酶的特性實(shí)驗(yàn)

酶的特性實(shí)驗(yàn)酶的特性實(shí)驗(yàn)一、目的酶是生物催化劑，生物體內(nèi)化學(xué)反映基本上都是在酶的催化下進(jìn)行的。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)理解酶催化的特異性以及pH、溫度、克制劑和激活劑對(duì)酶活力的影響，對(duì)于進(jìn)一步掌握代謝反映及其調(diào)控機(jī)理含有十分重要的意義。二、實(shí)驗(yàn)原理酶與普通催化劑最重要的區(qū)別之一是酶含有高度特異（專一）性，即一種酶只能對(duì)一種底物或一類底物（這類底物在構(gòu)造上普通含有相似的化學(xué)鍵）起催化作用，對(duì)其它底物無(wú)催化反映。例如，淀粉酶和蔗糖酶即使都是催化糖苷鍵的水解，但是淀粉酶只對(duì)淀粉起作用，蔗糖酶只水解蔗糖。還原糖產(chǎn)物可用班乃德試劑鑒定。通過(guò)比較淀粉酶在不同pH、不同溫度以及有無(wú)克制劑或激活劑時(shí)水解淀粉的差別，闡明這些環(huán)境因素與酶活性的關(guān)系。唾液淀粉酶對(duì)淀粉的水解過(guò)程以下：淀粉藍(lán)色糊精紅色糊精無(wú)色糊精麥芽糖與碘反映：藍(lán)色藍(lán)紫色紅色無(wú)色無(wú)色三、試劑和器材（一）、試劑1、2%蔗糖溶液：用分析純蔗糖新鮮配制。2、0.5%淀粉溶液（二）、材料(1)唾液淀粉酶溶液：先用蒸餾水漱口，再含10ml左右蒸餾水，輕輕漱動(dòng)，2分鐘后吐出收集在燒杯中，紗布過(guò)濾，即得清澈的唾液淀粉酶原液，根據(jù)酶活高低稀釋50倍，即為唾液淀粉酶溶液。(2)蔗糖酶溶液：取1g鮮酵母或干酵母放入研缽中，取蒸餾水12ml，分次加入，邊加邊研磨約10鐘，用漏斗加濾紙過(guò)濾，濾液加2倍蒸餾水稀釋。（三）、儀器恒溫水?。?7℃）、沸水?。?00℃）、冰?。?℃）、試管、吸管、2ml、5ml、量筒、比色板、膠頭滴管等。四、操作辦法（一）、酶催化的專一性取6支干凈試管，按下表操作：操作項(xiàng)目管號(hào)1234560.5%淀粉(ml)1100102%蔗糖(ml)001101稀釋唾液(ml)101000蔗糖酶溶液(ml)010100蒸餾水(ml)000011酶促水解搖勻，37℃水浴中保溫10-15min班乃德試劑(ml)222222反映搖勻，沸水浴中加熱5～10min成果（顏色）（二）、溫度對(duì)酶活力的影響取3支試管，按下表操作：操作項(xiàng)目管號(hào)1230.5%淀粉溶液(ml)222稀釋唾液(ml)111溫度預(yù)解決5min（℃）037沸水浴成果搖勻，保持各自溫度繼續(xù)反映，5分鐘后每隔1分鐘從第2號(hào)管吸取1滴反映液于比色板上，用碘液檢查反映進(jìn)行狀況，直至反映液不再變色（只有碘液的顏色），立刻取出全部試管，流水冷卻2min，向各管加入碘液2滴，混勻。觀察并統(tǒng)計(jì)各管反映現(xiàn)象，解釋之。（三）、pH對(duì)酶活力的影響取3支試管，按下表操作：操作項(xiàng)目管號(hào)123pH5.0磷酸緩沖液(ml)300pH6.8磷酸緩沖液(ml)030pH8.0磷酸緩沖液(ml)0031%淀粉溶液(ml)111稀釋唾液(ml)111成果（顏色）搖勻，置37℃水浴中繼續(xù)反映2分鐘，每隔1分鐘從第2號(hào)管中取出1滴反映液于比色板上，加碘液檢查反映進(jìn)行狀況，直至反映液不再變色，即可停止反映，取出全部試管，并向個(gè)試管內(nèi)加入2滴碘液，充足混勻，檢查并統(tǒng)計(jì)各管顏色，解釋PH對(duì)酶活性的影響。（四）、激活劑和克制劑對(duì)酶活性的影響取3支試管，按下表操作：操作項(xiàng)目管號(hào)1231%CuSO4(ml)1001%NaCl(ml)010蒸餾水(ml)001稀釋唾液(ml)1110.1%淀粉溶液(ml)222成果（顏色）搖勻，置37℃水浴反映1min左右即可用碘液檢查2號(hào)試管淀粉水解程度，待2號(hào)試管的反映液不再變色時(shí)取出全部試管，并向各管內(nèi)加入碘液1-2滴，觀察并統(tǒng)計(jì)各管顏色，解釋成果。五、注意事項(xiàng)（1）各人唾液中淀粉酶活力不同，因此實(shí)驗(yàn)2、3、4應(yīng)隨時(shí)檢查反映進(jìn)行狀況。如反映進(jìn)行得太快，應(yīng)