無菌制劑滴眼劑培養(yǎng)基模擬灌裝工藝設(shè)計驗證

-.z..--可修編-培養(yǎng)基模擬灌裝驗證文件編碼VPZ17001頒發(fā)部門制定部門：制定人：日期：日期：審核部門：審核人：日期：日期：批準人：日期：生效日期：年月日分發(fā)部門質(zhì)量管理中心［√］質(zhì)量保證部［］質(zhì)量控制部［√］生產(chǎn)技術(shù)部［］設(shè)備工程部［］采購部［］財務(wù)部［］行政人資部［］研發(fā)部［］銷售部［］綜合無菌制劑車間［］培訓培訓部門：培訓崗位：驗證領(lǐng)導小組會簽工程負責人：日期：驗證協(xié)調(diào)員：日期：QC負責人：日期：質(zhì)量部負責人：日期：生產(chǎn)部負責人：日期：工程部負責人：日期：變更歷史版本號修訂原因與容修訂后版本號生效日期驗證小組人員所在部門職務(wù)主要職責生產(chǎn)技術(shù)部質(zhì)量保證部質(zhì)量控制部儲運部設(shè)備工程部培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案文件編碼頒發(fā)部門制定部門：制定人：日期：日期：審核部門：審核人：日期：日期：批準人：日期：生效日期：年月日分發(fā)部門質(zhì)量管理中心［√］質(zhì)量保證部［］質(zhì)量控制部［√］生產(chǎn)技術(shù)部［］設(shè)備工程部［］采購部［］財務(wù)部［］行政人資部［］研發(fā)部［］銷售部［］綜合無菌制劑車間［］培訓培訓部門：培訓崗位：驗證領(lǐng)導小組會簽工程負責人：日期：驗證協(xié)調(diào)員：日期：QC負責人：日期：質(zhì)量部負責人：日期：生產(chǎn)部負責人：日期：工程部負責人：日期：變更歷史版本號修訂原因與容修訂后版本號生效日期目錄1概述2驗證目的3適用圍4相關(guān)部門職責5驗證條件6驗證引用的文件7培養(yǎng)基8培養(yǎng)基模擬灌裝試驗條件9培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的頻率10培養(yǎng)基模擬灌裝量和灌裝數(shù)量確實定11培養(yǎng)基模擬灌裝最差條件的設(shè)計12培養(yǎng)基配制和無菌灌裝操作過程13取樣方案14試驗樣品的培養(yǎng)15試驗結(jié)果評價16環(huán)境監(jiān)控和微生物限度控制17清場與清潔18培養(yǎng)基灌裝過程監(jiān)控記錄19偏差調(diào)差20糾偏措施21異常情況處理程序22變更23擬定再驗證周期24驗證結(jié)果評定與結(jié)論附錄附錄1：人員培訓附錄2：系統(tǒng)驗證及設(shè)備驗證確認附錄3：純化水檢驗報告單附錄4：注射用水檢驗報告單附錄5：環(huán)境監(jiān)測報告單附錄6：胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基適應(yīng)性實驗結(jié)果附錄7：胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基靈敏度檢查結(jié)果附錄8：培養(yǎng)基及包材確認附錄9：最差條件確認附錄10：包材檢驗結(jié)果附錄11：未參加培養(yǎng)灌裝瓶原因說明附錄12：培養(yǎng)基的培養(yǎng)觀察記錄附錄13：培養(yǎng)基的培養(yǎng)陽性結(jié)果和培養(yǎng)基灌裝失敗情況說明附錄14：培養(yǎng)基灌裝過程中監(jiān)控統(tǒng)計表附錄15：灌裝生產(chǎn)完畢清潔記錄附錄16：質(zhì)控過程監(jiān)控產(chǎn)品根本信息：產(chǎn)品名稱培養(yǎng)基模擬灌裝產(chǎn)品代碼----規(guī)格-----批量6000瓶/批記錄編碼驗證車間滴眼液車間本次驗證工藝關(guān)鍵步驟稱量、配制、過濾、洗瓶、洗塞蓋、灌裝〔無菌轉(zhuǎn)運〕1概述培養(yǎng)基模擬灌裝主要用的是胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基，適用于天龍藥業(yè)江北新廠滴眼劑車間生產(chǎn)線。依據(jù)批準的滴眼劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案，實施培養(yǎng)基模擬灌裝試驗；評價無菌生產(chǎn)工藝的可信限度到達可承受的合格標準，確認滴眼劑車間生產(chǎn)過程的可靠性，有效性。本方案規(guī)定了滴眼劑車間培養(yǎng)基模擬灌裝的驗證方法和標準。2驗證目的通過對滴眼劑灌裝過程中采用與正常生產(chǎn)工藝一樣的條件和操作方法〔包括生產(chǎn)環(huán)境等〕，向8ml滴眼瓶灌裝經(jīng)過除菌過濾的無菌培養(yǎng)基，在適當條件下培養(yǎng)，并對培養(yǎng)品觀察、結(jié)果判定的驗證，來確定滴眼劑車間生產(chǎn)無菌灌裝工藝的無菌保證水平，判定無菌生產(chǎn)要素是否能夠到達可承受的合格標準的能力，以確認無菌生產(chǎn)工藝過程的可靠性。3適用圍本驗證方案適用于本公司江北分廠滴眼劑車間滴眼液生產(chǎn)線。4相關(guān)部門職責部門職責驗證小組□負責驗證方案的審批?！踟撠燆炞C的協(xié)調(diào)工作，以保證本驗證方案規(guī)定工程的順利實施?！踟撠燆炞C數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核。□負責對驗證中出現(xiàn)的問題提出指導意見、執(zhí)行偏差調(diào)查、批準變更等。□負責驗證報告的審批。□負責發(fā)放驗證證書。□負責培養(yǎng)基模擬灌裝工藝驗證周期的批準。生產(chǎn)技術(shù)部□負責驗證方案編制。□培訓操作人員。□負責設(shè)備的清潔、生產(chǎn)操作等工作并提供原始記錄□安排滴眼劑車間進展培養(yǎng)基模擬灌裝實際生產(chǎn)?！踟撠熛蝌炞C管理小組及時報告驗證中出現(xiàn)的問題?！鯇z測結(jié)果進展匯總分析?！跗鸩蒡炞C報告。質(zhì)量管理部□負責驗證方案的審核。□負責制訂培養(yǎng)基模擬灌裝配制藥液中間產(chǎn)品和包裝成品的取樣及檢驗?！踟撠煂ε渲扑幰褐虚g產(chǎn)品和包裝成品進展檢測，并根據(jù)檢驗結(jié)果出具檢驗報告單。□負責驗證過程中的環(huán)境監(jiān)測?！踟撠燆炞C過程中的標準操作規(guī)程執(zhí)行情況等確認?！踟撠燆炞C報告的批準。5驗證條件5.1所有相關(guān)設(shè)備及其工藝均要事先通過確認或驗證，并符合規(guī)定。如干凈生產(chǎn)區(qū)環(huán)境須通過靜態(tài)、動態(tài)驗證〔A級區(qū)域的風速、空氣的懸浮粒子、浮游菌、沉降菌及外表微生物均要符合相應(yīng)規(guī)定〕，操作人員的衛(wèi)生及其操作行為均須經(jīng)過嚴格的培訓，參加人員的更衣、行為規(guī)、微生物知識、標準操作規(guī)程等經(jīng)過培訓，生產(chǎn)主要設(shè)備〔如洗瓶機、洗塞蓋機、配液系統(tǒng)、灌裝加塞機旋蓋等〕以及與生產(chǎn)相關(guān)的其它輔助工藝〔如濕熱滅菌、干熱滅菌、除菌過濾等〕，均須通過確認或驗證。確認或驗證合格前方可進展培養(yǎng)基模擬灌裝驗證，本實驗要模擬整個無菌操作過程，包括從工器具的滅菌直至完成灌裝和容器密封的整個過程，降低實際生產(chǎn)的無菌風險。本實驗要在滴眼劑車間生產(chǎn)中選擇最差合理條件進展評估，為實際生產(chǎn)提供依據(jù)。5.2人員培訓對所有參加培養(yǎng)基模擬灌裝人員進展培訓。5.2.1更衣、更鞋程序培訓培訓主要容：根據(jù)"進入干凈區(qū)更衣更鞋標準操作規(guī)程"對進入干凈區(qū)的工作人員進展培訓。合格標準：培訓人員掌握正確的洗手程序，確保手部的清潔；正確的干凈服穿戴程序，防止對干凈服的污染及將污染物帶入干凈區(qū)。5.2.2行為規(guī)培訓容：對進入干凈區(qū)的工作人員進展正確的行為規(guī)培訓。合格標準：充分的認識到在干凈區(qū)正確的行為的重要性。5.2.3微生物、清潔、消毒、滅菌知識的培訓容：對微生物的相關(guān)知識、清潔及消毒標準操作規(guī)程和滅菌知識進展培訓。合格標準：了解微生物的種類及生存條件，認識到微生物在藥品生產(chǎn)過程中的危害；明確清潔、消毒、滅菌在藥品的整個生產(chǎn)過程中的重要性。5.2.4崗位標準操作規(guī)程培訓容：根據(jù)各崗位的標準操作規(guī)程進展培訓合格標準：各崗位操作人員能夠掌握相關(guān)的崗位知識，熟練的進展崗位操作。培養(yǎng)基模擬灌裝實驗容的培訓容：詳細講解培養(yǎng)基模擬灌裝實驗容及各崗位的相關(guān)操作容。合格標準：掌握培養(yǎng)基模擬灌裝整個過程，包括培養(yǎng)基的配制、灌裝過程中所用管線器具的滅菌、管線的安裝、洗瓶、洗塞蓋、灌裝的操作。5.2.6無菌檢查人員對模擬灌裝產(chǎn)品的判定培訓容：講解培養(yǎng)基和微生物生長繁殖的相關(guān)知識。合格標準：能準確的判斷培養(yǎng)基中是否有微生物的繁殖及受污染的原因。培訓人員培訓容受訓人員干凈區(qū)更衣更鞋標準操作參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員干凈區(qū)工作人員的行為規(guī)參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員微生物、清潔、消毒、滅菌知識參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員無菌培養(yǎng)基模擬灌裝實驗容參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員灌裝崗位操作規(guī)程培訓參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員培養(yǎng)基和微生物生長繁殖的相關(guān)知識參加培養(yǎng)基無菌灌裝所有工作人員無菌檢查人員培訓參加培養(yǎng)基無菌灌裝檢查人員6驗證引用的文件6.1相關(guān)生產(chǎn)標準規(guī)程序號名稱文件編號1滴眼劑原輔料稱量崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27001-002配制崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27002-003灌裝崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27003-004理瓶崗為標準操作規(guī)程SOPPZ27004-005洗瓶崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27005-006洗塞崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27006-007洗蓋崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27007-008燈檢崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27008-009包裝崗位標準操作規(guī)程SOPPZ27009-0010滴眼劑車間過濾器完整性測試標準操作規(guī)程SOPPZ27010-006.2相關(guān)生產(chǎn)標準操作規(guī)程序號名稱文件編號1綜合無菌制劑車間空氣凈化系統(tǒng)過濾器更換標準操作規(guī)程SOPPZ7001-002綜合無菌制劑車間壓縮空氣過濾器更換標準操作規(guī)程SOPPZ7002-003綜合無菌制劑車間稱量衡器標準操作規(guī)程SOPPZ7003-004綜合無菌制劑車間酒度計使用標準操作規(guī)程SOPPZ7004-005綜合無菌制劑車間清潔劑、消毒液標準操作規(guī)程SOPPZ7005-006綜合無菌制劑車間紫外燈使用標準操作規(guī)程SOPPZ7006-007綜合無菌制劑車間傳遞窗〔柜〕標準操作規(guī)程SOPPZ7007-008綜合無菌制劑車間物料及其它物品進入車間〔生產(chǎn)區(qū)〕標準操作規(guī)程SOPPZ7008-009綜合無菌制劑車間濾芯完整性測試標準操作規(guī)程SOPPZ7009-0010綜合無菌制劑車間藥液過濾介質(zhì)標準操作規(guī)程SOPPZ7010-0011綜合無菌制劑車間干凈區(qū)洗衣崗位操作規(guī)程SOPPZ7011-0012綜合無菌制劑車間剩余尾藥處理標準操作規(guī)程.SOPPZ7012-0013綜合無菌制劑車間清場標準操作規(guī)程SOPPZ7013-0014綜合無菌制劑車間生產(chǎn)用工具清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7014-0015綜合無菌制劑車間特殊清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7015-0016綜合無菌制劑車間水池、地漏清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7016-0017綜合無菌制劑車間干凈區(qū)送、回風口清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7017-0018綜合無菌制劑車間空調(diào)機組清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7018-0019綜合無菌制劑車間一般區(qū)周轉(zhuǎn)容器清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7019-0020綜合無菌制劑車間一般生產(chǎn)區(qū)設(shè)備清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7020-0021綜合無菌制劑車間一般生產(chǎn)區(qū)清潔工具清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7021-0022綜合無菌制劑車間一般生產(chǎn)區(qū)工作服清洗、更衣柜清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7022-0023綜合無菌制劑車間D級干凈區(qū)工作服清洗標準操作規(guī)程SOPPZ7023-0024綜合無菌制劑車間C級干凈區(qū)工作服清洗標準操作規(guī)程SOPPZ7024-0025綜合無菌制劑車間干凈區(qū)清潔工具清潔操作規(guī)程SOPPZ7025-0026綜合無菌制劑車間人員進出一般生產(chǎn)區(qū)更衣操作規(guī)程SOPPZ7026-0027綜合無菌制劑車間人員進出D級干凈區(qū)更衣操作規(guī)程SOPPZ7027-0028綜合無菌制劑車間人員進出C級干凈區(qū)更衣操作規(guī)程SOPPZ7028-0029綜合無菌制劑車間傳遞窗清潔操作規(guī)程SOPPZ7029-0030綜合無菌制劑車間衛(wèi)生間清潔操作規(guī)程SOPPZ7030-0031綜合無菌制劑車間過濾器使用清潔操作規(guī)程SOPPZ7031-0032綜合無菌制劑車間人員進入生產(chǎn)區(qū)手清潔消毒操作規(guī)程SOPPZ7032-0033綜合無菌制劑車間一般生產(chǎn)區(qū)洗衣崗位操作規(guī)程SOPPZ7033-0034綜合無菌制劑車間A/B級干凈區(qū)工作服清洗標準操作規(guī)程SOPPZ7034-0035綜合無菌制劑車間干凈區(qū)清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7035-0036綜合無菌制劑車間一般區(qū)清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7036-0037綜合無菌制劑車間烘手器操標準操作規(guī)程SOPPZ7037-0038綜合無菌制劑車間烘手器清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7038-0039綜合無菌制劑車間手消毒器標準操作規(guī)程SOPPZ7039-0040綜合無菌制劑車間手消毒器清潔標準操作規(guī)程SOPPZ7040-006.3相關(guān)的設(shè)備標準操作規(guī)程序號名稱文件編號1全自動眼液外蓋〔塞〕清洗機標準操作規(guī)程SOPPZ23001-002高速小圓瓶理瓶機標準操作規(guī)程SOPPZ23002-003立式洗瓶機標準操作規(guī)程SOPPZ23003-004隧道式過氧化氫滅菌烘箱標準操作規(guī)程SOPPZ23004-005灌裝加塞旋蓋機標準操作規(guī)程SOPPZ23005-006干熱滅菌柜標準操作規(guī)程SOPPZ23006-007脈動真空滅菌器〔純蒸汽〕標準操作規(guī)程SOPPZ23007-008FFU小推車一臺標準操作規(guī)程SOPPZ23008-009配液罐標準操作規(guī)程SOPPZ23009-0010燈檢工作臺標準操作規(guī)程SOPPZ23010-0011微波滅菌機標準操作規(guī)程SOPPZ23011-0012澄明度檢測儀標準操作規(guī)程SOPPZ23012-0013全自動眼液外蓋〔塞〕清洗機清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23013-0014高速小圓瓶理瓶機清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23014-0015立式洗瓶機標清潔準操作規(guī)程SOPPZ23015-0016隧道式過氧化氫滅菌烘箱清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23016-0017灌裝加塞旋蓋機清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23017-0018干熱滅菌柜清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23018-0019脈動真空滅菌器〔純蒸汽〕清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23019-0020FFU小推車一臺清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23020-0021配液罐清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23021-0022燈檢工作臺清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23022-0023微波滅菌機清潔標準操作規(guī)程SOPPZ23023-0024澄明度檢測儀標準操作規(guī)程SOPPZ23024-006.4相關(guān)驗證文件序號文件名稱文件編碼空氣凈化系統(tǒng)驗證報告粉針生產(chǎn)線廠房驗證報告壓縮空氣系統(tǒng)驗證報告純化水制備系統(tǒng)驗證報告注射用水制備系統(tǒng)驗證報告KCZP型超聲波自動洗瓶機驗證報告GMS系列隧道式層流滅菌枯燥機驗證報告GA55CP-10型固定式螺桿空氣壓縮機驗證報告CZQ-200純蒸汽發(fā)生器驗證報告R*H-1系列熱風循環(huán)烘箱驗證報告*G1.U型脈動真空滅菌器驗證報告GC*B型超聲波膠塞漂洗罐驗證報告工衣清洗存放驗證報告膠塞清洗存放驗證報告工器具清洗驗證報告玻瓶清洗驗證報告鋁蓋清洗驗證報告廠房清潔驗證報告KFC系列抗生素玻瓶螺桿分裝機驗證報告KFC系列抗生素玻瓶螺桿分裝機清潔驗證報告培養(yǎng)基灌裝試驗報告BT-300型不干膠自動貼標機驗證報告7培養(yǎng)基7.1培養(yǎng)基的選擇為了盡可能地檢出無菌生產(chǎn)工藝系統(tǒng)中可能會給實際產(chǎn)品造成污染的微生物，所選用的培養(yǎng)基要盡可能適應(yīng)廣譜微生物的生長，包括細菌、霉菌和酵母菌等。驗證試驗前，要鑒別驗證培養(yǎng)基的可行性。首先嚴格按照培養(yǎng)基生產(chǎn)商的要求進展配制和滅菌，然后將無菌培養(yǎng)基灌裝至8ml滴眼劑瓶。同時制備好三種微生物〔枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌〕的懸浮液，菌液濃度控制為100～1000個菌/ml。將上述準備無菌培養(yǎng)基分成三等份，且每份至少兩瓶，分別參加上述菌懸液各0.1ml。將接枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基于30～35℃下培養(yǎng)，接有白色念珠菌的培養(yǎng)基于20～25℃下培養(yǎng)。如果在7天，每種微生物培養(yǎng)基均至少有50％長菌，則認為該培養(yǎng)基可用于無菌工藝驗證試驗。根據(jù)"無菌制劑GMP實施指南"提供胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基做上述試驗，適用于培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。7.2胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基靈敏度檢查本次試驗均采用同批號的培養(yǎng)基，根據(jù)培養(yǎng)基的正確配制方法進展配制，按照"中國藥典"2010年版二部附錄中無菌檢查法中的培養(yǎng)基靈敏度檢查。7.2.1菌種培養(yǎng)基靈敏度檢查所用的菌株傳代數(shù)不得超過5代〔從菌種保存中心獲得的冷凍枯燥菌種為第0種〕，并采用適宜的菌種保藏技術(shù)，以保證試驗菌株的生物學特性。金黃色葡萄球菌〔CMMCC〔B〕26003〕銅綠假單胞菌〔CMMCC〔B〕10104〕枯草芽孢桿菌〔CMCC〔B〕63501〕生孢梭菌〔CMCC〔B〕64941〕白色念珠菌〔CMCC〔F〕98001〕黑曲霉菌〔CMCC〔F〕98003〕本地菌〔沉降菌〕7.2.2菌液制備：接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、本地菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，接種生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)18～24小時；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改進馬丁培養(yǎng)基或改進馬丁瓊脂培養(yǎng)基中，23～28℃培養(yǎng)24～48小時，接種本地菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，23～28℃培養(yǎng)24～48小時，上述培養(yǎng)物用0.9％無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)小于100CFU的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改進馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，23～28℃培養(yǎng)5～7天，參加3～5ml0.9％無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，吸出孢子懸液〔用管口帶有薄的無菌棉花或紗布能過濾菌絲的無菌毛細吸管〕至無菌試管，用0.9％無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)小于100CFU的孢子懸液。7.2.3培養(yǎng)基接種：取每管裝量為12ml的胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基11支，分別接種1ml小于100CFU的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、本地菌〔沉降菌〕各2支、另1支不接種作為空白對照，培養(yǎng)3天；取每管裝量為9ml的胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基5支，分別接種1ml小于100CFU的白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接種作為空白對照，培養(yǎng)5天。逐日觀察結(jié)果。7.2.4結(jié)果判斷：空白對照管應(yīng)無菌生長，假設(shè)加菌的培養(yǎng)基管均生長良好，判該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合規(guī)定。7.3培養(yǎng)基微生物生長性試驗每一批的培養(yǎng)基在使用前都要做微生物的生長性試驗，以確認用于實驗的培養(yǎng)基的性能。7.3.1操作方法：按標準操作規(guī)程制備胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基并滅菌，將滅菌后的培養(yǎng)基分裝于20支無菌試管中，在10支試管中接種枯草桿菌，接種量小于100CFU；在另10支試管中接種白色念珠菌，接種量小于100CFU；接種后蓋塞、封口并分別在30-35℃和20-25℃培養(yǎng)7天。7.3.2合格標準：7天至少50%以上接種的各試管的胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長。7.4培養(yǎng)基無菌性試驗每一批除菌后的培養(yǎng)基均要做無菌性試驗，以確定培養(yǎng)基的無菌性，防止出現(xiàn)假陽性的結(jié)果。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的結(jié)果受培養(yǎng)基無菌性的影響很大，假設(shè)不能保證培養(yǎng)基在模擬灌裝試驗前的無菌性，則不能保證試驗結(jié)果的可信性。證明培養(yǎng)基的無菌性之后進展模擬灌裝的方法，以排除培養(yǎng)基無菌性對此項試驗的影響，從而確認模擬灌裝試驗中污染來源于灌裝過程。7.4.1操作方法：將除菌過濾后用于模擬灌裝的培養(yǎng)基灌裝于50ml無菌試管中，蓋塞、封口后在相應(yīng)溫度下培養(yǎng)7天。7.4.2合格標準：7天各試管胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中應(yīng)無任何微生物生長。假設(shè)發(fā)現(xiàn)有污染，應(yīng)明確記錄編號、數(shù)量，同時檢查試管。7.5影響培養(yǎng)基生長對試樣結(jié)果不利的風險分析培養(yǎng)基灌裝實驗，要求培養(yǎng)基在最適合的條件下進展，要防止由于操作條件等原因抑制微生物生長，從而降低實驗的可信度，對培養(yǎng)基微生物抑制風險評估如下：抑菌影響分析——物料準備、儲存過程風險點解釋控制方法配制溶液的注射用水溫度高于70℃高溫會抑制微生物生長將配制培養(yǎng)基的注射用水冷卻到室溫，在室溫下〔20-25℃〕配制正常生產(chǎn)溶液PH值偏高或偏低酸性或堿性環(huán)境不利于微生物生長培養(yǎng)基的PH調(diào)整到適合微生物生長的圍配制好的溶液在低溫下保存低溫會抑制微生物生長培養(yǎng)基在儲存容器中常溫保存抑菌影響分析——灌裝風險點解釋控制方法生產(chǎn)工藝規(guī)程中使用惰性氣體〔如氮氣〕保護產(chǎn)品大多數(shù)為需氧微生物，惰性氣體有一定抑菌作用用壓縮空氣或空氣來代替惰性氣體培養(yǎng)基灌裝量偏少滴眼劑瓶壁不能被完全接觸，微生物不能生長8ml滴眼劑瓶灌裝至少4ml培養(yǎng)基，以保證足夠量培養(yǎng)基用于培養(yǎng)抑菌影響分析——中間過程風險點解釋控制方法對設(shè)備的清洗、消毒和滅菌消毒劑會殺滅微生物防止設(shè)備上的消毒劑殘留正常生產(chǎn)時消毒劑〔如噴灑消毒酒精，對操作人員手部消毒〕的使用消毒劑會殺滅微生物對于模擬試驗過程中消毒劑〔如噴灑消毒酒精〕的使用，應(yīng)該注意不能超出正常生產(chǎn)時的使用頻率，不能將消毒劑直接接觸到培養(yǎng)基上班次輪換，清場消毒消毒劑會殺滅微生物對于兩班次灌裝輪換期間不進展消毒清場8培養(yǎng)基模擬灌裝試驗條件培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的條件是完全與實際的生產(chǎn)條件一樣。8.1環(huán)境監(jiān)測：對空氣懸浮粒子、外表微生物監(jiān)測、空氣浮游菌監(jiān)測、沉降菌監(jiān)測。監(jiān)測工程檢測合格標準監(jiān)測點空氣浮游菌監(jiān)測A級環(huán)境的測試標準＜1個/m3；B級環(huán)境的測試標準≤10個/m3；C級環(huán)境的測試標準≤100個/m3；灌裝間沉降菌監(jiān)測A級環(huán)境的測試標準＜1個/皿；B級環(huán)境的測試標準≤5個/皿；C級環(huán)境的測試標準≤50個/皿，灌裝間手指菌檢測A級環(huán)境的測試合格標準＜1個；B級環(huán)境的測試合格標準≤5個，為合格。灌裝間干凈服接觸檢測A級環(huán)境的測試合格標準＜1個；B級環(huán)境的測試合格標準≤5個；為合格。灌裝間8.2工藝用水及壓縮空氣的檢查，符合藥典標準。8.3培養(yǎng)基、包材的標準要符合。物料名稱物料代碼合格供給商胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基滴眼劑瓶原輔料、包裝材料的檢驗報告物料名稱批號檢驗單號結(jié)論胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基第一批：第二批：第三批：滴眼劑瓶第一批：第二批：第三批：8.4由受過培訓的無菌生產(chǎn)操作人員模擬實際的灌裝作業(yè)進展培養(yǎng)基灌裝。8.5培養(yǎng)基模擬灌裝試驗用滴眼劑瓶、塞、蓋的清洗、滅菌，灌裝設(shè)備的清洗、消毒及與產(chǎn)品接觸的灌裝設(shè)備部件的清洗、滅菌、安裝過程，均要遵守相應(yīng)的標準操作規(guī)程。8.6確定參加培養(yǎng)基無菌灌裝試驗人員數(shù)量及調(diào)試灌裝機速度。進入無菌室的操作人員數(shù)量可為生產(chǎn)時的最多人數(shù)，灌裝速度以正常生產(chǎn)時最低、正常和最高速度分別進展，生產(chǎn)過程中模擬最差生產(chǎn)條件。9培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的頻率滴眼劑車間必須每半年進展一批合格的培養(yǎng)基模擬灌裝試驗，并檢查培養(yǎng)結(jié)果，用以證明該工藝驗證結(jié)果的可靠性。10培養(yǎng)基模擬灌裝量和灌裝數(shù)量確實定10.1灌裝體積確實定：選擇的灌裝體積要使培養(yǎng)基能適當?shù)亟佑|容器的外表，并且適當?shù)姆D(zhuǎn)和旋轉(zhuǎn)，使培養(yǎng)基能充分的接觸到密封容器的外表。灌裝體積不得少于其容積的三分之一，這樣才能保證有足夠數(shù)量的培養(yǎng)基與容器的外表充分接觸并且易于觀察到微生物的生長狀況。灌裝容器為8ml滴眼劑瓶，確定的灌裝量為4.0ml。10.2灌裝數(shù)量確實定：應(yīng)符合統(tǒng)計學要求，即95％的置信限至少能檢出千分之一的污染率。公式：P〔*＞0〕＝1-〔1-*〕N*……表示被污染產(chǎn)品的比例，當*＝0.001，P＝95時，一次模擬分裝中至少應(yīng)分裝瓶數(shù)N＝2995。根據(jù)上述公式并結(jié)合我公司生產(chǎn)批量為25000支/批，確定實際培養(yǎng)基模擬灌裝批量為6000瓶/批。11培養(yǎng)基模擬灌裝最差生產(chǎn)條件的設(shè)計為保證培養(yǎng)基灌裝能模擬出實際的生產(chǎn)狀況，在試驗時設(shè)計最差條件。在培養(yǎng)基無菌灌裝操作過程中模擬以下出現(xiàn)的異常情況進展無菌灌裝生產(chǎn)：11.1增加灌裝前已滅菌器具的轉(zhuǎn)運時間〔如已滅菌的器具取出、轉(zhuǎn)運、放置時間高于實際操作時間〕。11.2正常的培養(yǎng)基配制除菌過濾后，延長在移動儲罐中的儲存時間。11.3延長灌裝室灌裝管線的連接時間〔增加灌裝管線連接操作〕。11.4灌裝過程中模擬屢次出現(xiàn)倒瓶、缺塞現(xiàn)象，并進展取走倒瓶和加塞的操作。11.5增加滴眼劑塞、蓋的添加次數(shù)。11.6滴眼劑瓶在輸送過程中屢次出現(xiàn)取缺瓶、碎瓶現(xiàn)象。11.7灌裝過程中灌裝針頭出現(xiàn)異常，更換針頭后繼續(xù)灌裝。11.8灌裝過程中出現(xiàn)裝量差異，重新調(diào)整裝量，確認后繼續(xù)灌裝〔檢查裝量不低于正常生產(chǎn)時的次數(shù)〕。11.9塞、蓋振蕩器出現(xiàn)故障，維修人員進展維修。排除故障后繼續(xù)灌裝。11.10滴眼劑瓶軌道出現(xiàn)故障。11.11在灌裝過程中停機，增加培養(yǎng)基存放時間。12培養(yǎng)基配制和無菌灌裝操作過程12.1生產(chǎn)設(shè)備及設(shè)施序號設(shè)備名稱設(shè)備編號設(shè)備型號位置1組合式空氣處理機組JK-105-012TMC1518CHW空調(diào)室2組合式空氣處理機組JK-105-013TMC1015CHW空調(diào)室3組合式空氣處理機組JK-105-014TMC1016CHW空調(diào)室4空壓機AZ56031/空調(diào)室5純化水設(shè)備AZ541213m3/h純化水室6多效蒸餾水機AZ550111500L/h注射用水室7純蒸汽發(fā)生器AZ55021300L/h注射用水室8立式超聲波清洗機05-003KQCL60室9冷卻段在線滅菌枯燥機05-004KSZ620/60-M室10直線灌裝加塞機05-006KGS10-*3灌裝壓塞室11全自動濕法氣沖式膠塞清洗機05-005KJQS-4ES室12配液罐05-002150L凍干稀配室14配液罐05-001100L凍干濃配室17真空冷凍枯燥機05-007LYO-7.5凍干室20軋蓋機05-009ZG400(F)軋蓋室21鋁蓋清洗機05-008KJSL-4ES洗蓋室22臭氧發(fā)生器05-016OSR-80H空調(diào)室12.2滴眼劑瓶、塞、蓋清洗操作與正常生產(chǎn)一致。12.3培養(yǎng)基的配制12.3.1工作人員對C級區(qū)的環(huán)境進展檢查，符合實際生產(chǎn)條件后進展培養(yǎng)基的配制。生產(chǎn)處方物料名稱胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基物料代碼：批號12.2.2在稀配室向稀配罐中參加處方量的注射用水和培養(yǎng)基，完全溶解后用蠕動泵經(jīng)兩次0.22μm膜除菌過濾至灌裝室B級區(qū)域的移動儲罐。8.2.2.1配制過程：向已滅菌的稀配罐中參加54kg，注射用水調(diào)節(jié)至溫度〔20-25℃〕。將1620g胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基投到54kg注射用水中，開啟攪拌20min，調(diào)節(jié)pH值在6.5-7.5，開啟蠕動泵將培養(yǎng)基液經(jīng)滅菌的0.45μm百褶裙筒式濾器和兩道已滅菌的0.22μm圓盤過濾器除菌過濾到無菌灌裝室的移動儲罐中〔在常溫下進展〕。準備進展無菌灌裝。8.2.2.2嚴格按培養(yǎng)基的配制要求，在稀配室用注射用水配制培養(yǎng)基，配液過程要遵守相應(yīng)的標準操作規(guī)程，控制溫度pH值。8.2.3除菌過濾前用一無菌瓶取50ml培養(yǎng)基溶液，用做除菌過濾前培養(yǎng)基溶液的微生物污染水平檢測。8.2.4除菌過濾后用一無菌瓶取100ml經(jīng)過除菌過濾的培養(yǎng)基溶液，用做除菌過濾后培養(yǎng)基溶液的無菌性實驗與培養(yǎng)基微生物生長性試驗。8.2.5除菌過濾操作完全模擬實際生產(chǎn)。8.3準備無菌灌裝加塞：與實際生產(chǎn)一致8.3.1操作人員按照進入B級區(qū)的程序進入工作區(qū)。8.3.2翻開濕熱和干熱滅菌柜，將灌裝過程中使用的圓盤過濾器、移動儲罐、灌裝針頭、管線、鑷子等已滅菌器具放到垂直層流小車上，在百級層流下轉(zhuǎn)運到無菌灌裝間，將兩端連有硅膠管的圓盤過濾器一端接到稀配輸液管線上，另一端和移動儲罐的上端進液口連接，下端出液口用硅膠管與十二頭分裝器連接，分裝器分液頭由輸液管線和針頭連接。將管線分別夾到輸液蠕動泵上。固定灌裝針頭。8.3.3用75%酒精、已滅菌的綢布將丁基膠塞振蕩器壁及下塞軌道仔細擦拭消毒〔按實際生產(chǎn)酒精用量與操作方法執(zhí)行〕，檢查調(diào)整真空吸塞是否對準瓶口及振蕩器輸送膠塞是否正常。將已滅菌〔在效期〕的不銹鋼桶放于垂直層流小車，接料斗放在出塞口處，按丁基膠塞清洗滅菌機出塞按鈕出塞。出塞完畢后關(guān)閉出塞口，用垂直層流小車將裝有膠塞的不銹鋼桶轉(zhuǎn)運到膠塞震蕩器處，翻開隔離器門，不銹鋼桶轉(zhuǎn)移到隔離器升降器上，關(guān)閉隔離器門。用舀子將不銹鋼桶的無菌膠塞加到膠塞料斗。8.3.4灌裝加塞操作人員將灌注器、管路、針頭及移動儲罐的注射用水排凈。8.3.5灌裝加塞操作人員將經(jīng)過兩道0.22μm除菌濾膜過濾的培養(yǎng)基溶液裝入移動儲罐〔不加惰性氣體保護〕。8.3.6灌裝量調(diào)節(jié)：灌裝加塞操作人員進展裝量調(diào)節(jié)控制在4.0-6.0ml。8.3.8灌裝操作人員將已灌裝的壓半塞培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到凍干箱，灌裝完畢后關(guān)閉凍干箱門，通知凍干組開啟冷凍枯燥機。8.3.9灌裝過程中，操作人員每20min用75%酒精對雙手進展消毒，用量、頻次與實際生產(chǎn)相符。8.3.10灌裝加塞完畢后，操作人員對環(huán)境按不更換品種清潔清場。8.4培養(yǎng)基模擬凍干凍干工序操作人員保持凍干箱的溫度處于常溫，輕微真空〔500Kba〕使空氣流動〔注意不能使藥液沸騰〕，通過抽真空引入空氣流動，再通無菌空氣以平衡氣壓，重復(fù)三次。制品在凍干箱放置6小時。8.5操作過程注意控制：消毒劑不可在設(shè)備上有殘留；模擬試驗過程中消毒劑〔如噴灑消毒酒精〕的使用，注意不能超出正常生產(chǎn)時的使用頻率，不能將消毒劑直接接觸到培養(yǎng)基上。批次間清場要按照正常清場程序進展，不得特意增加操作。8.6在整個培養(yǎng)基模擬灌裝過程中模擬最差生產(chǎn)條件。最差條件如下表：最差條件模擬方式處理方式頻次增加灌裝前已滅菌器具裝卸次數(shù)和轉(zhuǎn)運時間轉(zhuǎn)運時比正常時間加5分鐘一次延長培養(yǎng)基溶液在移動儲罐中的存儲時間延長30min。先將培養(yǎng)基溶液在移動儲罐中停放30分一次灌裝管線在安裝前暴露在無菌環(huán)境下20min——一次倒瓶操作人員進展倒瓶的移出操作十次缺塞操作人員進展加塞操作十次增加膠塞添加的次數(shù)——五次玻璃瓶屢次破碎操作人員進展碎瓶玻璃屑的移出清理操作三次灌裝針頭灌裝異常操作人員進展更換針頭操作三次取樣按取樣方法取樣六次裝量差異操作人員重新調(diào)節(jié)裝量四次加塞振蕩器出現(xiàn)異常維修人員進展維修一次增加壓全塞培養(yǎng)基在水平層流小車的裝卸次數(shù)————西林瓶軌道出現(xiàn)故障維修人員進展維修三次增加培養(yǎng)基轉(zhuǎn)運到凍干箱的操作次數(shù)————在灌裝過程中停機，增加培養(yǎng)基存放時間————8.7軋蓋操作8.7.1工作人員對B級區(qū)的環(huán)境進展檢查，符合實際生產(chǎn)條件后進展軋蓋。8.7.2生產(chǎn)操作過程8.7.2.1軋蓋操作人員出蓋，將鋁蓋放入振蕩器。8.7.2.2檢查振蕩送蓋系統(tǒng)運行正常后，開機空運轉(zhuǎn)5分鐘，無異常情況。8.7.2.3灌裝操作人員進入灌裝室，翻開凍干箱門，將經(jīng)過模擬凍干并壓全塞的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)運到水平層流小車上。經(jīng)氣鎖室轉(zhuǎn)運到軋蓋室，在軋蓋室軋鋁塑蓋完成封口。8.7.2.4如有軋蓋不良者不可丟棄，要把蓋起開防止培養(yǎng)基從西林瓶中泄露，重新軋蓋。8.8軋蓋完畢，將全部產(chǎn)品交給化驗室進展培養(yǎng)?！采a(chǎn)過程記錄見四〕8.9在灌裝全部完畢后對物料進展物料平衡計算。13取樣方案13.1環(huán)境監(jiān)測培養(yǎng)基灌裝試驗前，對于干凈區(qū)需要進展環(huán)境監(jiān)測，監(jiān)測合格后，再進展培養(yǎng)基模擬灌裝。13.1.1沉降菌監(jiān)測：對于B級環(huán)境下的A級操作區(qū)在灌裝過程中全程監(jiān)測，每4小時更換一次沉降碟。13.1.2懸浮粒子監(jiān)測：對于B級環(huán)境下的A級操作區(qū)全程在線監(jiān)測。13.1.3浮游菌監(jiān)測：對于B級環(huán)境下的A級操作區(qū)在灌裝過程中監(jiān)測。13.1.4外表微生物：生產(chǎn)完畢后，用棉簽沾滅菌的生理鹽水選取主要設(shè)備、易產(chǎn)生死角的角落擦拭，涂在培養(yǎng)基上。13.2包材取樣13.2.1滴眼劑瓶要求崗位操作人員檢測可見異物，每次取20支進展檢測，QA人員取20支進展檢測可見異物。13.2.2洗塞水檢測：在取樣口取洗塞水檢測可見異物。QA人員取樣進展檢測可見異物。13.2.3滅菌后滴眼劑塞取20支用比色管檢測可見異物。QA人員取樣進展檢測可見異物。13.2.4滅菌后滴眼劑蓋取20支用比色管檢測可見異物。QA人員取樣進展檢測可見異物。13.2.5滴眼瓶的取樣：清洗滅菌后的滴眼瓶進展取樣，檢測細菌毒素。13.2.6滴眼塞取樣：清洗滅菌后的滴眼劑塞進展取樣，檢測細菌毒素。13.2.7滴眼劑蓋取樣：清洗滅菌后的滴眼劑蓋進展取樣，檢測細菌毒素。13.3中間產(chǎn)品取樣13.3.1培養(yǎng)基全部在配液罐中溶解，攪拌均勻，保證培養(yǎng)基溶液將整個罐接觸，過濾到藥液暫存中，分別在過濾前段、中段、后段分別取樣各取2支每只20ml，用牛皮紙包好送到化驗室，將兩局部分開培養(yǎng)，一局部先在23-28℃培養(yǎng)7天，再拿到30-35℃培養(yǎng)基7天。另一局部相反培養(yǎng)。將培養(yǎng)基溶液留40L于配液罐中，放置1小時后，取樣進展取2支每只20ml，用牛皮紙包好送到化驗室，將兩局部分開培養(yǎng)，一局部先在23-28℃培養(yǎng)7天，再拿到30-35℃培養(yǎng)基7天。取樣位置取樣編號取樣量先培養(yǎng)溫度后培養(yǎng)溫度配液罐過濾前段P120ml23-28℃30-35℃配液罐過濾前段P220ml30-35℃23-28℃配液罐過濾中段P320ml23-28℃30-35℃配液罐過濾中段P420ml30-35℃23-28℃配液罐過濾后段P520ml23-28℃30-35℃配液罐過濾后段P620ml30-35℃23-28℃配液罐過濾放置P720ml23-28℃30-35℃配液罐過濾放置P820ml30-35℃23-28℃13.3.3培養(yǎng)基除菌過濾到藥液儲罐中，保證培養(yǎng)基溶液將整個罐接觸，經(jīng)終端過濾器過濾到緩沖罐中，取樣各取2支每只20ml，用牛皮紙包好送到化驗室，將兩局部分開培養(yǎng)，一局部先在23-28℃培養(yǎng)7天，再拿到30-35℃培養(yǎng)基7天。另一局部相反培養(yǎng)。每隔2小時進展取樣，取2支每只20ml，用牛皮紙包好送到化驗室，將兩局部分開培養(yǎng)，一局部先在23-28℃培養(yǎng)7天，再拿到30-35℃培養(yǎng)基7天。取樣位置取樣編號取樣量先培養(yǎng)溫度后培養(yǎng)溫度藥液儲罐〔0小時〕G120ml23-28℃30-35℃藥液儲罐〔0小時〕G220ml30-35℃23-28℃藥液儲罐〔2小時〕G320ml23-28℃30-35℃藥液儲罐〔2小時〕G420ml30-35℃23-28℃藥液儲罐〔4小時〕G520ml23-28℃30-35℃藥液儲罐〔4小時〕G620ml30-35℃23-28℃藥液儲罐〔6小時〕G720ml23-28℃30-35℃藥液儲罐〔6小時〕G820ml30-35℃23-28℃藥液儲罐〔8小時〕G920ml23-28℃30-35℃藥液儲罐〔8小時〕G1020ml30-35℃23-28℃藥液儲罐〔10小時〕G1120ml23-28℃30-35℃藥液儲罐〔10小時〕G1220ml30-35℃23-28℃13.3.4灌裝完成后，將所有樣有QA將所有樣品全部取走，送到化驗室培養(yǎng)。將樣品進展分別分類。取樣位置取樣編號取樣量先培養(yǎng)溫度后培養(yǎng)溫度成品1G1323-28℃30-35℃成品2G1430-35℃23-28℃13.4人員監(jiān)測操作人員操作完畢后，QA對每個操作人員進展手指菌，干凈服外表微生物監(jiān)測。14試驗樣品的培養(yǎng)14.1培養(yǎng)前將培養(yǎng)基無菌灌裝全部樣品上下顛倒三次，使培養(yǎng)基與塞及整個滴眼劑瓶壁充分接觸后，在化驗室培養(yǎng)箱置于較低溫度20～25℃下培養(yǎng)7天，然后在較高溫度30～35℃培養(yǎng)7天，共培養(yǎng)14天。14天時后由經(jīng)過培訓有資質(zhì)的人員檢查培養(yǎng)的全部樣品的微生物生長情況，檢查時將每瓶培養(yǎng)基在燈檢儀下進展目檢，透明、澄清、無混濁的培養(yǎng)基判為無微生物生長；假設(shè)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基混濁或有懸浮的菌絲或菌落，則需作進一步的微生物生長檢查，以確定培養(yǎng)基是否真正染菌。如染菌要記錄瓶號、瓶數(shù)，同時要檢查塞、蓋的密封情況；假設(shè)有破損要記錄并檢查其破損原因。對于微生物污染的樣品要進展鑒別試驗，鑒別的容至少要包括菌落、細胞形態(tài)學及革蘭染色特性等。14.2無密封缺陷的瓶均要培養(yǎng)，任何不作培養(yǎng)的瓶子都要說明不作培養(yǎng)的原因，如果有書面規(guī)程規(guī)定，灌裝過程由于進展干擾操作而丟棄的培養(yǎng)基可以不培養(yǎng),灌裝過程丟棄程序必須與實際生產(chǎn)一致。14.3培養(yǎng)及讀數(shù)過程原則上不可遺漏，如丟棄要有很明確的理由〔要盡量防止〕。14.4無法培養(yǎng)的制品包括壓碎瓶、在灌裝時掉到地上無法培養(yǎng)的，要在記錄中說明。15試驗結(jié)果評價15.1培養(yǎng)基灌裝實驗的合格標準：15.1.1灌裝量<5000瓶時，假設(shè)有1瓶污染，需徹底調(diào)查，并重新驗證〔3批〕。15.1.2灌裝量為5000-10000瓶時，假設(shè)有1瓶污染，視調(diào)查結(jié)果斷定是否需要重新進展1批培養(yǎng)基灌裝實驗：假設(shè)有兩瓶污染，必須重新驗證〔3批〕，同時進展徹底調(diào)查。15.1.3灌裝量>10000瓶時，假設(shè)有1瓶污染，需徹底調(diào)查；假設(shè)有兩瓶污染，必須進展徹底調(diào)查，并重新驗證〔3批〕。15.2我公司確定培養(yǎng)基模擬灌裝試驗批量為6000支/批。合格標準：6000支均不得有染菌灌裝產(chǎn)品存在為合格標準。如已灌裝的批量經(jīng)過按培養(yǎng)條件培養(yǎng)后經(jīng)檢查均陰性〔即全部灌裝數(shù)量無細菌生長〕，則判定驗證符合要求；如發(fā)生陽性〔有細菌生長〕則需全面調(diào)查后找出染菌原因，進展再驗證。15.3培養(yǎng)結(jié)果陽性調(diào)查15.3.1當培養(yǎng)基灌裝出現(xiàn)陽性結(jié)果時，不管是否符合合格標準，都必須進展調(diào)查。制定的CAPA，需要針對污染的原因或不良無菌操作行為做出糾正。15.3.3別離到的微生物要鑒別到種，調(diào)查過程中要詳細分析可能的產(chǎn)生陽性結(jié)果的原因，如果是系統(tǒng)產(chǎn)生的則要對系統(tǒng)進展驗證，以確定系統(tǒng)的穩(wěn)定性；如是人員產(chǎn)生的則要做針對性的改進。15.3.4科學評估工藝的可靠性以及上市產(chǎn)品可能存在的風險。15.3.5對于超出標準的結(jié)果，要在調(diào)查清楚原因后再次進展培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。15.4如果未到達承受標準：15.4.1在明確糾偏行動前，需考慮暫停生產(chǎn)。在工藝重新確認前的產(chǎn)品不得放行。15.4.2在本次培養(yǎng)基灌裝之后生產(chǎn)的到下一次成功的培養(yǎng)基灌裝之間的產(chǎn)品都需要被進展回憶，評估其無菌失敗的風險。15.4.3在該次培養(yǎng)基灌裝和上一次成功的培養(yǎng)基灌裝之間的產(chǎn)品也需要被進展回憶，評估其無菌失敗的風險。15.4.4必要時，要制定糾偏和預(yù)防性措施，并進展工藝的重新確認。15.5對培養(yǎng)基灌裝污染情況分析假設(shè)在培養(yǎng)基的培養(yǎng)過程中可能發(fā)生以下污染的情況，則說明培養(yǎng)基模擬無菌灌裝實驗失敗，及時分析造成污染的原因。15.5.1當培養(yǎng)基的污染率是這種曲線圖時，污染可能來源于液體培養(yǎng)基〔培養(yǎng)基貯罐非無菌連接，在此過程中染菌，使培養(yǎng)基溶液在循環(huán)管路中受到污染，微生物持續(xù)繁殖〕。在灌裝完畢時，要注意保持培養(yǎng)基貯罐處于無菌密閉狀態(tài)在儲罐取樣測試，可以核實這樣的假設(shè)。15.5.2當培養(yǎng)基的污染是以這種曲線圖時，說明污染僅僅發(fā)生在灌裝試驗的初期，污染可能來自于生產(chǎn)過程中所使用的灌裝設(shè)備〔移動儲罐、輸液管路、灌裝針頭、洗塞機〕，在灌裝過程中污染物被培養(yǎng)基溶液沖洗掉，灌裝到培養(yǎng)基中，在后續(xù)的灌裝過程中整個系統(tǒng)中不存在污染物。15.5.3當培養(yǎng)基污染率是以這種曲線圖時，只出現(xiàn)一個尖峰時，說明只是在短時段的一些灌裝培養(yǎng)基被污染，可能與灌裝過程中不正確操作或干擾導致的污染有關(guān)，必須知道被污染產(chǎn)品灌裝的準確時間，以及當時所實施的干擾措施〔灌裝操作過程的錄像是非常有用的〕，比擬容易調(diào)查到污染的原因。15.5.4當培養(yǎng)基污染率是以這種曲線圖時，可能是由*個干擾措施造成的，該污染可能是灌裝過程中的灌裝管線受到了污染，可能是更換灌裝針頭或重新調(diào)試裝量引起的污染，導致微生物持續(xù)繁殖。15.6培養(yǎng)基模擬灌裝失效15.6.1培養(yǎng)基模擬灌裝試驗結(jié)果被認作無效的情況不可以頻繁發(fā)生。更不能直接將失敗的培養(yǎng)基灌裝結(jié)果視為無效。15.6.3在符合明確的書面規(guī)程要求的情況下才能做出試驗無效的判定，此時，要給出支持文件對無效的原因充分說明理由，并且在實際生產(chǎn)中遇到類似情況時也要同樣處理。失效不等于無測試。如果有不可承受的情況發(fā)生，最好先停頓培養(yǎng)基灌裝，再判斷是否是失效。以下是可能造成培養(yǎng)基模擬灌裝失效結(jié)果的問題：培養(yǎng)基促生長試驗失敗。在無菌生產(chǎn)區(qū)域的物理條件發(fā)生問題(例如斷電、HEPA發(fā)生泄漏)。15.6.4.3培養(yǎng)基灌裝過程中一些違反規(guī)程的操作，這些操作可能造成批生產(chǎn)中止/報廢。15.6.4.4培養(yǎng)基灌裝可能因為上述的任何一個或所有類似其他原因造成失效,這些問題可能造成灌裝的中止或失效。但是，培養(yǎng)基灌裝中止的事件需要有詳細的說明記錄。16環(huán)境監(jiān)控和微生物限度控制16.1制定培養(yǎng)基灌裝過程的微生物負荷的監(jiān)控方案，便于偏差調(diào)查，確定給產(chǎn)品構(gòu)成最大風險的位置作為關(guān)鍵監(jiān)控點：產(chǎn)品暴露位置、直接接觸外表、人員風險點、瓶子裸露區(qū)、灌裝區(qū)域、塞、蓋裸露區(qū)。按實際生產(chǎn)選擇適宜的監(jiān)測方法：空氣浮游菌、沉降菌、接觸碟/棉簽法，合理制定控制標準，表達全面監(jiān)控和動態(tài)監(jiān)控。16.2無菌環(huán)境控制與監(jiān)測16.2.1浮游菌監(jiān)測測試狀態(tài)：測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。動態(tài)監(jiān)控在生產(chǎn)過程中進展。16.2.2沉降菌監(jiān)測測試狀態(tài)：測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。動態(tài)監(jiān)控在生產(chǎn)過程中進展。16.2.3手指菌檢測16.2.3.1凈化間操作人員手指菌檢測方法是：讓被檢者伸出左手和右手，分別將手指頭與平皿呈30o的角度，輕輕按在平皿培養(yǎng)基上，不得只按指尖。取樣后加蓋，用記號筆寫上。16.2.3.2手指菌檢測時，力求反映真實情況，照顧到各種人員，取樣時間定在手消毒后工作20—30min的時間段取樣，不要在操作人員剛剛進展手消毒后取樣。16.2.3.3檢驗后要對部位消毒處理。16.2.4干凈服接觸檢測16.2.4.1灌裝室操作人員干凈服檢測方法是：讓被檢者伸出手臂，分別將衣袖和胸前干凈服輕輕按在平皿培養(yǎng)基上，取樣后加蓋，用記號筆寫上。在生產(chǎn)完畢后進展，取樣后要對取樣部位單獨清洗保證沒有培養(yǎng)基遺留。16.2.4.2干凈服接觸檢測時，力求反映真實情況，照顧到各種人員，灌裝室的所有工作人員均應(yīng)取樣。監(jiān)測工程檢測合格標準監(jiān)測點空氣浮游菌監(jiān)測A級環(huán)境的測試標準＜1個/m3；B級環(huán)境的測試標準≤10個/m3；C級環(huán)境的測試標準≤100個/m3；灌裝間沉降菌監(jiān)測A級環(huán)境的測試標準＜1個/皿；B級環(huán)境的測試標準≤5個/皿；C級環(huán)境的測試標準≤50個/皿，灌裝間手指菌檢測A級環(huán)境的測試合格標準＜1個；B級環(huán)境的測試合格標準≤5個，為合格。灌裝間干凈服接觸檢測A級環(huán)境的測試合格標準＜1個；B級環(huán)境的測試合格標準≤5個；為合格。灌裝間17清場與清潔培養(yǎng)基灌裝完畢后要進展徹底的清場，以免對環(huán)境產(chǎn)生污染，制定清潔規(guī)程進展清潔，清潔區(qū)域包括：無菌生產(chǎn)區(qū)域、管道系統(tǒng)過程中的培養(yǎng)基泄漏處理、培養(yǎng)基的撤出和報廢，培養(yǎng)基灌裝過程、灌裝前不得成心設(shè)計不具代表性的大清場，采取措施保證驗證不能對生產(chǎn)造成不良影響。18培養(yǎng)基灌裝過程監(jiān)控記錄18.1文件記錄包括：過程控制檢測和實驗室檢測結(jié)果；環(huán)境和人員監(jiān)測結(jié)果；設(shè)備功能〔設(shè)備使用記錄，過濾器完整性測試〕；操作過程記錄；人員干擾操作、偏差、中斷等發(fā)生時間和持續(xù)時間；培養(yǎng)基報廢記錄：生產(chǎn)線清場記錄等。18.2QA人員觀察：整個培養(yǎng)基灌裝過程要有質(zhì)量保證部全程觀察；所有培養(yǎng)基按時間順序進展標記，便于一旦有污染時追逐發(fā)生時間段；灌裝過程任何的干擾行為，質(zhì)量監(jiān)視員要進展詳細記錄，以便識別可能的污染來源。19偏差調(diào)查19.1檢查所有培養(yǎng)基無菌灌裝用物品的滅菌設(shè)備的驗證資料及滅菌記錄。19.2檢查培養(yǎng)基模擬灌裝時的環(huán)境監(jiān)控資料，包括空氣懸浮粒子、浮游菌、沉降菌、外表微生物及操作人員的衛(wèi)生監(jiān)測資料。19.3將培養(yǎng)基中污染菌和環(huán)境監(jiān)測時所監(jiān)測到的微生物逐一鑒定，并比擬各個污染菌彼此間的相關(guān)性。19.4檢查相關(guān)產(chǎn)品無菌試驗結(jié)果呈陽性的歷史資料，看其污染菌與培養(yǎng)基模擬灌裝驗證試驗中的污染菌是否一致。19.5檢查以往的培養(yǎng)基模擬灌裝資料，看其中的污染菌是否符合常規(guī)。19.6檢查培養(yǎng)基灌裝滴眼劑瓶、塞、蓋的完好性。19.7檢查培養(yǎng)基模擬灌裝時控制區(qū)的溫、濕度和壓差記錄，是否符合常規(guī)。19.8檢查培養(yǎng)基模擬灌裝時的維修和清潔記錄。19.9檢查培養(yǎng)基模擬灌裝時的批生產(chǎn)記錄和設(shè)備運行記錄。20糾編措施20.1增加培養(yǎng)基的灌裝數(shù)量和環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)以查明污染源。20.2加強無菌生產(chǎn)環(huán)境的清潔和消毒措施。20.3增加灌裝前靜態(tài)下的環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)以檢查無菌環(huán)境條件的可靠性。20.4用培養(yǎng)基模擬灌裝不合格品的污染菌對消毒劑進展挑戰(zhàn)性試驗，以檢查污染菌是否對消毒劑有耐受性。20.5分別于灌裝前、灌裝時及灌裝后，增加對操作人員的衛(wèi)生監(jiān)控。20.6增加培養(yǎng)基模擬灌裝的批次，以檢查所出現(xiàn)的偏差是否具有偶然性。21異常情況處理程序培養(yǎng)基無菌灌裝確認過程中，嚴格按照工序標準操作規(guī)程、衛(wèi)生清潔規(guī)程、取樣規(guī)程、檢驗規(guī)程和質(zhì)量標準根本驗證方案進展操作。出現(xiàn)培養(yǎng)基無菌灌裝不合格品數(shù)量不符合標準的結(jié)果時，要按以下程序進展處理：21.1培養(yǎng)基無菌灌裝失敗原因進展分析21.1.1生產(chǎn)環(huán)境的監(jiān)控數(shù)據(jù)進展評估，包含環(huán)境沉降菌、空氣浮游菌、手指菌、干凈服的檢測結(jié)果進展分析。21.1.2對配制過程中使用的注射用水微生物的分析。21.1.3消毒劑的配制檢查：查看消毒劑的配制及使用記錄，對剩余的消毒劑進展消毒效果檢測。21.1.4對灌裝過程中所使用的所有設(shè)備：干熱滅菌柜、濕熱滅菌柜、洗瓶機、洗塞、蓋機的滅菌程序和滅菌記錄進展分析。21.1.5對灌裝過程中使用的過濾器的完整性試驗進展結(jié)果分析。假設(shè)不合格原因?qū)購S房設(shè)施、設(shè)備、滅菌系統(tǒng)和人員操作等方面的原因，及時報驗證領(lǐng)導小組，調(diào)整或維修系統(tǒng)運行參數(shù)或?qū)ο到y(tǒng)進展處理。21.2假設(shè)不合格原因不是上述原因造成的，則重新進展培養(yǎng)基模擬灌裝試驗，灌裝批次增加至5次，灌裝批量增加至原批量的1倍。21.3取樣時增加取樣數(shù)量和取樣頻次，并在所記錄瓶號時間的前后增加取樣數(shù)量和頻次，進展對照檢測，以確定不合格原因。21.4出現(xiàn)偏差，填寫設(shè)備驗證偏差處理單，報驗證委員會批準。22變更驗證方案需報驗證委員會審核批準，方案一經(jīng)批準要嚴格按照方案規(guī)定的容進展，假設(shè)因特殊原因，確實需要變更，要填寫驗證方案變更申請書，報驗證委員會批準。23擬訂再驗證周期23.1培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的頻率初始驗證：每班次連續(xù)進展3批合格試驗。隨后每半年針對不同班次/工藝進展一次再驗證。23.1.3所有日常操作人員每年都必須參加至少一次培養(yǎng)基模擬灌裝驗證。23.2空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，要重復(fù)進展培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。培養(yǎng)基模擬灌裝測試的頻率影響無菌灌裝過程中無菌保證水平的重大變更，需要進展培養(yǎng)基模擬灌裝重大變更的判斷,如：灌裝層流改造。23.2.2塞、蓋進料裝置變更。終端無菌過濾器改變位置。滅菌程序變更。24驗證結(jié)果評定與結(jié)論生產(chǎn)部負責收集各項驗證、試驗結(jié)果記錄，根據(jù)驗證、試驗結(jié)果起草驗證報告，報驗證領(lǐng)導小組。驗證領(lǐng)導小組負責對驗證結(jié)果進展綜合評審，做出驗證結(jié)論，發(fā)放驗證證書，確認培養(yǎng)基模擬灌裝再驗證周期。對驗證結(jié)果的評審要包括：24.1驗證試驗是否有遺漏。24.2驗證實施過程中對驗證方案有無修改，修改原因、依據(jù)是否經(jīng)過批準。24.3驗證記錄是否完整。24.4驗證試驗結(jié)果是否符合標準要求，偏差及對偏差的說明是否合理，是否需要進一步補充試驗。24.5對驗證進展綜合評定給出驗證結(jié)論。附錄1：人員培訓崗位培訓容考核成績備注配制組干凈區(qū)更衣更鞋標準操作干凈區(qū)工作人員的行為規(guī)微生物、清潔、消毒、滅菌知識無菌培養(yǎng)基模擬灌裝實驗容培養(yǎng)基和微生物生長繁殖的相關(guān)知識灌裝組干凈區(qū)更衣更鞋標準操作干凈區(qū)工作人員的行為規(guī)微生物、清潔、消毒、滅菌知識無菌培養(yǎng)基模擬灌裝實驗容培養(yǎng)基和微生物生長繁殖的相關(guān)知識灌裝崗位操作規(guī)程培訓洗瓶洗塞組干凈區(qū)更衣更鞋標準操作干凈區(qū)工作人員的行為規(guī)微生物、清潔、消毒、滅菌知識無菌培養(yǎng)基模擬灌裝實驗容培養(yǎng)基和微生物生長繁殖的相關(guān)知識清洗滅菌組干凈區(qū)更衣更鞋標準操作干凈區(qū)工作人員的行為規(guī)微生物、清潔、消毒、滅菌知識無菌培養(yǎng)基模擬灌裝實驗容培養(yǎng)基和微生物生長繁殖的相關(guān)知識附錄2：系統(tǒng)驗證及設(shè)備驗證確認序號驗證文件文件編號驗證日期驗證人驗證結(jié)果附錄3：純化水檢驗報告單崗位檢驗工程批號批號批號純化水pH值電導率氨硝酸鹽亞硝酸鹽易氧化物不揮發(fā)物重金屬微生物限度附錄4：注射用水檢驗報告單注射用水pH值電導率氨硝酸鹽亞硝酸鹽總有機碳不揮發(fā)物重金屬細菌毒素微生物限度附錄5：環(huán)境監(jiān)測報告單環(huán)境監(jiān)測結(jié)果年月日房間名稱沉降菌浮游菌塵埃粒子附錄6：胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基適應(yīng)性實驗結(jié)果微生物實驗條件枯草芽孢桿菌金黃色葡萄球菌白色念珠菌30～35℃培養(yǎng)7天20～25℃培養(yǎng)7天結(jié)論：附錄7：酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基靈敏度檢查結(jié)果菌種名稱靈敏度檢查結(jié)果記錄存檔處金黃色葡萄球菌銅綠假單胞菌枯草芽孢桿菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉菌本地菌〔沉降菌〕結(jié)論附錄8：培養(yǎng)基及包材確認品名：培養(yǎng)基模擬灌裝批號：物料名稱批號檢驗報告單理論投料量實際投料量品名：培養(yǎng)基模擬灌裝批號：物料名稱批號檢驗報告單理論投料量實際投料量品名：培養(yǎng)基模擬灌裝批號：物料名稱批號檢驗報告單理論投料量實際投料量附錄：9最差條件確認最差條件模擬方式處理方式頻次確認狀態(tài)增加灌裝前已滅菌器具裝卸次數(shù)和轉(zhuǎn)運時間轉(zhuǎn)運時比正常時間加5分鐘一次延長培養(yǎng)基溶液在移動儲罐中的存儲時間延長30min。先將培養(yǎng)基溶液在移動儲罐中停放30分一次灌裝管線在安裝前暴露在無菌環(huán)境下20min——一次倒瓶操作人員進展倒瓶的移出操作十次缺塞操作人員進展加塞操作十次增加膠塞添加的次數(shù)——五次玻璃瓶屢次破碎操作人員進展碎瓶玻璃屑的移出清理操作三次灌裝針頭灌裝異常