血糖(GLU)方法學(xué)驗證

實用文檔血糖（GLU）方法學(xué)驗證驗證時間：驗證次數(shù)：驗證人員：一檢測系統(tǒng)信息：項目：血糖（GLU）儀器名稱：儀器型號：試劑及廠商：檢測方法：葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法)二廠商的相關(guān)參數(shù)：需驗證參數(shù)廠家參數(shù)驗證結(jié)果分析靈敏度0.3mmol/L沿用廠家參數(shù)分析測量范圍0.3-25已驗證臨床報告范圍0.3-50已驗證參考區(qū)間3.1-6.2已驗證其他參閱說明書版本批內(nèi)精密度批間精密度平均值標(biāo)準(zhǔn)差變易系數(shù)平均值標(biāo)準(zhǔn)差變易系數(shù)廠家參數(shù)正常值異常值驗證結(jié)果正常值異常值三驗證過程1．準(zhǔn)確度（Accuracy）：目的：通過檢測數(shù)據(jù)與賦值材料數(shù)據(jù)的對比，得到實驗室檢測數(shù)據(jù)的偏倚，從而評價和驗證實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。評價方法：參加衛(wèi)生部臨檢中心或和重慶市臨檢中心組織的室間質(zhì)評，或者分析廠商提供的已賦值的參考材料或質(zhì)控品，檢測結(jié)果參照廠商的說明，還可以分析多個實驗室（10個以上）參與質(zhì)量控制過程所用的參考材料，檢測結(jié)果與同行間的均值比較。本實驗室已參加室間質(zhì)評的項目一律用回報結(jié)果作為評價指標(biāo)，沒有參加的項目通過室間比對來評價其準(zhǔn)確度。最近一次參加的衛(wèi)生部室間質(zhì)評：測定日期統(tǒng)計日期回報日期校準(zhǔn)物PT平均成績平均VIS各編號樣本測定情況：（mmol/L）樣本編號我室測定結(jié)果靶值PT允許范圍PT得分與靶值偏倚VIS允許范圍VIS得分2010112010122010132010142010152．精密度（Precision）：2．1批間精密度：目的：考察候選方法的隨機(jī)誤差方法：選擇室內(nèi)質(zhì)控作為衡量批間精密度的依據(jù)。選擇具有醫(yī)學(xué)決定水平的正常及異常質(zhì)控品每天按照常規(guī)標(biāo)本的方法一樣測定，測定結(jié)果在遵照廠商參數(shù)不出控的前提下利用前3個20天測定的數(shù)據(jù)逐步累積最終得出最適均值、標(biāo)準(zhǔn)差。以此作為判斷今后該批號質(zhì)控數(shù)據(jù)是否在控的依據(jù)。質(zhì)控來源：大部分為廠家配套正常/異常值質(zhì)控品。個別項目異常值采用留樣復(fù)查的方法來衡量是否符合臨床檢測精密度允許范圍。濃度一：月份123單位測定例數(shù)均值標(biāo)準(zhǔn)差變易系數(shù)濃度二：月份123單位測定例數(shù)均值標(biāo)準(zhǔn)差變易系數(shù)2．2批內(nèi)精密度：目的：考察候選方法的隨機(jī)誤差方法：選擇具有醫(yī)學(xué)決定水平的高低值標(biāo)本在相當(dāng)短的時間內(nèi)，按規(guī)定的操作方法，在較短得時間內(nèi)及穩(wěn)定的條件下各作20次重復(fù)測定。計算其X、S與CV。標(biāo)本來源：除個別項目采用病人標(biāo)本外其他項目均采用高低值配套質(zhì)控品濃度單位測定時間低值標(biāo)本來源高值標(biāo)本來源測定結(jié)果：測定次數(shù)血糖正常值異常值1234567891011121314151617181920平均值SDCV%試劑說明書上正常值CV%:0.9%試劑說明書上異常值CV%:0.7%1/4最大允許誤差:2.5%結(jié)果判斷方式：正、異常值CV至少小于1/4最大允許誤差。測定評價：批內(nèi)測定低、高值CV值分別為0.6%、0.7%，均小于1/4最大允許誤差，可判定該項目批內(nèi)精密度結(jié)果為“通過”。3．線性范圍（Linearityrange）：目的：在確定某項目檢測上限的同時檢測其檢測上下限是否呈線性關(guān)系,從而保證該濃度范圍檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。對于高濃度樣本可以用重做功能予以確定，或用0.9%的生理鹽水手工直接稀釋后上機(jī)測定，兩種方法稀釋效果差異經(jīng)統(tǒng)計學(xué)驗證無明顯差異。（具體操作可詳見“稀釋效果的對比”）羅氏說明書給出血糖（GLU）線性范圍（Linearityrange）為0.11-25.0mmol/L。過程描述：a）以100ul以一個體積單位，將高值標(biāo)本與0.9%NaCl以4：1、3：2、2：3、1：4的體積比例混合，分別上機(jī)按高到低、低到高各重復(fù)測定2次，記錄結(jié)果。b）線性統(tǒng)計：以直接測定結(jié)果計算得出的相應(yīng)濃度為X，以通過稀釋測定結(jié)果為Y，回歸方法學(xué)統(tǒng)計，得到a、b及r值。c）結(jié)果判斷：若b在0.97-1.03范圍內(nèi)，若a接近于0，則可直接判斷線性。范圍在實驗已涉及濃度；若b不在0.97-1.03范圍內(nèi)，a較大，舍去高值或低值組數(shù)據(jù)，另做回歸統(tǒng)計，直至縮小的分析范圍其回歸方程的a和b的判斷符合要求，則該范圍為線性范圍。結(jié)論：標(biāo)本狀態(tài)良好無干擾的情況下血糖（GLU）的測定結(jié)果在0.11-25.0mmol/L范圍內(nèi)呈線性。4．臨床可報告范圍（Clinicalreportablerange，CRR）：目的：分析各稀釋濃度的線性關(guān)系，確定最高稀釋倍數(shù)。從而確保高值樣本報告的準(zhǔn)確度。驗證方法：羅氏公司血糖（GLU）說明書上不僅給出了在MODULARP上的AMR，同時給出了經(jīng)稀釋后重復(fù)測定可達(dá)到的延伸范圍，我們將此范圍作為該項目的臨床可報范圍，同時延伸范圍高限值與線性范圍高限值的比值作為最大稀釋倍數(shù)。此倍數(shù)稀釋超限高值標(biāo)本測定值與預(yù)期值的偏差，以1/4CLIA’88總允許誤差范圍為判斷限。項目名稱可測定線性范圍臨床可報上限是否通過驗證實際稀釋倍數(shù)血糖0.3-250.3-50是390%AMR-140%AMR初擬稀釋倍數(shù)22.5-353稀釋倍數(shù)的應(yīng)用濃度為超出線性范圍且低于臨床可報上限濃度之間的高值標(biāo)本，為了減少稀釋引起的誤差及降低高值標(biāo)本尋求的難度，這里將稀釋標(biāo)本濃度限制在90%AMR-140%AMR。過程描述：a）測定標(biāo)本為2010室間質(zhì)評線性驗證標(biāo)本,同一時間內(nèi)平行上機(jī)測定兩次,測定結(jié)果分別為27.69mmol/L,27.76mmol/L,平均值為27.73mmol/L(此結(jié)果為MODULARPAMR100.9%上限),按照初擬倍數(shù)將此標(biāo)本直接稀釋3倍后平行上機(jī)測定2次,結(jié)果分別為9.23mmol/L,9.23mmol/L,乘以稀釋倍數(shù)后取平均值為27.69mmol/L。b）本次實驗預(yù)期值為27.73mmol/L，實測值為27.69mmol/L。測定值與預(yù)期值的偏差為0.14%，小于1/4CLIA’88總允許誤差2.5%。可判定為“通過”。5.分析靈敏度(AnalyticalSensitivity)：驗證方法：廠商通常給定的分析靈敏度為檢測低限LLD，即樣品單次檢測可以達(dá)到的非空白檢測響應(yīng)量對應(yīng)的分析物量。通過反復(fù)測定空白樣品，均值（X）加上三倍標(biāo)準(zhǔn)差（SD）則為LLD。驗證檢測低限時，重復(fù)至少20個數(shù)據(jù)，若不超過3個點大于LLD，則此LLD得到驗證。分析靈敏度僅對那些在接近0的低值有臨床意義的項目有必要進(jìn)行確定。該項目勿需進(jìn)行分析靈敏度的驗證，直接引用羅氏說明書上給定的0.11mmol/L。6.干擾物質(zhì)(InterferingSubstances)：膽紅素：膽紅素低于376.2μmol/L無明顯干擾；溶血：血紅蛋白低于8.5g/L無明顯干擾；脂血:甘油三酯低于3.42mmol/L無明顯干擾,但是脂血混濁的濁度和甘油三酯間相關(guān)性很差。7．參考區(qū)間（Referenceintervals）：過程描述：待檢標(biāo)本需滿足檢測前質(zhì)量控制要求（見下），收集20例健康人血清標(biāo)本及時檢測，要求其年齡，性別等均勻分布，對參考范圍進(jìn)行驗證，只允許5%的數(shù)據(jù)超過所驗證的參考范圍，否則需建立參考范圍。血糖（GLU）檢測前質(zhì)量控制要求：健康狀況調(diào)查表篩選合格候選個體，篩查要求詳見《健康狀況調(diào)查表—男性》，《健康狀、況調(diào)查表—女性》。離心沉淀（大約3000*g下5分鐘）不能澄清的脂血標(biāo)本勿用。不超過冷藏溫度（2-8。C）72小時的標(biāo)本。氟化物或碘乙酸鹽處理血漿：室溫穩(wěn)定24小時.收集后的標(biāo)本應(yīng)該盡快檢測,或者在半小時內(nèi)與細(xì)胞進(jìn)行分離并保存于2-8℃。檢測前離心去除沉淀。調(diào)查表顯示有服用VitC者血清標(biāo)本勿用。項目血糖濃度單位MMOL/L測定日期試劑批號有效期儀器測定分布例數(shù)1-10男性11-20女性是否在控在控測定結(jié)果見下表：樣本序列號樣本條碼號測定結(jié)果樣本序列號樣本條碼號測定結(jié)果1112123134145156167178189191020統(tǒng)計方式：R=測定結(jié)果在參考范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù)≥95%即合格羅氏說明書提供參考范圍GLU：3.05-6.38mmol/L。結(jié)果：本實驗測定正常人結(jié)果在廠家提供的參考范圍的比率R≥95%。結(jié)論：廠家提供的血