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文檔簡介
姓名.程開源系年級臨床醫(yī)學(xué)八年制 組別同組者竇云德、李康帥、高振東、高繼偉、李洪琦科目 細胞生物學(xué)實驗 題目細胞膜的滲透性學(xué)號201000232012【實驗?zāi)康摹苛私馊苎F(xiàn)象及其發(fā)生機制。了解細胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進入細胞的速度。【實驗原理】細胞膜是細胞與環(huán)境進行物質(zhì)的選擇通透性屏障,是一種半透膜,可選擇性地控制物質(zhì)進出細胞。將紅細胞放在低滲溶液中,水分子大量滲透到細胞內(nèi),可使細胞脹破,血紅蛋白釋放到介質(zhì)中,溶液有不透明的紅細胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液,這種現(xiàn)象稱為溶血(hemolysis)。由于溶質(zhì)滲透入細胞的速度不同,溶血時間不同,因此,發(fā)生溶血現(xiàn)象所需的時間長短可作為測量物質(zhì)進入紅細胞速度的一種指標。本實驗選用紅細胞作為細胞膜滲透性德實驗材料,將其放入不同的介質(zhì)溶液中,觀察紅細胞的變化。溶血(Hemolysis)紅細胞破裂,血紅蛋白逸出稱紅細胞溶解,簡稱溶血??捎啥喾N理化因素和毒素引起。在體外,如低滲溶液、機械性強力振蕩、突然低溫冷凍(-20°^—25°?;蛲蝗换瘍觥⑦^酸或過堿,以及酒精、乙醚、皂堿、膽堿鹽等均可引起溶血。哺乳動物血漿的等滲溶液為 0.9%NaCl溶液,紅細胞在低于0.45%NaCl溶液中,因水滲入,紅細胞膨脹而破裂,血紅蛋白逸出。在體內(nèi),溶血可為溶血性細菌或某些蛇毒侵入、抗原-抗體反應(yīng)(如姓名.程開源系年級臨床醫(yī)學(xué)八年制 組別同組者竇云德、李康帥、高振東、高繼偉、李洪琦科目 細胞生物學(xué)實驗 題目細胞膜的滲透性 學(xué)號201000232012輸入配血不合的血液)、各種機械性損傷、紅細胞內(nèi)在(膜、酶)缺陷、某些藥物等引起。溶血性細菌,如某些溶血性鏈球菌和產(chǎn)氣莢膜桿菌可導(dǎo)致敗血癥。瘧原蟲破壞紅細胞和某些溶血性蛇毒含卵磷脂酶,使血漿或紅細胞的卵磷脂轉(zhuǎn)變?yōu)槿苎蚜字?,使紅細胞膜分解?!緦嶒灢牧稀坎牧希弘u血試劑:0.85%氯化鈉溶液,0.0085%氯化鈉溶液,0.8mol/L甲醇,0.8mol/L丙三醇,6%葡萄糖溶液,2%TritonX-100器材:小試管9只,試管架,膠頭滴管,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,離心機【實驗步驟】取雞血6ml,加0.85%氯化鈉溶液4ml,在1000r/min條件下離心5min(RBC壓積量應(yīng)不少于0.3ml,否則應(yīng)補加雞血)將上述離心的紅細胞按沉淀量配成50%濃度,總體積應(yīng)不少于1ml每組取6支試管分別加入如下溶液各3ml0.85%氯化鈉溶液0.0085%氯化鈉溶液0.8mol/L甲醇0.8mol/L丙三醇
姓名.程開源系年級 臨床醫(yī)學(xué)八年制 組別同組者竇云德、李康帥、高振東、高繼偉、李洪琦科目 細胞生物學(xué)實驗 題目 細胞膜的滲透性 學(xué)號201000232012(5)6%葡萄糖溶液(6)2%TritonX-1004、向上述6試管中分別加入50%紅細胞懸液1滴,用吸管吹吸均勻。觀察各管是否有溶血現(xiàn)象發(fā)生(觀察時間一小時)。記錄溶血時間并于顯微鏡下觀察各溶液中細胞?!緦嶒灲Y(jié)果】0.85%的氯化鈉溶液Triton溶液0.0085%的氯化鈉溶液葡萄糖溶液姓名.程開源系年級 臨床醫(yī)學(xué)八年制 組別同組者竇云德、李康帥、高振東、高繼偉、李洪琦科目 細胞生物學(xué)實驗 題目 細胞膜的滲透性 學(xué)號201000232012丙三醇溶液甲醇溶液甲醇溶液六種溶液最終的對比丙三醇溶液甲醇溶液甲醇溶液六種溶液最終的對比【實驗結(jié)果分析與注意事項】編號溶液類型是否溶血溶血所需要的時間結(jié)果分析10.85%氯化鈉溶液不溶血作比色用,顏色暗紅,渾濁,不透明20.0085%氯化鈉完全溶血5s溶液透明,顏色鮮紅,由于濃度較大,細胞完全溶血
姓名.程開源系年級 臨床醫(yī)學(xué)八年制 組別同組者竇云德、李康帥、高振東、高繼偉、李洪琦科目一 細胞生物學(xué)實驗 題目一細胞膜的滲透性_學(xué)號20100023201230.8mol/L甲醇完全溶血8s前期細胞部分溶血,然后細胞完全溶血40.8mol/L丙三醇部分溶血27s濃度較小細胞部分溶血56%葡萄糖溶液部分溶血21min濃度較小細胞部分溶血66%TritonX-100完全溶血45s表面活性劑,結(jié)果不明顯,溶液渾濁,但顏色鮮紅【反思與總結(jié)】當反應(yīng)時間太快,來不及放到顯微鏡下調(diào)焦觀察時,可以先拿一個樣板對焦。調(diào)好焦后,將樣品滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,放在顯微鏡下即可直接觀察。用相機進行比對拍照時,應(yīng)該在陽光下用白色的背景做參照,使比對的結(jié)果更加客觀、明顯。由于細胞在等滲溶液中經(jīng)過一段時間后也會發(fā)生溶血,因此本次的實驗的時間為一小時,所以在1小時的時間內(nèi)應(yīng)該盡可能地充分利用時間,做好計時工作。實驗中有幾個實驗組的反應(yīng)較快,如果第一次做得不太成功,姓名.程開源系年級 臨床醫(yī)學(xué)八年制 組別同組者竇云德、李康帥、高振東、高繼偉、李洪琦科目 細胞生物學(xué)實驗 題目 細胞膜的滲透性 學(xué)號201000232012可以即刻翻工,注意時間。再將紅細胞的沉淀物放入實驗組的溶液中時,應(yīng)該用彈指法將溶液彈均勻再開始觀察。附:細胞膜滲透性的應(yīng)用——貧血的檢測缺鐵性貧血缺鐵而影響血紅蛋白合成所引起的貧血,見于營養(yǎng)不良、大量成長期小量出血和鉤蟲??;只要是女性就比較容易患上缺鐵性貧血,這是因為女性每個月生理期會固定流失血液。所以平均大約有20%的女性、50%的孕婦都會有貧血的情形。如果貧血不十分嚴重,就不必去吃各種補品,只要調(diào)整飲食就可以改變貧血的癥狀。比如首先要注意飲食,要均衡攝取肝臟、蛋黃、谷類等富含鐵質(zhì)的食物。如果飲食中攝取的鐵質(zhì)不足或是缺鐵嚴重,就要馬上補充鐵劑。維生素C可以幫助鐵質(zhì)的吸收,也能幫助制造血紅素,所以維他命C的攝取量也要充足。其次多吃各種新鮮的蔬菜。許多蔬菜含鐵質(zhì)很豐富。如黑木耳、紫菜、發(fā)菜、葬菜、黑芝麻、蓮藕粉等。巨幼紅細胞性貧血缺乏紅細胞成熟因素而引起的貧血,缺乏葉酸或維生素B12引起的巨幼紅細胞性貧血,多見于嬰兒和孕婦長期營養(yǎng)不良;巨幼細胞貧姓名.程開源系年級臨床醫(yī)學(xué)八年制 組別同組者竇云德、李康帥、高振東、高繼偉、李洪琦科目細胞生物學(xué)實驗題目細胞膜的滲透性學(xué)號201000232012血是指骨髓中出現(xiàn)大量巨幼細胞的一類貧血。實際上巨幼細胞是形態(tài)上和功能上都異常的各階段幼稚紅細胞。這種巨幼細胞的形成是DNA合成缺陷的結(jié)果,核的發(fā)育和成熟落后于含血紅蛋白的胞漿。身體多種組織細胞皆受DNA合成缺陷的影響,但以造血組織最嚴重,特別是紅系細胞。粒系細胞和巨核細胞也都有形態(tài)上的改變和成熟細胞數(shù)量的減少。巨幼細胞包括原巨幼細胞、早巨幼細胞、中巨幼細胞和巨幼細胞各不同發(fā)育階段的幼稚紅細胞。這些巨幼細胞均比相應(yīng)的正常幼紅細胞大,漿核比例比正常略高。經(jīng)Wright染色后,原巨幼細胞的胞漿呈深藍色,無顆粒,核周圍有一染色較淺的圈;核圓形,染成紫色,最顯著的特點是染色質(zhì)呈顆粒狀,彼此隔開,隔開處比較透亮,有時在核的周邊有彼此分開的染色質(zhì)小塊,形成所謂“鐘面”的狀態(tài);核仁較大,藍色。當細胞逐漸成熟,染色質(zhì)保持其顆粒狀結(jié)構(gòu),不易形成深染的固縮塊狀物。有時巨幼細胞貧血較輕,巨幼細胞的形態(tài)往往不很
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