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文檔簡(jiǎn)介
第2章
細(xì)胞工程細(xì)胞工程
細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)等多學(xué)科的原理和方法,通過(guò)細(xì)胞器、細(xì)胞或組織水平上的操作,有目的地獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個(gè)體或其產(chǎn)品的一門(mén)綜合性生物工程。1.原理方法:________________________________;2.操作水平:________________________________;3.目的:____________________________________;4.分類(lèi):____________________________________;細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)細(xì)胞器、細(xì)胞或組織水平獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個(gè)體或其產(chǎn)品植物細(xì)胞工程、動(dòng)物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程的發(fā)展歷程1.
1902年,哈伯蘭特(G.Haberlandt,1854-1945)提出了細(xì)胞全能性的理論,但相關(guān)的實(shí)驗(yàn)嘗試沒(méi)有成功。2.
1958年,斯圖爾德(E.C.Steward,1904-1993)等發(fā)現(xiàn)胡蘿卜的體細(xì)胞可以分化為胚,為細(xì)胞全能性理論提供了強(qiáng)有力的支持。3.
1960年,科金(E.C.Cocking,1931-)用真菌的纖維素酶分解番茄根的細(xì)胞壁,成功獲得了原生質(zhì)體。4.1971年,卡爾森(P.S.Carlson,1944-2017)誘導(dǎo)煙草種間原生質(zhì)體融合,獲得了第一株體細(xì)胞種間雜種植株。1964年,古哈(S.Guha,1938-2007)等在培養(yǎng)毛曼陀羅的花藥時(shí),首次得到了由花藥中的花粉粒發(fā)育而來(lái)的胚。5.
1974年,土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒被發(fā)現(xiàn)。之后,該質(zhì)粒應(yīng)用于植物分子生物學(xué)領(lǐng)域促進(jìn)了植物細(xì)胞工程與分子生物學(xué)技術(shù)的緊密結(jié)合。動(dòng)物細(xì)胞工程(含胚胎工程)1.1890年,希普(W.Heape,1855-1929)將安哥拉兔的胚胎移入比利時(shí)兔的輸卵管內(nèi),得到了兩只安哥拉兔,這是世界上胚胎移植成功的首例。2.1907年,哈里森(R.G.Harrison,1870-1959)用一滴淋巴液成功培養(yǎng)了蝌蚪的神經(jīng)元,首創(chuàng)了動(dòng)物組織體外培養(yǎng)法。3.1951年,張明覺(jué)(1908-1991)等發(fā)現(xiàn)了哺乳動(dòng)物精子的獲能現(xiàn)象。4.1958年,格登(J.Gurdon,1933-)用非洲爪蟾進(jìn)行體細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn),成功培育出性成熟個(gè)體。同一時(shí)期,我國(guó)科學(xué)家童第周(1902-1979)等開(kāi)展了魚(yú)類(lèi)細(xì)胞核移植工作。5.1959年,試管家兔誕生。之后,多種試管動(dòng)物相繼出生。1975年,米爾斯坦(C.Milstein,1927-2002)和科勒(G.Kohler,1946-1995)等創(chuàng)立了單克隆抗體技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞工程的發(fā)展歷程6.1975年,米爾斯坦(C.Milstein,1927-2002)和科勒(G.Kohler,1946-1995)等創(chuàng)立了單克隆抗體技術(shù)。7.1978年,小鼠的桑甚胚被成功分割。次年,科學(xué)家分割綿羊胚胎獲得了同卵美羊。8.1996年,世界上第一只體細(xì)胞克隆羊多莉在英國(guó)誕生。隨后多種克隆動(dòng)物相繼問(wèn)世。9.1981年,埃文斯(M.J.Evans,1941-)等成功分離和培養(yǎng)了小鼠的胚胎干細(xì)胞。10.2006年,山中伸彌(S.Yamanaka,1962-)等獲得了誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。我國(guó)科學(xué)家用這種細(xì)胞培育出了小鼠。11.2014年,世界上第一個(gè)用單細(xì)胞基因組測(cè)序進(jìn)行遺傳病篩查的試管嬰兒在我國(guó)誕生。12.2017年,我國(guó)科學(xué)家首次培育了體細(xì)胞克隆猴。動(dòng)物細(xì)胞工程的發(fā)展歷程細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)單克隆抗體技術(shù)核移植
第1節(jié)
植物細(xì)胞工程蘭花(學(xué)名:Cymbidiumssp.)單子葉植物綱、蘭科、蘭屬植物通稱(chēng)高貴典雅蘭花種子通常發(fā)育不全,自然條件下萌發(fā)率極低。傳統(tǒng)分株繁殖的方法又存在繁殖周期長(zhǎng)、繁殖率低等問(wèn)題如何能讓名貴的蘭花大量、快速地繁殖,從而走入尋常百姓家呢?
一植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)ZHIWUXIBAOGONGCHENGDEJIBENJISHU一、細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)1.細(xì)胞的全能性:
細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。2.具有全能性的原因:生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)。3.體現(xiàn)細(xì)胞全能性的標(biāo)志:細(xì)胞→完整個(gè)體或其他各種細(xì)胞4.在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,并不是所有的細(xì)胞都表現(xiàn)全能性的原因:基因在特定時(shí)間、空間條件下選擇性表達(dá)細(xì)胞全能性實(shí)例:——多肉進(jìn)行葉插繁殖1.選取多肉上健康、飽滿的葉片。2.用剪刀切下整片葉片,切口要平滑、整齊。也可以直接用手輕輕掰下葉片。3.平躺放在沙床上,葉片間隔相聚2~3厘米。4.葉片切口不要有碰臟,擺放通風(fēng)處2~3天,晾干。5.待葉片晾干后移至半陰處養(yǎng)護(hù)。6.約2~3周后生根,或從葉基處長(zhǎng)出不定芽。7.葉插成功5.實(shí)例
(1)表現(xiàn)出全能性的例子:(2)未表現(xiàn)出全能性的例子:①利用菊花莖段培養(yǎng)獲得試管苗;②利用胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)獲得胡蘿卜幼苗;③芽原基的細(xì)胞只能發(fā)育為芽,葉原基的細(xì)胞只能發(fā)育為葉;④受精卵發(fā)育成個(gè)體;⑤一粒玉米種子長(zhǎng)成一棵植株;⑥神經(jīng)干細(xì)胞分化形成各類(lèi)神經(jīng)細(xì)胞;⑦蜜蜂的孤雌生殖中,卵細(xì)胞直接發(fā)育成雄蜂;⑧通過(guò)花藥離體培養(yǎng),獲得單倍體幼苗;⑨胚胎干細(xì)胞可分化發(fā)育成為各種組織器官的細(xì)胞;⑩造血干細(xì)胞可分化形成多種血細(xì)胞;*多莉羊的誕生有沒(méi)有表現(xiàn)出動(dòng)物細(xì)胞的全能性?①②④⑦⑧⑨③⑤⑥⑩只表現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性6.全能性大小比較(1)受精卵、體細(xì)胞、生殖細(xì)胞________________________________________(2)分化程度高的細(xì)胞、分化程度低的細(xì)胞________________________________________(3)分裂能力強(qiáng)的細(xì)胞、分裂能力弱的細(xì)胞
________________________________________(4)植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞________________________________________(5)幼嫩的細(xì)胞、衰老的細(xì)胞________________________________________分化程度低的細(xì)胞>分化程度高的細(xì)胞分裂能力強(qiáng)的細(xì)胞>分裂能力弱的細(xì)胞受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞幼嫩的細(xì)胞>衰老的細(xì)胞(1)離體狀態(tài)(2)種類(lèi)齊全、比例適合的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素等(3)適宜的外界條件7.細(xì)胞表現(xiàn)全能性的條件
植物組織培養(yǎng)是指在無(wú)菌條件下,將離體的植物的器官、組織、細(xì)胞等,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。(1)概念外植體如:莖尖、根尖無(wú)性生殖有絲分裂植物細(xì)胞的全能性生殖方式:分裂方式:原理:1.植物組織培養(yǎng)二.植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)(2)植物組織培養(yǎng)的條件:1.植物組織培養(yǎng)二.植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)離體無(wú)菌培養(yǎng)基適宜的外界條件培養(yǎng)基:①種類(lèi)齊全、比例適合的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
②植物激素(主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素
結(jié)果比值高(>1)比值低(<1)比值適中(=1)有利于根的分化,抑制芽的形成有利于芽的分化,抑制根的形成促進(jìn)愈傷組織的形成蔗糖:提供能量、調(diào)節(jié)滲透壓。1.植物組織培養(yǎng)二.植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)(3)一般過(guò)程:外植體
愈傷組織
根、芽等
試管苗
完整植株脫分化再分化馴化移栽1.植物組織培養(yǎng)二.植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)(2)一般過(guò)程外植體
愈傷組織
根、芽等
試管苗
完整植株脫分化再分化馴化移栽A.外植體:離體的植物器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體。
植物的莖尖、幼嫩的葉片、花藥是常用的外植體。B.脫分化:已經(jīng)分化的細(xì)胞,經(jīng)過(guò)誘導(dǎo),失去其特有的結(jié)構(gòu)和功
能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過(guò)程。
思考:若培養(yǎng)物取自植物的幼莖、葉片等含有葉綠體的部位,愈傷組織中是否會(huì)含有葉綠體?為什么?
愈傷組織中不含有葉綠體;
培養(yǎng)物經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后,失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞,因此,愈傷組織中不含有葉綠體愈傷組織代謝類(lèi)型?異養(yǎng)需氧型1.植物組織培養(yǎng)二.植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)(2)一般過(guò)程外植體
愈傷組織
根、芽等
試管苗
完整植株脫分化再分化馴化移栽C.愈傷組織:細(xì)胞排列疏松且無(wú)規(guī)則、高度液泡化、呈無(wú)定形狀
態(tài)的薄壁細(xì)胞團(tuán)。注意:無(wú)葉綠體,可進(jìn)行有絲分裂1.植物組織培養(yǎng)二.植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)(2)一般過(guò)程外植體
愈傷組織
根、芽等
試管苗
完整植株脫分化再分化馴化移栽D.再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新分化
成胚狀體、根、芽等,這個(gè)過(guò)程叫做再分化。脫分化過(guò)程中涉及的生命活動(dòng):_________________________________只有細(xì)胞增殖(有絲分裂),沒(méi)有細(xì)胞分化再分化過(guò)程中涉及的生命活動(dòng):_________________________________既有細(xì)胞增殖(有絲分裂),又有細(xì)胞分化愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則是一種高度液泡化的無(wú)定形狀態(tài)的細(xì)胞。愈傷組織形成以后,如果在原來(lái)的培養(yǎng)基上續(xù)培養(yǎng),就會(huì)由于培養(yǎng)基中養(yǎng)分不足或有毒代謝產(chǎn)物的,導(dǎo)致愈傷組織生長(zhǎng)停止,甚至老化變黑乃至死亡。如果要愈傷組織續(xù)生長(zhǎng)增殖,必須定期地將它們分成小塊,接種到新鮮的培養(yǎng)基上,這樣愈傷組織就可以長(zhǎng)期保持旺盛的生長(zhǎng)。愈傷組織的再分化主要有兩種方式。一種是不定芽方式,就是在某些條件下,愈傷組織的細(xì)胞發(fā)生分化,形成不同的器官原基,再逐漸形成芽和根。另一種是胚狀體方式,就是由愈傷組織誘導(dǎo)分化出的具有胚芽、胚根、胚軸的類(lèi)似于胚的結(jié)構(gòu)。能夠產(chǎn)生胚狀體的愈傷組織常見(jiàn)于胡蘿卜、蘆筍、玉米和小麥等植物。小貼士胚狀體:離體培養(yǎng)條件下,沒(méi)有經(jīng)過(guò)受精過(guò)程,但是經(jīng)過(guò)了胚胎發(fā)育過(guò)程所形成的胚狀類(lèi)似物(類(lèi)似于自然種子胚(合子胚)的結(jié)構(gòu),),因而統(tǒng)稱(chēng)為胚狀體。根、芽植物體脫分化再分化培養(yǎng)條件:①無(wú)菌②營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)③適宜環(huán)境條件(溫度、PH、光等)④植物激素:
細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素2.
植物組織培養(yǎng)技術(shù)的一般過(guò)程細(xì)胞排列疏松不規(guī)則,高度液泡化,呈不定形狀態(tài)的薄壁組織團(tuán)塊愈傷組織離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體)愈傷組織重新分化為芽、根等器官失去特有結(jié)構(gòu)和功能轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞特點(diǎn):子代與親代性狀高度遺傳菊花的組織培養(yǎng)1.實(shí)驗(yàn)原理①植物細(xì)胞一般具有______;全能性②在一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下,已經(jīng)分化的細(xì)胞可以經(jīng)過(guò)______和______,形成________,長(zhǎng)出_________,進(jìn)而發(fā)育成__________;脫分化再分化胚狀體芽和根完整的植株③植物激素中______和__________是啟動(dòng)_________、______和______的關(guān)鍵激素,它們的_____、_____等都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向;生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂脫分化再分化濃度比例2.材料用具①外植體:幼嫩的菊花莖段(分化程度低,容易誘導(dǎo)形成愈傷組織)②體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精:對(duì)手、超凈工作臺(tái)、外植體進(jìn)行消毒③質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液:對(duì)外植體進(jìn)行消毒④無(wú)菌水:清洗外植體⑤培養(yǎng)基(參見(jiàn)本書(shū)附錄1)包括無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分(水和無(wú)機(jī)鹽)、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分(蔗糖、氨基酸、維生素等)、特定濃度和比例的激素(主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素);蔗糖的作用:提供能量,調(diào)節(jié)滲透壓滅菌方法為:濕熱滅菌法植物組織培養(yǎng)技術(shù)案例:菊花的組織培養(yǎng)
常用的培養(yǎng)基是____________,主要成分包括:
①____________:N、P、S、K、Ca、Mg等。
②____________:B、Mn、Cl、Zn、Fe、Mo、I、Co等。
③有機(jī)物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、以及________(葡萄糖/蔗糖)等。MS培養(yǎng)基大量元素微量元素蔗糖配制過(guò)程:1.配制各種母液。大量元素濃縮
倍,微量元素濃縮
倍2.培養(yǎng)基ph:
。10100偏中性(5.8左右)3.方法步驟(1)消毒①雙手和超凈工作臺(tái)臺(tái)面:用酒精擦拭②外植體:
流水沖洗→酒精消毒30s→立即用無(wú)菌水清洗2~3次→次氯酸鈉溶液處理30min→立即用無(wú)菌水清洗2~3次。(2)外植體切段
將消過(guò)毒的外植體置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿中→用無(wú)菌濾紙吸去表面的水分→用解剖刀將外植體切成0.5~1cm長(zhǎng)的小段。既要考慮消毒效果,又要考慮植物耐受力(3)接種外植體
在酒精燈火焰旁,將外植體的1/3~1/2插入誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基中。用封口膜或瓶蓋封蓋瓶口,并在培養(yǎng)瓶上作好標(biāo)記。注意:接種時(shí)注意外植體的方向,不要倒插?。?)脫分化
將接種了外植體的錐形瓶或植物組織培養(yǎng)瓶置于18~22℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在培養(yǎng)過(guò)程中,定期觀察和記錄愈傷組織的生長(zhǎng)情況。注意:該過(guò)程一般不需要光照形態(tài)學(xué)下端插入有光易形成維管組織,不易形成愈傷組織。(5)再分化
培養(yǎng)15~20d后,將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上→長(zhǎng)出芽后→將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上,進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗。注意:注意順序,先誘導(dǎo)生芽,再誘導(dǎo)生根;該過(guò)程每日需要給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照?。?)移栽培養(yǎng)
移栽前先打開(kāi)封口膜或瓶蓋,讓試管苗在培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)幾日。用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基后,將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中,待其長(zhǎng)壯后再移栽入土。每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況,適時(shí)澆水、施肥,直至開(kāi)花。芽發(fā)育成葉,葉肉細(xì)胞中葉綠素的合成需要光照思考:整個(gè)過(guò)程中使用的培養(yǎng)基中,生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比值大小是如何變化的?比值適中→比值低→比值高(1)植物體的任何細(xì)胞都具有全能性,也都能表現(xiàn)出全能性(
)(2)脫分化和再分化是植物組織培養(yǎng)的重要過(guò)程(
)(3)在植物組織培養(yǎng)時(shí),對(duì)外植體要進(jìn)行滅菌處理(
)(4)誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基和誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基完全一樣(
)判斷正誤×√××(1)為什么要強(qiáng)調(diào)所用器械的滅菌和實(shí)驗(yàn)人員的無(wú)菌操作?提示避免雜菌與培養(yǎng)物競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng),且有些雜菌會(huì)危害培養(yǎng)物的生長(zhǎng)。(2)高度分化的細(xì)胞是如何啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的?提示需要在一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下。(3)在植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中,如何控制光照條件?提示脫分化過(guò)程中一般不需要光照,但是再分化過(guò)程中需要給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照。1.(2021·遼寧高二期中)下列有關(guān)菊花組織培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是A.對(duì)外植體需要消毒處理,對(duì)培養(yǎng)基需要高壓蒸汽滅菌處理B.產(chǎn)生愈傷組織是細(xì)胞脫分化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控C.要先誘導(dǎo)生根后再轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽培養(yǎng)基上進(jìn)一步形成試管苗D.幼苗要先移植到消過(guò)毒的蛭石或者珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間典題應(yīng)用及時(shí)反饋知識(shí)落實(shí)√解析將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上培養(yǎng),長(zhǎng)出芽后再誘導(dǎo)生根,C錯(cuò)誤。2.(2021·合肥檢測(cè))植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理、培養(yǎng)基本過(guò)程的順序及誘導(dǎo)的植物激素分別包括①植物細(xì)胞的全能性②離體的植物器官、組織或細(xì)胞③根、芽④生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素⑤生長(zhǎng)素和乙烯⑥愈傷組織⑦再分化⑧脫分化⑨完整植株A.①、②⑦⑥⑧③⑨、④B.①、②⑧⑥⑦③⑨、④C.①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤D.①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤√問(wèn)題探討
20世紀(jì)60年代,科學(xué)家嘗試將番茄和馬鈴薯雜交,希望培育出一種地上結(jié)番茄、地下長(zhǎng)馬鈴薯的超級(jí)作物。討論:用傳統(tǒng)的有性雜交方法能得到雜種后代嗎?為什么?不能;因?yàn)閮煞N生物之間存在著生殖隔離;有沒(méi)有一種方法可以打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,獲得“番茄-馬鈴薯雜種植株”呢?嘗試用這兩種植物的體細(xì)胞進(jìn)行雜交1.你認(rèn)為兩個(gè)來(lái)自不同植物的體細(xì)胞完成融合,遇到的第一個(gè)障礙是什么?2.有沒(méi)有一種溫和的去壁方法呢?請(qǐng)思考:去細(xì)胞壁酶解法纖維素酶和果膠酶細(xì)胞壁阻礙著細(xì)胞間的雜交拓展:①原生質(zhì)體是指植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁后剩余的部分,包括細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。動(dòng)物細(xì)胞也可看做是原生質(zhì)體。②原生質(zhì)層是指成熟植物細(xì)胞的細(xì)胞膜、液泡膜和介于這兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì),包括細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、液泡膜。區(qū)分原生質(zhì)體與原生質(zhì)層:【注意】質(zhì)壁分離的“質(zhì)”指的是原生質(zhì)層。原生質(zhì)層三、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1.過(guò)程A細(xì)胞B細(xì)胞纖維素酶果膠酶1.去壁:酶解法正在融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁2.誘融物理法:化學(xué)法:電融合法、離心法聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等脫分化再分化移栽植物細(xì)胞融合植物組織培養(yǎng)雜種植株愈傷組織A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體移栽后的植株融合完成的標(biāo)志思考:1.獲得的所有細(xì)胞一定是需要的雜交細(xì)胞嗎?不一定;誘導(dǎo)融合后的產(chǎn)物有三類(lèi):①未融合的細(xì)胞②兩兩融合的細(xì)胞③多細(xì)胞融合體2.若只考慮兩兩融合,原生質(zhì)體A和原生質(zhì)體B可以形成幾種融合細(xì)胞?哪種融合細(xì)胞才是符合要求的?AAABBB篩選AB3.若A細(xì)胞具有2x條染色體,2個(gè)染色體組,基因型為Aabb。B細(xì)胞含有2y條染色體,2個(gè)染色體組,基因型為ccDd,則通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的新植株的染色體條數(shù):
;染色體組數(shù):
;基因型:
;屬于可遺傳變異類(lèi)型中的
。2x+2y4個(gè)AabbccDd染色體數(shù)目變異得到的雜種植株為_(kāi)___倍體理論上該植株可育嗎?四*異源四倍體可育,有同源染色體,同源染色體能聯(lián)會(huì),可形成配子兩親本染色體數(shù)之和兩親本染色體組數(shù)之和兩親本基因型之和2.植物體細(xì)胞雜交的概念:
植物體細(xì)胞雜交是指將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。3.原理:4.兩個(gè)標(biāo)志(1)植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志:再生出新的細(xì)胞壁(2)植物體細(xì)胞雜交完成的標(biāo)志:培育成新植物體5.實(shí)例:白菜—甘藍(lán)、普通小麥—長(zhǎng)穗偃麥草等。6.意義:打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,培育植物新品種。相關(guān)細(xì)胞器:高爾基體、線粒體體細(xì)胞雜交利用了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。(結(jié)構(gòu)特性)雜種細(xì)胞培育成植株利用了植物細(xì)胞的全能性。7.生殖方式:________8.分裂方式:________無(wú)性生殖有絲分裂識(shí)圖:數(shù)字代表過(guò)程,字母代表細(xì)胞、組織或植株①_______________a/b_____________②_______________c_______________③_______________d_______________④_______________e_______________⑤_______________f_______________①②③___________④⑤____________
去除細(xì)胞壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體間的融合正在融合的原生質(zhì)體再生出新的細(xì)胞壁雜種細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化雜種植株植物細(xì)胞融合植物組織培養(yǎng)思考:雜種植株包含兩個(gè)物種的全部遺傳物質(zhì),各種基因都包含在內(nèi),卻未按照人們的要求表現(xiàn)出親本所有的性狀,例如“番茄-馬鈴薯”并沒(méi)有地上結(jié)番茄,地下長(zhǎng)馬鈴薯,這是為什么?
生物體內(nèi)基因的表達(dá)不是孤立的,它們之間是相互調(diào)控、相互影響的,雜種植株的細(xì)胞中雖然具備兩個(gè)物種的遺傳物質(zhì),但這些遺傳物質(zhì)的表達(dá)相互干擾,它們不能像在原植株細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)有序表達(dá),因此不
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