生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題及參考答案(六)

生物化學(xué)試題及答案（14）第十四章

基因重組與基因工程

[測試題]一、名詞解釋：1.

基因工程（geneticengineering）。2.

接合作用(conjugation)。3.

轉(zhuǎn)化作用(transforation)。4.

轉(zhuǎn)導(dǎo)作用(transduction)。5.

轉(zhuǎn)座(transposition)。6.

轉(zhuǎn)座子(transposons)。7.

同源重組(homologousrecombination)。8.

基本重組(generalrecombination)。9.

DNA克?。―NAcloning）。10.

復(fù)制子(replicon)。11.

限制性核酸內(nèi)切酶(restrictionendonuclease)。12.

回文結(jié)構(gòu)（palindrome）。13.

配伍末端（compatibleend）。14.

目的DNA（targetDNA）。15.

互補(bǔ)DNA

(complementaryDNA；cDNA)。16.

克隆載體(cloningvector)。17.

表達(dá)載體(expressionvector)。18.

質(zhì)粒(plasmid)。19.

α—互補(bǔ)(alphacomplementation)。20.

基因組DNA文庫(genomicDNAlibrary)。21.

標(biāo)志補(bǔ)救(markerrescue)。22.

轉(zhuǎn)染（transfection）。23.

基因組DNA（genomicDNA）。24.

感受態(tài)細(xì)胞（competentcell）。25.

聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction)。26.

cDNA文庫(cDNAlibrary)。27.

保守性轉(zhuǎn)座(conservativetransposition)。28.

復(fù)制性轉(zhuǎn)座(duplicativetransposition)。29.

溶菌生長途徑(lysispathway)。30.

溶源生長途徑(lysogenicpathway)。二、填空題：31.

自然界的常見基因轉(zhuǎn)移方式有____、____、____、____。32.

不同DNA分子間發(fā)生的共價(jià)連接稱為____有____、____兩種方式。33.

某些基因可以從一個(gè)位置移動(dòng)到另一個(gè)位置，這些可移動(dòng)的DNA序列包括____和____。34.

由___和___介導(dǎo)的基因移位或重排稱為轉(zhuǎn)座。35.

反轉(zhuǎn)錄病毒整合酶可特異地識(shí)別．整合反轉(zhuǎn)錄病毒的cDNA的____，轉(zhuǎn)座酶可特異識(shí)別轉(zhuǎn)座子的____，發(fā)生特異性整合。36.

基因工程的載體必須具備的條件有____、____、____。37.

限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別的核苷酸序列的個(gè)數(shù)為____、____和____，其切口有____端和____端。38.

基因工程常用的載體DNA分子有____、____．和____。39.

一個(gè)完整的DNA克隆過程應(yīng)包括____、____、____、____、____。40.

目的基因獲取的途徑或來源有____、____、____、____。41.

基因工程過程中重組體直接篩選法的方式有____、____、____。42.

基因克隆的原核表達(dá)體系的E,coli表達(dá)體系的表達(dá)載體應(yīng)符合的標(biāo)準(zhǔn)有：____、____、____、____。43.

基因克隆真核生物表達(dá)體系常見的有____、____、____表達(dá)體系。44.

根據(jù)重組體DNA的性質(zhì)不同，將重組體DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的方式有____、____、____等。45.

M13噬菌體基因間隔區(qū)插入E,coli的一段調(diào)節(jié)基因及___的N端___個(gè)氨基酸殘基的編碼基因，其編碼產(chǎn)物為______的α片段，突變型lac\o""-E,coli可表達(dá)該酶的ω片段。當(dāng)宿主細(xì)胞與克隆載體同時(shí)表達(dá)兩個(gè)片段時(shí)，宿主細(xì)胞可使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物，即稱為____。46.

如果M13的外源基因被插入到lacZ基因內(nèi)，則在含有X—gal的培養(yǎng)基上生長時(shí)會(huì)出現(xiàn)____色菌落，如果在lacZ基因內(nèi)無外源基因插入，在同樣的條件下呈現(xiàn)____色菌落。47.

典型的插入序列是由____序列和一個(gè)____編碼基因構(gòu)成。48.

插入序列發(fā)生的轉(zhuǎn)座有____和____兩種形式。49.

當(dāng)細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí)，____就可以從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移到另一細(xì)胞（細(xì)菌），這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為____作用。50.

重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有____、____、____、____。三、選擇題：

A型題51.

關(guān)于接合作用正確的是A．與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí)，染色體DNA從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞（細(xì)菌）B．細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí)，某些較大質(zhì)粒DNA從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞（細(xì)菌）C．細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí)，噬菌體DNA從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞（細(xì)菌）D．細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí)，所有類型的質(zhì)粒DNA從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞（細(xì)菌）E．細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí)，所有類型的噬菌體DNA從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞（細(xì)菌）52.

下列那種方式保證了免疫球蛋白的多樣性？A．轉(zhuǎn)化

B．轉(zhuǎn)染

C．轉(zhuǎn)位

D．轉(zhuǎn)導(dǎo)

E．接合53.

微切割技術(shù)使目的基因可來源于下列那種物資？A．真核細(xì)胞染色體DNA

B．人工合成DNA．

C．CDNA

D．G—文庫

E．C—文庫54.

基因工程的特點(diǎn)是：A．在分子水平上操作，在分子水平上表達(dá)

B．在分子水平上操作，在細(xì)胞水平上表達(dá)C．在細(xì)胞水平上操作，在分子水平上表達(dá)

D．在細(xì)胞水平上操作，在細(xì)胞水平上表達(dá)E．以上均可以55.

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用的連接外源性DNA和載體DNA的酶是：A．DNA連接酶

B．DNA聚合酶Ⅰ

C．DNA聚合酶Ⅱ

D．DNA聚合酶Ⅲ

E．反轉(zhuǎn)錄酶56．用來鑒定DNA的技術(shù)是：A．Northern印跡

B．Southern印跡

C．Western印跡

D．親和層析

E．離子交換層析57．用來鑒定DNA的技術(shù)是：A．Northern印跡

B．Southern印跡C．Western印跡

D．親和層析E．離子交換層析58．重組DNA技術(shù)中常用的工具酶下列那項(xiàng)不是：A．限制性核酸內(nèi)切酶

B．DNA連接酶C．DNA聚合酶Ⅰ

D．RNA聚合酶E．反轉(zhuǎn)錄酶59．F-細(xì)胞與F+細(xì)胞混合培養(yǎng)，產(chǎn)生F+細(xì)胞的過程為：A．轉(zhuǎn)化

B．轉(zhuǎn)導(dǎo)C．接合

D．突變E．轉(zhuǎn)位60．DNA致癌病毒感染宿主細(xì)胞后，使之發(fā)生癌變是因?yàn)榘l(fā)生了：A．轉(zhuǎn)化

B．轉(zhuǎn)導(dǎo)C．接合

D．轉(zhuǎn)座E．轉(zhuǎn)位61．關(guān)于基因工程的敘述，不正確的是：A．根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇目的基因

B．選擇一個(gè)適合的載體C．把目的基因和載體分別用限制性核酸內(nèi)切酶切開

D．連接酶只連接目的基因和載體E．把重組體轉(zhuǎn)化到細(xì)胞中去的過程不是絕對的62．限制性核酸內(nèi)切酶不具有那項(xiàng)特點(diǎn)：A．僅存在原核細(xì)胞中

B．用于重組DNA技術(shù)中的為Ⅰ類酶C．能識(shí)別雙鏈DNA中特定的堿基順序

D．具有一定的外切酶活性E．辨認(rèn)的核苷酸序列常具有回文結(jié)構(gòu)63．限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別DNA中核苷酸序列的個(gè)數(shù)為：A．4、5、6

B．5、6、7C．6、7、8

D．4、6、8E．4~864．如果某限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的堿基序列為6個(gè)，則24Kb的一段隨機(jī)的DNA序列可出現(xiàn)的切口數(shù)為：A．4次

B．5次C．6次

D．7次E．8次65．關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的敘述，下列那項(xiàng)是錯(cuò)誤的：A．限制性核酸內(nèi)切酶分為三類，用于基因工程的為Ⅱ酶

B．限制性核酸內(nèi)切酶切割后可產(chǎn)生粘性末端或平端C．識(shí)別的核苷酸序列個(gè)數(shù)可以是6個(gè)或8個(gè)

D．識(shí)別的序列一般具有回文結(jié)構(gòu)E．識(shí)別的DNA為單鏈66．關(guān)于基因工程的敘述，下列那項(xiàng)是錯(cuò)誤的？A．基因工程也稱基因克隆

B．只有質(zhì)粒DNA可作為載體C．重組體DNA轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞

D．需獲得目的基因E．需對重組DNA進(jìn)行純化．篩選67．有關(guān)質(zhì)粒的敘述，下列那項(xiàng)是錯(cuò)誤的？A.

小型環(huán)狀雙鏈DNA分子

B．可小到2~3Kb，大到數(shù)百個(gè)KbC．能在宿主細(xì)胞中獨(dú)立自主地進(jìn)行復(fù)制

D．常含有耐藥基因E．只有一種限制性核酸內(nèi)切酶切口68．有關(guān)質(zhì)粒的敘述，下列那項(xiàng)是錯(cuò)誤的？A．質(zhì)粒的某些遺傳信息可賦予宿主細(xì)胞

B．質(zhì)粒較易轉(zhuǎn)化C．質(zhì)粒的遺傳表型可作為轉(zhuǎn)化子的篩選依據(jù)

D．PBR322的分子中僅有一個(gè)E．coRⅠ內(nèi)切酶位點(diǎn)

E．PBR322含有β—半乳糖苷酶的α片段基因69．有關(guān)噬菌體的敘述錯(cuò)誤的是：A.

常用作克隆載體的噬菌體有λ—噬菌體和M13噬菌體

B．λ噬菌體DNA改造成的載體有λgt系列和EMBL系列C．λgt系列適用于插入型載體，用于cDNA克隆

D．EMBL系列適用于置換型載體，用于基因組DNA克隆E．M13噬菌體基因間隔區(qū)插入了E．coli的一段調(diào)節(jié)基因和LacZ的C端氨基酸編碼基因70．下列那項(xiàng)不是重組DNA的連接方式A．粘性末端與粘性末端的連接

B．平端與平端的連接C．粘性末端與平端的連接

D．人工接頭連接E．同聚物加尾連接71．關(guān)于翻譯，下列那項(xiàng)不正確？A．重組體由目的基因與載體連接組成

B．重組體能轉(zhuǎn)化細(xì)胞C．重組體的表達(dá)在細(xì)胞水平

D．重組體有獨(dú)立繁殖的能力E．重組體的表達(dá)體系有真核和原核兩種72．關(guān)于基因重組的敘述，錯(cuò)誤的是：A．整段的DNA不能在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行交換

B．整段的DNA能在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行交換C．整段的DNA能在不同的物種間進(jìn)行交換

D．交換的DNA能在新的位置上進(jìn)行復(fù)制．轉(zhuǎn)錄．翻譯E．基因重組可引起自然突變現(xiàn)象73．基因重組的方式不包括：A．轉(zhuǎn)化

B．轉(zhuǎn)導(dǎo)C．轉(zhuǎn)位

D．轉(zhuǎn)換E．整合74．關(guān)于噬菌體錯(cuò)誤的是；A.

λ噬菌體DNA進(jìn)入宿主菌后可整合到宿主菌DNA中又可保持獨(dú)立狀態(tài)B.

B．依賴本身的酶系進(jìn)行其DNA的復(fù)制C.

C．依賴宿主的酶系進(jìn)行其DNA的轉(zhuǎn)錄D.

D．依賴宿主的酶系表達(dá)其蛋白質(zhì)外殼E.

E．當(dāng)λ噬菌體從宿主細(xì)胞釋放出來，再感染另外的宿主時(shí)，可發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)作用75．有關(guān)噬菌體的敘述那項(xiàng)不符合：A．感染大腸桿菌時(shí)僅把DNA注入大腸桿菌內(nèi)

B．有溶源和裂解兩種生活方式C．溶源和裂解兩種生活方式可以相互轉(zhuǎn)變

D．噬菌體是由外殼蛋白和DNA組裝而成E．當(dāng)從一個(gè)宿主細(xì)胞釋放出來，再感染另外宿主時(shí)，一定發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)作用76．DNA克隆不包括下列那項(xiàng)步驟？A．選擇一個(gè)適合的載體

B．限制性核酸內(nèi)切酶在特異位點(diǎn)裂解質(zhì)粒和目的基因C．用連接酶連接載體DNA和目的DNA，形成重組體

D．用載體的相應(yīng)抗生素抗性篩選含重組體的細(xì)菌E．重組體用融合法導(dǎo)入細(xì)胞77．下列那項(xiàng)不能作為表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的方法？A．磷酸鈣轉(zhuǎn)染

B．電穿孔C．脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染

D．顯微注射E．氯化鈣轉(zhuǎn)染78．下列那項(xiàng)不能作為基因工程重組體的篩選方法A．抗藥性標(biāo)志選擇

B．宿主菌的營養(yǎng)缺陷標(biāo)志補(bǔ)救C．原位雜交

D．Southern印跡PCR技術(shù)79．下列那項(xiàng)不是重組體篩選的免疫化學(xué)方法的工作原理及特點(diǎn)：A.

將瓊脂培養(yǎng)板上的轉(zhuǎn)化子菌落經(jīng)蒸汽裂解釋放抗原B.

將固定目的基因編碼蛋白質(zhì)的抗血清聚乙烯薄膜覆蓋在裂解菌落上C.

再使用\o""32P標(biāo)記的DNA探針與薄膜反應(yīng)D.

經(jīng)放射自顯影檢出陽性反應(yīng)菌落E．免疫學(xué)方法特異性強(qiáng)．靈敏度高，尤其適用于選擇不為宿主菌提供任何選擇標(biāo)志的基因80．重組DNA技術(shù)不能應(yīng)用于：A．疾病基因的發(fā)現(xiàn)

B．生物制藥C．DNA序列分析

D．基因診斷E．基因治療81．基因重組是指DNA分子的：A．共價(jià)連接

B．氫鍵連接C．離子鍵連接

D．交換E．退火82．下列那種藥物不能用基因工程的方法生產(chǎn)？A．胰島素

B．干擾素C．白細(xì)胞介素

D．性激素E．促紅細(xì)胞生成素83．DNA重組技術(shù)不能應(yīng)用于下列哪個(gè)方面？A.

產(chǎn)前診斷

B．?dāng)y帶者測試C．癥候前診斷

D．遺傳病的易感性E．傳染病的傳染性84．一種可靠的DNA診斷學(xué)方法，下列那項(xiàng)是不必符合的？A．能正確擴(kuò)增靶基因

B．能準(zhǔn)確區(qū)分單個(gè)堿基的差別C．本底或噪聲低，不干擾DNA的鑒定

D．便于完全自動(dòng)化操作E．方法簡便，易于推廣應(yīng)用85．關(guān)于轉(zhuǎn)化錯(cuò)誤的是：A．受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型

B．外源DNA一定整合進(jìn)受體細(xì)胞基因組C．自然界中較大的外源DNA轉(zhuǎn)化幾率較低

D．自然界中較大的外源DNA轉(zhuǎn)化幾率較高E．越大的外源DNA與染色體整合幾率越低86．關(guān)于同源重組不正確的是：A．同源重組不需要特異的DNA序列

B．同源重組要求兩分子間序列必須相同C．RecB．C．D具有內(nèi)切酶和解旋酶活性

D．Holliday中間體的形成，是同源重組的重要步驟E．需要DNA連接酶參與87．下列那種酶是重組DNA技術(shù)中最重要的？A．反轉(zhuǎn)錄酶

B．堿性磷酸酶C．末端轉(zhuǎn)移酶

D．DNA聚合酶ⅠE．DNA連接酶88．在分子生物學(xué)中，基因克隆主要指：A．DNA的復(fù)制

B．DNA的轉(zhuǎn)錄C．DNA的剪切

D．RNA的轉(zhuǎn)錄E．RNA的剪接89．在分子生物學(xué)中，重組DNA又稱為：A．酶工程

B．蛋白質(zhì)工程C．細(xì)胞工程

D．基因工程E．DNA工程90．基因工程中，不常用到的酶是；A．限制性核酸內(nèi)切酶

B．DNA聚合酶C．DNA連接酶

D．逆轉(zhuǎn)錄酶E．DNA解鏈酶91．限制性核酸內(nèi)切酶酶切后的DNA末端最常見的是：A．平頭末端

B．3’突出末端C．5’突出末端

D．粘性末端E．缺口末端92．能識(shí)別DNA的特異序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類酶稱為：A．DNA內(nèi)切酶

B．限制性內(nèi)切核酸酶C．非限制性內(nèi)切核酸酶

D．限制性外切核酸酶E．非限制性外切核酸酶93．cDNA是指：A．在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補(bǔ)的DNA

B．在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補(bǔ)的DNAC．在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補(bǔ)的RNA

D．在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補(bǔ)的RNAE．在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補(bǔ)的DNA94．基因工程中通常使用的質(zhì)粒存在于：A．細(xì)菌染色體

B．酵母染色體C．細(xì)菌染色體外

D．酵母染色體外E．以上均不是95．質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)是：A．環(huán)狀雙鏈DNA

B．環(huán)狀單鏈DNAC．環(huán)狀單鏈RNA

D．線狀雙鏈DNAE．線狀單鏈DNA96．聚合酶鏈反應(yīng)常?？s寫為：A．PRC

B．PERC．PDR

D．BCRE．PCR97．在已知DNA序列的情況下，獲取目的基因的最方便的方法是：A．人工化學(xué)合成

B．基因組文庫法C．cDNA文庫法

D．PCR法E．從染色體DNA直接提取98．E．coRⅠ切割DNA雙鏈產(chǎn)生：A．平端

B．5’突出的粘性末端C．3’突出的粘性末端

D．鈍性末端E．配伍末端99．用于PCR反應(yīng)的酶是：A．DNA連接酶

B．堿性磷酸酶C．逆轉(zhuǎn)錄酶

D．限制性內(nèi)切核酸酶E．TaqDNA聚合酶100．PstⅠ內(nèi)切酶切割目的基因后產(chǎn)生：

A．

5′

——G↓AATT

C——3′

B．

5′

——GTT↓

AA

C——3′

3′

——C

TTAA↑G——5′

3′——CAA↑

TT

G——5′

C．

5′——CTGCA↓

G——3′

D．

5′

——CTG↓

CAG——3′

3′——G↑

ACGTC——5′

3′

——GAC↑

GTC——5′

E．

5′

——GAA↓TT

C——3′

3′

——CTT↑AA

G——5′

101．將PstⅠ切割后的目的基因與同樣切割的載體DNA連接是：A．同聚物加尾連接

B．人工接頭連接C．平端連接

D．粘性末端連接E．非粘性末端連接102．限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生：A．3’磷酸末端和5’羥基末端

B．5’磷酸末端和3’羥基末端C．3’磷酸末端和5’磷酸末端

D．3’羥基末端和5’羥基末端E．3’羥基末端．5’羥基末端和磷酸103．基因工程中使目的基因與載體拼接的酶是：A．DNA聚合酶

B．RNA聚合酶C．DNA連接酶

D．RNA連接酶E．限制性核酸內(nèi)切酶104．以質(zhì)粒為載體，將外源基因?qū)胧荏w菌的過程稱為：A．轉(zhuǎn)化

B．轉(zhuǎn)染C．轉(zhuǎn)導(dǎo)

D．轉(zhuǎn)位E．感染105．最常用的篩選轉(zhuǎn)化細(xì)菌是否含有質(zhì)粒的方法是：A．營養(yǎng)互補(bǔ)篩選

B．抗藥性篩選C．免疫化學(xué)篩選

D．原位雜交篩選E．Southern印跡篩選106．α互補(bǔ)篩選屬于：A．抗藥性標(biāo)志篩選

B．酶聯(lián)免疫篩選C．標(biāo)志補(bǔ)救篩選

D．原位雜交篩選E．免疫化學(xué)篩選107．進(jìn)行同聚物加尾法連接目的基因和載體DNA時(shí)，需要那種酶？A．DNA聚合酶

B．RNA聚合酶C．引物酶

D．逆轉(zhuǎn)錄酶E．末端轉(zhuǎn)移酶108．確切的講，cDNA文庫包含：A．一個(gè)物種的全部基因信息

B．一個(gè)物種的全部RNA信息C．一個(gè)生物體組織或細(xì)胞的全部基因信息

D．一個(gè)生物體組織或細(xì)胞的全部RNA信息E．一個(gè)生物體組織或細(xì)胞所表達(dá)mRNA信息109．下列描述最能確切表達(dá)質(zhì)粒DNA作為克隆載體特性的是：A．小型環(huán)狀雙鏈DNA分子

B．?dāng)y帶有某些耐藥基因C．在細(xì)胞分裂時(shí)恒定地傳遞給子代細(xì)胞

D．具有自我復(fù)制能力E．獲得目的基因110．表達(dá)人類蛋白質(zhì)的最理想的細(xì)胞體系是：A．E．coli表達(dá)體系

B．原核表達(dá)體系C．酵母表達(dá)體系

D．昆蟲表達(dá)體系E．哺乳類細(xì)胞表達(dá)體系B型題：(111~113)A．噬菌體感染宿主菌后核酸進(jìn)入菌體的過程

B．外來DNA引起生物類型改變的過程C．溶源菌中的噬菌體全部基因都表達(dá)

D．溶源菌中的噬菌體部分調(diào)控區(qū)的基因表達(dá)E．帶有宿主DNA的噬菌體111．溶源狀態(tài)是：

112．進(jìn)入裂解周期是：

113．轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是指：

(114~116)A．接合作用

B．轉(zhuǎn)化作用C．轉(zhuǎn)導(dǎo)作用

D．轉(zhuǎn)座作用E．轉(zhuǎn)移作用114．F因子陰性細(xì)胞與F因子陽性細(xì)胞形成F因子陽性細(xì)胞的是：

115．病毒從被感染的細(xì)胞釋放出來，再次感染另一細(xì)胞時(shí)，發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的DNA轉(zhuǎn)移的是：

116．從一個(gè)染色體位點(diǎn)轉(zhuǎn)移至另一位點(diǎn)的分散的重復(fù)序列稱為：

(117~120)A．插入序列轉(zhuǎn)座

B．轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座C．位點(diǎn)特異的重組

D．同源重組E．溶源117．噬菌體DNA和宿主染色體的特異靶位點(diǎn)整合稱為：

118．噬菌體的生長方式是：

119．Tn3發(fā)生的DNA轉(zhuǎn)移的是：

120．復(fù)制后的一個(gè)復(fù)制本遷移至新位，另一個(gè)仍保留在原位的是：

(121~123)A．RecA

B．E．coRⅠC．RuvC

D．LexAE．Ffactor121．有蛋白水解酶活性的是：

122．能使同源重組中單鏈DNA對另一雙鏈DNA的侵入的是：

123．切割Holliday中間體的內(nèi)切酶是：

(124~126)A．Replicon

B．CloningC．Invertedrepeats

D．PalindromeE．Transposons124．目的基因與載體連接形成：

125．來自同一始祖的相同副本或拷貝的集合稱為：

126．限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別的序列具有：

(127~129)A．抗藥性篩選

B．分子雜交篩選C．RNA反轉(zhuǎn)錄

D．免疫學(xué)方法E．體外翻譯127．用于鑒定質(zhì)粒是否轉(zhuǎn)化的一般方法是：

128．用于鑒定轉(zhuǎn)化子細(xì)胞是否含有目的基因的常用方法是：

129．利用目的基因表達(dá)產(chǎn)物的特異性抗體來篩選含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞的方法是：

(130~132)A．限制性核酸內(nèi)切酶

B．DNA連接酶C．反轉(zhuǎn)錄酶

D．TaqDNA聚合酶E．堿性磷酸酶130．識(shí)別DNA回文結(jié)構(gòu)并對其雙鏈進(jìn)行切割的是：

131．用于PCR反應(yīng)的酶是：

132．將目的基因與載體進(jìn)行拼接的酶是：

(133~134)A．支原體

B．衣原體C．噬菌體

D．細(xì)菌E．酵母133．常用于原核表達(dá)體系的是：

134．常用于真核表達(dá)體系的是：

(135~137)A．轉(zhuǎn)染

B．轉(zhuǎn)化C．感染

D．轉(zhuǎn)導(dǎo)E．轉(zhuǎn)位135．以質(zhì)粒為載體，細(xì)菌為宿主的導(dǎo)入方式是：

136．以噬菌體為載體，細(xì)菌為宿主的導(dǎo)入方式是：

137．以病毒為載體，哺乳動(dòng)物細(xì)胞為宿主的導(dǎo)入方式是：

(138~139)A．抗藥性篩選

B．RNA反轉(zhuǎn)錄C．免疫化學(xué)方法

D．體外翻譯E．PCR138．對重組體內(nèi)基因進(jìn)行直接篩選的方法是：

139．通過鑒定基因表達(dá)產(chǎn)物篩選重組體的方法是：

(140~142)A．RNA聚合酶

B．末端轉(zhuǎn)移酶C．堿性磷酸酶

D．反轉(zhuǎn)錄酶E．核苷酸酶140．能切除DNA末端磷酸基的是：

141．能在DNA3’羥基末端進(jìn)行同聚物加尾的是：142．合成cDNA用的是：

(143~145)A．同聚物加尾連接

B．人工接頭連接C．粘性末端連接

D．缺口末端連接E．平端連接143．外源基因和載體DNA經(jīng)過E．coRⅠ切割后的連接屬于：

144．在外源基因和載體DNA末端加同聚物后進(jìn)行連接屬于：

145．在外源基因和載體DNA末端添加短核苷酸序列，人為制造粘性末端后進(jìn)行連接屬于：

X型題：146．可用于基因工程載體的DNA分子有：A．染色體DNA

B．病毒DNAC．細(xì)菌DNA

D．噬菌體DNAE．質(zhì)粒DNA147．重組DNA技術(shù)的基本過程包括：A．目的基因的獲取

B．PCR反應(yīng)C．克隆載體的構(gòu)建

D．目的基因與載體的連接E．重組體分子導(dǎo)入受體菌148．基因克隆又稱為：A．重組DNA

B．重組RNAC．DNA克隆

D．RNA克隆E．蛋白質(zhì)復(fù)制149．組成PCR反應(yīng)體系的物質(zhì)包括：A．RNA引物

B．TaqDNA聚合酶C．RNA聚合酶

D．DNA模板E．ddNTP150．對于重組體的篩選，屬于直接選擇法的是：A．免疫化學(xué)法

B．原位雜交法C．Southern印跡

D．補(bǔ)救標(biāo)志篩選E．抗藥性標(biāo)志篩選151．對于重組體的篩選，屬于非直接選擇法的是：A．免疫化學(xué)法

B．原位雜交法C．Southern印跡

D．補(bǔ)救標(biāo)志篩選E．酶聯(lián)免疫篩選152．限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA時(shí)可產(chǎn)生：A．5’粘性末端

B．3’粘性末端C．平末端

D．單鏈缺口E．粘性末端153．基因工程中目的基因的來源有：A．化學(xué)合成

B．PCR合成C．CDNA文庫

D．基因組文庫E．組織細(xì)胞中染色體DNA直接提取154．基因工程中外源性基因又稱為：A．目的基因

B．目的DNAC．目的RNA

D．targetDNAE．外源RNA155．重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有：A．限制性核酸內(nèi)切酶

B．DNA聚合酶ⅠC．DNA連接酶

D．反轉(zhuǎn)錄酶E．末端轉(zhuǎn)移酶156．使細(xì)胞獲取新的遺傳表型的方式有：A．接合作用

B．轉(zhuǎn)化作用C．轉(zhuǎn)導(dǎo)作用

D．轉(zhuǎn)座E．以上均可以157．作為基因工程的載體必須具備的條件是：A．能獨(dú)立自主復(fù)制

B．易轉(zhuǎn)化C．易檢測（含有抗藥性基因等）

D．具有限制性內(nèi)切核酸酶的切口E．易提取獲得158．限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別的核苷酸序列可以是：A．4個(gè)

B．5個(gè)C．6個(gè)

D．7個(gè)E．8個(gè)159．將表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染方法有：A．磷酸鈣轉(zhuǎn)染

B．DEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染C．電穿孔

D．脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染E．顯微注射160．為保證轉(zhuǎn)錄和翻譯的順利進(jìn)行，表達(dá)載體必須具備的DNA序列應(yīng)包括：A．較強(qiáng)的啟動(dòng)子

B．較強(qiáng)的衰減子C．較強(qiáng)的沉默子

D．合適的SD序列E．核糖體結(jié)合位點(diǎn)161．融合蛋白的結(jié)構(gòu)中包含有：A．N端為原核蛋白質(zhì)

B．N端為真核蛋白質(zhì)C．C端為原核蛋白質(zhì)

D．C端為真核蛋白質(zhì)E．N．C兩端為原核蛋白質(zhì)，中間為真核蛋白質(zhì)162．可以連接的目的基因與載體的末端有：A．同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的粘性末端

B．不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的配伍末端C．不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的不同類型的粘性末端

D．同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的平端

E．不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的平端四、問答題：163．什么叫基因克??？簡述基因克隆的步驟。164．限制性內(nèi)切核酸酶有哪些特點(diǎn)？165．簡述重組DNA技術(shù)中目的基因的獲取來源和途徑。166．簡述α互補(bǔ)篩選重組體質(zhì)粒細(xì)菌的原理。167．基因工程中重組體篩選的方法有那些？168．基因工程E．coli表達(dá)體系的表達(dá)載體必須符合那些標(biāo)準(zhǔn)？169．常用的真核表達(dá)體系有哪些？常用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法有哪些？170．已知有一mRNA分子，你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)？簡述其過程。171．一種可靠的DNA診斷學(xué)方法必須符合哪些標(biāo)準(zhǔn)？172．作為基因工程的載體必須具備哪些條件？173．什么叫基因重組？簡述沙門氏菌是怎樣逃避宿主免疫監(jiān)視的？[參考答案]：一、名詞解釋：1.

基因工程（genticengineering）是指將DNA重組體引進(jìn)受體細(xì)胞中，建立無性系的過程。因此，又稱為基因克?。╣enecloning）?？寺∧骋换蚧駾NA片段過程中,將外源DNA插入載體分子所形成的復(fù)制子是雜合分子---嵌合DNA（DNAchimerase），所以又稱為重組DNA（recombinantDNA）。2.

當(dāng)細(xì)胞（細(xì)菌）與細(xì)胞（細(xì)菌）相互接觸時(shí)，質(zhì)粒DNA就可以從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌），這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為接合作用。3.

由外源性DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞，并引起生物類型改變的過程[或使宿主細(xì)胞獲得新的遺傳表型]稱為轉(zhuǎn)化作用。4.

當(dāng)病毒從被感染的（供體）細(xì)胞釋放出來，再次感染另一（受體）細(xì)胞時(shí)，發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用?；驇в兴拗鱀NA的噬菌體或病毒，再感染另外的宿主的過程中發(fā)生的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。5.

轉(zhuǎn)座即是指一個(gè)或一組基因從一個(gè)位置轉(zhuǎn)倒基因組的另一個(gè)位置?？梢苿?dòng)的DNA序列包括插入序列和轉(zhuǎn)座子。故由插入序列和轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移或重排稱轉(zhuǎn)座。6.

轉(zhuǎn)座子是可以從一個(gè)染色體位點(diǎn)轉(zhuǎn)移至另一個(gè)位點(diǎn)的分散的重復(fù)序列。轉(zhuǎn)座子也包括含有兩個(gè)反向重復(fù)序列的側(cè)翼，內(nèi)有轉(zhuǎn)座酶基因，并含有抗生素耐藥基因等其他基因7.

8.

9.

10.

11.

。

7．

發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組，又稱基本重組（general

recombination）。同源重組不需要特異DNA

列，而是依賴兩分子間序列的相同或類似性。

8．

發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組，又稱基本重組（general

recombination）。

9．

是指含有單一DNA重組體的無性系?；蛑笇NA重組體引進(jìn)受體細(xì)胞中，建立無性系的過程。因此，又稱為基因克?。╣enecloning）。

10．

外源DNA插入載體DNA分子所形成的具有自我復(fù)制能力的DNA分子稱為復(fù)制子（replicon）。11．限制性內(nèi)切核酸酶（Restrictionendonuclease）是指能識(shí)別DNA的特異序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶。12.

DNA的核苷酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對稱結(jié)構(gòu)即回文結(jié)構(gòu)Palindrome（或正讀反讀序列相同的DNA序列）。13.

不同限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)不同，但切割后產(chǎn)生相同類型的粘性末端，稱為配伍末端。14.

DNA重組技術(shù)中是我們所需要的DNA序列或基因，就稱為目的基因(targetgene)或目的

DNA(target

DNA)。15.

以mRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補(bǔ)的DNA稱為cDNA（complementaryDNA）。16.

克隆載體（cloningvector）是攜帶目的基因，實(shí)現(xiàn)目的基因的無性繁殖或表達(dá)有意義的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA分子。17.

為使插入的目的基因可轉(zhuǎn)錄．進(jìn)而翻譯成多肽鏈，而特意設(shè)計(jì)的克隆載體又稱為表達(dá)載體（expressionvector）。即具有轉(zhuǎn)錄和翻譯所必須的DNA序列的載體。18.

存在于細(xì)菌染色體以外的環(huán)狀DNA分子。19.

M13噬菌體的基因間隔區(qū)插入E．Coli的調(diào)節(jié)基因及LacZ（β-半乳糖苷酶基因）的N-端146個(gè)aa殘基編碼基因，其產(chǎn)物為β-半乳糖苷酶的α-片段。而突變型Lac－

E．coli可表達(dá)β-半乳糖苷酶的ω—片段（酶的C-端），單獨(dú)的α-片段及ω-片段均無β-半乳糖苷酶的活性，當(dāng)含有LacZ的M13噬菌體轉(zhuǎn)化Lac－

E．coli細(xì)菌時(shí)，α-片段及ω-片段共同表達(dá)，宿主Lac－

E．coli細(xì)菌才有β-半乳糖苷酶活性，使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物，（生長的細(xì)菌為蘭色）即α-互補(bǔ)。20.

把生物體全部的DNA提純后，用限制性內(nèi)切核酸酶，隨機(jī)切割成許多片段，將所有片段均重組入同一類載體上，得到許多重組DNA分子，繼而全部轉(zhuǎn)入受體菌擴(kuò)增，使每個(gè)細(xì)菌內(nèi)都攜帶一種重組DNA分子的多個(gè)拷貝，這樣生長的全部細(xì)菌所攜帶的所有基因組DNA片段，即為整個(gè)基因組。21.

如克隆基因能夠在宿主菌表達(dá)，且表達(dá)產(chǎn)物與宿主菌的營養(yǎng)缺陷互補(bǔ)，那么就可以利用營養(yǎng)突變菌株進(jìn)行篩選，即標(biāo)志補(bǔ)救。22.

將表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程或方法。23.

一個(gè)細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息，或整套基因的全部DNA片段。24.

具備接受外源DNA的能力的經(jīng)過特殊方法處理的受體菌。25.

PCR

(polymerasechainreaction)是一種DNA迅速大量擴(kuò)增的方法，短時(shí)間內(nèi)獲得大量DNA。有利目的基因的獲得。26.

以mRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補(bǔ)的DNA稱為cDNA，單鏈的cDNA再復(fù)制成雙鏈cDNA片段，與適當(dāng)?shù)妮d體連接后，轉(zhuǎn)入受體菌，所建立的文庫稱為cDNA文庫。27.

插入序列從原位遷至新位的轉(zhuǎn)座方式。28.

插入序列復(fù)制后，其中的一個(gè)復(fù)制本遷至新位，另一個(gè)保留在原位的轉(zhuǎn)座方式。29.

噬菌體DNA注入菌體內(nèi)后，在宿主內(nèi)迅速增殖，產(chǎn)生病毒顆粒，并溶解細(xì)菌。30.

噬菌體DNA注入菌體內(nèi)與細(xì)菌染色體重組成為細(xì)菌染色體的一部分。二、填空題：31.

接合作用；轉(zhuǎn)化子用；轉(zhuǎn)導(dǎo)作用；轉(zhuǎn)座。32.

基因重組；位點(diǎn)特異的重組；同源重組。33.

插入序列；轉(zhuǎn)座子。34.

插入序列；轉(zhuǎn)座子。35.

長末端重復(fù)序列；反向末端重復(fù)序列。36.

能獨(dú)立復(fù)制；便于檢測；可導(dǎo)入宿主細(xì)胞。37.

4個(gè)；6個(gè)；8個(gè)；粘；平。38.

質(zhì)粒DNA；噬菌體DNA；病毒DNA。39.

目的基因的獲取；基因載體的選擇與構(gòu)建；目的基因與載體的拼接；重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞；篩選與鑒定出陽性克隆。40.

化學(xué)合成法；基因組DNA；cDNA；聚合酶鏈反應(yīng)。41.

抗藥性標(biāo)志選擇；標(biāo)志補(bǔ)救；分子雜交。42.

含有大腸桿菌適宜的選擇標(biāo)志；具有強(qiáng)的啟動(dòng)子；含有適當(dāng)?shù)姆g控制序列；含有合理設(shè)計(jì)的多接頭克隆位點(diǎn)。43.

酵母；昆蟲；哺乳動(dòng)物細(xì)胞。44.

轉(zhuǎn)化；轉(zhuǎn)染；感染。45.

LacZ；146；β半乳糖苷酶；α互補(bǔ)。46.

白；藍(lán)。47.

反向重復(fù)；轉(zhuǎn)座酶。48.

保守性轉(zhuǎn)座；復(fù)制性轉(zhuǎn)座。49.

質(zhì)粒DNA；接合作用。50.

限制性核酸內(nèi)切酶；DNA連接酶；DNA聚合酶Ⅰ；反轉(zhuǎn)錄酶。三、選擇題：

A型題

51．B

52．D

53．A

54．B

55．A

56．B

57．A

58．D

59．C

60．A

61．D

62．B

63．D

64．C

65．E

66．B

67．C68．E

69．E

70．C

71．D

72．A

73．D

74．B

75．E

76．E

77．E

78．E

79．C

80．C

81．A

82．D

83．E

84．E85．D

86．B

87．E

88．A

89．D

90．E

91．D

92．B

93．A

94．C

95．A

96．E

97．D

98．B

99．E

100．C

101．D102．B

103．C

104．A

105．B

106．C

107．E

108．E

109．D

110．E

B型題：

111．D

112．C

113．E

114．A115．C

116．D

117．C

118．E

119．B

120．A

121．A

122．A

123．C

124．A

125．B

126．D

127．A

128．B

129．D

130．A

131．D

132．B

133．D

134．E

135．B

136．A

137．C

138．A

139．C

140．C

141．B

142．D

143．C

144．A

145．B

X型題：

146．B．D．E

147．A．C．D．E

148．A．C

149．A．B．D．E

150．B．C．D．E

151．A．E

152．A．B．C．E

153．A．B．C．D．E

154．A．B．D

155．A．B．C．D．E

156．A．B．C

157．A．B．C

158．A．C．E

159．A．B．C．D．E

160．A．C．D

161．A．D

162．A．B．C．D四、問答題：

163．基因克?。╣enecloning）是指含有單一DNA重組體的無性系?；蛑笇NA重組體引進(jìn)受體細(xì)胞中，建立無性系的過程。一個(gè)完整的基因克隆過程包括：A．目的基因和載體的選擇------分。B．限制性內(nèi)切酶處理的基因和載體------切。C．目的基因與載體的連接------接。D．重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞------轉(zhuǎn)。E．篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞------篩。

164．限制性內(nèi)切核酸酶分為三類，重組DNA技術(shù)的限制性內(nèi)切核酸酶為Ⅱ類。其特點(diǎn)為：①．識(shí)別DNA位點(diǎn)的核苷酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對稱----即回文結(jié)構(gòu)（Palindrome）。②．一些酶切割后產(chǎn)生粘性末端（StickyendorCohesiveend）。另一些酶切割后產(chǎn)生平端或鈍性末端（bluntend）。③．不同的限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別DNA中的核苷酸長短不一，為4．6或8個(gè)。165．的基因的獲?。褐饕幸韵聨追N途徑：①．化學(xué)合成法：已知某種基因的核苷酸序列或根據(jù)某種基因產(chǎn)物的aa序列推導(dǎo)出該多肽鏈編碼的核苷酸序列，再利用DNA合成儀合成。②．基因組DNA：一個(gè)細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息，或整套基因的全部DNA片段。從基因組DNA文庫中獲得。③．cDNA文庫。④．聚合酶鏈反應(yīng)------PCR

(polymerasechainreaction)。166．13噬菌體的基因間隔區(qū)插入E．Coli的調(diào)節(jié)基因及LacZ（β-半乳糖苷酶基因）的N-端146個(gè)aa殘基編碼基因，其產(chǎn)物為β-半乳糖苷酶的α-片段。而突變型Lac－

E．coli可表達(dá)β-半乳糖苷酶的ω—片段（酶的C-端），單獨(dú)的α-片段及ω-片段均無β-半乳糖苷酶的活性，當(dāng)含有LacZ的M13噬菌體轉(zhuǎn)化Lac－

E．coli細(xì)菌時(shí)，α-片段及ω-片段共同表達(dá)，宿主Lac－

E．coli細(xì)菌才有β-半乳糖苷酶活性，使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物，（生長的細(xì)菌為蘭色）這就是α-互補(bǔ)?？捎糜谥亟M體的篩選。如果目的基因插入LacZ基因內(nèi)，則LacZ不表達(dá)，為白色菌落。167．重組體的篩選方法有：①．直接法（directselection）：針對載體攜帶的某種或某些標(biāo)志基因和目的基因而設(shè)計(jì)的篩選方法稱直接法。其特點(diǎn)是：直接測定基因或基因表型。A．抗藥性標(biāo)志篩選：如克隆載體攜帶有某個(gè)（些）抗藥基因，如：ampr．tetr等。只有被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌才能在含有該抗生素的培養(yǎng)基生長，并形成菌落，使轉(zhuǎn)化菌與非轉(zhuǎn)化菌區(qū)別開。如重組體中的外源性基因插入到標(biāo)志性基因內(nèi)，標(biāo)志性基因則失活，通過有或無抗菌素培養(yǎng)基對比培養(yǎng)，即可區(qū)分單純載體轉(zhuǎn)化菌和重組體（含目的基因的載體）轉(zhuǎn)化菌。如：將目的基因插入tetr基因中，該載體就失去tetr抗藥性，但仍有apmr抗藥性,被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌（含重組體）可在含有apmr培養(yǎng)基生長，而不能在tetr培養(yǎng)基生長。也叫插入滅活法。B．補(bǔ)救標(biāo)志（marker

rescue）篩選：如克隆基因能夠在宿主菌表達(dá)，且表達(dá)產(chǎn)物與宿主菌的營養(yǎng)缺陷互補(bǔ)，那么就可以利用營養(yǎng)突變菌株進(jìn)行篩選，這就是標(biāo)志補(bǔ)救。如：酵母咪唑甘油磷酸脫水酶基因表達(dá)產(chǎn)物與細(xì)菌組氨酸合成有關(guān)。當(dāng)酵母DNA與λ噬菌體載體結(jié)合后，在轉(zhuǎn)染或感染組氨酸缺陷型大腸桿菌，在無組氨酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，只有含重組體的細(xì)菌能生長（因有咪唑甘油磷酸脫水酶）。再如：α－互補(bǔ)也是一種標(biāo)志補(bǔ)救。C．雜交法：利用

32P標(biāo)記的探針與轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上的轉(zhuǎn)化子DNA或克隆的DNA片段進(jìn)行分子雜交，直接選擇鑒定目的基因。如：原位雜交Southern

blotting（DNA-DNA雜交；）。②．免疫學(xué)方法（

非直接法）：是利用特異抗體與目的基因的表達(dá)產(chǎn)物相互作用進(jìn)行的篩選。分為：免疫化學(xué)法和酶免疫檢測分析。免疫化學(xué)法：原理為：將培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化子菌落，經(jīng)氯仿蒸汽裂解，釋放抗原，再將固定有抗血清（目的基因編碼蛋白特異的免疫血清）的聚乙烯膜覆蓋在裂解菌落上，在膜上形成抗原抗體復(fù)合物，再與125I－IgG反應(yīng)，最后放射自顯影，檢出陽性菌落。168．含有大腸桿菌適宜的選擇標(biāo)志．具有強(qiáng)的啟動(dòng)子．含有適當(dāng)?shù)姆g控制序列．含有合理設(shè)計(jì)的多接頭克隆位點(diǎn)。169．真核表達(dá)體系常見的有：酵母．昆蟲．哺乳類細(xì)胞等。重要的是將重組體導(dǎo)入細(xì)胞。即轉(zhuǎn)染。（將表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程）常見的轉(zhuǎn)染方法有：磷酸鈣轉(zhuǎn)染．DEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染．電竄孔．脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染．顯微注射等。170．已知有一mRNA分子，你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)呢？其過程如下：首先以mRNA分子為模板，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，合成cDNA，再合成雙鏈cDNA，擴(kuò)增后與載體連接形成重組體，轉(zhuǎn)染表達(dá)載體，篩選出克隆，進(jìn)行基因表達(dá)即可。171．一種可靠的診斷學(xué)方法必須符合1）能正確擴(kuò)增靶基因。2）能準(zhǔn)確區(qū)分單個(gè)堿基的差別。3）本底和噪聲低，不干擾DNA鑒定。4）便于自動(dòng)化操作，適合大面積．大人群普查。172．作為基因工程的載體必須具備的條件是：能獨(dú)立自主復(fù)制。易轉(zhuǎn)化。易檢測（含有抗藥性基因等）。173．不同DNA分子間發(fā)生的共價(jià)連接稱基因重組。沙門菌為逃避宿主免疫監(jiān)視，其鞭毛素蛋白的表達(dá)每經(jīng)歷1000代細(xì)胞即發(fā)生一次相變異（Phase

variation）。沙門菌鞭毛素基因H1H2分別編碼鞭毛素H1H2，H2啟動(dòng)序列同時(shí)啟動(dòng)H2及一種阻遏蛋白的表達(dá)。阻遏蛋白可阻H1的表達(dá)hin基因編碼一種重組酶，催化H2啟動(dòng)序列與hin基因倒位，發(fā)生基因重組（geneticrecombination）其結(jié)果是啟動(dòng)序列方向改變，H2及阻遏蛋白表達(dá)關(guān)閉，H1基因表達(dá)。生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題庫0101A01在核酸中一般不含有的元素是（）A、碳B、氫C、氧D、硫0101A02通常既不見于DNA又不見于RNA的堿基是（）A、腺嘌呤B、黃嘌呤C、鳥嘌呤D、胸腺嘧啶0101A03下列哪種堿基只存在于mRNA而不存在于DNA中（）A、腺嘌呤B、尿嘧啶C、鳥嘌呤D、胞嘧啶0101A04DNA與RNA完全水解后，其產(chǎn)物的特點(diǎn)是（）戊糖不同、堿基部分不同B、戊糖不同、堿基完全相同C、戊糖相同、堿基完全相同D、戊糖相同、堿基部分不同0101A05在核酸分子中核苷酸之間的連接方式是（）A、3′，3′，-磷酸二酯鍵B、糖苷鍵C、3′，5′，磷酸二酯鍵 D、肽鍵0101A06核酸的紫外吸收是由哪一結(jié)構(gòu)所產(chǎn)生的（）A、嘌呤和嘧啶之間的氫鍵B、堿基和戊糖之間的糖苷鍵C、戊糖和磷酸之間的酯鍵D、嘌呤和嘧啶環(huán)上的共軛雙鍵0101A07含有稀有堿基比例較多的核酸是（）A、mRNAB、DNAC、tRNAD、rRNA0101A08核酸分子中儲(chǔ)存、傳遞遺傳信息的關(guān)鍵部分是（）A、核苷B、戊糖C、磷酸D、堿基序列0101A09按照結(jié)構(gòu)特征劃分，下列不屬于絲氨酸蛋白酶類的是：（）A、胃蛋白酶B、胰蛋白酶C、胰凝乳蛋白酶D、彈性蛋白酶0101A10關(guān)于氨基酸的脫氨基作用，下列說法不正確的是：（）A、催化氧化脫氨基作用的酶有脫氫酶和氧化酶兩類；B、轉(zhuǎn)氨酶的輔助因子是維生素B2；C、聯(lián)合脫氨基作用是最主要的脫氨基作用；D、氨基酸氧化酶在脫氨基作用中不起主要作用。0101B01鳥類為了飛行的需要，通過下列哪種排泄物釋放體內(nèi)多余的氨（）A、尿素B、尿囊素C、尿酸D、尿囊酸0101B02胸腺嘧啶除了在DNA出現(xiàn)，還經(jīng)常在下列哪種RNA中出現(xiàn)（）A、mRNAB、tRNAC、5SrRNAD、18SrRNA0101B03下列哪一個(gè)代謝途徑是細(xì)菌和人共有的（）A、嘌呤核苷酸的合成B、氮的固定C、乙醇發(fā)酵D、細(xì)胞壁粘肽的合成0101B04脫氧核糖核酸（DNA）分子中堿基配對主要依賴于（）A、二硫鍵B、氫鍵C、共價(jià)鍵D、鹽鍵0101B05人細(xì)胞DNA含2.9×109堿基對，其雙螺旋的總長度約為（）A、990mmB、580mmC、290mmD、9900mm0101B06核酸從頭合成中，嘌呤環(huán)的第1位氮來自（）A、天冬氨酸B、氨甲酰磷酸C、甘氨酸D、谷氨酰胺0101B07m2G是（）A、含有2個(gè)甲基的鳥嘌呤堿基B、雜環(huán)的2位上帶甲基的鳥苷C、核糖2位上帶甲基的鳥苷酸D、鳥嘌呤核苷磷酸二甲酯0101B08核苷酸從頭合成中，嘧啶環(huán)的1位氮原子來自（）A、天冬氨酸B、氨甲酰磷酸C、谷氨酰胺D、甘氨酸0101B09在適宜條件下，核酸分子兩條鏈通過雜交作用可自行形成雙螺旋，取決于（）A、DNA的融點(diǎn)B、序列的重復(fù)程度C、核酸鏈的長短D、堿基序列的互補(bǔ)0101B10熱變性的DNA分子在適當(dāng)條件可以復(fù)性，條件之一是（）A、驟然冷卻B、緩慢冷卻C、濃縮D、加入濃的無機(jī)鹽0101B11天然DNA和RNA中的N糖苷鍵是（）A、β型B、α型C、α型和β型都存在D、非以上選項(xiàng)0101B12下列RNA中含修飾核苷酸最多的是（）A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、病毒RNA0101C01假尿苷的糖苷鍵是（）A、C—CB、C—NC、N—ND、C—H0101C02在核苷酸分子中戊糖（R）、堿基（N）和磷酸（P）的連接關(guān)系是（）A、N—R—PB、N—P—RC、P—N—RD、R—N—P0101C03DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指（）A、α-螺旋B、β-片層C、β-轉(zhuǎn)角D、雙螺旋結(jié)構(gòu)0101C04下列關(guān)于核苷酸生理功能的敘述，錯(cuò)誤的是（）A、作為生物界最主要的直接供能物質(zhì)B、作為輔酶的組成成分C、作為質(zhì)膜的基本結(jié)構(gòu)成分D、作為生理調(diào)節(jié)物質(zhì)0101C05ATP的生理功能不包括（）A、為生物反應(yīng)供能B、合成RNAC、貯存化學(xué)能D、合成DNA0101C06關(guān)于DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)學(xué)說的敘述，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的（）A、由兩條反向平行的DNA鍵組成B、堿基具有嚴(yán)格的酸對關(guān)系C、戊糖的磷酸組成的骨架在外側(cè)D、生物細(xì)胞中所有DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)都是右手螺旋0101C07下列哪種核酸的二級(jí)結(jié)構(gòu)具有“三葉草”型（）A、mRNAB、質(zhì)粒DNAC、tRNAD、線粒體DNA0101C08下列復(fù)合物中除哪個(gè)外，均是核酸與蛋白質(zhì)組成的復(fù)合物（）A、核糖體B、病毒C、端粒酶D、核酶（ribozyme）0101C09真核細(xì)胞染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位是（）A、組蛋白B、核心顆粒C、核小體D、超螺旋管0101C10不參與核小體核心顆粒的蛋白質(zhì)是（）A、H1B、H2AC、H2BD、H30101C11核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)實(shí)質(zhì)上就是（）A、多核苷酸鏈中的堿基排列順序B、多核苷酸鏈中的堿基配對關(guān)系C、多核苷酸鏈中的堿基比例關(guān)系D、多核苷酸鏈的盤繞、折疊方式0101C12DNA變性是指（）A、多核苷酸鏈解聚B、DNA分子由超螺旋變?yōu)殡p螺旋C、分子中磷酸二酯鏈斷裂D、堿基間氫鍵斷裂0101C13雙鏈DNA熱變性后（）A、黏度下降B、沉降系數(shù)下降C、浮力密度下降D、紫外吸收下降0102A01穩(wěn)定蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵是（）A、肽鍵B、氫鍵C、鹽鍵D、疏水鍵0102A02蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的特征性元素是（）A、CB、OC、HD、N0102A03蛋白質(zhì)的電泳行為是因其具有（）。A、酸性B、堿性C、電荷D、親水性0102A04屬于亞氨基酸的是（）A、組氨酸B、脯氨酸C、精氨酸D、賴氨酸0102A05乳酸脫氫酶屬于（）A、氧化還原酶類B、異構(gòu)酶類C、移換酶類D、裂合酶類0102A06谷丙轉(zhuǎn)氨酶屬于（）A、移換酶類B、水解酶類C、異構(gòu)酶類D、裂合酶類0102A07酶的化學(xué)本質(zhì)是（）A、多糖B、脂類C、核酸D、蛋白質(zhì)0102A08哺乳動(dòng)物解除氨毒并排泄氨的主要形式是：（）A、尿素；B、尿酸；C、谷氨酰胺；D、碳酸氫銨0102A09氨基酸分解代謝后產(chǎn)生的氨，其去向不包括生成（）A、尿素；B、銨鹽；C、酰胺；D、脂肪0102A10在氨基酸的生物合成中，許多氨基酸都可以作為氨基的供體，其中最重要的是：（）A、Gly；B、Glu；C、CysD、Lys0102B01蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元中，例外的是（）。A、α-螺旋B、β-折疊C、無規(guī)卷曲D、亞基0102B02氨基酸在等電點(diǎn)時(shí)，具有的特點(diǎn)是（）A、不帶正電荷B、不帶負(fù)電荷C、溶解度最大D、在電場中不泳動(dòng)0102B03下列氨基酸中，哪一種氨基酸是非極性氨基酸（）A、異亮氨酸B、半胱氨酸C、天冬酰胺D、絲氨酸0102B04肽鍵的正確表示方法。（）A、—CO—NH—B、NH2—CO—C、—NO—CH—D、—CH—NO—0102B05在生理pH時(shí)，下列哪個(gè)氨基酸在溶液中帶正電荷？（）A、丙氨酸B、天冬氨酸C、谷氨酸D、精氨酸0102B06當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于等電點(diǎn)時(shí)，可使蛋白質(zhì)分子（）A、在電場中向陽極移動(dòng)B、穩(wěn)定性增加C、在電場中向陰極移動(dòng)D、溶解度最小0102B07維持蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵是（）A、離子鍵B、疏水鍵C、氫鍵D、二硫鍵0102B08蛋白質(zhì)變性不包括（）A、氫鍵斷裂B、肽鍵斷裂C、疏水鍵斷裂D、范德華力破壞0102B09具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)是（）A、胰島素B、核糖核酸酶C、血紅蛋白D、肌紅蛋白0102B10酶對催化反應(yīng)的機(jī)制是（）。A、增加活化能B、降低活化能C、增加反應(yīng)能量水平D、改變反應(yīng)的平衡點(diǎn)0102B11淀粉酶屬于（）。A、水解酶類B、裂合酶類C、氧化還原酶類D、移換酶類0102B12含78個(gè)氨基酸殘基形成的α-螺旋長度應(yīng)為：（）A、3.6nmB、5.4nmC、11.7nmD、7.8nm0102B13變構(gòu)酶是一種（）A、單體酶B、寡聚酶C、多酶體系D、同工酶0102B14酶分子中使底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的基團(tuán)是指（）A、結(jié)合基團(tuán)B、催化基團(tuán)C、疏水基團(tuán)D、酸性基團(tuán)0102B15國際酶學(xué)委員會(huì)將酶分為六大類的主要根據(jù)是（）A、酶的來源B、酶的結(jié)構(gòu)C、酶的理化性質(zhì)D、酶促反應(yīng)的性質(zhì)0102C01氨基酸與蛋白質(zhì)共同的理化性質(zhì)（）A、膠體性質(zhì)B、兩性性質(zhì)C、變性性質(zhì)D、雙縮脲性質(zhì)0102C02酶促反應(yīng)中，決定酶專一性的部分是（）A、酶蛋白B、活性中心C、輔基