jìn)行基因組分析工作，首先選擇胃癌進(jìn)行探索。進(jìn)展

卵巢癌神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤

結(jié)腸癌乳腺癌白血病

子宮癌等肺癌2.3萬個(gè)變異是患病細(xì)胞所特有的，幾乎所有變異是由60種左右的煙霧中的化學(xué)物質(zhì)造成的。黑素瘤皮膚癌3.3萬個(gè)變異是由直接暴曬陽(yáng)光造成的。新生兒快速DNA診斷(3500geneticdiseases)解碼兒童腫瘤(3yers,65million)基因組“巨變”誘導(dǎo)癌癥發(fā)生七、轉(zhuǎn)錄組學(xué)的建立及應(yīng)用Theestablishmentandapplicationoftranscriptome轉(zhuǎn)錄組學(xué)轉(zhuǎn)錄組學(xué)（transcriptomics）是在基因組學(xué)后新興的一門學(xué)科，即研究細(xì)胞在某一功能狀態(tài)下所含mRNA的類型與拷貝數(shù)。

轉(zhuǎn)錄組學(xué)實(shí)驗(yàn)方法基于雜交技術(shù)的芯片技術(shù)包括cDNA芯片和寡聚核苷酸芯片基于序列分析的基因表達(dá)系列分析SAGE

（serial

analysis

of

gene

expression，SAGE）和大規(guī)模平行信號(hào)測(cè)序系統(tǒng)MPSS(massively

parallel

signature

sequencing,MPSS)。

我們正由結(jié)構(gòu)基因組時(shí)代邁入功能基因組時(shí)代。隨著這個(gè)功能基因組學(xué)問題的提出（后基因組時(shí)代，蛋白組學(xué)），涌現(xiàn)出許多功能強(qiáng)大的研究方法和研究工具，最突出的就是細(xì)胞蛋白質(zhì)二維凝膠電泳（2-D-gel）（及相應(yīng)的質(zhì)譜法測(cè)蛋白分子量）和基因芯片（Genechip）技術(shù)生命科學(xué)正迅速地演變?yōu)橐婚T信息科學(xué)美國(guó)繼開展人類基因組計(jì)劃以后，于1998年正式啟動(dòng)基因芯片計(jì)劃。（多部門參加）多所名校（斯坦福大學(xué)、麻省理工學(xué)院、英國(guó)劍橋大學(xué)及部分國(guó)立實(shí)驗(yàn)室如ArgonneOakridge也參與了該項(xiàng)目的研究和開發(fā)。世界大型制藥公司尤其對(duì)基因芯片技術(shù)用于基因多態(tài)性、疾病相關(guān)性、基因藥物開發(fā)和合成或天然藥物篩選等領(lǐng)域感興趣，都已建立了或正在建立自己的芯片設(shè)備和技術(shù)。而主要仍以少數(shù)幾家公司為主，如Affymetrix、Brax、Hysep等。國(guó)內(nèi)目前主要如清華大學(xué)（程京）、中科院生命科學(xué)院、上海復(fù)旦大學(xué)、北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院、南京東南大學(xué)、西安等四十余家公司，而且可能還有一大批公司相繼成立?；蛐酒切畔r(shí)代的產(chǎn)物橫跨：生命科學(xué)、物理學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)、微電子技術(shù)光電技術(shù)、材料科學(xué)等現(xiàn)代高科技2.什么是基因芯片

生物芯片，將大量生物識(shí)別分子按預(yù)先設(shè)置的排列固定于一種載體（如硅片、玻片及高聚物載體等）表面，利用生物分子的特意性親和反應(yīng)，如核酸雜交反應(yīng)，抗原抗體反應(yīng)等來分子各種生物分子存在的量的一種技術(shù)?；蛐酒╣enechip），又稱DNA微陣列（microarray），是由大量DNA或寡核苷酸探針密集排列所形成的探針陣列，其工作的基本原理是通過雜交檢測(cè)信息。生物芯片包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、組織芯片。而基因芯片中，最成功的是DNA芯片，即將無數(shù)預(yù)先設(shè)計(jì)好的寡核苷酸或cDNA在芯片上做成點(diǎn)陣，與樣品中同源核酸分子雜交的芯片。

生物芯片的分類生物芯片的分類根據(jù)用途還可以把生物芯片分為兩類：信息生物芯片（information-biochip）和功能生物芯片（function-biochip）?；蛐酒褂貌襟E芯片制作把探針固定于載體表面樣品處理目標(biāo)分子富集分子間的雜交結(jié)果檢測(cè)與數(shù)據(jù)分析Measurements:images,quantitation,specifications10.基因芯片的應(yīng)用基因芯片具有巨大的應(yīng)用前景1.基因功能分析研究2.檢測(cè)與疾病相關(guān)的基因,進(jìn)而用于疾病診斷3.藥物篩選,4.檢測(cè)基因突變5.其他(環(huán)境化學(xué)毒物的篩選

\體質(zhì)醫(yī)學(xué)的研究)基因功能分析研究將成千上萬個(gè)我們克隆到的特異性靶基因固定在一塊芯片上，對(duì)來源于不同個(gè)體不同組織不同細(xì)胞周期不同發(fā)育階段不同分化階段不同病變不同刺激（包括不同誘導(dǎo)不同治療手段）下細(xì)胞內(nèi)的mRNA或逆轉(zhuǎn)錄所得的cDNA進(jìn)行檢測(cè)，從而對(duì)這些基因表達(dá)的個(gè)體特異性組織特異性發(fā)育階段特異性分化階段特異性。進(jìn)行綜合評(píng)定與判斷，極大加快這些基因功能的確立。通過相關(guān)基因進(jìn)行疾病診斷目前主要涉及：癌癥、血液病、心血管疾病、遺傳性疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、部分感染性疾病、毒物引起的損傷、免疫反應(yīng)相關(guān)性疾病等。Golubetal,Science,286(5439):531,Oct15,1999藥物篩選

在基因功能研究基礎(chǔ)上，特別是確立了與某些疾病相關(guān)基因的表達(dá)變化情況后，就可針對(duì)疾病發(fā)生機(jī)理進(jìn)行藥物篩選工作。將這些基因特異性片段固定在芯片上，研究病變組織和正常組只在某些藥物刺激下這些基因表達(dá)的變化，可快速判斷藥物作用的效果，并進(jìn)行高通量篩選（highthroughoutscreening），可使新藥開發(fā)獲得技術(shù)上的突破。幫助中醫(yī)藥走向世界研究天然藥物對(duì)人體的作用機(jī)制篩選對(duì)人體有生物效應(yīng)的單味天然藥物篩選對(duì)人體有生物效應(yīng)的有效成分篩選對(duì)人體有生物效應(yīng)的天然藥物配方中藥的研究。尤其中藥中眾多成分中有效成分的篩選、有效藥物的篩選、中藥毒理學(xué)過程均被大大簡(jiǎn)化，將推動(dòng)中藥的迅猛發(fā)展。中藥學(xué)引入基因芯片技術(shù)，將大大推動(dòng)中藥研究的國(guó)際化進(jìn)程，為闡明中藥作用機(jī)理，具有無可估量的重要意義。

蛋白質(zhì)組學(xué)蛋白質(zhì)組的研究不僅能為生命活動(dòng)規(guī)律提供物質(zhì)基礎(chǔ)，也能為眾多種疾病機(jī)理的闡明及攻克提供理論根據(jù)和解決途徑。蛋白質(zhì)組學(xué)的概念及發(fā)展進(jìn)展

蛋白質(zhì)組（proteome）：PROTEins+genOME，意思是Proteinsexpressedbyagenome（基因組表達(dá)的所有蛋白質(zhì)）。1994年由Williams和Wilkins提出，是一個(gè)動(dòng)態(tài)的概念，指的是不同細(xì)胞在不同時(shí)相表達(dá)不同的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組和蛋白質(zhì)組學(xué)的概念對(duì)應(yīng)于基因組的所有蛋白質(zhì)構(gòu)成的整體，不是局限于一個(gè)或幾個(gè)蛋白質(zhì)。同一基因組在不同細(xì)胞、不同組織中的表達(dá)情況各不相同。在空間和時(shí)間上動(dòng)態(tài)變化著的整體。蛋白質(zhì)組：蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)

指應(yīng)用各種技術(shù)手段來研究蛋白質(zhì)組的一門新興科學(xué)，其目的是從整體的角度分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成份、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律。

主要研究?jī)?nèi)容

了解某種特定的細(xì)胞、組織或器官制造的蛋白質(zhì)種類；

明確各種蛋白質(zhì)分子是如何形成類似于電路的網(wǎng)絡(luò)的；

描繪蛋白質(zhì)的精確三維結(jié)構(gòu)，揭示其結(jié)構(gòu)上的關(guān)鍵部位，如與藥物結(jié)合并且決定其活性的部位。

表達(dá)蛋白組學(xué)ThestudyofglobalchangesinproteinexpressionProteomics蛋白質(zhì)組功能模式

Thesystematicstudyofprotein-proteininteractionsthroughtheisolationofproteincomplexes蛋白質(zhì)組研究包括兩個(gè)方面：基因組轉(zhuǎn)錄組蛋白組ThestudyofproteinsexpressedbygenomesCompletionofthesequencingofthe1stdraftofhumangenomeindicatesthereareapproximately250,000proteinsinthehumangenomeOnly2-5%ofproteinsinhumangenomehavebeenidentified功能蛋白質(zhì)組學(xué)

(functionalproteomics)的提出

功能蛋白質(zhì)組：細(xì)胞在一定階段或與某一生理現(xiàn)象相關(guān)的所有蛋白質(zhì)。介于對(duì)個(gè)別蛋白質(zhì)的傳統(tǒng)蛋白質(zhì)化學(xué)研究和以全部蛋白質(zhì)為研究對(duì)象的蛋白質(zhì)組學(xué)之間。

從局部入手研究蛋白質(zhì)組的各個(gè)功能亞群體。將多個(gè)亞群體組合起來，逐步描繪出接近于生命細(xì)胞的“全部蛋白質(zhì)”的蛋白質(zhì)組圖譜。發(fā)展進(jìn)展各國(guó)政府支持，國(guó)際著名研究和商業(yè)機(jī)構(gòu)加盟：1996年澳大利亞建立了世界上第一個(gè)蛋白質(zhì)組研究中心（AustraliaProteomeAnalysisFacility，APAF）

美國(guó)國(guó)立癌癥研究院（NCI）投資1000萬美元建立肺、直腸、乳腺、卵巢腫瘤的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫(kù)。NCI和FDA共同投資數(shù)百萬美元建立癌癥不同階段的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫(kù)。英國(guó)建立三個(gè)蛋白質(zhì)組研究中心對(duì)已完成或即將完成全基因組測(cè)序的生物體進(jìn)行蛋白質(zhì)組研究。

Celera公司投資上億美元獨(dú)自啟動(dòng)了全面鑒定和分類匯總?cè)祟惤M織、細(xì)胞和體液中的蛋白質(zhì)及其異構(gòu)體，構(gòu)建新一代的蛋